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LDLC自動分析測定法與間接計(jì)算結(jié)果的比較作者:周鐵成于文彬程曉東秦慶肖鵬濤【關(guān)鍵詞】低密度脂蛋白膽固醇關(guān)鍵詞:低密度脂蛋白膽固醇;冠心??;Friedewald公式中圖號:R446.112文獻(xiàn)標(biāo)識碼:B0引言流行病學(xué)研究已確定了與冠心病(CHD)有關(guān)的幾個(gè)脂蛋白危險(xiǎn)因素,血清總膽固醇(TC)升高伴隨有低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)升高,顯著增加CHD的危險(xiǎn)性.LDL-C濃度降低,CHD癥狀改善,能引起損傷的好轉(zhuǎn)1.目前臨床上LDL-C測定多采用聚乙烯硫酸沉淀法2,F(xiàn)riedewald公式間接計(jì)算法3.前者麻煩,費(fèi)時(shí),后者受許多因素的影響.我們采用均相分析的LDL-C試劑盒,無需沉淀分離,自動分析測定LDL-C,方法先進(jìn)、簡便、快速、準(zhǔn)確、適宜自動化分析.1反應(yīng)原理試劑1中的活性劑1能特異性水解高密度脂蛋白(HDL),極低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微(CM),被包裹在上述脂質(zhì)中的膽固醇即被釋放并立即與酶試劑反應(yīng)轉(zhuǎn)變成一種無色產(chǎn)物.此時(shí)加入試劑2,低密度脂蛋白(LDL)即被活性劑2水解,并在偶聯(lián)劑作用下產(chǎn)生一種有色化合物.該化合物在546/660波長下有特異性吸光系數(shù).2材料和方法2.1儀器日立7170型自動生化分析儀.2.2LDL-C測定試劑盒日本第一化學(xué)藥品株式會社生產(chǎn).標(biāo)準(zhǔn)品:LDL-C校正物,含膽固醇3.7mmol・;L-1,凍干品加1mL蒸餾水溶解后即可使用.甘油三酯(TG)和總膽固醇測定,用上海長征公司生產(chǎn)的試劑盒.HDL-C用自動分析測定法,日本第一化學(xué)藥品株式會社生產(chǎn)的試劑盒.2.3方法2.3.1LDL-C自動分析測定法參數(shù)兩點(diǎn)終點(diǎn)法,溫度37,主波長546nm,副波長660nm,樣品用量2.4L,R1試劑240L,反應(yīng)5min,加R2試劑80L,反應(yīng)5min,監(jiān)測1634點(diǎn)吸光度.2.3.2對照法用Friedewald公式LDL-C=TC-HDL-C-TG/2.2,間接計(jì)算LDL-C.其中TG和TC測定用酶法,LDL-C用自動分析測定法.3結(jié)果3.1精密度批內(nèi)CV:取低、中、高濃度LDL-C樣品各一份,LDL-C濃度分別為1.45,2.86和3.94mmol・;L-1.用本法同時(shí)測定10次CV分別1.32%,0.72%和0.48%.批間CV:取低、中、高濃度LDL-C混合血清各一份,LDL-C濃度分別為1.41,2.98和3.89mmol・;L-1,置4冰箱保存,每天測定一次,連續(xù)10d,批間CV分別3.61%,2.45%和3.41%.3.2回收率取一LDL-C濃度為3.82mmol・;L-1的血清樣本,加入校正物1.85mmol・;L-1,作回收實(shí)驗(yàn),共測3次,回收率在99.2%103.2%之間.3.3線性關(guān)系用一混合血清溶解LDL-C校正物,經(jīng)反復(fù)測定4次濃度為6.70mmol・;L-1.將此血清用生理鹽水作梯度稀釋,使含血清1/5,2/5,3/5,4/5及原血清,用自動分析法測定,結(jié)果顯示在6.70mmol・;L-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,回歸方程(X為濃度,Y為吸光度)為Y=0.0013+0.0934X(r=0.9997,P<;0.01).3.4與Friedewald計(jì)算結(jié)果的偏離隨機(jī)取臨床送檢樣本150份,用自動分析法測LDL-C(D),同時(shí)測定TG,TC和HDL-C,用F公式計(jì)算LDL-C(F),按TG高低分組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析(Tab1).表1LDL-C自動分析法測定與間接計(jì)算的比較(略)4討論一般認(rèn)為當(dāng)TG<;4.52mmol・;L-1,及排除高脂血癥的條件,上述計(jì)算公式是可行的.我們的研究結(jié)果也表明當(dāng)TG<;4.52mmol・;L-1時(shí),LDL-C計(jì)算結(jié)果與自動分析測定結(jié)果相比無顯著性差別,且高度相關(guān)(r>;0.95),計(jì)算偏差<;5%.但TG>;4.52mmol・;L-1時(shí),LDL-C計(jì)算結(jié)果與自動分析測定結(jié)果相比有顯著性差別(P<;0.05,r<;0.80),計(jì)算偏差>;15%.可見LDL-C自動分析測定法在高TG濃度條件下有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值,與文獻(xiàn)報(bào)道一致4.但在型脂蛋白血癥,乳糜微粒血清等條件下的應(yīng)用價(jià)值有待進(jìn)一步探討.參考文獻(xiàn):1RifaiN,WarnickP.McnamaraJRetal.Measurementoflow-density-lipoproteincholesterolinserum:AstatusreportJ.ClinChem,1992;38(2):150-152.2中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)行政司編.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程M.第2版.南京:東南大學(xué)出版社,1997:281-282.3FridedewaldWT,LevyRI,F(xiàn)redricksonDS.Estimationofcon-centrationoflow-density-lipoproteincholesterolinplasma,withoutuseoftheprecipitativeultracentrifugeJ.ClinChem,1972;18(5):499-501.4HarrisN,NeufeldEJ,NewburgerJWetal.Analyticalperfor-mance
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