微生物驗證自發(fā)突變?nèi)齻€經(jīng)典實驗.ppt

1 基因突變及類型2 基因突變的特點3 自發(fā)性的證明 基因突變一 基因突變簡稱突變 指細(xì)胞內(nèi) 或病毒粒內(nèi) 遺傳物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)或數(shù)量突然發(fā)生的可遺傳的變化 一 類型1 根據(jù)表型劃分 突變類型 自發(fā)突變 誘發(fā)突變 低劑量多因素突變 互變異構(gòu)效應(yīng) 物理誘變 化學(xué)誘變 定向培育和馴化 微生物基因突變的特點自發(fā)性 沒有人為誘變因素可自發(fā)產(chǎn)生稀有性 突變率比較低 范圍10 6 10 9獨立性 某基因突變率不受別的基因影響 多基因同時突變幾率極低 可誘變性 誘變劑可提高突變率穩(wěn)定性 突變后新性狀是穩(wěn)定的 可遺傳的 規(guī)律性 特定性狀具有較穩(wěn)定的突變率的規(guī)律 可逆性 野生型突變型 正向突變 回復(fù)突變 不對應(yīng)性 突變的性狀與引起突變的原因 環(huán)境 之間無直接的關(guān)系 兩種觀點 抗生素 紫外線或高溫誘變產(chǎn)生相對應(yīng)的突變性狀 非自發(fā)性 認(rèn)為突變是通過生物對某特定環(huán)境 例如化學(xué)藥物 抗生素和高溫等 的適應(yīng)而產(chǎn)生的 這種環(huán)境正是突變的誘因 所產(chǎn)生的抗性性狀是與該環(huán)境因素相對應(yīng)的 并認(rèn)為這就是環(huán)境因素對生物體的 馴化 馴養(yǎng) 蒙導(dǎo) 或 定向變異 抗生素 紫外線或高溫淘汰原有非突變個體 自發(fā)性 抗性突變是可以自發(fā)產(chǎn)生的 即使誘發(fā)產(chǎn)生 其產(chǎn)生的性狀與誘變因素間也是不對應(yīng)的 即最終適應(yīng)了的化學(xué)藥物等不良因素并非誘變因素 而僅僅是一種用于篩選的環(huán)境而已 基因突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性的證明 突變是通過適應(yīng)而產(chǎn)生的 突變的原因與性狀間是相對應(yīng)的 突變是自發(fā)的 與環(huán)境是不相對應(yīng)的 PK 微生物突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性證明 取敏感于噬菌體的E coli指數(shù)期的肉湯培養(yǎng)物 用新鮮培養(yǎng)稀釋成濃度為103 mL的細(xì)菌懸液 然后在甲 乙兩試管各裝10mL 1 變量實驗 1 實驗內(nèi)容 E coli對于phageT1的抗性變異波動實驗 接著把甲管中的菌液先分裝在50支小試管中 每管0 2mL 保溫24 36h 微生物突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性證明 把各小管的菌液分別倒在50個預(yù)先涂滿噬菌體T1的平板上 經(jīng)培養(yǎng)后分別計算各皿上所產(chǎn)生的抗噬菌體的菌落數(shù) 微生物突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性證明 乙管中的10mL菌不經(jīng)分裝先整管保溫24 36h 然后分成50份分別倒在同樣涂滿T1的平板上 經(jīng)同樣培養(yǎng)后 也分別計算各皿上所產(chǎn)生的抗噬菌體菌落數(shù) 微生物突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性證明 結(jié)果 在來自甲管的50皿中 各皿出現(xiàn)的抗性菌落數(shù)相差極大 而來自乙管的則各皿上抗性菌落數(shù)基本相同 微生物突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性證明 結(jié)論 E coli抗噬菌體性狀的產(chǎn)生 并非由所抗的環(huán)境因素 即噬菌體T1 誘導(dǎo)出來的 而是在它接觸T1前 在某次細(xì)胞分裂過程中自發(fā)產(chǎn)生的 微生物突變的自發(fā)性和不對應(yīng)性證明 2 涂布實驗 1 實驗內(nèi)容 2 實驗原理 若抗性是在接觸噬菌體以后產(chǎn)生的 那么噴噬菌體以前的重新涂布無非使細(xì)菌所處的位置發(fā)生改變 而不會因為涂布大大地改變細(xì)菌對于噬菌體的反應(yīng) 因此兩組培養(yǎng)皿上出現(xiàn)的抗性菌落數(shù)應(yīng)相等 若抗性發(fā)生在接觸噬菌體以前 那么在噴上噬菌體以前某些菌落中的抗性突變型細(xì)菌已經(jīng)分裂若干次 在不經(jīng)重新涂布的培養(yǎng)皿上形成一個菌落 在重新涂布的培養(yǎng)皿上出現(xiàn)若干菌落 3 結(jié)果 重新涂布的培養(yǎng)皿上出現(xiàn)的抗性菌落多余未經(jīng)重新涂布的 4 結(jié)論 抗性突變的發(fā)生在接觸噬菌體之前 3 影印培養(yǎng)實驗 1 實驗內(nèi)容 2 實驗原理 通過蓋印章的方式 在未接觸抗性因素的條件下篩選出的抗性突變株 由于實驗過程中沒有接觸過抗性因素 所以