生物化學(xué)練習(xí)題3(生科08).doc

本資料來源于生科07師兄師姐第十四章 核酸的物理化學(xué)性質(zhì) 核酸的糖苷鍵和磷酸二酯鍵均可被酸、堿和酶水解，產(chǎn)生堿基、核苷、核苷酸和寡核苷酸。酸水解時，糖苷鍵比磷酸酯鍵易于水解；嘌呤堿的糖苷鍵比嘧啶的糖苷鍵易于水解；嘌呤堿與脫氧核糖的糖苷鍵最不穩(wěn)定。 RNA 易被稀堿水解，產(chǎn)生 2 和 3 核苷酸， DNA 對堿比較穩(wěn)定。細(xì)胞內(nèi)有各種核酸酶可以分解核酸。限制性內(nèi)切酶是基因工程的重要工具酶。 核酸的堿基和磷酸基均能解離，因此核酸具有酸堿性質(zhì)。堿基雜環(huán)中的氮具有結(jié)合和釋放質(zhì)子的能力。核苷和核苷酸的堿基與游離堿基的解離性質(zhì)相近，它們是兼性離子。核酸中的磷酸基只有一級解離。 DNA 的酸堿變性使酸堿滴定曲線不可逆。 核酸的堿基具有共軛雙鍵，因而有紫外吸收的性質(zhì)。各種堿基、核苷和核苷酸的吸收光譜略有區(qū)別。核酸的紫外吸收峰在 260nm 附近，可用于測定核酸。根據(jù) 260nm 與 280nm 的吸光度（ A ）可判斷核酸純度。天然 DNA 的（ P ）為 6600 ， RNA 為 77007800 ，發(fā)生變性和降解時，（ P ）值會升高，以此可鑒別核酸制劑的質(zhì)量。變性作用是指核酸雙螺旋結(jié)構(gòu)被破壞，雙鏈解開，但共價健并未斷裂。引起變性的因素很多，升高溫度、過酸、過堿、 有機溶劑都能造成核酸變性。核酸變性時物理化學(xué)性質(zhì)將發(fā)生改變。熱變性一半時的溫度稱為熔點或變性溫度，以 Tm 表示。 DNA 的 G+C 含量影響 Tm 值。根據(jù)經(jīng)驗公式 xG+C =(Tm 69.3) 2.44 可以由 DNA 的 Tm 值計算 G+C 含量?；蛴?G+C 含量計算 Tm 值。 變性 DNA 在適當(dāng)條件下可以復(fù)性，物化性質(zhì)得到恢復(fù)。復(fù)性快慢以 Cot 1/2 來表示。用不同來源 DNA 進(jìn)行退火，得到雜交分子。也可以由 DNA 鏈與互補 RNA 鏈得到雜交分子。分子雜交是進(jìn)行分子生物學(xué)研究的重要方法。 一、名詞解釋1、DNA的變性：在某些理化因素（如熱、酸或堿）作用下，DNA分子中的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)松散分開成為單鏈的現(xiàn)象。DNA變性不涉及到其一級結(jié)構(gòu)的改變，即不破壞3，5-磷酸二酯鍵。2、DNA的復(fù)性：DNA變性是可逆的。當(dāng)逐漸降溫時，變性DNA的二條鏈重新締合形成原來的雙螺旋結(jié)構(gòu)并恢復(fù)其原有的理化性質(zhì)和生物學(xué)活性，稱為DNA復(fù)性或稱退火。3、核酸分子雜交：不同來源的核酸變性后，混在一起進(jìn)行復(fù)性，只要各核酸單鏈有一定數(shù)量的堿基彼此互補(不用全部堿基互補)，彼此之間就可形成局部雙鏈，即所謂的雜化雙鏈，這個過程稱為分子雜交。4、Tm ：DNA變性過程中，紫外光吸收值達(dá)到最大值的50時的溫度稱為DNA的解鏈溫度(Tm)。在Tm時，核酸分子內(nèi)50的雙鏈結(jié)構(gòu)被解開。Tm值與DNA的分子大小和堿基中的G+C含量有關(guān)。5、 增色效應(yīng)： 核酸變性后，與未發(fā)生變性的同一濃度的核酸溶液相比，其在波長260nm處的光吸收（A260nm）增強的現(xiàn)象稱為增色效應(yīng)或高色效應(yīng)。這主要是核酸變性后，堿基的共軛雙鍵更多地暴露的原故。二、是非題（1） 核酸樣品的純度可以根據(jù)樣品的O.D260/O.D280 的比值判斷，純的DNA 樣品O.D260/O.D280=1.8，純的RNA 樣品O.D260/O.D280=2.0。對（2） 用堿水解核酸時，可以得到2和3-核苷酸的混合物。對（3） DNA 的Tm 值隨（A+T）/（G+C）比值的增加而增加 錯（4） DNA復(fù)性時會產(chǎn)生增色效應(yīng) 錯（5） DNA的變性通常是爆發(fā)式的，在一個很窄的溫度范圍內(nèi)發(fā)生對第十五章 核酸的研究方法 核酸研究的首要方法是核酸的分離和測定。目前分離 DNA 最重要的方法有 3 個：一是用鹽抽提，用苯酚和氯仿除去蛋白質(zhì)。二是用廣譜蛋白酶在 SDS 存在下保溫消化細(xì)胞懸液，再用苯酚的氯仿去蛋白，用 Rnase 除去少量的 RNA 。三是用氯化銫密度梯度離心法分離純化DNA。制備 RNA 要防止 Rnase 的降解。器皿要高溫處理或用 DEPC 除去 Rnase 。破碎細(xì)胞的同時使蛋白質(zhì)變性。 RNA 反應(yīng)體系中加入 Rnase 抑制劑。目前常用的 RNA 分離方法有兩個：其一 用酸性鹽 / 苯酚 / 氯仿抽提。其二，用鹽 / 氯化銫密度梯度離心。分離 poly(A) + mRNA 可用寡聚（ dT ） n 親和層析法。核酸的測定常用紫外分光光度法、定磷法和定糖法。測定生物樣品中的核酸需要預(yù)先處理提取出核酸或其成分再作測定。核酸的超速離心是研究核酸的重要方法。常用的是密度梯度離心法?？捎脕頊y定核酸密度、測定 G+C 含量和研究核酸的構(gòu)象。核酸的凝膠電泳是最常用的核酸研究方法。通常用的是瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳。核酸的測定常用紫外分光光度法、定磷法和定糖法。測定生物樣品中的核酸需要預(yù)先處理提取出核酸或其成分再作測定。核酸的超速離心是研究核酸的重要方法。常用的是密度梯度離心法。可用來測定核酸密度、測定 G+C 含量和研究核酸的構(gòu)象。核酸的凝膠電泳是最常用的核酸研究方法。通常用的是瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳?？焖贉y定核酸序列有許多方法。 Sanger 最初提出加減法測定 DNA 序列，后又改進(jìn)為終止法。 Maxan 和 Gilbert 提出化學(xué)法測定 DNA 序列。 RNA 序列測定方法與 DNA 測序法的原理是一樣的。 DNA 的聚合酶鏈反應(yīng)（ PCR ）是應(yīng)用最廣泛的生物技術(shù)。它的基本步驟為：（ 1 ）設(shè)計引物。（ 2 ）優(yōu)化反應(yīng)體系。（ 3 ）選擇熱循環(huán)溫度。（ 4 ）鑒定擴增產(chǎn)物。 PCR 技術(shù)在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、法醫(yī)等方面都有廣泛的應(yīng)用。 名詞解釋 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）：聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法。典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán)，通過多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴增。是非 本學(xué)期所做實驗動物組織核酸的提取及含量測定對核酸進(jìn)行定量所用的方法為定糖法對第十九章 代謝總論、第二十章 生物能學(xué) 第二十四章生物氧化-電子傳遞和氧化磷酸化作用（一）名詞解釋1 生物氧化2 呼吸鏈：有機物在生物體內(nèi)氧化過程中所脫下的氫原子，經(jīng)過一系列有嚴(yán)格排列順序的傳遞體組成的傳遞體系進(jìn)行傳遞，最終與氧結(jié)合生成水，這樣的電子或氫原子的傳遞體系稱為呼吸鏈或電子傳遞鏈。3 氧化磷酸化：在底物脫氫被氧化時，電子或氫原子在呼吸鏈上的傳遞過程中伴隨ADP 磷酸化生成ATP 的作用，稱為氧化磷酸化。氧化磷酸化是生物體內(nèi)的糖、脂肪、蛋白質(zhì)氧化分解合成ATP 的主要方式。4 磷氧比(PO)：在物質(zhì)氧化時，每消耗1摩爾原子氧所消耗的無機磷的摩爾數(shù)（或每消耗一摩爾原子氧所生成的ATP的摩爾數(shù)）稱為PO比值。5 底物水平磷酸化：在底物被氧化的過程中，底物分子內(nèi)部能量重新分布產(chǎn)生高能磷酸鍵（或高能硫酯鍵），由此高能鍵提供能量使ADP（或GDP）磷酸化生成ATP（或GTP）的過程稱為底物水平磷酸化。此過程與呼吸鏈的作用無關(guān)，以底物水平磷酸化方式只產(chǎn)生少量ATP。體內(nèi)僅有的三個底物水平磷酸化反應(yīng)為？6能荷：能荷是細(xì)胞中高能磷酸狀態(tài)的一種數(shù)量上的衡量，能荷大小可以說明生物體中ATP-ADP-AMP 系統(tǒng)的能量狀態(tài)。 ATP+ 1/2 ADP能荷= ATP+ADP+AMP7. 兩用代謝途徑分解代謝和合成代謝可以共同利用的代謝環(huán)節(jié)稱為兩用代謝途徑。如檸檬酸循環(huán)是典型的兩用代謝途徑，氨基酸分解代謝的產(chǎn)物如草酰乙酸、-酮戊二酸是檸檬酸循環(huán)的中間物，這些中間物又可用來合成氨基酸。(二) 填空題1 生物氧化有3 種方式：_、_和_ 。2 生物氧化是氧化還原過程，在此過程中有_、_和_ 參與。3生物分子的E0值小，則電負(fù)性_，供出電子的傾向_。4生物體內(nèi)高能化合物有_、_、_、_、_、_等類。5細(xì)胞色素a 的輔基是_與蛋白質(zhì)以_鍵結(jié)合。6在無氧條件下，呼吸鏈各傳遞體都處于_狀態(tài)。7NADH 呼吸鏈中氧化磷酸化的偶聯(lián)部位是_、_、_。8舉出三種氧化磷酸化解偶聯(lián)劑_、_、_。9舉出4 種生物體內(nèi)的天然抗氧化劑_、_、_、_。10舉出兩例生物細(xì)胞中氧化脫羧反應(yīng)_、_。11生物氧化是_在細(xì)胞中_，同時產(chǎn)生_的過程。12高能磷酸化合物通常指水解時_的化合物，其中最重要的是_，被稱為能量代謝的_。13真核細(xì)胞生物氧化的主要場所是_，呼吸鏈和氧化磷酸化偶聯(lián)因子都定位于_。14以NADH 為輔酶的脫氫酶類主要是參與_作用，即參與從_到_電子傳遞作用；以NADPH 為輔酶的脫氫酶類主要是將分解代謝中間產(chǎn)物上的_轉(zhuǎn)移到_反應(yīng)中需電子的中間物上。15在呼吸鏈中，氫或電子從_的載體依次向_的載體傳遞。16線粒體氧化磷酸化的重組實驗證實了線粒體內(nèi)膜含有_，內(nèi)膜小瘤含有_。17魚藤酮，抗霉素A，CN、N3、CO的抑制作用分別是_，_，和_。18磷酸源是指_。脊椎動物的磷酸源是_，無脊椎動物的磷酸源是_。19H2S 使人中毒機理是_。20線粒體呼吸鏈中電位跨度最大的一步是在_。21典型的呼吸鏈包括_和_兩種，這是根據(jù)接受代謝物脫下的氫的_不同而區(qū)別的。22解釋氧化磷酸化作用機制被公認(rèn)的學(xué)說是_，它是英國生物化學(xué)家_于1961 年首先提出的。23化學(xué)滲透學(xué)說主要論點認(rèn)為：呼吸鏈組分定位于_內(nèi)膜上。其遞氫體有_作用，因而造成內(nèi)膜兩側(cè)的_差，同時被膜上_合成酶所利用、促使ADP + Pi ATP24細(xì)胞色素aa3 輔基中的鐵原子有_結(jié)合配位鍵，它還保留_游離配位鍵，所以能和_結(jié)合，還能和_、_結(jié)合而受到抑制。25體內(nèi)CO2 的生成不是碳與氧的直接結(jié)合，而是_。26線粒體內(nèi)膜外側(cè)的-磷酸甘油脫氫酶的輔酶是_；而線粒體內(nèi)膜內(nèi)側(cè)的-磷酸甘油脫氫酶的輔酶是_。27動物體內(nèi)高能磷酸化合物的生成方式有_和_兩種。（二）填空題1脫氫；脫電子；與氧結(jié)合2酶；輔酶；電子傳遞體3大；大4焦磷酸化合物；?；姿峄衔铮幌┐剂姿峄衔?；胍基磷酸化合物；硫酯化合物；甲硫鍵化合物5血紅素A；非共價6還原7復(fù)合物I；復(fù)合物；復(fù)合物82,4-二硝基苯酚；纈氨霉素；解偶聯(lián)蛋白9維生素E；維生素C；GSH；-胡蘿卜素10丙酮酸脫氫酶；異檸檬酸脫氫酶；11燃料分子； 分解氧化； 可供利用的化學(xué)能12釋放的自由能大于20.92kJmol；ATP；即時供體13線粒體；線粒體內(nèi)膜上14呼吸；底物；氧；電子；生物合成15低氧還電勢；高氧還電勢16電子傳遞鏈的酶系；F1-F0 復(fù)合體17NADH 和CoQ 之間 Cytb 和Cytc1 之間 Cytaa3 和O218貯存能量的物質(zhì)；磷酸肌酸；磷酸精氨酸19與氧化態(tài)的細(xì)胞色素aa3 結(jié)合，阻斷呼吸鏈20細(xì)胞色素aa3O221NADH；FADH2；初始受體22化學(xué)滲透學(xué)說；米切爾（Mitchell）23線粒體；質(zhì)子泵；氧化還原電位；ATP245個；1個；O2；CO；CN -。25有機酸脫羧生成的26NAD；FAD27氧化磷酸化；底物水平磷酸化(三) 選擇題1如果質(zhì)子不經(jīng)過F1F0-ATP 合成酶回到線粒體基質(zhì)，則會發(fā)生：A氧化 B還原 C解偶聯(lián)、 D緊密偶聯(lián)選C：當(dāng)質(zhì)子不通過F0 進(jìn)人線粒體基質(zhì)的時候，ATP 就不能被合成，但電子照樣進(jìn)行傳遞，這就意味著發(fā)生了解偶聯(lián)作用。2離體的完整線粒體中，在有可氧化的底物存時下，加入哪一種物質(zhì)可提高電子傳遞和氧氣攝入量：A更多的TCA 循環(huán)的酶 BADP CFADH2 DNADH選B：ADP 作為氧化磷酸化的底物，能夠刺激氧化磷酸化的速率，由于細(xì)胞內(nèi)氧化磷酸化與電子傳遞之間緊密的偶聯(lián)關(guān)系，所以ADP 也能刺激電子的傳遞和氧氣的消耗。3下列氧化還原系統(tǒng)中標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位最高的是：A延胡索酸琥珀酸 BCoQCoQH2C細(xì)胞色素a（Fe 2Fe 3） DNADNADH選C：電子傳遞的方向是從標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位低的成分到標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位高的成分，細(xì)胞色素a（Fe 2Fe 3）最接近呼吸鏈的末端，因此它的標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位最高。4下列化合物中，除了哪一種以外都含有高能磷酸鍵：ANAD BADP CNADPH DFMN選D： NAD + 和NADPH 的內(nèi)部都含有ADP 基團，因此與ADP 一樣都含有高能磷酸鍵，只有FMN 沒有高能磷酸鍵。5下列反應(yīng)中哪一步伴隨著底物水平的磷酸化反應(yīng)：A蘋果酸草酰乙酸 B甘油酸-1,3-二磷酸甘油酸-3-磷酸C檸檬酸-酮戊二酸 D琥珀酸延胡索酸6肌肉組織中肌肉收縮所需要的大部分能量以哪種形式貯存：AADP B磷酸烯醇式丙酮酸 CATP D磷酸肌酸選D： 當(dāng)ATP 的濃度較高時，ATP 的高能磷酸鍵被轉(zhuǎn)移到肌酸分子之中形成磷酸肌酸。7呼吸鏈中的電子傳遞體中，不是蛋白質(zhì)而是脂質(zhì)的組分為：ANAD+ BFMN CCoQ DFeS選C：CoQ 含有一條由n 個異戊二烯聚合而成的長鏈，具脂溶性，廣泛存在于生物系統(tǒng)，又稱泛醌。8下述哪種物質(zhì)專一性地抑制F0 因子：A魚藤酮 B抗霉素A C寡霉素 D纈氨霉素選C：寡霉素是氧化磷酸化抑制劑，它能與F0 的一個亞基專一結(jié)合而抑制F1，從而抑制了ATP 的合成。9下列不是催化底物水平磷酸化反應(yīng)的酶是：A磷酸甘油酸激酶 B磷酸果糖激酶C丙酮酸激酶 D琥珀酸硫激酶選B：磷酸甘油酸激酶、丙酮酸激酶與琥珀酸硫激酶分別是糖酵解中及三羧酸循環(huán)中的催化底物水平磷酸化的轉(zhuǎn)移酶，只有磷酸果糖激酶不是催化底物水平磷酸化反應(yīng)的酶。10在下列的氧化還原系統(tǒng)中，氧化還原電位最高的是：ANAD 十NADH B細(xì)胞色素a （Fe3）細(xì)胞色素a （Fe2）C延胡索酸/琥珀酸 D氧化型泛醌/還原型泛醌11二硝基苯酚能抑制下列細(xì)胞功能的是：A糖酵解 B肝糖異生 C氧化磷酸化 D檸檬酸循環(huán)選C：二硝基苯酚抑制線粒體內(nèi)的氧化磷酸化作用，使呼吸鏈傳遞電子釋放出的能量不能用于ADP 磷酸化生成ATP，所以二硝基苯酚是一種氧化磷酸化的解偶聯(lián)劑。12活細(xì)胞不能利用下列哪些能源來維持它們的代謝：AATP B糖 C脂肪 D周圍的熱能13下列關(guān)于化學(xué)滲透學(xué)說的敘述哪一條是不對的：A吸鏈各組分按特定的位置排列在線粒體內(nèi)膜上B各遞氫體和遞電子體都有質(zhì)子泵的作用CH返回膜內(nèi)時可以推動ATP 酶合成ATPD線粒體內(nèi)膜外側(cè)H不能自由返回膜內(nèi)選B：化學(xué)滲透學(xué)說指出在呼吸鏈中遞氫體與遞電子體是交替排列的，遞氫體有氫質(zhì)子泵的作用，而遞電子體卻沒有氫質(zhì)子泵的作用。14關(guān)于有氧條件下，NADH 從胞液進(jìn)入線粒體氧化的機制，下列描述中正確的是：ANADH 直接穿過線粒體膜而進(jìn)入B磷酸二羥丙酮被NADH 還原成3-磷酸甘油進(jìn)入線粒體，在內(nèi)膜上又被氧化成磷酸二羥丙酮同時生成NADHC草酰乙酸被還原成蘋果酸，進(jìn)入線粒體再被氧化成草酰乙酸，停留于線粒體內(nèi)D草酰乙酸被還原成蘋果酸進(jìn)人線粒體，然后再被氧化成草酰乙酸，再通過轉(zhuǎn)氨基作用生成天冬氨酸，最后轉(zhuǎn)移到線粒體外選D：線粒體內(nèi)膜不允許NADH 自由通過，胞液中NADH 所攜帶的氫通過兩種穿梭機制被其它物質(zhì)帶人線粒體內(nèi)。糖酵解中生成的磷酸二羥丙酮可被NADH 還原成3-磷酸甘油，然后通過線粒體內(nèi)膜進(jìn)人到線粒體內(nèi)，此時在以FAD 為輔酶的脫氫酶的催化下氧化，重新生成磷酸二羥丙酮穿過線粒體內(nèi)膜回到胞液中。這樣胞液中的NADH 變成了線粒體內(nèi)的FADH2。這種-磷酸甘油穿梭機制主要存在于肌肉、神經(jīng)組織。另一種穿梭機制是草酰乙酸-蘋果酸穿梭。這種機制在胞液及線粒體內(nèi)的脫氫酶輔酶都是NAD，所以胞液中的NADH 到達(dá)線粒體內(nèi)又生成NADH。就能量產(chǎn)生來看，草酰乙酸-蘋果酸穿梭優(yōu)于-磷酸甘油穿梭機制；但-磷酸甘油穿梭機制比草酰乙酸-蘋果酸穿梭速度要快很多。主要存在于動物的肝、腎及心臟的線粒體中。15安密妥、魚藤酮抑制呼吸鏈中電子：A ANADHCoQ BFADH2CoQ Cc1c DCoQb Eaa3O216呼吸鏈的各細(xì)胞色素在電子傳遞中的排列順序是：DAc1bcaa3O2； B cc1baa3O2；Cc1cbaa3O2； D bc1caa3O2；16關(guān)于氰化物、寡霉素和二硝基苯酚抑制線粒體氧化磷酸化作用機制的正確描述是：B A氰化物、寡霉素和二硝基苯酚與細(xì)胞色素氧化酶競爭氧 B氰化物抑制呼吸鏈，而寡霉素和二硝基苯酚抑制ATP合成 C氰化物、寡霉素和二硝基苯酚都能取消或降低H+的跨膜梯度，而影響ATP合成 D寡霉素抑制呼吸鏈，而氰化物和二硝基苯酚抑制ATP合成 E以上都不對17在下列電子傳遞過程中，能偶聯(lián)磷酸化的是 C ACytcCytaa3 B琥珀酸FAD CCytaa3 O2 DCoQCytb E以上都不是(四) 是非判斷題( )1NADH 在340nm 處有吸收峰，NAD+ 沒有，利用這個性質(zhì)可將NADH 與NAD+區(qū)分開來。( )2琥珀酸脫氫酶的輔基FAD 與酶蛋白之間以共價鍵結(jié)合。( )3生物氧化只有在氧氣的存在下才能進(jìn)行。( )4NADH 和NADPH 都可以直接進(jìn)入呼吸鏈。( )5如果線粒體內(nèi)ADP 濃度較低，則加入DNP 將減少電子傳遞的速率。( )6磷酸肌酸、磷酸精氨酸等是高能磷酸化合物的貯存形式，可隨時轉(zhuǎn)化為ATP供機體利用。 ( )7解偶聯(lián)劑可抑制呼吸鏈的電子傳遞。( )8電子通過呼吸鏈時，按照各組分氧還電勢依次從還原端向氧化端傳遞。( )9NADPH / NADP+的氧還勢稍低于NADH / NAD+，更容易經(jīng)呼吸鏈氧化。( )10寡霉素專一地抑制線粒體F1F0-ATPase 的F0，從而抑制ATP 的合成。( )11ADP 的磷酸化作用對電子傳遞起限速作用。( )12ATP 雖然含有大量的自由能，但它并不是能量的貯存形式。（）13. 生物氧化中ATP的產(chǎn)生均采取ADP磷酸化為ATP的形式。1對：2對：琥珀酸脫氫酶的輔基FAD 與酶蛋白的一個組氨酸以共價鍵相連。3錯：只要有合適的電子受體，生物氧化就能進(jìn)行。4錯：NADPH 通常作為生物合成的還原劑，并不能直接進(jìn)入呼吸鏈接受氧化。只是在特殊的酶的作用下，NADPH 上的H 被轉(zhuǎn)移到NAD+上，然后由NADH 進(jìn)人呼吸鏈。5錯：在正常的生理條件下，電子傳遞與氧化磷酸化是緊密偶聯(lián)的，低濃度的ADP 限制了氧化磷酸化，因而就限制了電子的傳遞速率。而DNP 是一種解偶聯(lián)劑，它可解除電子傳遞和氧化磷酸化的緊密偶聯(lián)關(guān)系，在它的存在下，氧化磷酸化和電子傳遞不再偶聯(lián)，因而ADP 的缺乏不再影響到電子的傳遞速率。6對：磷酸肌酸在供給肌肉能量上特別重要，它作為儲藏P 的分子以產(chǎn)生收縮所需要的ATP。當(dāng)肌肉的ATP 濃度高時，末端磷酸基團即轉(zhuǎn)移到肌酸上產(chǎn)生磷酸肌酸；當(dāng)ATP 的供應(yīng)因肌肉運動而消耗時，ADP 濃度增高，促進(jìn)磷酸基團向相反方向轉(zhuǎn)移，即生成ATP。7錯：解偶聯(lián)劑使電子傳遞與氧化磷酸化脫節(jié)，電子傳遞釋放的能量以熱形式散發(fā)，不能形成ATP。8對：組成呼吸鏈的各成員有一定排列順序和方向，即由低氧還電位到高氧還電位方向排列。9錯：NADPH / NADP+的氧還勢與NADH / NAD+相同，并且NADPH / NADP+通常不進(jìn)入呼吸鏈，而主要是提供生物合成的還原劑。10對：寡霉素是氧化磷化抑制劑，它與F1F0-ATPase 的F0 結(jié)合而抑制F1，使線粒體內(nèi)膜外側(cè)的質(zhì)子不能返回膜內(nèi)，造成ATP 不能合成。11對：在正常的生理條件下，電子傳遞與氧化磷酸化是緊密偶聯(lián)的，因而ADP 的氧化磷酸化作用就直接影響電子的傳遞速率。12對：在生物系統(tǒng)中ATP作為自由能的即時供體，而不是自由能的儲藏形式。13錯：除了氧化磷酸化還有底物水平磷酸化。問答題（解題要點）1常見的呼吸鏈電子傳遞抑制劑有哪些？它們的作用機制是什么?2何為能荷？能荷與代謝調(diào)節(jié)有什么關(guān)系？1答：常見的呼吸鏈電子傳遞抑制劑有：（1）魚藤酮（rotenone）、阿米妥（amytal）、以及殺粉蝶菌素（piericidin-A），它們的作用是阻斷電子由NADH 向輔酶Q 的傳遞。魚藤酮是從熱帶植物（Derriselliptiee）的根中提取出來的化合物，它能和NADH 脫氫酶牢固結(jié)合，因而能阻斷呼吸鏈的電子傳遞。魚藤酮對黃素蛋白不起作用，所以魚藤酮可以用來鑒別NADH 呼吸鏈與FADH2 呼吸鏈。阿米妥的作用與魚藤酮相似，但作用較弱，可用作麻醉藥。殺粉蝶菌素A 是輔酶Q 的結(jié)構(gòu)類似物，由此可以與輔酶Q 相競爭，從而抑制電子傳遞。（2）抗霉素A（antimycin A）是從鏈霉菌分離出的抗菌素，它抑制電子從細(xì)胞色素b 到細(xì)胞色素c1 的傳遞作用。（3）氰化物、一氧化碳、疊氮化合物及硫化氫可以阻斷電子細(xì)胞色素aa3 向氧的傳遞作用，這也就是氰化物及一氧化碳中毒的原因。2答：細(xì)胞內(nèi)存在著三種經(jīng)常參與能量代謝的腺苷酸，即ATP、ADP 和AMP。這三種腺苷酸的總量雖然很少，但與細(xì)胞的分解代謝和合成代謝緊密相聯(lián)。三種腺苷酸在細(xì)胞中各自的含量也隨時在變動。生物體中ATP-ADP-AMP 系統(tǒng)的能量狀態(tài)（即細(xì)胞中高能磷酸狀態(tài)）在數(shù)量上衡量稱能荷。能荷的大小與細(xì)胞中ATP、ADP 和AMP 的相對含量有關(guān)。當(dāng)細(xì)胞中全部腺苷酸均以ATP 形式存在時，則能荷最大，為100，即能荷為滿載。當(dāng)全部以AMP形式存在時，則能荷最小，為零。當(dāng)全部以ADP 形式存在時，能荷居中，為50。若三者并存時，能荷則隨三者含量的比例不同而表現(xiàn)不同的百分值。通常情況下細(xì)胞處于80的能荷狀態(tài)。能荷與代謝有什么關(guān)系呢？研究證明，細(xì)胞中能荷高時，抑制了ATP 的生成，但促進(jìn)了ATP 的利用，也就是說，高能荷可促進(jìn)分解代謝，并抑制合成代謝。相反，低能荷則促進(jìn)合成代謝，抑制分解代謝。能荷調(diào)節(jié)是通過ATP、ADP 和AMP 分子對某些酶分子進(jìn)行變構(gòu)調(diào)節(jié)進(jìn)行的。例如糖酵解中，磷酸果糖激酶是一個關(guān)鍵酶，它受ATP 的強烈抑制，但受ADP和AMP 促進(jìn)。丙酮酸激酶也是如此。在三羧酸環(huán)中，丙酮酸脫氫酶、檸檬酸合酶、異檸檬酸脫氫酶和-酮戊二酸脫氫酶等，都受ATP 的抑制和ADP 的促進(jìn)。呼吸鏈的氧化磷酸化速度同樣受ATP 抑制和ADP 促進(jìn)。 糖代謝（第22、23、25、26章）一、名詞解釋1糖異生：非糖物質(zhì)（如丙酮酸 乳酸 甘油 生糖氨基酸等）轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟堑倪^程。2乳酸循環(huán)：乳酸循環(huán)是指肌肉缺氧時產(chǎn)生大量乳酸，大部分經(jīng)血液運到肝臟，通過糖異生作用生成肝糖原或葡萄糖補充血糖，血糖可再被肌肉利用，這樣形成的循環(huán)稱乳酸循環(huán)。3發(fā)酵：厭氧有機體把糖酵解生成NADH 中的氫交給丙酮酸脫羧后的產(chǎn)物乙醛，使之生成乙醇的過程稱之為酒精發(fā)酵。如果將氫交給病酮酸丙生成乳酸則叫乳酸發(fā)酵。4糖酵解途徑：糖酵解途徑指糖原或葡萄糖分子分解至生成丙酮酸的階段，是體內(nèi)糖代謝最主要途徑。5糖的有氧氧化：糖的有氧氧化指葡萄糖或糖原在有氧條件下氧化成水和二氧化碳的過程。是糖氧化的主要方式。6糖原分解：糖原分解指肝糖原分解為葡萄糖的過程。7磷酸戊糖途徑：磷酸戊糖途徑指機體某些組織（如肝、脂肪組織等）以6-磷酸葡萄糖為起始物在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下形成6-磷酸葡萄糖酸進(jìn)而代謝生成磷酸戊糖為中間代謝物的過程，又稱為磷酸已糖旁路。二、填空題11 分子葡萄糖轉(zhuǎn)化為2 分子乳酸凈生成_分子ATP2糖酵解過程中有3 個不可逆的酶促反應(yīng)，這些酶是_、 _ 和_。3糖酵解抑制劑碘乙酸主要作用于_酶。4調(diào)節(jié)三羧酸循環(huán)最主要的酶是_、_ _、_。52 分子乳酸異生為葡萄糖要消耗_ATP。6丙酮酸還原為乳酸，反應(yīng)中的NADH 來自于_的氧化。7延胡索酸在_酶作用下，可生成蘋果酸，該酶屬于EC 分類中的_酶類。8 磷酸戊糖途徑可分為_階段，分別稱為_和_，其中兩種脫氫酶是_和_，它們的輔酶是_。9糖酵解在細(xì)胞的_中進(jìn)行，該途徑是將_轉(zhuǎn)變?yōu)開，同時生成_和_的一系列酶促反應(yīng)。10TCA 循環(huán)中有兩次脫羧反應(yīng)，分別是由_ _和_催化。11乳酸脫氫酶在體內(nèi)有5 種同工酶，其中肌肉中的乳酸脫氫酶對_ 親和力特別高，主要催化_反應(yīng)。12 在糖酵解中提供高能磷酸基團， 使ADP 磷酸化成ATP 的高能化合物是_ 和_13糖異生的主要原料為_、_和_。14 參與 -酮戊二酸氧化脫羧反應(yīng)的輔酶為_， _ ，_，_和_。15在磷酸戊糖途徑中催化由酮糖向醛糖轉(zhuǎn)移二碳單位的酶為_，其輔酶為_；催化由酮糖向醛糖轉(zhuǎn)移三碳單位的酶為_。16 酮戊二酸脫氫酶系包括3 種酶， 它們是_ ， _ ，_。17催化丙酮酸生成磷酸烯醇式丙酮酸的酶是_，它需要_和_作為輔因子。18合成糖原的前體分子是_，糖原分解的產(chǎn)物是_。三、選擇題1由己糖激酶催化的反應(yīng)的逆反應(yīng)所需要的酶是：A果糖二磷酸酶 B葡萄糖-6-磷酸酶C磷酸果糖激酶 D磷酸化酶2正常情況下，肝獲得能量的主要途徑：A葡萄糖進(jìn)行糖酵解氧化 B脂肪酸氧化C葡萄糖的有氧氧化 D磷酸戊糖途徑 E以上都是。3糖的有氧氧化的最終產(chǎn)物是：ACO2+H2O+ATP B乳酸C丙酮酸 D乙酰CoA4需要引物分子參與生物合成反應(yīng)的有：A酮體生成 B脂肪合成C糖異生合成葡萄糖 D糖原合成 E以上都是5不能經(jīng)糖異生合成葡萄糖的物質(zhì)是：A-磷酸甘油 B丙酮酸C乳酸 D乙酰CoA E生糖氨基酸6丙酮酸激酶是何途徑的關(guān)鍵酶：A磷酸戊糖途徑 B糖異生C糖的有氧氧化 D糖原合成與分解 E糖酵解7丙酮酸羧化酶是那一個途徑的關(guān)鍵酶：A糖異生 B磷酸戊糖途徑C膽固醇合成 D血紅素合成 E脂肪酸合成8動物饑餓后攝食，其肝細(xì)胞主要糖代謝途徑：A糖異生 B糖有氧氧化C糖酵解 D糖原分解 E磷酸戊糖途徑9下列各中間產(chǎn)物中，那一個是磷酸戊糖途徑所特有的？A丙酮酸 B3-磷酸甘油醛C6-磷酸果糖 D1，3-二磷酸甘油酸 E6-磷酸葡萄糖酸10三碳糖、六碳糖與七碳糖之間相互轉(zhuǎn)變的糖代謝途徑是：A糖異生 B糖酵解C三羧酸循環(huán) D磷酸戊糖途徑 E糖的有氧氧化11關(guān)于三羧酸循環(huán)那個是錯誤的A是糖、脂肪及蛋白質(zhì)分解的最終途徑B受ATP/ADP 比值的調(diào)節(jié)CNADH 可抑制檸檬酸合酶DNADH 氧經(jīng)需要線粒體穿梭系統(tǒng)。12三羧酸循環(huán)中哪一個化合物前后各放出一個分子CO2：A檸檬酸 B乙酰CoA C琥珀酸 D-酮戊二酸13磷酸果糖激酶所催化的反應(yīng)產(chǎn)物是：AF-1-P BF-6-P CF-D-P DG-6-P14醛縮酶的產(chǎn)物是：AG-6-P BF-6-P CF-D-P D1，3-二磷酸甘油酸15TCA 循環(huán)中發(fā)生底物水平磷酸化的化合物是？A-酮戊二酸 B琥珀酰C琥珀酸CoA D蘋果酸16丙酮酸脫氫酶系催化的反應(yīng)不涉及下述哪種物質(zhì)？A乙酰CoA B硫辛酸CTPP D生物素 ENAD+17三羧酸循環(huán)的限速酶是：A丙酮酸脫氫酶 B順烏頭酸酶C琥珀酸脫氫酶 D延胡索酸酶 E異檸檬酸脫氫酶18生物素是哪個酶的輔酶：A丙酮酸脫氫酶 B丙酮酸羧化酶C烯醇化酶 D醛縮酶 E磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶19三羧酸循環(huán)中催化琥珀酸形成延胡索酸的酶是琥珀酸脫氫酶，此酶的輔因子是ANAD+ BCoASHCFAD DTPP ENADP+20下面哪種酶在糖酵解和糖異生中都起作用：A丙酮酸激酶 B丙酮酸羧化酶C3-磷酸甘油醛脫氫酶 D己糖激酶 E果糖1，6-二磷酸酯酶21糖酵解時哪一對代謝物提供P 使ADP 生成ATP：A3-磷酸甘油醛及磷酸烯醇式丙酮酸B1，3-二磷酸甘油酸及磷酸烯醇式丙酮酸C1-磷酸葡萄糖及1，6-二磷酸果糖D6-磷酸葡萄糖及2-磷酸甘油酸22在有氧條件下，線粒體內(nèi)下述反應(yīng)中能產(chǎn)生FADH2 步驟是：A琥珀酸延胡索酸 B異檸檬酸-酮戊二酸（C）-戊二酸琥珀酰CoA （D）蘋果酸草酰乙酸23丙二酸能阻斷糖的有氧氧化，因為它：（A）抑制檸檬酸合成酶 （B）抑制琥珀酸脫氫酶（C）阻斷電子傳遞 （D）抑制丙酮酸脫氫酶24由葡萄糖合成糖原時，每增加一個葡萄糖單位消耗高能磷酸鍵數(shù)為：（A）1 （B）2 （C）3 （D）4 （E）525糖代謝中間產(chǎn)物中含有高能磷酸鍵的是：A6-磷酸葡萄糖 B6-磷酸果糖 C1，6-二磷酸果糖D3-磷酸甘油醛 E13-二磷酸甘油酸26丙酮酸氧化脫羧生成乙酰輔酶A，與下列維生素?zé)o關(guān)的是：AB1 BB2 CB6 DPP E泛酸27在糖原合成中作為葡萄糖載體的是：AADP BGDP CCDP DTDP EUDP28下列哪個激素可使血糖濃度下降？A腎上腺素 B胰高血糖素 C生長素 D糖皮質(zhì)激素 E胰島素29下列哪一個酶與丙酮酸生成糖無關(guān)？A果糖二磷酸酶 B丙酮酸激酶 C丙酮酸羧化酶D醛縮酶 E磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶30磷酸果糖激酶的最強變構(gòu)激活劑是：AAMP BADP CATP D2，6-二磷酸果糖 E1，6-二磷酸果糖31三羧酸循環(huán)和有關(guān)的呼吸鏈反應(yīng)中能產(chǎn)生ATP最多的步驟是：A檸檬酸異檸檬酸 B異檸檬酸-酮戊二酸C-酮戊二酸琥珀酸 D琥珀酸蘋果酸 E蘋果酸草酰乙酸32丙酮酸羧化酶的活性可被下列哪種物質(zhì)激活？A脂肪酰輔酶A B磷酸二羥丙酮 C異檸檬酸 D乙酰輔酶A E檸檬酸33.位于糖酵解、糖異生、磷酸戊糖途徑、糖原合成和糖原分解各條代謝途徑交匯點上的化合物是：A1-磷酸葡萄糖 B6-磷酸葡萄糖 C1，6-二磷酸果糖D3-磷酸甘油酸 E6-磷酸果糖四、是非判斷題（ ）1ATP 是果糖磷酸激酶的變構(gòu)抑制劑。（ ）2沿糖酵解途徑簡單逆行，可從丙酮酸等小分子前體物質(zhì)合成葡萄糖。（ ）3所有來自磷酸戊糖途徑的還原能都是在該循環(huán)的前三步反應(yīng)中產(chǎn)生的。（ ）4發(fā)酵可以在活細(xì)胞外進(jìn)行。（ ）5催化ATP 分子中的磷?；D(zhuǎn)移到受體上的酶稱為激酶。（ ）6動物體內(nèi)的乙酰CoA 不能作為糖異生的物質(zhì)。（ ）7檸檬酸循環(huán)是分解與合成的兩用途徑。（ ）8在糖類物質(zhì)代謝中最重要的糖核苷酸是CDPG。（ ）9聯(lián)系糖原異生作用與三羧酸循環(huán)的酶是丙酮酸羧化酶。對：丙酮酸羧化酶是變構(gòu)酶，受乙酰CoA 的變構(gòu)調(diào)節(jié)，在缺乏乙酰CoA 時沒有活性，細(xì)胞中的ATP/ADP 的比值升高促進(jìn)羧化作用。草酰乙酸既是糖異生的中間產(chǎn)物，又是三羧酸循環(huán)的中間產(chǎn)物。高含量的乙酰CoA 使草酰乙酸大量生成。若ATP 含量高則三羧酸循環(huán)速度降低，糖異生作用加強。（ ）10糖異生作用的關(guān)鍵反應(yīng)是草酰乙酸形成磷酸烯醇式丙酮酸的反應(yīng)。（ ）11糖酵解過程在有氧無氧條件下都能進(jìn)行。（ ）12在缺氧條件下，丙酮酸還原為乳酸的意義是使NAD+再生。（ ）13TCA 中底物水平磷酸化直接生成的是ATP。（ ）14三羧酸循環(huán)的中間產(chǎn)物可以形成谷氨酸。問答題：1、把少量的琥珀酸加入到肌肉勻漿組織中，會強烈引發(fā)丙酮酸氧化成CO2。如果組織與丙二酸保溫，即使加入琥珀酸，丙酮酸的氧化也受阻。為什么？解答：（1）肌肉勻漿制劑中含有丙酮酸脫氫酶復(fù)合物和檸檬酸循環(huán)所必需的酶及輔助因子。（2）琥珀酸在檸檬酸循環(huán)中可轉(zhuǎn)變成延胡索酸，延胡索酸轉(zhuǎn)變?yōu)樘O果酸，蘋果酸再轉(zhuǎn)變?yōu)椴蒗Ｒ宜?。?）當(dāng)丙酮酸在丙酮酸脫氫酶復(fù)合物催化下轉(zhuǎn)變成乙酰CoA后，便與草酰乙酸縮合成檸檬酸，后者經(jīng)檸檬酸循環(huán)被氧化成CO2。所以加入琥珀酸能強烈的促進(jìn)丙酮酸氧化成CO2。（4）丙二酸是琥珀酸的結(jié)構(gòu)類似物，它作為琥珀酸脫氫酶的