LDL┐C自動分析測定法與間接計(jì)算結(jié)果的比較.doc

LDLC自動分析測定法與間接計(jì)算結(jié)果的比較作者：周鐵成于文彬程曉東秦慶肖鵬濤【關(guān)鍵詞】低密度脂蛋白膽固醇關(guān)鍵詞:低密度脂蛋白膽固醇；冠心??；Friedewald公式中圖號:R446.112文獻(xiàn)標(biāo)識碼:B0引言流行病學(xué)研究已確定了與冠心病（CHD）有關(guān)的幾個(gè)脂蛋白危險(xiǎn)因素，血清總膽固醇（TC）升高伴隨有低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）升高，顯著增加CHD的危險(xiǎn)性.LDL-C濃度降低，CHD癥狀改善，能引起損傷的好轉(zhuǎn)1.目前臨床上LDL-C測定多采用聚乙烯硫酸沉淀法2，F(xiàn)riedewald公式間接計(jì)算法3.前者麻煩，費(fèi)時(shí)，后者受許多因素的影響.我們采用均相分析的LDL-C試劑盒，無需沉淀分離，自動分析測定LDL-C，方法先進(jìn)、簡便、快速、準(zhǔn)確、適宜自動化分析.1反應(yīng)原理試劑1中的活性劑1能特異性水解高密度脂蛋白（HDL），極低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微（CM），被包裹在上述脂質(zhì)中的膽固醇即被釋放并立即與酶試劑反應(yīng)轉(zhuǎn)變成一種無色產(chǎn)物.此時(shí)加入試劑2，低密度脂蛋白（LDL）即被活性劑2水解，并在偶聯(lián)劑作用下產(chǎn)生一種有色化合物.該化合物在546/660波長下有特異性吸光系數(shù).2材料和方法2.1儀器日立7170型自動生化分析儀.2.2LDL-C測定試劑盒日本第一化學(xué)藥品株式會社生產(chǎn).標(biāo)準(zhǔn)品:LDL-C校正物，含膽固醇3.7mmol・；L-1，凍干品加1mL蒸餾水溶解后即可使用.甘油三酯（TG）和總膽固醇測定，用上海長征公司生產(chǎn)的試劑盒.HDL-C用自動分析測定法，日本第一化學(xué)藥品株式會社生產(chǎn)的試劑盒.2.3方法2.3.1LDL-C自動分析測定法參數(shù)兩點(diǎn)終點(diǎn)法，溫度37，主波長546nm，副波長660nm，樣品用量2.4L，R1試劑240L，反應(yīng)5min，加R2試劑80L，反應(yīng)5min，監(jiān)測1634點(diǎn)吸光度.2.3.2對照法用Friedewald公式LDL-C=TC-HDL-C-TG/2.2，間接計(jì)算LDL-C.其中TG和TC測定用酶法，LDL-C用自動分析測定法.3結(jié)果3.1精密度批內(nèi)CV:取低、中、高濃度LDL-C樣品各一份，LDL-C濃度分別為1.45，2.86和3.94mmol・；L-1.用本法同時(shí)測定10次CV分別1.32%，0.72%和0.48%.批間CV:取低、中、高濃度LDL-C混合血清各一份，LDL-C濃度分別為1.41，2.98和3.89mmol・；L-1，置4冰箱保存，每天測定一次，連續(xù)10d，批間CV分別3.61%，2.45%和3.41%.3.2回收率取一LDL-C濃度為3.82mmol・；L-1的血清樣本，加入校正物1.85mmol・；L-1，作回收實(shí)驗(yàn)，共測3次，回收率在99.2%103.2%之間.3.3線性關(guān)系用一混合血清溶解LDL-C校正物，經(jīng)反復(fù)測定4次濃度為6.70mmol・；L-1.將此血清用生理鹽水作梯度稀釋，使含血清1/5，2/5，3/5，4/5及原血清，用自動分析法測定，結(jié)果顯示在6.70mmol・；L-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程（X為濃度，Y為吸光度）為Y=0.0013+0.0934X（r=0.9997，P<；0.01）.3.4與Friedewald計(jì)算結(jié)果的偏離隨機(jī)取臨床送檢樣本150份，用自動分析法測LDL-C（D），同時(shí)測定TG，TC和HDL-C，用F公式計(jì)算LDL-C（F），按TG高低分組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析（Tab1）.表1LDL-C自動分析法測定與間接計(jì)算的比較（略）4討論一般認(rèn)為當(dāng)TG<；4.52mmol・；L-1，及排除高脂血癥的條件，上述計(jì)算公式是可行的.我們的研究結(jié)果也表明當(dāng)TG<；4.52mmol・；L-1時(shí)，LDL-C計(jì)算結(jié)果與自動分析測定結(jié)果相比無顯著性差別，且高度相關(guān)（r>；0.95），計(jì)算偏差<；5%.但TG>；4.52mmol・；L-1時(shí)，LDL-C計(jì)算結(jié)果與自動分析測定結(jié)果相比有顯著性差別（P<；0.05，r<；0.80），計(jì)算偏差>；15%.可見LDL-C自動分析測定法在高TG濃度條件下有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值，與文獻(xiàn)報(bào)道一致4.但在型脂蛋白血癥，乳糜微粒血清等條件下的應(yīng)用價(jià)值有待進(jìn)一步探討.參考文獻(xiàn):1RifaiN，WarnickP.McnamaraJRetal.Measurementoflow-density-lipoproteincholesterolinserum:AstatusreportJ.ClinChem，1992；38（2）:150-152.2中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)行政司編.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程M.第2版.南京:東南大學(xué)出版社，1997:281-282.3FridedewaldWT，LevyRI，F(xiàn)redricksonDS.Estimationofcon-centrationoflow-density-lipoproteincholesterolinplasma，withoutuseoftheprecipitativeultracentrifugeJ.ClinChem，1972；18（5）:499-501.4HarrisN，NeufeldEJ，NewburgerJWetal.Analyticalperfor-mance