（化學(xué)專(zhuān)業(yè)論文）瑞香狼毒根化學(xué)成分的研究.pdf

原創(chuàng)性聲明 本人聲明：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成 果。除本文已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也 j 不包含為獲得內(nèi)鏊直太堂及其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同 志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。 學(xué)位論文作者簽名：邀簽! 生 指導(dǎo)教師簽名： 日 期：劃l ：么：么 日期： 在學(xué)期間研究成果使用承諾書(shū) 本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：內(nèi)蒙古大學(xué)有權(quán)將 學(xué)位論文的全部?jī)?nèi)容或部分保留并向國(guó)家有關(guān)機(jī)構(gòu)、部門(mén)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和磁盤(pán)，允 許編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，也可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。 為保護(hù)學(xué)院和導(dǎo)師的知識(shí)產(chǎn)權(quán)，作者在學(xué)期間取得的研究成果屬于內(nèi)蒙古大學(xué)。作者今后使 用涉及在學(xué)期間主要研究?jī)?nèi)容或研究成果，須征得內(nèi)蒙古大學(xué)就讀期間導(dǎo)師的同意；若用于 發(fā)表論文，版權(quán)單位必須署名為內(nèi)蒙古大學(xué)方可投稿或公開(kāi)發(fā)表。 。 學(xué)位論文作者簽名：送查：雄 e t 期：童q 【l 笸：6 指導(dǎo)教師簽名： 日期： 內(nèi)蒙古大學(xué)碩上學(xué)位論文 瑞香狼毒根化學(xué)成分的研究 摘要 瑞香狼毒為瑞香科狼毒屬植物s t e l l e r ac h a m a e j a s m el ，其干燥的根由于 在抗癌、殺菌、殺蟲(chóng)等方面具較強(qiáng)的作用而引起國(guó)內(nèi)外大量學(xué)者的關(guān)注。本論 文對(duì)瑞香狼毒根的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，并且對(duì)瑞香狼毒的研究概況作了簡(jiǎn)要 綜述。 本文對(duì)瑞香狼毒根用9 5 7 , 醇回流提取，提取物分別采用不同極性的溶劑進(jìn) 行萃取，然后利用硅膠柱色譜、制備薄層色譜、萃取、重結(jié)晶、高效液相等技 術(shù)進(jìn)行分離純化。通過(guò)理化常數(shù)、紅外光譜、核磁共振氫譜、碳譜和二維核磁 共振譜等數(shù)據(jù)并結(jié)合文獻(xiàn)分析鑒定了3 個(gè)化合物，其結(jié)構(gòu)為分別為鄰苯二甲酸 二丁酯( i ) 2 個(gè)，蔗糖( i i ) ，新狼毒素a ( i ) ，并利用氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技 術(shù)對(duì)瑞香狼毒根中油狀物進(jìn)行了分析。 關(guān)鍵詞：瑞香狼毒，鄰苯二甲酸二丁酯，蔗糖，新狼毒素a s t e l l e r ac h a m a e j a s m el h a sb e e nt a k e nn o t eo fb ys o m er e s e a c h e ri nm a n y c o n t r i e sb e c a u s eo fi t sa n t i c a n c e r , a n t i b a c t e r a le t a l t h ec h e m i c a lc o n s t i t u e n t si nt h e r o o t so fs t e l l e r ac h a m a e ja s m el h a v eb e e ns t u d i e d ，t h eg e n e r a ls i t u a t i o nh a v eb e e n r e v i e w e di nt h i st h e s i s i np r e s e n ts t u d y , t h er o o to fs t e l l e r ac h a m a e ja s n el w a se x t r a c t e db y9 5 e t h a n 0 1 t h ea b s t r a c t i o n sw e r es u b s e q u e n t l ye x t r a c t e dw i t hd i f f e r e n tp o l a r s o l v e n t t h r e ec o m p o u n d sh a v eb e e ni s o l a t e da n dp u r i f i e db yu t i l i z i n gc o l u m n c h r o m a t o g r a p h y , p r e p a r a t i v et l c a n dr e c r y s t a l l i z a t i o nt e c h n i q u e s t h es t r u c t u r e so f t h r e ec o m p o u n d sh a v eb e e ni d e n t i f i e db yi r , 1dn m r ( 1 h n m r , ”c n m r ) ，2 d n m r ( h s q c ，h m b c ) a n d r e f e r e n c el i t e r a t u r e s t h e ya r ed i b u t y lp h t h a l a t e ，s u c r o s e ， n e o c h a m a e j a s m i n a k e y w o r d s ：s t e l l e r ac h a m a e j a s m el ，d i b u t y lp h t h a l a t e ，s u c r o s e ， n e o c h a m a e j a s m i na 內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文 目錄 摘昌要l a b s t r a c t 第一章瑞香科植物和瑞香狼毒化學(xué)成分文獻(xiàn)綜述1 1 1 瑞香科植物簡(jiǎn)介1 1 2 瑞香狼毒植物學(xué)特征1 1 3 瑞香狼毒的地理分布及藥理作用2 1 4 瑞香狼毒化學(xué)成分研究進(jìn)展2 1 4 1 香豆素類(lèi)化合物3 1 4 2 萜類(lèi)4 1 4 3 黃酮類(lèi)化合物5 1 4 4 木脂素類(lèi)8 1 4 5 揮發(fā)油類(lèi)8 1 4 6 其它類(lèi)化合物9 第二章瑞香狼毒根中化學(xué)成分的提取，分離和鑒定1 0 2 1 研究目的和意義1 0 2 2 實(shí)驗(yàn)儀器和材料1 0 2 2 1 實(shí)驗(yàn)儀器。1 0 2 2 2 實(shí)驗(yàn)試劑1 0 2 2 3 實(shí)驗(yàn)材料1 1 2 3 化學(xué)成分的提取和分離1 1 2 3 1 提取。1 l 2 3 2 化學(xué)成分純化和鑒定1 2 2 4 瑞香狼毒根油狀成分的g c - m c 分析1 4 2 4 1g c m s 的測(cè)試條件1 4 2 4 2 乙醚提取物分離油狀成分的g c - m c 分析鑒定1 5 第三章結(jié)果與討論1 7 展望。2 2 參考文獻(xiàn)：一2 3 附圖2 7 致j 射。4 2 瑞香科( t h y m e l a e a c e a ) 是被子植物門(mén)( a n g i o s p e r m a e ) 、雙子葉植物綱( d i c o t y l e d o n e a e ) 、薔薇亞綱( r o s i d a e ) 、( m y r t a l e s ) 的1 科。瑞香科植物在世界上約有5 0 屬5 0 0 余種， 廣布于全世界熱帶和溫帶地區(qū)，但主產(chǎn)非洲南部、地中海沿岸至大洋洲。我國(guó)有9 屬，分別 是瑞香屬( d a p h n e ) 、蕘花屬( w i k s t r o e m i a ) 、狼毒屬( s t e l l e r a ) 、沉香屬( a q u i l a r i a ) 、 結(jié)香屬( e d g e w o r t h i a ) 、鼠皮樹(shù)屬( r h a m n o n e u r o n ) 、假狼毒屬( s t e l l e r o p s i s ) 、栗麻屬( d i a t h r o n ) 、毛花瑞香屬( e r i o s o l e n a ) ，共有9 0 多種，分布遍及全國(guó)，主要生長(zhǎng)子長(zhǎng)江流域 以南各省區(qū)，其中以瑞香屬與蕘花屬居多【1 ，2 j 。本科有毒植物主要分布于狼毒屬、瑞香屬、蕘 花屬，且多為藥用植物，具顯著的生理活性，但對(duì)皮膚及粘膜具有強(qiáng)烈的刺激性【l 】。狼毒屬 ( s t e l l e r a ) 共有6 種，分布于亞洲溫帶地區(qū)，在我國(guó)有1 種【3 一，即瑞香狼毒。 一 1 2 瑞香狼毒植物學(xué)特征 瑞香狼毒( s t e l l e r ac h a m e j a s m e l ) 為瑞香科狼毒屬植物，是少用中藥“狼毒”三種 原植物之一，俗稱(chēng)斷腸草，饅頭花，洋火頭花、山丹花、悶頭草、一把香等，是瑞香科狼毒屬 多年生草本植物，其高2 0c m 5 0 c m ，根莖粗大木質(zhì)化，成圓柱形；莖直立叢生，少則3 - - - 5 個(gè)，多則2 0 個(gè)以上；單葉互生或?qū)ι?，葉全緣，長(zhǎng)1 2 c m 2 8a m ，寬0 3 0c m 0 9a m ， 均無(wú)毛【5 , 6 , 7 , 8 1 ，披針形或線形，葉柄短；頭狀花序，頂生，花萼冠狀，花白色或黃色，萼筒細(xì) 管狀，頂端五裂；雄蕊1 0 枚，2 輪環(huán)生；子房上位，頭狀，種子l 枚；返青期6 月初，花期 7 - - - 8 月，果期9 1 0 月【4 9 】，瑞香狼毒再生能力強(qiáng)，冬季地上部分干枯死亡，以地下部分越冬。 產(chǎn)種量大，結(jié)實(shí)能力強(qiáng)，成年株可年產(chǎn)種2 0 0 粒左右，果皮厚而硬，種子堅(jiān)固，生殖能力強(qiáng)。 單葉披針形，蠟質(zhì)層厚。它能忍受長(zhǎng)期干旱，根系入土深，吸水能力強(qiáng)，叢生枝條多，冠層 繁茂，在干草原上，瑞香狼毒地上部分春季時(shí)較其他植物萌發(fā)早，入秋時(shí)又有二次萌發(fā)，其粗大 的直根系可深入地下吸收水分因?yàn)閺?qiáng)大的生存力和繁殖力使瑞香狼毒在北方干旱草原上得 以大肆蔓延。 。 內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文 1 3 瑞香狼毒的地理分布及藥理作用 瑞香狼毒多生長(zhǎng)于海撥2 3 0 0 一- - 4 2 0 0m ，年均溫度o 。c 左右的干燥向陽(yáng)山坡及高山亞高山 草地 1 6 , 1 7 】。我國(guó)廣泛分布于西北、東北、華北、西南等地，主要分布于青海省的天然草地、 四川省的甘孜州、阿壩州天然草場(chǎng)及梁山州的西北部【1 1 ，3 ，4 ，12 1 。瑞香狼毒多生于沙地、山地與 丘陵，干草原、沙質(zhì)草原和典型草原的退化草地上，為一般草原植物群落的伴生種，在重度退 化的草原上已成為主要的建群種。在同一類(lèi)型的草原地帶，由于其局部生態(tài)條件的差異，使瑞 香狼毒分布呈斑塊狀鑲嵌，或隨機(jī)分布，定居在碎石和石質(zhì)坡地上以及沙質(zhì)草地上【1 3 】，其與牧 草爭(zhēng)水、爭(zhēng)肥、爭(zhēng)空間，嚴(yán)重影響草場(chǎng)利用及牧草的品質(zhì)與繁衍，引起草原退化，實(shí)為我國(guó) 天然草場(chǎng)一大禍害。據(jù)調(diào)查，甘肅有4 6 6 萬(wàn)h i i l 2 草原遭受危害，每年牧草減產(chǎn)1 3 7 5 億k g ， 經(jīng)濟(jì)損失近1 5 0 0 - - 2 0 0 0 萬(wàn)元【1 4 】；青海省天然草地上生長(zhǎng)的瑞香狼毒面積達(dá)7 3 3 萬(wàn)h 1 2 ，密度 為每百平方米3 5 0 株叢，最多可達(dá)1 9 9 8 - 5 0 0 0 株叢【1 5 】；海北洲海晏縣青海湖鄉(xiāng)每百平方米有 狼毒4 0 0 一- 1 4 0 0 株叢，蓋度為2 0 - - 4 0 。另?yè)?jù)不完全統(tǒng)計(jì)，內(nèi)蒙古哲里木盟阿魯旗己經(jīng)形成 了以瑞香狼毒為主要植物群落的草場(chǎng)約4 萬(wàn)h m 2 ，有瑞香狼毒生長(zhǎng)的草場(chǎng)約1 3 3 萬(wàn)h m 2 以上， 占全旗1 0 4 萬(wàn)h m 2 草場(chǎng)面積的2 8 ；在內(nèi)蒙古烏蘭察布干草原，狼毒已成為退化草地的景觀 植物1 1 4 j 。 中藥狼毒始載于神農(nóng)本草經(jīng)，列為下品，為少用中藥。其味苦辛，性平，有毒，入肺 脾肝經(jīng)，有逐水祛痰、破積殺蟲(chóng)的功效【4 引，主治水腫腹脹、痰、食、蟲(chóng)、積、心腹疼痛、慢 性氣管炎、咳嗽氣喘、淋結(jié)、皮膚、骨、疥癬、痔縷等。經(jīng)過(guò)多年的現(xiàn)代藥理與臨床研究， 結(jié)果表明，瑞香狼毒中含有的化合物，特別是二萜類(lèi)、雙二氫黃酮類(lèi)、木脂素類(lèi)等成分有抗 腫瘤作用、抗h i v 病毒作用、抗菌作用、抗結(jié)核作用以及對(duì)免疫系統(tǒng)的作用，提示其具有潛 在的重要藥用價(jià)值【4 6 j 。 1 4 瑞香狼毒化學(xué)成分研究進(jìn)展 關(guān)于瑞香狼毒化學(xué)成分的研究始于2 0 世紀(jì)6 0 年代。近幾年來(lái)，隨著現(xiàn)代高科技研究手段 的發(fā)展，許多國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)瑞香狼毒進(jìn)行了更進(jìn)一步的理論化、系統(tǒng)化的研究，取得了突破 性進(jìn)展，為其深層次開(kāi)發(fā)提供了可靠的依據(jù)。目前從瑞香狼毒中分離鑒定出結(jié)構(gòu)的化學(xué)成分 已經(jīng)有非常多種類(lèi)型，總結(jié)歸納主要有萜類(lèi)、黃酮類(lèi)、香豆素類(lèi)、木脂素以及高分子有機(jī)酸 等化合物。 2 一一 內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文 【_ - 。- 。1 。_ _ 。_ 。1 。1 。1 。一 1 4 1 香豆素類(lèi)化合物 據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，目前發(fā)現(xiàn)香豆素類(lèi)化合物有植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)、光敏、抗菌抗病毒、平滑肌松 弛、抗血凝等作用，香豆素類(lèi)化合物在瑞香狼毒的根部和地上部分均有分布，是瑞香科植物 的一類(lèi)特征成分之一。目前已從瑞香狼毒中分離鑒定出約1 2 種香豆素，這些香豆素多數(shù)具有 較強(qiáng)的生物活性。大致可以分為3 類(lèi)【1 8 1 9 。2 。 第1 類(lèi)為簡(jiǎn)單香豆素類(lèi)，包括傘形花內(nèi)酯( u m b e l l i f e r o n e ) ( 1 ) 、瑞香內(nèi)酯有名瑞香素。 d a p h n e t i n ) ( 2 ) 及在其7 位形成的單糖甙類(lèi)瑞香甙( d a p h n i n ) ( 3 ) 和一種雙糖甙、東莨菪素 ( s c o p o l e t i n ) ( 4 ) 等。 第2 類(lèi)主要為呋哺環(huán)與香豆素母核在7 、8 位連接形成的角型呋喃香豆素類(lèi)，有牛防風(fēng)素 ( s p h o n d i n ) ( 5 ) 、異佛手柑內(nèi)酯( i s o b e r g a t e o ) ( 6 ) 、茴芹香豆素( p i m p i n e l l i n ) ，還有一個(gè)呋 哺環(huán)與香豆素母核在6 、7 位連接形成的直型呋喃香豆素一一_ 異茴芹香豆素， ( i s o p i m p i n e l l i n ) ( 8 ) 。 第3 類(lèi)為雙香豆素類(lèi)，包括西瑞香素( 又名雙百瑞香素，d a p h n o r e t i n ) ( 9 ) 、及其7 0 _ 葡 萄糖甙( c h a m a e j a s o s i d e ) ( 1 0 ) i 異西瑞香素( i s o d a p h n o r e t i n ) ( 1 1 ) 【4 9 】等。 牛防風(fēng)素( s p h o n d i n ) ( 1 ) 、異佛手柑內(nèi)酯( i s o b e r g a p t e o ) ( 2 ) 、茴芹香豆素 ( p i m p i n e l l i n ) ( 3 ) 和異茴芹香豆素( i s o p i m p i n e l l i n ) ( 4 ) 是前蘇聯(lián)學(xué)者t i k h o m i r o v a 1 8 】于 1 9 7 4 年最先從瑞香狼毒中發(fā)現(xiàn)的香豆素類(lèi)化合物。 h 3 c o h 3 c 3 o 4 o c h 3 1 9 8 5 年，前蘇聯(lián)學(xué)者m o d o n o v a 2 5 1 又自瑞香狼毒地上部分首次分離鑒定出傘形花內(nèi)酯 ( u m b e l l i f e r o n e ) ( 5 ) 、瑞香內(nèi)酯( 又譯為瑞香苷、白瑞香素，d a p h n e t i n ) ( 6 ) 和西瑞香素 ( d a p h n o r e t i n ) ( 7 ) ，同時(shí)分得東莨菪素( s c o p o l e t i n ) ( 8 ) 。 3 h o h 3 c o o o h 3 c o h oo 7 8 蒙古學(xué)者n a r a n t u y a a 刀于1 9 9 4 年自瑞香狼毒地上部分首次分離鑒定出瑞香苷( 又稱(chēng)白瑞 香苷，d a p h n i n ) ( 1 0 ) ，同時(shí)也得到一新的雙香豆素苷類(lèi)化合物西瑞香素一7 一o _ 葡萄糖苷 ( c h a m a e j a s m o s i d e ) ( 9 ) ， 1 9 9 5 - 1 9 9 6 ，我國(guó)學(xué)者劉桂芳等 2 6 , 2 7 】自中國(guó)產(chǎn)瑞香狼毒根中又分得 一新化合物異西瑞香素( i s o d a p h n o r e t i n ) ( 1 1 ) ，同時(shí)還得到了西瑞香素、傘形花內(nèi)酯及瑞香 素。：， 二一 h 3 c o 八o 蘭囝h 3 c o a v o 1 4 2 萜類(lèi) o g l 1 0 萜類(lèi)( t e r p e n e ) 【2 8 】無(wú)論是它們?cè)谥参锝绶植嫉膹V泛程度，還是從它們對(duì)人類(lèi)生活的作用來(lái) 看都是一種重要的植物成分。這類(lèi)成分從結(jié)構(gòu)上可分為倍半萜、單萜、二萜、三萜等類(lèi)別。 我們非常熟悉的植物激素脫落酸是典型的倍半萜結(jié)構(gòu)，赤霉素是典型的二萜類(lèi)結(jié)構(gòu)。從瑞香 狼毒根部已鑒定分離的萜類(lèi)化合物達(dá)11 種，其中二萜類(lèi)化合物多數(shù)具有顯著的生理活性，特 別是二萜原酸酯類(lèi)化合物。1 9 8 2 年，n i w a 【2 9 】自瑞香狼毒根中分離得到的4 種具有抗癌活性的 瑞香烷型( d a p h n a n e ) 化合物，它們分別為h u r a t o x i n ( 1 2 ) 、s u b t o x i na ( 1 3 ) 、s i m p l e x i n ( 1 4 ) 、 p i m e l e a - f a c t o rp ( 1 6 ) 。1 0 年后馮威健等 3 0 , 3 1 1 分離得到強(qiáng)抗癌活性成分尼地嗎啉 4 內(nèi)蒙古大學(xué)壩十學(xué)位論文 ( g n i d i m a c r i n ) ( 1 7 ) 及一新化合物s t e l l e r a m a c r i n 。1 9 9 3 年i k e k a w at e t s u r o 進(jìn)一步分離得 到抗癌活性成分s t e l l e r a m a c r i na 和b 1 3 2 】( 1 8 ，1 5 ) ，1 9 9 6 年得到一顯著抗白血病作用的化合 物n e o s t e l l i n d 3 i ( 1 9 ) ，1 9 9 7 年e n d o y u i c h i 等再得到一個(gè)具有抗h i v - i 病毒作用且細(xì)胞毒性 很低的c o m p o u n di ( 2 0 ) d 4 1 ，馮寶民在2 0 0 1 年又發(fā)現(xiàn)一新化合物新瑞香素( n e o s t e l l e r i n ) 【2 0 1 。 j 2 ：r i = r 4 = h , r 3 一= ，r 4 = m e ( c h 2 ) ( c 自h = c h ) ， ，1 6 7 ：r r l ，：= 。r 2 h = ，r r a 。：, r r 3 4 = ：h h r ，r 3 ：= ：p p h h c c o 。0 3 ：r i = m e c o o r 2 = m e ( c h 2 ) 8 ( c h = c h ) r 3 = r 4 = h ?！? 1 一， ， 7 d 一，、l jd d l jd d h ，、n n ：r i = r 4 = h 口, r 一2 = 。m ，r e ( h c h 、，2 r ) , h r 一3 r = m u ： ；8 “：“r 1 1 = r 。4 ”= 。m 喝e , r “3 4 = o ”h 一, 哩r 2 。= ”b 。z o 。c 。h 3 5 ：r1 i = o h ，r 2 = m e ( c h 2 ) ( c h = c h ) 2 ，r 4 = m e 。 o p h 3 c c o o 1 9 1 4 3 黃酮類(lèi)化合物 h 2 0 o h 3 黃酮類(lèi)化合物( f l a v o n o i d ) 又稱(chēng)黃酮體、黃堿素，是植物界中分布最廣的一類(lèi)成分，它 常以游離態(tài)或與糖結(jié)合成苷的形式存在于自然界中。黃酮類(lèi)成分對(duì)植物的生長(zhǎng)、發(fā)育、開(kāi)花、 結(jié)果以及抵御異物的侵入等起著重要的作用3 5 1 ，瑞香狼毒中的黃酮類(lèi)成分主要有c - 3 c - 3 5 內(nèi)蒙古大學(xué)壩上學(xué)位論文 連接的雙黃酮類(lèi)化合物( 狼毒素類(lèi)化合物) 、狼毒色原酮和黃烷一3 一醇及含有黃烷單元的雙黃酮 類(lèi)。其中，狼毒素類(lèi)含量較高。瑞香狼毒中的黃酮類(lèi)化合物有一共同特點(diǎn)：b 環(huán)都有羥基、甲 氧基或葡萄糖基取代，單糖苷皆為葡萄糖苷。 對(duì)于瑞香狼毒中的黃酮類(lèi)化合物的研究，最早是我國(guó)化學(xué)家黃文魁先生，1 9 6 3 年他分離 得到了第一個(gè)瑞香狼毒中的雙二氫黃酮類(lèi)化臺(tái)物，命名為狼毒素( c h a m a e j a s m i n e ) 。到目前為 止，人們己經(jīng)從瑞香狼毒中分離出大量黃酮類(lèi)化合物。它包括1 9 7 7 年黃文魁分離得到的狼毒 素( c h a m a e j a s m i n e ) ( 2 1 ) ，1 9 8 4 年楊偉文等得到的7 一甲氧基狼毒素 ( 7 - m e t h o x y l c h a m a e j a s m i n e ) ，1 9 8 4 - 1 9 8 6 年間，日本學(xué)者m a s a t a k en i w a 研究組分離得到八 種雙二氫黃酮同系物及其異構(gòu)體：狼毒素a ，b ，c ( c h a m a e j a s m i na ，b ，c ) 【3 6 】( 2 2 ，2 3 ，2 4 ) ，新_ 狼毒素a ，b ( n e o c h a m a e j a s m i na ，b ) 3 7 1 ( 2 5 ，2 6 ) ，異狼毒素( i s o c h a m a e j a s m i n ) i s l ( 2 7 ) ，狼毒 素外消旋體c h a m a e j a s m i n e ( d 1 ) 、內(nèi)消旋體異狼毒素i s o c h a m a e j a s m i n ( m e s o 一) ，1 9 9 5 年日本 學(xué)者i k e g a w at e t s u o 【3 8 】又自瑞香狼毒中分離得到的較強(qiáng)抗h i v 病毒的優(yōu)狼毒素a ( 2 9 ) ，b ， c ( e u c h a n m a e j a s m i na ，b ，c ) 。 ：1 9 9 5 年劉桂芳【2 2 】分離得到一個(gè)新的二氫黃酮類(lèi)化合物：37 ，1 4 - 一- 甲基一4 ，1 1 一二甲氧 基一5 ，7 一二羥基苯駢二氫黃酮【4 0 】( 3 2 ) 。1 9 9 9 年j i n 嘞3 分離出一個(gè)二氫黃酮苷類(lèi)化合物：二氫山 奈酚一7 一o - b - d - 葡萄糖苷，同時(shí)得到狼毒色原酮( c h a m a e c h r o m o n e ) ( 2 8 ) 及一個(gè)新的狼毒色原 乏 酮衍生物m o h s e n o n e ( 3 1 ) ；1 9 7 6 年蒙古學(xué)者r e z a n o v a l 4 4 分離得n - 氫山奈酚( 3 0 ) ；2 0 0 0 2 0 0 1 年馮寶民t 2 1 , s l 】分得新狼毒素- 甲、狼毒色原酮和芫花醇乙，同時(shí)自該植物中首次分離鑒定出旋光 j 純的7 一甲氧基狼毒素和一個(gè)新化合物s 一( + ) - 1 ，5 - - - 苯基- 3 - 羥基- 1 - 戊酮；2 0 0 1 年徐志紅等 分離得到的瑞香狼毒素a ，b ( r u i x i a n g l a n g d u s ua ，b ) m7 j ；4 ，47 ，5 ，5 ，7 ，7 ! 一h e x a h y d r o x y 一3 ，3 一b i f l a v o n e ；2 0 0 2 年z h i - h o n gj i a n g 得至0 的7 - m e t h o x y l n e o c h a e j a s m i n a ，2 0 0 3 年劉欣等得到二氫瑞香素乙( d i h y d r o d a p h n o d o r i nb ) 4 0 2 3 等。 ：o 6 2 6 2 8 7 h 2 7 h o o c h 3 0 c h 3 0 3 2 1 4 4 木脂素類(lèi) h 3 木脂素類(lèi)( 1 i g n a n s ) 是一類(lèi)苯丙素氧化聚合而成的天然產(chǎn)物，常指其二聚物，少數(shù)為三聚童 物和四聚物，它有許多生物活性。 1 9 8 5 年，日本學(xué)者t a t e m a t s uh i r o s h i 4 5 】自瑞香狼毒根中分離鑒定出具有毒魚(yú)活性的木o j 脂體類(lèi)化合物鵝掌楸樹(shù)脂醇b ( 1i r i o r e s i n o lb ) 和松脂醇( p i n o r e s i n 0 1 ) 。1 9 9 4 年，日本學(xué)者 i k e g a w at e t s u o 6 1 l 研究發(fā)現(xiàn)，木脂體類(lèi)化合物桉素( e u d e s m i n ) 具有抗h i v 病毒作用。2 0 0 1 年， 徐志紅【6 2 】首次分離出一種新的木脂素類(lèi)化合物( 一) - p i n o r e s i n o lm o n o m e t h y l e t h e r ，其具有抗 菌活性。2 0 0 3 年j 劉欣等【2 3 】發(fā)現(xiàn)雙木脂素：羅漢松樹(shù)脂酚、拉帕酚、牛蒡苷。 1 4 5 揮發(fā)油類(lèi) 揮發(fā)油( v o l a t i l eo i l s ) 又稱(chēng)精油( e s s e n t i a lo i l s ) ，是一類(lèi)具有芳香氣味的油狀液 體的總稱(chēng)。在室溫下能揮發(fā)，可隨水蒸氣蒸餾。揮發(fā)油類(lèi)成分在植物界分布很廣，含有揮發(fā) 油的藥材也很多，在我國(guó)野生與栽培的芳香藥用植物有數(shù)百種之多。揮發(fā)油為多種類(lèi)型化合 物的混合物，含有化學(xué)成分都比較復(fù)雜，由十幾種到一百多種成分組成，其中有脂肪族化合 物、芳香族化合物、更多為萜類(lèi)衍生物。 8 內(nèi)蒙古入學(xué)碩士學(xué)位論文 1 9 8 6 年，楊偉文【5 9 】用氣相色譜質(zhì)譜( g c m s ) 聯(lián)用技術(shù)對(duì)瑞香狼毒根的揮發(fā)油進(jìn)行了研究， 共分離得到了2 7 種成分，其中1 2 種成分( 占精油總量的6 2 5 ) 分別鑒定為卜苯甲基丙二酮 一1 ，2 、正辛烷、肉桂酚、2 ，6 一二甲基庚烷、2 ，6 一二甲基辛烷、5 一甲基烷、正十二烷、正十三 烷、2 ，5 一二甲基十二烷、卜苯基己酮一3 、7 ，1 0 - 十 k - - 烯酸甲酯和3 ，7 ，1 1 一三甲基十二碳一2 一 反一6 一順一1 0 一三烯醇。其中，最后2 種成分分別占揮發(fā)油總量的1 7 8 9 和2 2 0 7 。于風(fēng)蘭【刪 等從新鮮瑞香狼毒莖葉經(jīng)正己烷提取，脫臘后進(jìn)行g(shù) c - m s d s 聯(lián)用分析，鑒定出2 0 個(gè)化合物。 主要成分為正十八烷，正十九烷，2 ，6 ，1 0 ，1 4 一四甲基十六烷，十六烷酸，十六烷酸甲酯，十 六烷酸乙酯，9 ，1 2 ，1 5 - 十八碳三烯酸甲酯，9 ，1 2 - 十八碳二烯酸，9 ，1 2 ，1 5 - 十八碳三烯酸和 十八烷酸。 1 4 6 其它類(lèi)化合物 甾醇類(lèi)化合物1 9 8 0 年gs c h r o e d e r 5 2 】等學(xué)者首次分得7 一氧代甾醇、7 a 一羥基甾醇、7 b 一羥基甾醇；1 9 8 7 年劉桂芳【5 3 】等分離鑒定出谷甾醇。 ， 。 葸醌類(lèi)化合物，1 9 9 7 年馬晴高【5 4 l 首次分離得到大黃素甲醚。另外，瑞香狼毒根中還含有 b 一谷甾醇、胡蘿卜苷、2 ，6 - - - 甲氧基對(duì)苯醌1 5 引、1 ，5 - - - 苯基一卜戊酮、1 ，5 = - - 苯基2 一烯一卜 戊酮、對(duì)羥基桂皮酸、正二十二酯、咖啡酸正二十酯1 2 0 】和s 一( + ) - 3 - 羥基_ 1 ，5 一二苯基- - 1 - 戊酮、 硬脂酸及三萜類(lèi)化合物白樺酸1 2 3 等成分。有報(bào)道，瑞香狼毒中總酸性成分含量為 1 7 7 0 m g g - i 1 5 6 1 ，多糖含量占2 5 5 7 【5 7 1 ，總皂苷含量占2 7 5 ，鞣質(zhì)含量占3 6 2 【5 8 】。： 瑞香狼毒根莖葉中還含有鋅、銅、鋁、砷、鉛、鎘、汞、鈦、釩及鎳等微量元素jj 在瑞 香狼毒鈣、鉀、鎂、鉛、銅、鋅、鎘、鐵、錳等9 種金屬元素中，鈣、鉀、鎂含量較高，而對(duì) 人類(lèi)健康有害的元素鉛、鎘含量比較低j ： - ：， ： 9 由于近幾年的過(guò)度放牧，瑞香狼毒在內(nèi)蒙古的分布面積在逐步擴(kuò)大，特別是在局部地區(qū) 瑞香狼毒已經(jīng)成為退化草原的優(yōu)勢(shì)種，這對(duì)草地生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生了極大的壓力。瑞香狼毒全株 有毒，家畜誤食可導(dǎo)致其死亡，作為一個(gè)畜牧業(yè)大省其分布廣泛危害嚴(yán)重。 2 2 實(shí)驗(yàn)儀器和材料 2 2 1 實(shí)驗(yàn)儀器 ，： 7 ： 。 i ： n e x u s 一6 7 0 f t i r 型傅里葉變換紅外光譜儀，k b r 壓片，美國(guó) ， j y 0 2 s 型紫外分析儀，北京君意東方電泳設(shè)備有限公司 ? ：j一 一 。， ：， ：。 r e - 5 2 a a 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠 ： ， s h z - c 循環(huán)水多用真空泵，鞏義市英峪予華儀器廠 ， x t t - 2x 4 顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀( 溫度計(jì)未校正) ，北京泰克儀器有限公司 b r u k e r a v a n c e5 0 0 型核磁共振儀，d m s o 為溶劑，t m s 為內(nèi)標(biāo)，測(cè)定溫度為3 0 ， 美國(guó) 2 2 2 實(shí)驗(yàn)試劑 序號(hào)試劑與材料 1石油醚( 沸程6 0 9 0 ) 2 乙醚 規(guī)格 分析純 分析純 3氯仿分析純 4乙酸乙酯分析純 產(chǎn)地 天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開(kāi)發(fā)有限 公司 天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開(kāi)發(fā)有限 公司 天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開(kāi)發(fā)有限 公司 天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開(kāi)發(fā)有限 公司 內(nèi)蒙古人學(xué)碩 ：學(xué)位論文 5 乙醇( 9 5 )分析純 6柱層析硅膠( 2 0 0 一3 0 0 目) 7 薄層層析硅膠板g f 2 5 4 2 2 3 實(shí)驗(yàn)材料 天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開(kāi)發(fā)有限公司 青島海洋化工廠分廠 青島海洋化工廠分廠 瑞香狼毒的根采集時(shí)間2 0 0 9 年9 月初，采集地點(diǎn)內(nèi)蒙古呼和浩特市大青山。采集樣 品洗干凈，撕碎，陰干備用 2 3 化學(xué)成分的提取和分離 2 3 1 提取 將8 k g 陰干的瑞香狼毒根用9 5 的乙醇回流提取，提取三次，每次3 小時(shí)，合并提取液， 經(jīng)減壓濃縮后得到約1 1 3 0 9 棕黑色浸膏。取1 0 7 0 9 此浸膏分散于3 5 的乙醇溶液中。依次用 有機(jī)試劑石油醚、乙醚、氯仿乙酸乙酯萃取，每種萃取三次。減壓濃縮后得到石油醚、乙醚、 氯仿，乙酸乙酯萃取浸膏，質(zhì)量分別為1 4 7 9 、l l l g 、7 5 9 、7 8 9 。提取過(guò)程如圖2 一l 所示： 內(nèi)蒙古大學(xué)碩j ：學(xué)位論文 8 k g 陰干的瑞香狼毒的根 ( 取乙醇浸膏加7 眙) 依次加入石油醚，乙醚，氯仿，乙酸乙酯萃取后濃縮 0 砒# 砷材，、， 、， 7 一一、 二。q 一物) ，。! 一 內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文 6 0 9 乙醇浸膏 硅膠柱層析( 1 0 0 - 2 0 0 目) 1 1r r1r 、，、 石油醚：乙酸乙 石油醚：乙酸乙酯石油醚：乙酸乙酯 酯= 3 ：5 = 4 0 ：1 = 1 0 ：l lj l r r 1r ，r - 9 8 黃色油狀物狀物，處 6 - 5 0 3 淡黃色 m s 析 “i j 一，a l ， 7 士亡 1 ：工，石倒i 乙酸乙酯 晶 物i i i 瑞香狼毒根乙醇提取物分離過(guò)程 ( 二仿提取物 物，用盡量少的乙酸乙酯溶解，加入一，剩 余的溶劑于烘箱中低于5 0 烘干至不結(jié)塊，得到一褐色粉末狀樣品。用硅膠(目) 法裝柱，干法上樣，并不斷攪拌趕出氣泡。以石油醚一乙酸乙酯系統(tǒng) 梯度，用硅膠gf板以石油醚一乙酸乙酯和乙酸乙酯一乙醇體系為展開(kāi)試劑監(jiān)測(cè)收集，每 ，共得到個(gè)組合并相同組分。 塑鍪直奎蘭堡主蘭垡笙塞 當(dāng)石油醚：乙酸乙酯= 3 0 ：l 時(shí)，合并組分5 3 0 ，濃縮后得到黃色油狀物質(zhì)，再用硅膠柱反 復(fù)梯度洗脫，得到黃色油狀物，經(jīng)過(guò)鑒定和化合物1 一樣的物質(zhì)。當(dāng)石油醚：乙酸乙酯= 1 0 ：4 時(shí)，合并組分5 4 7 0 ，濃縮后得白色物質(zhì)，經(jīng)重結(jié)晶得到白色粉末即化合物i i i ，分離過(guò)程如 圖2 3 所示： ，r 、 廠、石油醚：乙酸乙酯= 3 0 ：1 ，收集餾分 一， 5 - 3 0 ，黃色油狀物，石油醚一乙酸乙酯 體系反復(fù)梯度洗脫，得與化合物i 一 圭膠柱層析 樣物質(zhì) 一 廠 、 一、 石油醚：乙酸乙酯= 1 0 ：4 餾分 y7 5 4 - 7 0 ，反復(fù)梯度洗脫，重結(jié)晶， 得化合物i i i 圖2 3 瑞香狼毒根氯仿提取物分離過(guò)程 f i 醇- 3p r o c e d u r eo fi s o l a t i o no fc h l o r o f o r me x t r a c t i o n 2 4 瑞香狼毒根油狀成分的g c m c 分析 2 4 1g o m s 的測(cè)試條件 儀器：7 8 9 0 a 氣相色譜儀，5 9 7 5 c 質(zhì)譜儀( m s ) 色譜條件： 色譜柱：d b 5 一m s ，輔助通道溫度：3 2 0 。c ，柱溫：8 0 ( 2 ( 0 5 m i n ) 一3 0 m i n - 1 6 0 一1 0 m i n 一1 8 0 ( 3 m i n ) ，進(jìn)樣口溫度：3 0 0 。 樣品進(jìn)樣方法： a g i l e n t 自動(dòng)進(jìn)樣器，不分流、進(jìn)樣1l l1 ，載氣：h e 質(zhì)譜條件： 離子化方式：e l ，電子加速電壓：7 0 v ，離子源溫度：2 3 0 。c ，監(jiān)測(cè)方式：s c a n ，進(jìn)樣口溫度： 2 6 0 。c ，輔助通道溫度：2 8 0 。c ，采集到質(zhì)譜圖用n i s t 標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜序進(jìn)行檢索分析。 1 4 表2 1 乙醚萃取物中油狀物1 化學(xué)成分結(jié)果分析 t a b l e 2 - - 1a n a l y s i sr e s u l t so fc o n s t i t u e n t so fe s s e n t i a lo i lf r o mp e t r o l e u me t h e r e x t r a c t i o n ( 1 ) 編號(hào)保留時(shí)間 化合物名稱(chēng) 相對(duì)分子質(zhì)量 ( n u ) ( t r m i n )( c o m p o u n d ) ( r e l a t i v em o e c u l a r m a s s ) 6 。7 6 1 0 3 3 1 1 3 3 1 2 9 4 1 3 5 2 1 3 8 4 2 2 9 6 ( e ，e ) - 2 ，4 - 十二二碳二烯醛( ( e ，e ) 一2 ，4 - d o d e c a d i e n a l ) 鄰苯二甲酸：二丙酯( 1 ，2 - b e n z e n e d i c a r b o x y l i ca c i d ，d i p m p y le s t e r ) 鄰苯二甲酸二丁酯( d i b u t y lp h t h a l a t e ) 1 ，3 ，5 - 三甲苯( b e n z e n e ，1 , 3 ，5 - t r i m e t h y l - ) 氟苯氧丙胺( f l u o x e t i n e ) 環(huán)丁醇 c y c l o b u t a n o 1 - ( 3 ，4 - 二羥基苯基) 一2 - 甲氨基乙醇e p i n e p h r i n e 1 8 0 2 5 0 2 7 8 1 2 0 3 4 6 1 7 2 1 8 3 82 4 9 3 3 , 7 ，1 1 一三甲基一2 ，6 ，1 0 一十二烷三烯醛( 3 ，7 ，1 1 - t r i m e t h y l d o d e c a 一2 ，6 ，1 0 - t r i e n a l ) 2 6 4 _ 一i i i i - _ - _ - - - _ - _ - _ _ _ - _ - _ - _ _ - _ _ - - _ i _ - _ _ _ _ _ l - l _ _ - l - l l _ - - _ _ _ _ _ - - _ - - _ _ _ _ - _ _ - _ _ - _ - _ i _ _ - - _ l _ - _ - - - _ _ - _ - _ _ _ _ _ _ _ - _ - _ l - - _ _ _ - - _ - - _ - _ _ _ _ _ - _ _ _ - _ _ _ _ _ _ - - 一 1 2 3 4 5 6 7 內(nèi)蒙古人學(xué)碩上學(xué)位論文 油狀物2 串度 t i c ：o o o o d d a t a m s 表2 2 乙醚萃取物中油狀物2 化學(xué)成分結(jié)果分析 t a b l e 2 - - 2a n a l y s i sr e s u l t so f c o n s t i t u e n t so f e s s e n t i a lo i lf r o mp e t r o l e u me t h e r e x t r a c t i o n ( 2 ) o ， 卜 鯽鯽吾舳鯽鯽坩 釅 化合物1 黃色油狀物i r ( k b r ) ：2 9 6 1 c m 、2 9 2 0c m 、2 8 5 1c m 。1 顯示具有飽和的c h 。、c h 2 ，1 7 3 8c i l l q 處的強(qiáng)單峰說(shuō)明化合物中有c = o ，11 7 5 c m - 11 2 6 4 c m - 1 為c o - c 的不對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)吸收峰， 3 0 5 3 7 1 c m 一，3 0 6 8 8 8 c m _ 1 說(shuō)明苯環(huán)的c h 伸縮振動(dòng)；1 5 8 8 2 8 1 c m 、1 5 8 0 3 3 c m 一、1 4 6 6 7 3 c m _ 1 和1 6 1 1 4 3 c m 、1 5 8 0 2 2 c m - 1 、1 4 6 0 6 0 c m - 1 是苯環(huán)的骨架振動(dòng)，充分證明苯環(huán)的存 在：7 2 1 5 7 c m 一，7 2 3 1 6 c m 一：苯環(huán)二取代c h 面外彎曲振動(dòng)：結(jié)合1 3 c n m r 、1 h n m r ，初步確定化 合物為一酯類(lèi)化合物。化合物的核磁共振數(shù)據(jù)見(jiàn)表3 1 表3 1化合物i 的核磁共振數(shù)據(jù) t a b l e 3 。1n m rd a t ao fc o m p o u n di c 化學(xué)位移c 級(jí)數(shù)連接h 化學(xué)位移與h 遠(yuǎn)程相關(guān)c 位移與h 遠(yuǎn)程相關(guān)h c n m r 和d e p td e p t 或h n m r 和刪q c舳c h h c o s y 刪q c 1 6 6 9 q 一 1 3 1 7 q 1 3 1 4 7 6 01 2 8 67 6 0 - 7 6 5 c h 1 2 8 6 7 6 51 6 6 9 1 3 1 4 c h 6 4 94 1 51 6 6 9 3 0 01 8 64 1 5 - 1 5 8 c h 2 3 0 01 5 86 4 9 1 8 6 1 3 41 5 8 - 1 3 1 c h 2 1 8 61 3 16 4 93 0 o1 3 4 1 3 1 - 0 8 3 c h 2 1 3 4 0 8 33 0 0 1 8 6 c h 3 根據(jù)c o s y 和h m b c 可以確定4 1 5 - 1 5 8 - 0 8 3 為一個(gè)正丁基，末端c h 。( c 為6 4 9 ，h 為4 1 5 ) 應(yīng)該連接一個(gè)o ，并與1 6 6 9 長(zhǎng)程相關(guān)，說(shuō)明1 6 6 9 為酯羧基。由c o s y 和h m b c 可以確定1 3 1 4 與 1 2 8 6 相連，j 1 1 2 8 6 離1 6 6 9 碳更近。結(jié)合文獻(xiàn)【6 3 】，其核磁數(shù)據(jù)均和鄰苯二甲酸二丁酯數(shù)據(jù) 吻合，推知化合物i 為鄰苯二甲酸二丁酯，化學(xué)式為c 。h ：。q ，化合物的結(jié)構(gòu)如下t