分光光度法測定新血寶膠囊中鐵的含量.doc

分光光度法測定新血寶膠囊中鐵的含量 （湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 藥學(xué)（2）班 ）一、實(shí)驗(yàn)綜述 摘要：以鄰二氮菲為顯色劑用分光光度法測定新血寶膠囊中鐵的含量。研究表明，在pH=29的溶液中，鐵（）可用鹽酸羥胺還原至鐵（），生成的鐵（）與鄰二氮菲生成穩(wěn)定的橘紅色絡(luò)合物，其最大吸收波長為506nm,鐵濃度在0.3116.00mg/L范圍內(nèi)與溶液吸收光度呈良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為A= _ 相關(guān)系數(shù)r=_，檢出限為_ mg/L，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差RSD=_，表觀摩爾吸收系數(shù)=_L（mol-1cm-1） 關(guān)鍵詞：鄰二氮菲；分光光度法；鐵鐵元素是人體內(nèi)重要的元素之一。人體缺鐵容易導(dǎo)致一些貧血癥狀甚至一些疾病，所以適當(dāng)補(bǔ)鐵對(duì)人體健康有著非常重要的意義。如果人體缺鐵，可影響血紅蛋白、肌紅蛋白的合成，使某些酶的活性降低，引起人體生理上的變化，從而導(dǎo)致免疫力降低，智力降低和機(jī)體抵抗力下降等引起的各種疾病的產(chǎn)生。測定新血寶膠囊中的鐵含量對(duì)于人體的健康有著十分重要的意義。測定鐵的含量由很多方法。本文采用鄰二氮菲分光光度法測定新血寶膠囊中鐵的含量，該法具有操作簡單、靈敏度高等特點(diǎn)，結(jié)果令人滿意。 2、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解分光光度法側(cè)鐵的選擇2.熟悉顯色反應(yīng)條件與測量條件的選擇方法3.熟悉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本內(nèi)容與方法4.掌握分光光度法測定新血寶膠囊中鐵的含量3、 實(shí)驗(yàn)原理 亞鐵離子與鄰二氮菲反應(yīng)生成橘紅色絡(luò)合物，其反應(yīng)式為：332+橘 紅色 lmax鄰二氮菲四、實(shí)驗(yàn)儀器和試劑 儀器： 721(722)分光光度計(jì)、50ml容量瓶、刻度吸管（1ml、5ml），pH精密試紙。 實(shí)驗(yàn)試劑：鐵標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(Fe2+=100.0 g/ml). 0.15%鄰二氮菲水溶液(顯色劑). 10%鹽酸羥胺溶液(還原劑) 醋酸緩沖溶液. 3mol/ml HCl. 1mol/ml NaOH.五、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案（一）測定波長的選擇：在50m L容量瓶中，準(zhǔn)確加入040m L 鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液( I ) ，分別加入1 m L 10 鹽酸羥胺溶液，搖勻后放置2m i n后，再加入2m L 015鄰二氮菲溶液、5 m L10m o l L醋鈉溶液，以水稀釋至刻度，搖勻。用l c m 吸收池，以去離子水為空白溶液作參比溶液，在不同波長( 從440一560nm ) 下測定一次吸光度。繪制吸收曲線。 表1/nm440450460470480490492494A/nm496498500502504506508510A/nm520530540550560A 繪制A曲線 A /nm 圖1 由圖1可以看出，隨著波長的增加，吸光度值逐漸增加，在_nm處有最大吸收，此后隨著波長的增加，吸光度值降低。因此選擇_nm為最佳吸收波長。 （二）鄰二氮菲的用量對(duì)吸光度的影響 取6個(gè)50 m L 容量瓶，各加1 0- 3m ol L 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液2 m L 及1 m L 10N H 20H H C I 溶液，搖勻，放置2m i n后，再分別加入010 m L、0 30 m L、0 50m L、10 m L、2 0 m L 及4 0 m LO 15鄰二氮菲溶液，和5 m L l m ol L C H 3C O O N a 溶液，以去離子水稀釋至標(biāo)線，搖勻。在722型分光光度計(jì)上用l c m 吸收池，在選定的波長_nm ，測定溶液的吸光度( A ) 。繪制吸光度一顯色劑用量曲線。 表2 鄰二氮菲用量的不同對(duì)吸光度的影響V鄰二氮菲0.100.300.501.02.04.0A根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)繪制AV曲線 A /nm 圖2 根據(jù)表2和圖2可知鄰二氮菲的用量在1.0, 4.0范圍時(shí)，溶液的吸光度最大且恒定不變，故選2.0m L作為其最佳用量。 （三）顯色反應(yīng)的時(shí)間 取一個(gè)50 m L 容量瓶，加入2m L 10 qm o l L標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，及l(fā) m L 10N H 20H H C I 溶液，搖勻放置2m i n后，再加2 m L 01 5鄰二氮菲溶液，5 m L1.0mol/L 醋酸鈉溶液，以水稀釋至刻度，搖勻。在分光光度計(jì)上，在選定波長_nm 下，用l c m 吸收池，以去離子水為空白溶液作參比溶液，測定吸光度以后每隔半小時(shí)再測定一次。 表3 不同顯色時(shí)間對(duì)溶液吸光度的影響 時(shí)間0h0.5h1h1.5h2.0h2.5h3.0h3.5h4.0hA 根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)繪制At 曲線 A t/h圖3 根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為了實(shí)現(xiàn)快速并且準(zhǔn)確分析，本實(shí)驗(yàn)選擇室溫下最佳測定時(shí)間為顯色后_h。 （四）溶液pH的選擇 取6 個(gè)50m L 容量瓶，每個(gè)加入2 m L 10- 3mol/L標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，及l(fā) m L 10N H ：O H H C I 溶液，搖勻放置2r a i n后，再加2 m L 015鄰二氮菲溶液，搖勻。分別從滴定管中加入10 m L 、12 m L 、14 m L、16m L、18 m L、20 m L 01m o l L N a O H 溶液，以去離子水稀釋至標(biāo)線，搖勻。在選定波長_nm 下，用1c m 吸收池。以去離子水為空白，測定各溶液的吸光。 表4 不同酸度對(duì)吸光度的影響V/mL101214161820ApH 根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)繪制ApH曲線 A pH 圖4 由圖4中可知，在pH 值為_范圍內(nèi)吸光度最大并基本恒定，故本實(shí)驗(yàn)取pH 為_作為最佳顯色pH 。所以我們就可以得出加入_m ol LN aO H 溶液時(shí)為最適宜用量。 （五）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取5個(gè)50m L容量瓶，用刻度移液管分別加入000 m L 、040 m L、0 80 m L 、120 m L、1 60 m L 、180 m L ( I I ) 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液注( 含鐵100 ugm L) 。在分別加入1m L 10N H 20 H H C l 溶液，搖勻放置2m i n后，再加2 m L 015鄰二氮菲溶液，5 m L 1 0m o l L 醋酸鈉溶液，以去離子水稀釋至刻度，搖勻。在分光光度計(jì)上，在選定波長_nm 下，用l c m 吸收池，以去離子水為空白溶液作參比溶液，測定各溶液吸光度。以含鐵量為橫坐標(biāo)，相應(yīng)吸光度為縱坐標(biāo)，繪制出工作曲線。 表5 標(biāo)準(zhǔn)曲線 V/mL0.400.801.21.601.80A 由標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液( I I ) 在波長_nm 處測定吸光度，做標(biāo)準(zhǔn)曲線。數(shù)據(jù)見表5 和圖5，其線性較好?；貧w方程為：A =_，r =_。根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，以含鐵量為橫坐標(biāo)，相應(yīng)吸光度為縱坐標(biāo)，繪制曲線 A C/ug/L 用移液管量取20mL新血寶樣品溶液于5 0 m L容量瓶中，加入l m L 10N H ：O H H C l 溶液，搖勻放置2min后，再加2 m L015鄰二氮菲溶液，5m L 10m o l L 醋酸鈉溶液，以水稀釋至刻度，搖勻。在分光光度計(jì)上，在選定波長_nm 下，用l cm 吸收池，去離子水為空白溶液作參比溶液，放置_h后，測鄰二氮菲的用量，圖4不同顯色時(shí)間對(duì)溶液吸光度的影響定吸光度。測得吸光度為A =_，由回歸方程為：A=_ ，得C = _ug/m L，則自來水中鐵的含量_ug/m L：六、實(shí)驗(yàn)結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)的最佳實(shí)驗(yàn)條件是：最大吸收波長為_nm ，顯色劑最佳用量為_m L ；選擇在室溫下_h