生化檢測中的影響因素.ppt

生化檢測中的影響因素 一 檢測前因素二 檢測中因素三 檢測后因素 檢測前的影響因素一 標(biāo)本的因素1 生理因素對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響影響檢驗(yàn)結(jié)果的生理因素可分為可控因素和不可控因素兩種類型 主要有年齡 性別 運(yùn)動(dòng) 情緒 體位改變 生活方式 妊娠 季節(jié)變化 海拔高度 生理性波動(dòng)等 2 飲食對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響 3 藥物對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響藥物引起生化檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)誤差的原因可分為物理干擾和化學(xué)干擾 物理干擾是由于藥物進(jìn)入體內(nèi)后使血清的物理性質(zhì)如顏色等發(fā)生變化進(jìn)而影響某些項(xiàng)目的檢測 而化學(xué)干擾是由于藥物本身的化學(xué)性質(zhì)如藥物的強(qiáng)還原性等對體內(nèi)某些物質(zhì)測定的影響 此外 許多藥物的副作用使肝 腎功能發(fā)生改變而引起檢驗(yàn)結(jié)果異常 值得注意的是長期靜脈點(diǎn)滴的病人留取標(biāo)本時(shí)可使標(biāo)本稀釋 造成某些項(xiàng)目結(jié)果偏低 又因靜點(diǎn)時(shí)高濃度的藥物進(jìn)入標(biāo)本中 使許多檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)生巨大變化 因此護(hù)理人員應(yīng)避免在靜點(diǎn)時(shí)和用藥4h以內(nèi)采取檢驗(yàn)標(biāo)本 必要時(shí)停藥后再查 以防藥物的干擾作用 4 標(biāo)本采集對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響5 標(biāo)本處理 儲(chǔ)存對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響標(biāo)本的離心速度 時(shí)間 離心前放置的時(shí)間 以及標(biāo)本貯存的溫度 時(shí)間等都會(huì)對生化檢測結(jié)果產(chǎn)生影響 6 標(biāo)本狀態(tài)對生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響6 1溶血溶血是臨床生化檢驗(yàn)中最常見的一種影響因素 它能引起很多指標(biāo)明顯異常 溶血的干擾機(jī)理有以下三種 一是血細(xì)胞中高濃度組分逸出 使測定結(jié)果增高 血細(xì)胞內(nèi)濃度比血漿中濃度明顯高的物質(zhì)有LDH ACP AST K 只要輕微溶血就可以對這些項(xiàng)目產(chǎn)生很大影響 另外若某些物質(zhì)的血細(xì)胞內(nèi)濃度低于血清濃度時(shí) 則溶血相當(dāng)于血清被稀釋 因而使這些血清成分特別是發(fā)生重度溶血時(shí)的檢測值降低 這類項(xiàng)目主要有Ca2 Na Cl UA等 二是血細(xì)胞成分進(jìn)入血清中后因化學(xué)反應(yīng)而引起其他物質(zhì)的濃度改變 如溶血后紅細(xì)胞的磷脂進(jìn)入血清被血清中的磷酸酯酶水解 其結(jié)果造成血清無機(jī)磷濃度顯著增高 三是血紅蛋白本身顏色對檢測的光學(xué)干擾 血紅蛋白的顏色在431nm和555nm波長附近能使比色 比濁法的吸光度增高 如溶血引起重氮單試劑法膽紅素測定結(jié)果明顯升高 實(shí)際上 以上三類干擾在溶血標(biāo)本中同時(shí)存在并可相互作用 因而使受影響的檢項(xiàng)更為復(fù)雜 這在超微量 高精度和多指標(biāo)的檢測分析中顯然不可忽視 因此 嚴(yán)控標(biāo)本溶血是保證檢驗(yàn)質(zhì)量的重要方面 2脂血對生化檢測的干擾 血液脂濁可散射光線 所以對吸光度一般產(chǎn)生正向干擾 導(dǎo)致某些項(xiàng)目如ALB UA 總蛋白 TP 23 等測定結(jié)果 而在pH10以上的環(huán)境中 乳糜中的TG會(huì)皂化可使血清逐漸變清 使許多比色法測定如Ca2 Cr ALP TP等結(jié)果產(chǎn)生負(fù)誤差 6 3黃疸膽紅素對反應(yīng)結(jié)果產(chǎn)生黃色化合物的比色分析影響很大 一般可以用樣本空白或兩點(diǎn)比色法 連續(xù)監(jiān)測法來消除膽紅素對黃色結(jié)果的影響 但由于膽紅素不穩(wěn)定 隨著膽紅素被氧化為膽綠素 膽褐素而變色 此時(shí)如果使用兩點(diǎn)法 連續(xù)監(jiān)測法同樣也不能排除膽紅素對結(jié)果的干擾 此外膽紅素作為一種還原劑對氧化反應(yīng)有干擾 如氧化酶法測定GLU TG UA 膽固醇等 因?yàn)槟懠t素可以與上述過程中H2O2分解產(chǎn)生的新生態(tài)氧發(fā)生反應(yīng) 從而使新生態(tài)氧與氧化酶法反應(yīng)中的色源物質(zhì)結(jié)合減少 導(dǎo)致結(jié)果偏低 此時(shí)也可用雙波長法或設(shè)計(jì)樣本空白消除干擾 亦或當(dāng)外觀檢查發(fā)現(xiàn)是黃疸血清時(shí)可先除蛋白 然后加膽紅素氧化酶預(yù)先將膽紅素氧化成較穩(wěn)定的氧化產(chǎn)物膽褐素 可大大減低甚至消除膽紅素的干擾 返回 二 環(huán)境的因素包括生化分析儀的用水 電源以及環(huán)境的溫濕度等方面對生化檢測的結(jié)果都會(huì)產(chǎn)生影響 分析中因素確立測定系統(tǒng)的概念測定系統(tǒng)包括測定原理 試劑 儀器 校準(zhǔn)品四要素 對于一個(gè)臨床檢測項(xiàng)目 如果所用方法的測定原理 試劑 儀器 校準(zhǔn)品中任何一個(gè)不同 都可能得到不同的測定結(jié)果 如果我們想要得到準(zhǔn)確可靠的測定結(jié)果 而該結(jié)果又具有與國際 國內(nèi)其他實(shí)驗(yàn)室的可比性 應(yīng)該自己建立一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)測定系統(tǒng) 生化分析儀的校準(zhǔn)對測定標(biāo)本的儀器一定要求進(jìn)行校準(zhǔn) 校準(zhǔn)時(shí)要選擇合適的 配套的 標(biāo)準(zhǔn)品 校準(zhǔn)品 如有可能 校準(zhǔn)品應(yīng)能溯源到參考方法或 和參考物質(zhì) 對不同的分析項(xiàng)目要根據(jù)其特性確立各自的校準(zhǔn)頻率 儀器的精密度檢查儀器的維護(hù)保養(yǎng) 用已糖激酶 HK 法則定葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液時(shí) 葡萄糖的消耗與NADH的生成是等摩爾關(guān)系 校準(zhǔn)生化分析儀340nm處NAD P H的摩爾吸光系數(shù) 可用ALP測定試劑的緩沖液作為測定試劑 對硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)液作為血清標(biāo)本 實(shí)際測定405nm的吸光度值 根據(jù)對硝基苯酚的濃度可計(jì)算 值 檢測方法的選擇不同的檢測方法對檢測結(jié)果的影響是不言而預(yù)的 我們應(yīng)優(yōu)先選擇國際 國內(nèi) 行業(yè)內(nèi)權(quán)威機(jī)構(gòu)推薦的方法 沒有推薦常規(guī)方法的 應(yīng)該選擇公認(rèn)的測定方法 試劑的影響生化試劑盒有許多生產(chǎn)廠家 不同廠家產(chǎn)品的質(zhì)量 技術(shù)含量等常有區(qū)別 有時(shí)即使同一廠家不同批號(hào)的同種試劑因原料來源 純度不同以及生產(chǎn)條件變動(dòng) 會(huì)產(chǎn)生批間變異 同一批號(hào)的同種試劑盒在儲(chǔ)存 運(yùn)輸時(shí)的情況有所不同 性能也可能發(fā)生變化 同項(xiàng)目試劑盒之間作比較 如果穩(wěn)定性好 線性范圍寬 正向型試劑空白吸光度低 反向型試劑空白吸光度高 試劑空白速率低 瓶間差小者可視為優(yōu)質(zhì)試劑 校準(zhǔn)品 Calibrationmaterials 含有已知量的欲測物 用以校準(zhǔn)該測定方法的數(shù)值 它與該方法及試劑 儀器是相關(guān)聯(lián)的 校準(zhǔn)品的作用是為了減少或消除儀器 試劑等造成的系統(tǒng)誤差 在全自動(dòng)生化分析儀上使用配套的試劑和標(biāo)準(zhǔn)品 各儀器廠家均有自己的標(biāo)準(zhǔn)測定系統(tǒng) 對于校準(zhǔn)品不能亂用 關(guān)于酶活性測定校準(zhǔn)問題常用K值有以下幾種 a 理論K值 根據(jù)理論摩爾消光系數(shù) 來計(jì)算 如NADH為6 22 103b 實(shí)測K值 由于儀器波長的精密及半寬度不同 而應(yīng)根據(jù)實(shí)測 值來設(shè)定K值c 廠家給的K值 廠家生產(chǎn)試劑盒說明書上提供的K值 有的廠家提供6 3 103 d 校準(zhǔn)K值 通過校準(zhǔn)物直接校準(zhǔn)得到的K值 從上述K值中不難發(fā)現(xiàn)實(shí)測K值大于理論K值 這說明生化分析儀的測光系統(tǒng)還存在著一定誤差 如波長 半寬度及光徑等偏差 使儀器達(dá)不到理論上的最佳狀態(tài) 校準(zhǔn)K值與實(shí)測K值之間也存在一定的差距 即使指示物和儀器相同 其差異可能由試劑及校準(zhǔn)品造成的 校準(zhǔn)K值應(yīng)有其溯源性 試劑間的相互干擾全自動(dòng)生化分析儀的吸樣針 試劑針 攪拌捧及比色杯是常見交叉污染的原因 稱互為干擾的項(xiàng)目為交叉污染對 測定試劑中含有下一測試所要測定的底物 直接干擾下一檢測的測定結(jié)果 試劑中含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)所要測定的底物有作用 因而干擾下一反應(yīng)的測定結(jié)果 該試劑中所引導(dǎo)的反應(yīng)對下一個(gè)項(xiàng)目的反應(yīng)進(jìn)程帶來間接的干擾 下一項(xiàng)目所測定的是前后兩個(gè)項(xiàng)目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果 項(xiàng)目參數(shù)的設(shè)置對結(jié)果的影響項(xiàng)目參數(shù)主要包括 標(biāo)本用量 試劑的配比及用量 反應(yīng)的溫度 延遲時(shí)間 反應(yīng)時(shí)間 監(jiān)測的主波長 次波長 反應(yīng)類型 監(jiān)測的時(shí)間 空白吸光度 底物耗盡及前帶現(xiàn)象的監(jiān)測 額外的清洗 必須要針對不同類型的反應(yīng) 不同試劑的性質(zhì)設(shè)置合理的檢測參數(shù) 分析后階段目前大多數(shù)檢驗(yàn)科室都實(shí)行了計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)管理技術(shù) 病人資料 檢驗(yàn)數(shù)據(jù)網(wǎng)上共享 各實(shí)驗(yàn)室當(dāng)天的測試結(jié)果通過聯(lián)機(jī)即時(shí)傳達(dá)電腦網(wǎng)絡(luò) 這種模式提高了工作效率 也避免了以往由人為抄錄結(jié)果時(shí)發(fā)生的誤差 由于標(biāo)本量大 影響因素多而復(fù)雜 加上審核人員的經(jīng)驗(yàn)等原因的影響 生化檢驗(yàn)的幾種異常結(jié)果的分析1 體檢標(biāo)本中的Glu結(jié)果普遍偏低 2 體檢標(biāo)本中部分TG T CH結(jié)果偏低 3 CK MB大于CK 4 Mg TBA K等項(xiàng)目的結(jié)果在與其它一些項(xiàng)目在一起檢測的結(jié)果與單獨(dú)檢測的結(jié)果差距較大 5 黃疸標(biāo)本中的UA Cr Glu等結(jié)果偏低 6 溶血標(biāo)本中的K LDH AST DBIL CRP等結(jié)果偏高 7 ALT檢測中原倍結(jié)果遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于標(biāo)本稀釋的檢測結(jié)果 血清ALT測定 血清中的內(nèi)源性丙酮酸及其它酮酸也可與試劑中的指示酶 乳酸脫氫酶 起反應(yīng) 使結(jié)果偏高 若先加入缺乏 酮戊二酸的第一試劑 使其它酮酸與指示酶反應(yīng)之后再加入含有 酮戊二酸的第二試劑 啟動(dòng)真正的ALT酶促反應(yīng)生成丙酮酸 而丙酮酸與乳酸脫氫酶的反應(yīng)消耗的NAD 能真正反映ALT的活性 從而消除以上副反應(yīng)的影響 8 部分項(xiàng)目原倍的檢測結(jié)果正常 稀釋后的結(jié)果顯著升高 9 部分免疫比濁法項(xiàng)目的檢測結(jié)果小于 0 應(yīng)對措施1 完善制度 認(rèn)真實(shí)施完善的規(guī)章制度 規(guī)范的文件體系是全面質(zhì)量管理體系必須具備的要素 根據(jù)實(shí)際情況 制定各級(jí)管理制度 如 標(biāo)本查對制度 儀器校準(zhǔn) 保養(yǎng)管理制度 試劑管理制度 各種實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)操作 SOP文件 新項(xiàng)目新方法的評(píng)價(jià) 質(zhì)量控制操作程序 實(shí)驗(yàn)操作考核制度 差錯(cuò)登記 安全管理制度等等 各種制度緊密結(jié)合 始終貫穿檢驗(yàn)分析前 分析中 分析后的全過程 2 加強(qiáng)與客戶的溝通檢驗(yàn)科與臨床配合的好壞直接影響診療的質(zhì)量 兩者結(jié)合是提高臨床診治水平的重要環(huán)節(jié) 因分析前質(zhì)量控制大部分是由臨床完成的 這就要求檢驗(yàn)科需加強(qiáng)與臨床聯(lián)系 對標(biāo)本正確采集及影響測定的各種因素進(jìn)行告知和培訓(xùn) 為臨床正確分析結(jié)果提供參考意見 促進(jìn)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)和諧發(fā)展 4 3做好臨床常規(guī)生化的室內(nèi)質(zhì)量控制每日工作前 執(zhí)行嚴(yán)格的校準(zhǔn)程序 先測定質(zhì)控血清以監(jiān)測儀器的工作狀態(tài)及試劑的質(zhì)量 一旦發(fā)現(xiàn)失控 及時(shí)分析原因 采取措施 改善后方可進(jìn)行當(dāng)天標(biāo)本的檢測 在每批標(biāo)本測定的同時(shí) 隨機(jī)測定質(zhì)控血清 以監(jiān)控儀器測定的漂移 為保證檢驗(yàn)質(zhì)量 使用的質(zhì)控血清統(tǒng)一向臨床檢驗(yàn)中心購買 使用質(zhì)控品時(shí) 實(shí)驗(yàn)室要重復(fù)檢測以決定每批質(zhì)控品在本室的統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù) 在報(bào)告檢驗(yàn)結(jié)果前 質(zhì)控品結(jié)果必須達(dá)到實(shí)驗(yàn)室設(shè)定的可接受標(biāo)準(zhǔn) 4 4積極參與各級(jí)臨檢中心的室間質(zhì)控評(píng)比活動(dòng)室間質(zhì)控是實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的重要依據(jù) 是保證實(shí)驗(yàn)室開展項(xiàng)目的基礎(chǔ) 反映了實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)確度和可信度 臨床常規(guī)生化室間質(zhì)量評(píng)比活動(dòng)是相互校正各參與實(shí)驗(yàn)室測定結(jié)果的準(zhǔn)確性 并使各實(shí)驗(yàn)室之間的結(jié)果有可比性 減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的系統(tǒng)誤差等 4 5危機(jī)值報(bào)告制度的建立與應(yīng)用危急值是一組代表會(huì)危及患者生命的數(shù)據(jù) 應(yīng)采取及時(shí)