高中生物 2.1《微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)》課件 新人教版選修1.ppt

課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 霉菌 細(xì)菌 酵母菌 放線菌 上圖都是一些常見的微生物 微生物是結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單 形體微小的單細(xì)胞 多細(xì)胞或沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的低等生物 與人類關(guān)系密切 人工的培養(yǎng)和分離 使得我們更進(jìn)一步認(rèn)識(shí)微生物 今天我們就來學(xué)習(xí)如何培養(yǎng)和分離大腸桿菌 1 特點(diǎn) 結(jié)構(gòu)都相當(dāng)簡(jiǎn)單 個(gè)體多數(shù)十分微小 通常要用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡才能看到 有的甚至沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu) 且體內(nèi)一般不含有葉綠素 不能進(jìn)行光合作用 2 微生物包括五類 病毒細(xì)菌放線菌真菌原生動(dòng)物 培養(yǎng)基 培養(yǎng)液 是由人工方法配制而成的 專供微生物生長(zhǎng)繁殖使用的混合營(yíng)養(yǎng)液 固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基 1 培養(yǎng)基的類型 成分區(qū)別 瓊脂 2 不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方 細(xì)菌喜葷 霉菌喜素 大腸桿菌配方酵母提取物 0 25g蛋白胨 0 5gnacl 0 5g瓊脂 1g水 50ml 3 培養(yǎng)基內(nèi)所含的基本物質(zhì) 一般營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)水 碳源 氮源 無機(jī)鹽 其他物質(zhì)ph 特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 例如 生長(zhǎng)因子 即細(xì)菌生長(zhǎng)必需 而自身不能合成的化合物 以及氧氣 二氧化碳 滲透壓等的要求 4 培養(yǎng)基的用途 液體培養(yǎng)基 增菌 工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基 純化 分離 鑒定 活菌計(jì)數(shù) 保藏菌種半固體培養(yǎng)基 動(dòng)力檢測(cè) 1 無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中 所有防止雜菌污染的方法 無菌操作是培養(yǎng)微生物成功的關(guān)鍵 1 消毒定義 2 消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別 2 滅菌的定義 是指殺滅病原微生物的方法 是指殺滅或清除環(huán)境中一切微生物 包括芽胞 孢子 的方法 a 灼燒滅菌 3 常用滅菌的方法 b 干熱滅菌 160 170 下加熱1 2h c 高壓蒸氣滅菌 100kpa 121 下維持15 30min 取2個(gè)250ml的三角瓶中分別裝入50mllb液體培養(yǎng)基和50mllb固體培養(yǎng)基 剛配好 尚未凝固 加上封口膜 牛皮紙包裝后高壓鍋滅菌15min lb液體培養(yǎng)基 細(xì)菌的擴(kuò)大培養(yǎng)lb固體培養(yǎng)基 細(xì)菌的劃線分離 滅菌后的培養(yǎng)基在無菌操作臺(tái)上倒入4個(gè)培養(yǎng)皿中 倒后立即置于水平位置上 輕輕晃動(dòng) 使培養(yǎng)基鋪滿平皿底部 待凝 使之形成平面 1 培養(yǎng)基滅菌后 需要冷卻到50 左右時(shí) 才能用來倒平板 你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度 答 可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶 感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí) 就可以進(jìn)行倒平板了 2 在倒平板的過程中 如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位 這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎 為什么 答 空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生 因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物 將斜面上培養(yǎng)的大腸桿菌菌種接種到滅菌后的液體培養(yǎng)基中 使其在37 搖床培養(yǎng)12小時(shí) 注意事項(xiàng) 1 火焰旁從斜面上用接種環(huán)取菌 2 取菌前接種環(huán)要用酒精燈灼燒滅菌 冷卻后方能取菌 3 取菌后封口膜和棉塞復(fù)原 1 平板劃線法 1 灼燒接種環(huán) 2 接種環(huán)冷卻后 蘸取帶菌培養(yǎng)物 3 在近火焰處 讓帶菌接種環(huán)在固體培養(yǎng)基上劃線 注意事項(xiàng) 1 接種環(huán)只蘸一次菌液 但要在培養(yǎng)基不同位置連續(xù)劃線多次 2 劃線首尾不能相接 3 劃線后 培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)12 24h 2 3 從上次的末端開始 交叉2 3條線 4 最后的劃線不能與第一區(qū)相連 分離后 一個(gè)菌體便會(huì)形成一個(gè)菌落 這是消除污染雜菌的通用方法 也是用于篩選菌株的最簡(jiǎn)便方法之一 2 稀釋涂布平板法 稀釋操作 注意 移液管需要經(jīng)過滅菌 操作時(shí) 試管口和移液管離火焰1 2cm處 1 臨時(shí)保藏 接種到固體斜面培養(yǎng)基 菌落長(zhǎng)成后置于4 冰箱保存 2 長(zhǎng)期保存 甘油冷凍管藏法 一 培養(yǎng)基的制作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1 2d后無菌落生長(zhǎng) 說明培養(yǎng)基的制備是成功的 否則需要重新制備 實(shí)驗(yàn)操作成果評(píng)價(jià) 3 二 接種操作是否符合無菌要求如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色 形狀 大小基本一致 并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn) 則說明接種操作是符合要求的 如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落 則說明接種過程中 無菌操作還未達(dá)到要求 需要分析原因 再次練習(xí) 三 是否進(jìn)行了及時(shí)細(xì)致的觀察與記錄培養(yǎng)12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同 及時(shí)觀察記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn) 并能觀察到其他一些細(xì)微的變化 這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣 1 關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中 正確的是 a 是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源b 凡碳源都提供能量c 除水以外的無機(jī)物只提供無機(jī)鹽d 無機(jī)氮源也能提供能量 d 解析 a b選項(xiàng)的表達(dá)是不完整的 有的碳源只能是碳源 有的碳源可同時(shí)是氮源 有的碳源同時(shí)是能源 有的碳源同時(shí)是氮源 也是能源 對(duì)于c選項(xiàng) 除水以外的無機(jī)物種類繁多 功能也多樣 對(duì)于d選項(xiàng) 無機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的 如nh3可為硝化細(xì)菌提供能量和氮源 2 下面對(duì)發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是 a 防止雜菌污染b 接種前菌種要進(jìn)行滅菌c 培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌d 滅菌必須在接種前 b 退出 解析 發(fā)酵所用的菌種大多是單一的純種 整個(gè)發(fā)酵過程不能混入其他微生物 雜菌 a正確 b錯(cuò)誤