臨床血液學檢驗基礎(chǔ)PPT課件.ppt

臨床血液學檢驗基礎(chǔ),黃河三門峽醫(yī)院,1,一、血涂片的制備與染色二、紅細胞及其形態(tài)學檢查三、白細胞及其形態(tài)學檢查,內(nèi)容,2,一、血涂片的制備與染色,外周血涂片檢查是最有益的血液系統(tǒng)疾病檢查手段，能為臨床提供大量的信息，如能鑒別白血病，感染和其它疾病。因此，血透片的質(zhì)量至關(guān)重要。一：載玻片要求：干凈，整齊；新玻片一般用鉻酸清洗液或10%鹽酸浸泡24小時，再徹底清洗。舊玻片可用肥皂水或合成洗滌劑清洗。目的：保持玻片接近中性二：手工推片：先后移，后前推（30-45度），勻速，平穩(wěn)；血滴大，角度大，速度快，血膜厚，反之，則血膜薄。,3,瑞氏染色（Wright染色）,瑞氏染料由酸性染料伊紅（E-）和堿性染料亞甲藍（M+）組成。甲醇的作用：一是溶解美藍和伊紅；二是固定細胞形態(tài)。原理：既有物理的吸附作用，又有化學的親和作用。各種細胞成分化學性質(zhì)不同，對各種染料的親和力也不一樣。,4,紅細胞及其形態(tài)學檢查,紅細胞：起源于骨髓造血干細胞，在紅細胞生成素的作用下，經(jīng)紅系祖細胞階段，分化為原紅細胞，再經(jīng)數(shù)次分裂發(fā)育為早幼、中幼、晚幼直至成熟紅細胞。生理功能：紅細胞通過血紅蛋白來實現(xiàn)交換和攜氣的功能。臨床相關(guān)檢查：血常規(guī)、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)、血沉、紅細胞形態(tài)分析,5,紅細胞計數(shù),通過血常規(guī)分析儀來檢測紅細胞參數(shù)和形態(tài)變化，從而對某些疾病進行診斷和鑒別診斷。血紅蛋白測定：氰化高鐵血紅蛋白（HiCN)測定法是WHO和ICSH推薦的參考方法。缺點：KSN有劇毒，污染環(huán)境，可使高白細胞、，高球蛋白血癥的標本渾濁，以及不能測定SHb。血細胞分析儀：比色法紅細胞數(shù)目計數(shù)：分析儀通過直接測量紅細胞對應的電脈沖個數(shù)獲取紅細胞數(shù)目（RBC),單位為1012/LRBC=n*1012/L,6,紅細胞計數(shù),平均紅細胞體積（MCV):根據(jù)紅細胞分別的直方圖，計算紅細胞平均體積，單位為fL。紅細胞壓積(HCT)、平均紅細胞血紅蛋白含量（MCH)、平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC)計算公式：HCT=RBC*MCVMCH=HGB/RBCMCHC=HGB/HCT,7,紅細胞形態(tài),正常紅細胞形態(tài),1.形態(tài)：正常紅細胞直徑69m，平均7.5m；圓形或輕微的卵圓形，中心約1/3區(qū)域為淺染的灰白區(qū),2.正細胞正色素性貧血,8,紅細胞形態(tài)異常意義：貧血輔助診斷為其他疾病診斷提供依據(jù)(如:MM、DIC、骨髓纖維化)某些病原檢查,9,紅細胞形態(tài)主要價值在于對貧血疾病的診斷、鑒別診斷及療效監(jiān)測,貧血既是臨床癥狀，也是一大類疾病。貧血的診斷：1）臨床癥狀及體征的鑒別作用；2）實驗室檢查的重要性：鐵代謝、葉酸及B12測定、溶血試驗、血紅蛋白性質(zhì)檢查、免疫學及分子生物學檢查等。3）形態(tài)學診斷：包括血液涂片、骨髓檢查在貧血的分類、診斷中具有重要提示作用，有的病例有確診意義。,10,貧血形態(tài)學分類,11,貧血的MCV、MCH和MCHC分類,12,紅細胞在血膜上的不規(guī)則分布,凝集反應：抗紅細胞抗體的冷凝集反應，顯示MCV假性增高、RBC計數(shù)假性減少，MCH及MCHC假性增高,13,紅細胞堆積現(xiàn)象,14,紅細胞在血膜上的不規(guī)則分布,緡錢狀形成：,15,紅細胞大小和(或)著色異常,紅細胞大小不均：是指紅細胞大小差異程度增大，分析儀參數(shù)表現(xiàn)為RDW增加；紅細胞雙形性：兩種不同紅細胞群體存在，在分析儀的紅細胞直方圖中清晰可見,16,低色素性：紅細胞著色變淺伴有中心淡染區(qū)擴大，超過紅細胞直徑三分之一，建議MCH被用于衡量低色素；嗜多色性：未完全成熟紅細胞由于殘存核糖體核酸RNA而呈現(xiàn)出粉灰藍色，應網(wǎng)織紅細胞計數(shù)大紅細胞：直徑大于8.5um（MCV100fL），大紅細胞呈圓形或卵圓形，具有診斷意義。早產(chǎn)兒、嬰兒及新生兒的紅細胞較，網(wǎng)織紅細胞過多也會導致MCV增高；小紅細胞：指直徑小于7um的小紅細胞（MCV80fL），常伴有Hb的減低,17,小細胞低色素性貧血,18,嗜多色性紅細胞,（1）形態(tài)學（2）臨床意義,19,紅細胞異常形態(tài),棘紅細胞：,一例脂蛋白貧血典型的高色素細胞，伴有不等長度、厚度和形狀的突起,20,紅細胞異常形態(tài),咬紅細胞：,RBC外周有一個或多個弧形缺損（咬形），是脾臟切除海因小體而成。咬細胞是氧化溶血的特征改變。微血管病性溶血性貧血和紅細胞機械損傷可能產(chǎn)生，是由外周假空泡破裂及紅細胞膜繼發(fā)融合而成。,21,紅細胞異常形態(tài),水泡細胞：,紅細胞內(nèi)血紅蛋白收縮至細胞的一半，形成致密物質(zhì)，細胞剩余部分成為一個空膜,G6PD缺乏（藥物溶血）-常見水泡細胞，伴細胞破壞,22,紅細胞異常形態(tài),不規(guī)則收縮細胞,紅細胞失去了圓盤形狀，覆蓋了10-30個短而鈍的突出物或規(guī)律排列的針狀物,異形紅細胞,異形紅細胞是指紅細胞形狀異常。異形紅細胞增生是非特異改變，但特定形狀的異形紅細胞可能與特殊紊亂相關(guān)，如：遺傳性橢圓形紅細胞增多癥中的橢圓形紅細胞。建議：用具體異常描述！,23,紅細胞異常形態(tài),鐮狀紅細胞呈新月狀或鐮形，末端尖銳，是HbS聚合而成,24,紅細胞異常形態(tài),球形紅細胞,球形紅細胞是?。ㄖ睆?%，則稱為中性粒細胞核右移。核右移常伴有白細胞總數(shù)減低和中性粒細胞胞體增大。常見于巨幼細胞性貧血及惡性貧血等。在應用某些抗核酸代謝藥物及炎癥恢復期等也可見核右移現(xiàn)象。,56,中性粒細胞核左移,57,血液中的腫瘤細胞,原始粒細胞早幼粒細胞原始單核細胞幼稚單核細胞,58,59,慢性中性粒細胞白血病WBC持續(xù)增高，多30109/L或更高。白細胞分類可見中性分葉粒細胞百分率明顯增高，?？蛇_90%以上。桿狀粒細胞僅輕度增高，幼稚粒細胞少見或不見。嗜酸及嗜堿粒細胞百分率正常。中性粒細胞可見核分葉過多、可見胞質(zhì)中出現(xiàn)空泡、中毒顆粒等形態(tài)學改變；PLT一般正常。NAP活性常增高。,60,外周血出現(xiàn)原始細胞,61,M3,62,單核細胞增多及形態(tài)變化,63,64,65,幼稚單核細胞,66,嗜酸細胞增多及形態(tài)變化,CEL,67,嗜堿細胞增多及形態(tài)變化,68,69,淋巴細胞數(shù)量增高,淋巴細胞增高：生理性增高：年齡病理性增高：相對比例增高（粒細胞減少，射線）絕對增高：病毒感染、淋巴腫瘤,70,淋巴細胞胞質(zhì)的異常,建議反應性淋巴細胞用于描述淋巴細胞良性病因，異常淋巴細胞用于描述與疑似惡性淋巴細胞或克隆病因,71,反應性淋巴細胞：細胞變大，胞核不成熟包括核仁可見、染色質(zhì)不聚集，核不規(guī)則或分葉，胞質(zhì)嗜堿性以及空泡形成和細胞不規(guī)則形。胞質(zhì)可能豐富，與染淡藍色明顯不同的是近核處胞質(zhì)嗜堿性,72,異型淋巴細胞,傳染性單核細胞增多癥異型淋巴細胞：型、型、型,73,異型淋巴細胞,74,異常淋巴細胞,建議將異常淋巴樣細胞定義為一種特殊的腫瘤細胞類型，如毛細胞，淋巴瘤細胞、幼淋巴細胞，骨髓瘤中的漿細胞或其它漿細胞惡性增生，異常淋巴樣細胞如果在鑒別時出現(xiàn)一定數(shù)量可以在血片報告中加以描述并視為單獨一類異常淋巴細胞強調(diào)形態(tài)學在淋巴細胞增生性腫瘤診斷價值中的局限性，最終診斷是由流式細胞術(shù)中的免疫表型確定。,75,淋巴腫瘤外周血細胞形態(tài),76,ALL,77,PLL,78,成熟淋巴腫瘤（FL),79,濾泡淋巴瘤細胞,80,伴絨毛增多的脾邊緣區(qū)淋巴瘤,81,LGL,82,HCL,83,MM繼發(fā)漿細胞白血病,84,巨球蛋白血癥,85,血小板及巨核細胞形態(tài),86,正常血小板形態(tài),典型血小板為圓形、橢圓形或不規(guī)型，直徑約24m，無核，瑞-姬染色后胞質(zhì)透明區(qū)呈淡藍色，顆粒區(qū)含許多散在分布的紫紅色顆粒。,87,88,巨大血小板,89,90,血小板衛(wèi)星現(xiàn)象,91,微小巨核細胞,92,細胞形態(tài)學檢查需要注意,93,1.涂片要盡量展開細胞,94,2.良好的染色,瑞氏染色基本原理：酸性伊紅+