氣相色譜儀.doc

色譜法的分類一 按兩相所處的狀態(tài)分類氣相色譜法:氣固色譜法,氣液色譜法 液相色譜法:液固色譜法,液液色譜法二 按固定相的幾何形式分類1.柱色譜法(column chromatography)柱色譜法是將固定相裝在一金屬或玻璃柱中或是將固定相附著在毛細(xì)管內(nèi)壁上做成色譜柱，試樣從柱頭到柱尾沿一個(gè)方向移動而進(jìn)行分離的色譜法。 2.紙色譜法（paper chromatography）紙色譜法是利用濾紙作固定液的載體，把試樣點(diǎn)在濾紙上，然后用溶劑展開，各組分在濾紙的不同位置以斑點(diǎn)形式顯現(xiàn)，根據(jù)濾紙上斑點(diǎn)位置及大小進(jìn)行定性和定量分析。3.薄層色譜法(thin-layer chromatography, TLC)薄層色譜法是將適當(dāng)粒度的吸附劑作為固定相涂布在平板上形成薄層，然后用與紙色譜法類似的方法操作以達(dá)到分離目的。三、按分離原理分類按色譜法分離所依據(jù)的物理或物理化學(xué)性質(zhì)的不同，又可將其分為：1.吸附色譜法( adsorption chromatography )利用吸附劑表面對不同組分物理吸附性能的差別而使之分離的色譜法稱為吸附色譜法。2.分配色譜法( partition chromatography )利用固定液對不同組分分配性能的差別而使之分離的色譜法稱為分配色譜法。3.離子交換色譜法4.尺寸排阻色譜法5.親和色譜法分光光度儀使用說明1、開機(jī)：按儀器背后電源開關(guān)，儀器自檢，當(dāng)顯示主菜單時(shí)開機(jī)完成。2、選擇模式：一般選擇Fixed Wavelength，直接按主菜單Fixed Wavelength選項(xiàng)。該模式用于檢測樣品在選定波長的吸收，可滿足一般需要，如需用其他模式請先閱讀完整說明書。3、選定波長：按Option -，顯示當(dāng)前波長，單擊顯示對話框，輸入波長值按OK確認(rèn)。4、空白：在比色杯中加入空白對照，將比色杯放入檢測倉，蓋上滑蓋，按Blank ，此時(shí)吸光度顯示0.000。5、檢測：在比色杯中加入樣品，將比色杯放入檢測倉，蓋上滑蓋，按Read ，此時(shí)顯示吸光度。注意每次加入樣品要先潤洗比色杯，并且保持比色杯外部的清潔，尤其是通光的兩側(cè)。6、重復(fù)步驟5，完成一系列樣品的檢測。7、關(guān)機(jī)：檢測完成后按Exit 退到主菜單，然后按儀器背后電源開關(guān)關(guān)閉儀器分光光度計(jì)使用方法1） 預(yù)熱儀器。為使測定穩(wěn)定，將電源開關(guān)打開，使儀器預(yù)熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時(shí)和在不測定時(shí)應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷。2）選定波長。根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，轉(zhuǎn)動波長調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長。3）固定靈敏度檔。根據(jù)有色溶液對光的吸收情況，為使吸光度讀數(shù)為0.2-0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實(shí)驗(yàn)過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。4）調(diào)節(jié)“0”點(diǎn)。輕輕旋動調(diào)“0”電位器，使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處（此時(shí)，比色皿暗箱蓋是打開的，光路被切斷，光電管不受光照）。5）調(diào)節(jié)T=100。將盛蒸餾水（或空白溶液或純?nèi)軇┑谋壬蠓湃氡壬笞苤械牡谝桓駜?nèi)，有色溶液放在其它格內(nèi)，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)動光量調(diào)節(jié)器，使透光度T=100，即表頭指針恰好指在T=100處。6）測定。輕輕拉動比色皿座架拉桿，使有色溶液進(jìn)入光路，此時(shí)表頭指針?biāo)緸樵撚猩芤旱奈舛華。讀數(shù)后，打開比色皿暗箱蓋。7）關(guān)機(jī)。實(shí)驗(yàn)完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。注意事項(xiàng)：1）為了防止光電管疲勞。不測定時(shí)必須將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷，以延長光電管使用壽命。2）比色皿的使用方法：拿比色皿時(shí)，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。清洗比色皿時(shí)，一般先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。如比色皿被有機(jī)物沾污，可用鹽酸-乙醇混合洗滌液（12）浸泡片刻，再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿，以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿，以免損傷它的透光面。每次做完實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)立即洗凈比色皿。比色皿外壁的水用擦鏡紙或細(xì)軟的吸水紙吸干，以保護(hù)透光面。測定有色溶液吸光度時(shí)，一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次，以免改變有色溶液的濃度。另外，在測定一系列溶液的吸光度時(shí)，通常都按由稀到濃的順序測定，以減小測量誤差。在實(shí)際分析工作中，通常根據(jù)溶液濃度的不同，選用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.20.7。氣相色譜法氣相色譜法（gas chromatography 簡稱GC）是色譜法的一種。色譜法中有兩個(gè)相，一個(gè)相是流動相，另一個(gè)相是固定相。如果用液體作流動相，就叫液相色譜，用氣體作流動相，就叫氣相色譜。氣相色譜法由于所用的固定相不同，可以分為兩種，用固體吸附劑作固定相的叫氣固色譜，用涂有固定液的擔(dān)體作固定相的叫氣液色譜。按色譜分離原理來分，氣相色譜法亦可分為吸附色譜和分配色譜兩類，在氣固色譜中，固定相為吸附劑，氣固色譜屬于吸附色譜，氣液色譜屬于分配色譜。按色譜操作形式來分，氣相色譜屬于柱色譜，根據(jù)所使用的色譜柱粗細(xì)不同，可分為一般填充柱和毛細(xì)管柱兩類。一般填充柱是將固定相裝在一根玻璃或金屬的管中，管內(nèi)徑為26mm。毛細(xì)管柱則又可分為空心毛細(xì)管柱和填充毛細(xì)管柱兩種?？招拿?xì)管柱是將固定液直接涂在內(nèi)徑只有0.10.5mm的玻璃或金屬毛細(xì)管的內(nèi)壁上，填充毛細(xì)管柱是近幾年才發(fā)展起來的，它是將某些多孔性固體顆粒裝入厚壁玻管中，然后加熱拉制成毛細(xì)管，一般內(nèi)徑為0.250.5mm。在實(shí)際工作中，氣相色譜法是以氣液色譜為主。 定量方法可分以下三種：1、內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)法 取標(biāo)準(zhǔn)被測成分，按依次增加或減少的已知階段量，各自分別加入各單體所規(guī)定的定量內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中，調(diào)制標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別取此標(biāo)準(zhǔn)液的一定量注入色譜柱，根據(jù)色譜圖取標(biāo)準(zhǔn)被測成分的峰面積和峰高和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積和峰高的比例為縱座標(biāo)，取標(biāo)準(zhǔn)被測成分量和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量之比，或標(biāo)準(zhǔn)被測成分量為橫坐標(biāo)，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。 然后按單體中所規(guī)定的方法調(diào)制試樣液。在調(diào)制試樣液時(shí)，預(yù)先加入與調(diào)制標(biāo)準(zhǔn)液時(shí)等量的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)。然后按制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)的同樣條件下得出的色譜，求出被測成分的峰面積或峰高和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰積或峰高之比，再按標(biāo)準(zhǔn)曲線求出被測成分的含量。 所用的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，應(yīng)采用其峰面積的位置與被測成分的峰的位置盡可能接近并與被測成分以外的峰位置完全分離的穩(wěn)定的物質(zhì)。 2、絕對標(biāo)準(zhǔn)曲線法 取標(biāo)準(zhǔn)被測成分 按依次增加或減少階段法，各自調(diào)制成標(biāo)準(zhǔn)液，注入一定量后，按色譜圖取標(biāo)準(zhǔn)被測成分的峰面積或峰高為縱座標(biāo)，而以標(biāo)準(zhǔn)被測成分的含量為橫坐標(biāo)，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后按單體中所規(guī)定的方法制備試樣液。取試樣液按制標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)相同的條件作出色譜，求出被測成分的峰面積和峰高，再按標(biāo)準(zhǔn)曲線求出被測成分的含量。 3、峰面積百分率法 以色譜中所得各種成分的峰面積的總和為100，按各成分的峰面積總和之比，求出各成分的組成比率。氣相色譜法在環(huán)境科學(xué)中的應(yīng)用大氣中微量-氧化碳的分析 汽車尾氣中含有一氧化碳，工業(yè)鍋爐和家用煤爐燃燒不完全放出一氧化碳，都污染環(huán)境。大氣中痕量一氧化碳常用轉(zhuǎn)化法沒定。國產(chǎn)SP-2307色譜儀具有轉(zhuǎn)化裝置，使CO轉(zhuǎn)化為CH4。 CO+3H2Ni催化/380CH4+H2O 色譜柱固定相可用5A篩分子，GDX-104,Porpak Q等，以分子篩為例，13X或5A分子篩6080目（先經(jīng)500550活化2小時(shí)）以氫氣載氣, 57ml/nin;氫焰檢測器；空氣400ml/min;尾吹氮?dú)?0ml/min。柱長2m，內(nèi)徑2mm,柱溫36,檢測室130，轉(zhuǎn)化爐380v;進(jìn)樣量1mm?？蓽y大氣中ppm級一氧化碳。 空氣中苯系物的分析 常用的方法是用長2m,內(nèi)徑3mm的柱子；內(nèi)填充10%PEG20M/101白擔(dān)體6080目；柱溫120,汽化室 150,檢測室150;載氣氮流速60ml/min；57ml/nin;氫焰檢測器；氫35ml/min,空氣400ml/min。對苯、甲苯、二甲苯分離很好。也可用非極性的阿皮松或角鯊?fù)橥繚n的柱子。若需對二甲苯三個(gè)異構(gòu)體完全分離，可用有機(jī)皂土與鄰苯二甲酸二壬酯混合固定液涂在6201擔(dān)體上，或采用有機(jī)皂土與雙甘油混合固定液，三個(gè)體都可得到很好的分離。6201為吸附劑，吸附溫度-78，脫附100，濃縮100倍，回收率100%,色譜柱40%N,N-雙9_氰乙基）甲酰胺/6201,80100目，柱溫100氫焰檢測器，苯最小5ppb。 水中有機(jī)鹵化物的分析 自來水加氯消毒后會產(chǎn)生氯仿、四氯化碳、1,2-二氯乙烷等