乙型肝炎病毒基因型和基因變異在乙型肝炎病毒相關(guān)性腎小球腎炎中的意義.doc

乙型肝炎病毒基因型和基因變異在乙型肝炎病毒相關(guān)性腎小球腎炎中的意義按摩與康復(fù)醫(yī)學(xué)2011.2(中)chinesemanipulation&rehabilitationmedicine2011.no.4187乙型肝炎病毒基因型和基因變異在乙型肝炎病毒相關(guān)性腎小球腎炎中的意義田華生楊艷萍(湖北省應(yīng)城市人民醫(yī)院應(yīng)城432400)摘要:目的:探討hbv基因型及基因變異等病毒因素在hbvgn中的意義.方法:選擇41例hbvgn患者,采用熒光pcr法檢測hbvgn患者基因型,hbv多態(tài)性芯片檢測基因變異,同時(shí)測定尿常規(guī),腎功能和血壓等臨床資料.結(jié)果:41例hbvgn患者,b基因型14例,c型24例(86.8),b+c混合型3例.b型和c型患者間24小時(shí)尿蛋白有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.o5),尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù),血壓,尿素氮和血清肌酐無顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均p>0.05).12例為前c區(qū)1896位變異,1896位變異與未變異者問小便常規(guī),血壓和腎功能無顯著性差異.結(jié)論:hbvgn患者h(yuǎn)bv基因以b,c兩型為主,c型為多.c型患腎臟損害可能更為嚴(yán)重.前c區(qū)1896位變異和ymdd變異對hbvgn患者小便常規(guī),血壓和腎功能無明顯影響.關(guān)鍵詞:腎功能乙型肝炎病毒基因型基因變異secondgradehepatitisvirusgenotypeandgenevariationinsecondgradehepatitisvirusrelevantrenalglomerulusnephritissignificancetianhuashengyangyanpingabstract:0bjective:discussesviralfactorsandsoonhbvgenotypeandgenevariationinthehbvgnsignificance.methods:chooses41examplehbvgnpatient,usesthefluorescencepcrlawtoexaminethehbvgnpatientgenotype,thehbvpoly-morphismchipexaminationgenevariation,simultaneouslydeterminestheroutineurinetest,thekidneyfunctionandthebloodpressureandsooiltheclinicalmateria1.results:41examplehbvgnpatient,bgenotype14examples,c24example(86.8),b+cmixedtype3examples.bandbetweenthecpatient24hoururineproteinshavethesignificancestatisticsdifference(p<o.05),urinatestheredeellcount.thebloodpressure,theureanitrogenandthebloodserummyobitterwinenonsignificancestatisticsdifference(p>o.05).12examplesforthefrontcarea1896variations,1896variationshavenoturinatedwiththevariationtheconvention,thebloodpressureandthekidneyfunctionnonsignificancedifference.conclusion:hbvgnthepatienthbvgenetakeb,ctwoprimarily,casmany.thectroublekidneyharmispossiblymoreserious.thefirstcarea1896variationsandtheymddvariationurinatetheconventiontothehbvgnpatient,thebloodpressureandthekidneyfunctionaffectnotobviously.keywords:kidneyfunctionsecondgradehepatitisvirusgenotypegenevariation【中圖分類號jr4【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】a乙型肝炎病毒相關(guān)性腎小球腎炎(hbvgn)是由hbv介導(dǎo)的免疫損傷引起的腎小球疾病,起病緩慢,病程遷延,治療效果欠佳.hbvgn可發(fā)生于任何年齡,以635歲的兒童和青壯年多見,兒童發(fā)病率明顯高于成人】hbv可分為8個(gè)基因型(ah).hbv基因型可因地域和人種不同而有不同【文章編號110081879(2011)02003702的分布.hbv基因型和hbv基因變異與慢性乙型肝炎病情的發(fā)生發(fā)展,預(yù)后以及抗病毒療效密切相關(guān).乙型肝炎病毒(hbv)相關(guān)性腎小球hbvgn發(fā)病與病毒因素的關(guān)系研究甚少.本文檢測本地區(qū)41例hbvgn患者h(yuǎn)bv基因型和hbvdna前c區(qū)1896位變異和ymdd變異,探討其在臨床慢性疾病之一.據(jù)估計(jì),中國糖尿病患者已達(dá)7000萬,其中絕大多數(shù)都屬于型糖尿病.由于患病初期癥狀不明顯,往往不容易被發(fā)現(xiàn)而延誤治療.事實(shí)上,由于遺傳背景不同,人群中存在對型糖尿病相對易感的人群,在同等條件下,他們更容易得型糖尿病.如果能夠找到影響型糖尿病遺傳易感性的基因,特別是中國人群的易感基因,對及早檢出易感人群,推動型糖尿病的早期預(yù)防將有莫大的幫助.大量研究已顯示,人體在高血糖和高游離脂肪酸的刺激下,自由基大量生成,進(jìn)而啟動氧化應(yīng)激.氧化應(yīng)激信號通路的激活會導(dǎo)致胰島素抵抗,胰島素分泌受損和糖尿病血管病變.由此可見,氧化應(yīng)激不僅參與了型糖尿病的發(fā)病過程,也構(gòu)成糖尿病晚期并發(fā)癥的發(fā)病機(jī)制.氧化應(yīng)激與糖尿病相互促進(jìn),形成一個(gè)難以打破的怪固.胰島素抵抗可以先于糖尿病發(fā)生,在其作用下,疾病早期胰島素代償性分泌增加以保持正常糖耐量.當(dāng)胰島素抵抗增強(qiáng),胰島索代償性分泌減少或二者共同出現(xiàn)時(shí),疾病逐漸向糖耐量減退和糖尿病進(jìn)展,血糖開始升高.高血糖和高ffa共同導(dǎo)致ros大量生成和氧化應(yīng)激,也激活應(yīng)激敏感信號途徑,從而又加重胰島素抵抗,臨床上表現(xiàn)為糖尿病持續(xù)進(jìn)展與惡化.體外研究顯示,ros和氧化應(yīng)激可引起多種絲氨酸激酶激活的級聯(lián)反應(yīng).最近的抗氧化劑改善血糖控制試驗(yàn)也證實(shí),ros和氧化應(yīng)激會引起胰島素抵抗.p細(xì)胞也是氧化應(yīng)激的重要靶點(diǎn)b細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶水平較低,故對ros較為敏感ros可直接損傷胰島b細(xì)胞,促進(jìn)口細(xì)胞凋亡,還可通過影響胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路間接抑制p細(xì)胞功能.p細(xì)胞受損,胰島素分泌水平降低,分泌高峰延遲,血糖波動加劇,因而難以控制餐后血糖的迅速上升,對細(xì)胞造成更為顯著的損害.糖化血紅蛋白作為反映兩個(gè)月左右血糖控制水平的良好指標(biāo),為臨床評定糖尿病病情及預(yù)后提供重要的診斷依據(jù).當(dāng)機(jī)體處于高糖環(huán)境,許多蛋白質(zhì)由于機(jī)體的非酶糖基化反應(yīng)速率加速,導(dǎo)致這些蛋白發(fā)生不可逆的糖化且功能異常,在糖尿病的器官損傷中起重要作用.腎病是糖尿病常見的并發(fā)癥,其病理基礎(chǔ)是糖尿病患者腎臟的微血管病變.糖化血紅蛋白生成增加致氧合血紅蛋白減少等,引起組織缺氧,損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞,血管通透性增強(qiáng),同時(shí)糖化蛋白易通過腎小球?yàn)V膜,加劇了微血管的損傷,并且高糖環(huán)境下,基底膜膠原蛋白糖化,血壓增高使腎小球?yàn)V過率增加等,共同促使了白蛋白尿的形成.從研究中可看到:malb的排泄量隨著hbale的增高而增高,同時(shí)說明糖尿病腎病易發(fā)生于血糖水平未得到很好控制的糖尿病患者,hbalc水平與尿白蛋白增多所表現(xiàn)的糖尿病腎病的微血管病變密切相關(guān),這與美國糖尿病控制和并發(fā)癥調(diào)查結(jié)果相似.hscrp是炎癥的敏感的指標(biāo).本研究顯示,三組2型糖尿病患者血清hscrp水平與對照組比較明顯升高,且hscrp水平隨著尿微量自蛋白排泄量的增加而增加,說明糖尿病時(shí),機(jī)體內(nèi)有可能存在一定的炎癥過程.炎癥反應(yīng)可引起機(jī)體的氧化應(yīng)激,使低密度脂蛋白氧化為0xldl,后者可直接損傷腎小球內(nèi)皮細(xì)胞,增強(qiáng)單核細(xì)胞對血管內(nèi)皮的粘附及浸潤,產(chǎn)生大量反應(yīng)氧化中問產(chǎn)物,直接損傷血管壁,導(dǎo)致血管炎癥,表現(xiàn)為微量白蛋白尿和血管病變之間慢性炎癥起著潛在的媒介作用.參考文獻(xiàn)口貝政平主編.3200個(gè)內(nèi)科疾病診斷標(biāo)準(zhǔn).北京:科學(xué)出版社,200496796838按摩與康復(fù)醫(yī)學(xué)2011.2(中)chinesemanipulation&rehabilitationmedicine2011,no.41中的意義.1材料與方法1.1研究對象.2004年12月2010年2月本院收治的41例hbvgn患者,男性31例,女性1o例,年齡1262歲,平均年齡26歲,診斷均符合hbvgn診斷標(biāo)準(zhǔn).其中,hbv攜帶狀態(tài)l2例,慢性乙型肝炎15例,乙型肝炎肝硬化13例,慢性乙型重型肝炎1例.患者病程均超過半年,排除丙型肝炎病毒(hcv),丁型肝炎病毒(hdv)及人類免疫缺陷病毒(hiv)等病毒感染.排除合并酒精性肝病,血吸蟲肝臟損害等肝臟病變.排除原發(fā)性高血壓病,系統(tǒng)性紅斑狼瘡等所致的腎臟疾病.普管采血5ml,分離血清,一2o保存統(tǒng)一檢測.1.2hbv基因型.采用限制性片段長度多態(tài)性(rflp)分析技術(shù),用限制性內(nèi)切酶avaii和dpn作用于hbvdna前s區(qū)擴(kuò)增片段,測定hbv基因型.hbv基因型檢測試劑盒購自杭州bioselex公司.l|3hbv基因變異.采用pcr限制性片段長度多態(tài)性分析方法測定hbvdna前c區(qū)1896位變異和ymdd變異.1.4臨床資料.測定患者血壓,腎功能(血清尿素氮和肌酐清除率),24h尿蛋白定量和小便常規(guī).1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理.數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差(x士s)表示,采用spssl1.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行團(tuán)體t檢驗(yàn),p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.z結(jié)果2.1hbv基因型.41例hbvgn中,hbv基因型為b型14例(34.1),c型24例(58.5%),b+c混合型3例(7.4).未檢出a,d,e,f型.2.2hbv1896位變異和ymdd變異.hbv基因型b型和c型均可檢出前c區(qū)1896位,12例出現(xiàn)1896位變異(31.7).hbv基因型c型可檢出ymdd變異.其中,lo例為ymdd變異(24.4).3例出現(xiàn)前c區(qū)1896位和ymdd同時(shí)變異(7.3%).2.3hbv基因型與血壓,小便常規(guī)和腎功能之間的關(guān)系.hbv基因型與血壓,小便常規(guī)和腎功能之間的關(guān)系見表1.hbv基因型b型和c型間血壓,bun,肌酐清除率,尿蛋白和紅細(xì)胞無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均p>0.05);因例數(shù)少,b,c混合型未進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理.表1hbv基因型與血壓,小便常規(guī)和腎功能注;p<0.05,b,c混合型未進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理.2.4hbv1896位變異和ymdd變異與血壓,小便常規(guī)和腎功能之間的關(guān)系.hbvl896位變異和ymdd變異與血壓,小便常規(guī)和腎功能之間的關(guān)系見表2.hbv1896位變異和hbv野生型間,ymdd變異和hbv野生型間血壓,bun,肌酐清除率,尿蛋白和紅細(xì)胞無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均p>0.05).3例1896位和ymdd變異未進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理.表2hbv1896位變異與血壓,小便常規(guī)和腎功能注:均p>o.05.3討論hbvgn發(fā)生沒有種族差異,特定人群發(fā)病率與乙型病毒性肝炎的發(fā)病率平行.在hbv攜帶者高流行區(qū)和高傳播區(qū),hbvgn的發(fā)病率男:女為4:1_】.已確定的8種hbv基因型呈全球性分布.a型可見于北歐和非洲南部,b型和c型主要流行于亞洲,大洋洲,d型分布于地中海和俄羅斯,e見于西非,f型可見于中美洲和南美洲,g型見于法國和美國,h型是最近發(fā)現(xiàn)的hbv型,與f型關(guān)系密切,見于中美洲和南美洲l6j.我國乙型肝炎患者的hbv基因型主要以b,c兩型為主,以c型最多見,亦可見少量a,d及b+c混合型.我們這組湖北和廣州地區(qū)的資料中,b型,c型和b+c混合型所占比例分別為34.1,58.5和7.4,與我國其他地區(qū)hbv基因型分布相似.我們的資料進(jìn)一步表明,我國絕大部分地區(qū)以hbv基因型以b型和c型多見,其中,c型最常見.hbv基因型與肝臟病變程度有關(guān),可影響抗病毒治療的療效,但hbv基因型與hbvgn的研究甚少.本研究發(fā)現(xiàn),hbv基因型b型和c型hbivgn患者間尿蛋白有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05),而血壓,尿素氮,肌酐清除率和尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等無顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>o.05),因而表明hbvc型hbvgn患者腎臟病變較b型患者重.因例數(shù)較少,hbv基因型b,c混合型未進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析.本研究與日本學(xué)者的研究結(jié)論并不一致,他們的研究表明,hbv基因型對hbvgn發(fā)病和病程無明顯影響.另外,本研究資料中,僅有b型,c型和b,c混合型,未見其它基因型不同hbv基因型誘發(fā)病毒性肝炎的發(fā)病率明顯不同.因此,有必要進(jìn)一步探討hbv基因型對hbvgn發(fā)病和病程的影響.前c區(qū)基因1896位在肝臟病變中的作用仍有不同的報(bào)道.有研究表明,前c區(qū)基因1896位與成肝炎慢性化和重癥肝炎有關(guān).ymdd變異病毒dna編碼的dna聚合酶基因序列發(fā)生了變異,發(fā)生ymdd變異的病毒株對拉米夫定有耐藥性,并非病情加重.本資料中,1896位變異,ymdd變異和前c區(qū)1896位和ymdd同時(shí)變異的比例為24.4,31.7和7.3.目前國內(nèi)外尚未見前c區(qū)基因1896位和ymdd變異對hbvgn發(fā)病和病程影響的報(bào)道.我們的資料中,hbv1896位變異和hbv野生型間,ymdd變異和hbv野生型間血壓,尿素氮,肌酐清除率和尿蛋白無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,因而表明,hbv1896位變異和ymdd變異對hbvgn發(fā)病和病程影響不大.3例1896位和ymdd同時(shí)變異例數(shù)少,未進(jìn)行分析.病毒因素,包括基因型和基因變異,在hbvgn發(fā)病中的作用研究甚少.我們和初步研究表明,hbvgn患者h(yuǎn)bv基因多為b,c型.其中,以c型為多.c型患者尿蛋白程度較b型患者重.前c區(qū)1896位變異和ymdd變異對hbvgn患者腎臟病變無明顯影響.然而,我們的資料為小樣本研究,我們認(rèn)為,有必要進(jìn)行深入研究,以明確病毒因素在hbvgn發(fā)病中的作用.參考文獻(xiàn)13kimse.parkyh,chungwy.studyonhepatitisbviruspre-s/sgenemutationsofrenaltissuesinchildrenwithhepa