果蠅唾腺染色體觀察.ppt

實驗八 人類X染色質(zhì) 和果蠅唾腺染色體觀察,果蠅唾腺染色體觀察,實驗?zāi)康?學(xué)習(xí)分離果蠅三齡幼蟲唾腺及壓制唾腺染色體標(biāo)本的方法 觀察多線染色體的特征:a.巨大 b.體細(xì)胞同源染色體配對,染色體只有半數(shù) c.各染色體異染色質(zhì)多的著絲粒部分互相靠攏形成染色中心 d.橫紋有深淺疏密的不同,各自對應(yīng)排列,意味著基因的排列 根據(jù)唾腺染色體上帶紋的形態(tài)和排列識別不同染色體,以研究和鑒別果蠅染色體結(jié)構(gòu)的變異,實驗原理,唾腺染色體處于永久性間期中的一種體細(xì)胞同源染色體配對狀態(tài),比普通染色體大得多, 稱巨大染色體. 唾腺染色體經(jīng)過多次復(fù)制并不分開,約有1000-4000根染色體絲的拷貝,因此又稱為“多線染色體”.雙翅目昆蟲某些物種幼蟲唾腺細(xì)胞內(nèi)普遍存在,是研究唾腺染色體常用的材料 .,果蠅唾腺染色體特點： 巨大，是多線染色體； 正常：間期DNA復(fù)制 兩條染色單體 著絲點裂開 子染色體 核分裂 胞質(zhì)分裂 果蠅：有絲分裂停止在分裂間期，DNA不斷自我復(fù)制，著絲點不裂開 同源染色體緊密配對：體細(xì)胞聯(lián)會，所以染色體只呈現(xiàn)單倍數(shù)； 形成染色中心，從染色體中心處伸出5條長臂，1條短臂； 染色后，出現(xiàn)一系列寬窄不同、染色深淺不一的橫紋； 蓬突,實驗材料,普通果蠅野生型或任何突變型的三齡幼蟲活體.選擇行動遲緩,肥大,爬上管壁的三齡幼蟲做標(biāo)本最佳,實驗器具和藥品,實驗器具:解剖鏡,顯微鏡,解剖針,載玻 片,蓋玻片,吸水紙 藥 品:生理鹽水(0.7%Nacl),1mol/L 鹽酸、卡寶品紅,實驗步驟,幼蟲的培養(yǎng):較低溫度下培養(yǎng)(16-18),每隔2天將羽化的新蠅倒出.取充分發(fā)育的三齡幼蟲 唾腺分離:取三齡幼蟲放在滴有一滴生理鹽水的載玻片上,兩手各持一支解剖針.一支針壓在蟲體前端1/3處,固定幼蟲，另一針按在頭部里突處(口器)稍后，輕緩前移將頭部扯開,唾腺也隨之扯開，可看到一對透明而微白的長形小囊即為唾腺。唾腺的側(cè)面常帶少量白色沫狀脂肪體,用針剝離。,實驗步驟,解離：用吸水紙小心吸去生理鹽水，加1滴1N HCl，浸23分鐘，使組織疏松，以便壓片時細(xì)胞分散，染色體散開。 染色壓片:將唾腺移到另一干凈的預(yù)先滴有卡寶品紅的載玻片上染色10min后，取蓋玻片和雙面刀片，雙面刀片放于蓋玻片和載玻片間，吸去多余染液，,實驗步驟,蓋上蓋玻片，在蓋片上覆一條吸水紙，用拇指適當(dāng)用力壓片。（注意：在撥取和染色過程中勿使腺體干燥） 觀察:低倍鏡觀察選出典型細(xì)胞后用高倍鏡觀察，可以看到五條彎曲展開的染色體臂和一個點狀的第6號染色體對,它們在著絲點構(gòu)成染色中心并向外展開，自染色體的終端可分辨橫向