植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)題.doc

植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)題（習(xí)題）一、名詞解釋愈傷組織：在培養(yǎng)基上由培養(yǎng)物產(chǎn)生的無序生長且沒有一定結(jié)構(gòu)的薄壁細(xì)胞團(tuán)。外植體：在組織培養(yǎng)中，由植物體上取下來進(jìn)行離體培養(yǎng)的那部分組織或器官.脫分化：由高度分化的植物器官，組織或細(xì)胞經(jīng)過離體培養(yǎng)，產(chǎn)生愈傷組織的過程。半連續(xù)培養(yǎng)：利用培養(yǎng)罐進(jìn)行大量細(xì)胞培養(yǎng)的一種方式。無性系變異：由任何形式的細(xì)胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株所表現(xiàn)出來的差異。胚狀體：在離體植物細(xì)胞、組織或器官培養(yǎng)過程中，由一個(gè)或一些體細(xì)胞，經(jīng)過胚胎發(fā)生和發(fā)育過程，形成的與合子胚相類似的結(jié)構(gòu)?？醋o(hù)培養(yǎng)：用同種或異種材料的愈傷組織作為看護(hù)組織培養(yǎng)細(xì)胞的一種方法。無融合生殖：由配囊中卵細(xì)胞以外的其他細(xì)胞發(fā)育成的單倍體植株。種質(zhì)：親代通過生殖細(xì)胞活體細(xì)胞直接傳遞給子代并決定固有生物性狀的遺傳物質(zhì)。懸浮培養(yǎng)：將游離的植物單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，按一定的細(xì)胞密度在受到不斷拉動或搖動的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的一種方式。早熟萌發(fā)：在培養(yǎng)后迅速萌發(fā)為幼苗，不繼續(xù)進(jìn)行胚狀生長，超過正常發(fā)育階段。選擇壓：在2個(gè)相對性狀之間，一個(gè)性狀被選擇而生存下來的優(yōu)勢。細(xì)胞全能性：任何有完整細(xì)胞核的植物細(xì)胞具有全部的遺傳信息，在一定條件下，均具有分化，發(fā)育成完整植株的潛在能力。條件培養(yǎng)基：在培養(yǎng)集中加入高密度的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)過一段時(shí)間后，這些細(xì)胞向培養(yǎng)基中分泌一些促進(jìn)細(xì)胞生長的活性物質(zhì)，使培養(yǎng)基條件化，使原來在合成培養(yǎng)基上不能分裂的細(xì)胞發(fā)生分裂。離體授粉：將未授粉的胚珠，子房或柱頭從母體上分離下來，進(jìn)行無菌培養(yǎng)，并通過一定的方式授給 無菌花粉，使其在試管內(nèi)實(shí)現(xiàn)受精的技術(shù)。同步化培養(yǎng)：培養(yǎng)基中大多數(shù)細(xì)胞都能同時(shí)通過細(xì)胞周期的各個(gè)階段。植板率：(每個(gè)平板上形成的細(xì)胞團(tuán)數(shù) / 每個(gè)平板上接種的細(xì)胞總數(shù)) * 100%、繼代培養(yǎng)：對來自于外植體所增殖的培養(yǎng)物通過更換新鮮培養(yǎng)基及不斷切割分離進(jìn)行的連續(xù)多代的培養(yǎng)。無性系：由任何形式的細(xì)胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株。細(xì)胞融合：在自發(fā)或人工誘導(dǎo)下，兩個(gè)不同基因型的細(xì)胞或原生質(zhì)體融合形成一個(gè)雜種細(xì)胞。二、填空題1、根據(jù)外植體的的種類不同，組織培養(yǎng)可以分為組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、原生質(zhì)培養(yǎng)和胚胎培養(yǎng)五種類型。根據(jù)培養(yǎng)基的物理性狀，組織培養(yǎng)可以分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩種類型。2、對高溫高壓條件下易降解變質(zhì)的物質(zhì)，在滅菌時(shí)應(yīng)采用過濾滅菌方法。3、植物組織培養(yǎng)過程中，細(xì)胞分裂素與生長素比值（CTK/IAA）高低決定了器官的分化類型，其比值高有利于芽，比值低有利于根，而兩者相等時(shí)則促進(jìn)愈傷組織形成。4、在細(xì)胞懸浮培養(yǎng)過程中，細(xì)胞的生長周期呈“S”型曲線，可分為五個(gè)階段，分別是延滯期、對數(shù)生長期、直線生長期、緩慢期和靜止期。5、酒精和升汞是兩種常用的外植體表面消毒劑，它們的使用濃度分別為70-75%和 0.1-1%；消毒時(shí)間的范圍分別為 0.2-2min和 2-15min。6、單細(xì)胞培養(yǎng)的方法有平板培養(yǎng)法、看護(hù)培養(yǎng)法、微室培養(yǎng)法和條件培養(yǎng)基培養(yǎng)法等四種方法。7、在細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)，實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)細(xì)胞同步化的方法有饑餓法和抑制法。8、實(shí)現(xiàn)細(xì)胞全能性的條件是組織或器官解離和給予所需的營養(yǎng)物質(zhì)。9、常用于誘導(dǎo)愈傷組織的植物激素是2，4-D。10、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為0.10.25mm。11、在冷凍保存中，對植物材料傷害最小的防護(hù)劑一般是二甲基亞砜（DMSO)。12、支撐植物組織培養(yǎng)作為一門技術(shù)的兩個(gè)重要模式是培養(yǎng)基模式和激素調(diào)控模式。13、無病毒植株的鑒定方法主要有直接測定法、指示植物法、抗血清鑒定法、核酸分析法和電鏡顯微檢測法等14、用于細(xì)胞活力的測定方法有 TTC、FDA和 伊凡藍(lán)染色法。15、通過離體培養(yǎng)可獲得單倍體植株的材料有花粉和未受精胚珠。16、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為小于0.3mm。17、植物離體快速繁殖的方式中，遺傳性狀穩(wěn)定的有器官型、短枝發(fā)生型。18、典型的人工種子由體細(xì)胞胚、人工胚乳和人工種皮構(gòu)成。19、原生質(zhì)體的分離純化過程中要添加滲透壓穩(wěn)定劑和原生質(zhì)膜穩(wěn)定劑提高原生質(zhì)產(chǎn)量和活力，屬于質(zhì)膜穩(wěn)定劑的有葡聚糖硫酸鉀 、CaCl2。20、根據(jù)不同植物的生長發(fā)育特點(diǎn)，快速繁殖的途徑有短株發(fā)生型、器官發(fā)生型、胚胎發(fā)生型和原球莖發(fā)生型。21、組織培養(yǎng)中碳源的主要作用是合成有機(jī)物和維持合適的滲透壓。22、目前用于細(xì)胞融合的方法主要有自發(fā)融合和誘導(dǎo)融合兩種。23、原生質(zhì)體的純化方法有沉降法、懸浮法和界面法。24、懸浮培養(yǎng)中細(xì)胞生長的測定方法：細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞密實(shí)體積（PCV）及細(xì)胞總體積、細(xì)胞鮮重和干重、細(xì)胞有絲分裂的指數(shù)。25、振蕩培養(yǎng)的目的：改善液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)材料的通氣狀況。26、單倍體育種的主要有優(yōu)點(diǎn)是：縮短育種年限、后代不出現(xiàn)性狀分離。27、常用于誘導(dǎo)胡蘿卜胚性愈傷組織的植物激素是生長素，胚狀體的形成則是在細(xì)胞分裂素的促進(jìn)下。28、在組織培養(yǎng)的發(fā)展史上，1958年Steward報(bào)道了胡蘿卜細(xì)胞懸浮培養(yǎng)；1978年Melchers報(bào)道了馬鈴薯和番茄的融合培養(yǎng)；1960年Cooking報(bào)道了誘導(dǎo)雞紅細(xì)胞與酵母細(xì)胞融合培養(yǎng)。29、在胚乳培養(yǎng)中，由裸子植物胚乳發(fā)育成的植株為單倍體；被子植物胚乳發(fā)育成的植株為三倍體。30、組織培養(yǎng)中的突變可分為體細(xì)胞無性系變異和加選擇壓（化學(xué)物質(zhì)）誘導(dǎo)產(chǎn)生的變異。三、單選題1、常用于誘導(dǎo)愈傷組織的植物激素是（ B ）。A 6-BA B 2，4-D C IBA D ZT2、在用物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合時(shí)，下列哪種方法不在此列（ C ）。A 電刺激 B 顯微操作 C 多聚化合物 D 振蕩3、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為（ A ）A 0.20.3mm B 0.5mm C 0.51mm D 10mm4、用酶解法分離原生質(zhì)的離析液中，下列哪種物質(zhì)具有抑制核糖核酸酶的作用（ D ）。A 葡聚糖硫酸鉀 B CaCl2 C 甘露醇 D MgSO45、在冷凍保存中，對植物材料傷害最小的防護(hù)劑一般是（ A ）。A 二甲基亞砜 B 氯化鈣 C 甘露醇 D 脯氨酸四、簡答題 （論述題）1、植物離體快速繁殖的途徑有哪些？答：1.無菌母株的制備 2.繼代芽的增殖 3.芽苗生根培養(yǎng) 4.再生根的鍛煉和移栽2、脫除植物病毒的方法有哪些？為什么莖尖分生組織培養(yǎng)能夠除去植物病毒？答：1.莖尖培養(yǎng)脫毒 2.熱處理脫毒 3.愈傷組織脫毒 4.微體嫁接脫毒 5.珠心培養(yǎng)脫毒 6.化學(xué)療法3、 糖在幼胚培養(yǎng)中的生理作用？答：（1）調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓 （2）作為碳源和能源 （3）防止幼胚早期發(fā)育4、單細(xì)胞分離的方法有哪些？各有什么優(yōu)缺點(diǎn)？答：機(jī)械法； 酶解法； 由培養(yǎng)的愈傷組織中分離單細(xì)胞機(jī)械法：優(yōu)點(diǎn)：1.細(xì)胞不受酶的傷害 2.不發(fā)生質(zhì)器分離；缺點(diǎn)：1.材料要求是薄壁細(xì)胞，組織排列松散 2.產(chǎn)量低酶解法：優(yōu)點(diǎn)：能得到比較均勻一致的海綿組織或柵欄組織細(xì)胞缺點(diǎn)：在分離細(xì)胞時(shí)，必須對酶液給予滲透壓保護(hù)，防止細(xì)胞的賬裂。5、通過機(jī)械法和酶解法比較原生質(zhì)體分離優(yōu)缺點(diǎn)。機(jī)械法：優(yōu)點(diǎn)：可避免酶制劑對原生質(zhì)的某些破壞作用。缺點(diǎn)：獲得的原生質(zhì)少，產(chǎn)生的原生質(zhì)的細(xì)胞類型限制，一般取材局限于具有液泡化程度較大的細(xì)胞或長形 的細(xì)胞組織。酶解法：優(yōu)點(diǎn)：可以獲得大量的原生質(zhì)體，適用于幾乎所有植物和器官，雙子葉植物葉肉細(xì)胞比單子葉更易分離。 缺點(diǎn)：酶制劑含有核酸酶，蛋白酶，過氧化物酶及酚類物質(zhì)，會影響原生質(zhì)體的活力。6、簡述細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用。一、天然化合物的生產(chǎn)與特化：(1)植物次生代謝物的產(chǎn)生、(2)進(jìn)行特化的生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)、(3)細(xì)胞的工廠化生產(chǎn) 二：突變體選擇：（1）直接選擇法、（2）間接選擇法、（3）誘導(dǎo)多倍體7、簡述實(shí)現(xiàn)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞同步化的兩種主要方法：（1）饑餓法 （2）抑制法8、單倍體育種優(yōu)點(diǎn)是什么？（1）良好的遺傳研究材料（2）加速育苗進(jìn)程（3）提高選育效率（4）突變體選育，單倍體植株基因表達(dá)不受遮蔽，可以充分展示基因型所決定的表現(xiàn)型（5）遺傳轉(zhuǎn)化受體，確保外源基因的穩(wěn)定遺傳，大大提高遺傳轉(zhuǎn)化率（6）利用單倍體育種時(shí)，栽培品種進(jìn)行純化對基因型混雜品種進(jìn)行純化。9、原生質(zhì)體培養(yǎng)的意義。（1）比較容易攝取外來的遺傳物質(zhì)，研究植物原生質(zhì)體培養(yǎng)和再生植株技術(shù)，有可能采取細(xì)胞遺傳工程的方法培育出新品種。（2）便于進(jìn)行細(xì)胞融合，形成雜交細(xì)胞，可廣泛的重組植物界優(yōu)良遺傳性狀，創(chuàng)造新品種。（3）原生質(zhì)體可以作為遺傳理論研究的材料。10、細(xì)胞培養(yǎng)的工業(yè)應(yīng)用有哪些方面：（1）高產(chǎn)細(xì)胞株的選擇 （2）種子的培養(yǎng) （3）大規(guī)模培養(yǎng)11、在原生質(zhì)體分離與純化過程中，影響原生質(zhì)體活力和數(shù)量的因素有哪些？(1)光：一般在黑暗靜止條件下進(jìn)行。(2)溫度：酶解溫度25-30，兼顧原生質(zhì)穩(wěn)定性及酶活性(3)時(shí)間：幾小時(shí)或幾十小時(shí)，太長時(shí)間影響原生質(zhì)活力，一般少于24小時(shí)(4)細(xì)胞壁降解酶的種類和組合(5)滲透壓的穩(wěn)定性種類(6)原生質(zhì)膜穩(wěn)定劑(7)PH影響12、簡述離體授粉的主要方式？（1）離體柱頭授粉 （2）離體子房授粉 （3）離體胚珠授粉13、簡述試管苗移栽不易成活的原因？（1）根系結(jié)構(gòu)不完善，不生根，根與芽的輸導(dǎo)不相通（愈傷組織），再生根的吸收功能差；（2）葉部結(jié)構(gòu)不完善，缺少角質(zhì)層和蠟質(zhì)層，保水性差，缺少葉表皮毛，保濕，反光性差，氣孔開度大，關(guān)閉能力差，葉片中的柵欄組織發(fā)育不完善，結(jié)合能力低。14、種質(zhì)保存的意義有哪些？所占空間少，節(jié)省人力、物力和土地；有利于國際間的種質(zhì)交流及瀕危物種搶救和快繁；需要時(shí)，可以用離體培養(yǎng)方法很快大量繁殖；避免自然災(zāi)害引起的種質(zhì)丟失。15、概述花粉培養(yǎng)在育種上的應(yīng)用？（1）單倍體育種;（2）對于二倍體植物加倍變成四倍體或倍數(shù)更高的多倍體，可以改善原來植物的某些經(jīng)濟(jì)性狀;（3）對異花授粉作物（如玉米）的單倍體植株進(jìn)行加倍，可迅速獲得自交系，免去了煩瑣的人工自交過程，節(jié)省大量的時(shí)間和人力；（4）排除顯隱性基因干擾，有利于進(jìn)行突變體選擇16、植物子房內(nèi)授粉的意義是什么？在離體條件下，將無菌花粉直接引入子房中，使花粉粒在子房中萌發(fā)，完成受精，并獲得具有生活力的種子的發(fā)育，可以克服柱頭或花柱授粉不親和性障礙。17、莖尖脫毒的理論依據(jù)是什么？（1）莖尖由分生組織構(gòu)成，無維管束胞間連絲也不發(fā)達(dá)，病毒很難進(jìn)入；（2）分生組織不斷進(jìn)行活躍的分裂增殖，需要消耗大量能量。代謝旺盛，能抑制病毒復(fù)制；（3）莖尖和根尖中內(nèi)源激素濃度在很高的水平，抑制病毒復(fù)制18、概述胚乳培養(yǎng)的意義？（1）三倍體幼苗和植株的獲得: 對于以種子生產(chǎn)為目的的植物是無益的；但有時(shí)無籽果實(shí)及以營養(yǎng)體生產(chǎn)為目的的植物則具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值。如蘋果、香蕉、桑樹、西瓜、甜菜、茶及某些花卉的三倍體經(jīng)濟(jì)性狀更優(yōu)越。（2）胚乳植株染色體的不穩(wěn)定性，為染色體工程的研究提供有效的途徑。（染色體不穩(wěn)定的原因和變化規(guī)律）（3）為研究淀粉、蛋白質(zhì)和脂肪等產(chǎn)物的生物合成及其代謝，提供了良好的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。19、植物細(xì)胞規(guī)?；囵B(yǎng)與次生產(chǎn)物生產(chǎn)前景如何？為什么？利用植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)代謝產(chǎn)物具有十分廣闊的前景。目前植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)的化合物很多，包括糖類、酚類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸以及帖類和生物堿等初生和次生代謝產(chǎn)物，植物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用主要包括以下3個(gè)方面：（1）有用物質(zhì)（次生代謝產(chǎn)物）的生產(chǎn)；（2）植物無性系的快速繁殖和遺傳突變體的篩選；（3）植物細(xì)胞遺傳、生理、生化和病毒方面的深入研究。通過植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)藥用成分取得了很大的進(jìn)展，目前已經(jīng)研究過的植物有400多種，能夠生產(chǎn)超過600多種的成分，其中有相當(dāng)大部分具有藥用價(jià)值，如紫草細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)紫草寧、人參細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)人參皂苷以及黃連細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)黃連素等。20、試述離體受精的類型及其意義。類型：胚珠授粉，子房授粉，柱頭授粉。意義：克服遠(yuǎn)緣雜交過程中的受精前障礙，獲得可育性種子。21、論述植物快速繁殖的過程。（1）無菌母株的制備：初代培養(yǎng)，選取性狀優(yōu)良，穩(wěn)定，生長健壯，無病蟲害植株上的外植體，經(jīng)適當(dāng)存放滅菌處理后，接種在培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)其產(chǎn)生芽和愈傷組織。（2）繼代芽的增殖：無菌母株再次切割進(jìn)行繼代培養(yǎng)，芽分化增殖成叢芽，加快繁殖速度（3）芽苗生根培養(yǎng)：誘導(dǎo)無根苗生根的方法：a.試管內(nèi)生根：將無菌小枝條轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng);b.試管外生根：有些植物可以將離體條件下形成的枝條，在基部切口處，用生根粉和滑石粉混合的IBA涂抹，然后種植到溫室或田間，這樣可大大降低成本。（4）再生根的鍛煉與移栽A.將小苗根系周圍的培養(yǎng)基沖洗干凈，以避免有害生物的污染B篩選適宜的移栽基質(zhì)，選較好保水性和通氣性的C選擇使用營養(yǎng)缽，苗床及遮陽網(wǎng)，以調(diào)控光，溫度，濕度等D移栽前后培養(yǎng)條件發(fā)生改變22、論述脫除植物病毒的方法及其原理。（1）熱處理脫毒；原理：1.某些病毒受熱后不穩(wěn)定，高溫使這些病毒失去活性，可以部分地或完全的被鈍化2.病毒進(jìn)入植物細(xì)胞后，隨植物細(xì)胞的DNA一起復(fù)制，熱處理鈍化病毒的活性后，病毒在植物體內(nèi)增殖減緩或增殖停止，而失去侵染的能力3.高溫下，一方面不能生成或生成病毒很少，另一方面對病毒的破壞作用加重，病毒顆粒生成和破壞的平衡程度受到破壞，使感染植株的病毒含量不斷降低，經(jīng)過一段時(shí)間，病毒自行消失，而達(dá)到脫毒的目的。（2）愈傷組織脫毒；原理：1.細(xì)胞的增殖速度快于病毒復(fù)制的速度2.細(xì)胞產(chǎn)生變異，獲得對病毒感染的抗性，最終表現(xiàn)出脫毒現(xiàn)象。（3）微體嫁接脫毒；（4）珠心胚培養(yǎng)脫毒；原理：珠心組織與維管束沒有聯(lián)系，所以可以培養(yǎng)珠心組織，得到無病毒植株。（5）化學(xué)療法；原理：化學(xué)藥劑對病毒的殺傷力。（6）莖尖培養(yǎng)脫毒；原理：莖尖幾乎不含病毒，采用旺盛分裂的莖尖組織培養(yǎng)，就有可能去除病毒。注：具體答案參照各自教材植物組織培養(yǎng)練習(xí)題1. 植物組織培養(yǎng)：指要人工控制的條件下，將植物體的任何部分，或器官、或組織、或細(xì)胞，進(jìn)行離體培養(yǎng)，使之發(fā)育形成完整植物體。所謂人工控制的條件，即營養(yǎng)條件和環(huán)境條件；植物體的任何一部分是指根、莖、葉、花、果、實(shí)以及它們的組織切片和細(xì)胞。2. 愈傷組織培養(yǎng)：將外植體接種在人工培養(yǎng)基上，由于植物生長調(diào)節(jié)劑的存在，而使其細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后通過再分化形成再生植株。3. 外植體：植物組織培養(yǎng)中的各種接種材料，包括植物體的各種器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體等。4. 脫分化：一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象。5、接種：把經(jīng)過表面滅菌后的外植體切碎或分離出器官、組織、細(xì)胞，轉(zhuǎn)放到無菌培養(yǎng)基上的全部操作過程。6、褐變：外植體在培養(yǎng)過程中體內(nèi)的多酚氧化酶被激活，使細(xì)胞里的酚類物質(zhì)氧化成棕褐色的醌類物質(zhì)，這種致死性的褐化物不但向外擴(kuò)散使培養(yǎng)基逐漸變成褐色，而且還會抑制其他酶的活性，嚴(yán)重影響外植體的脫分化和器官分化，最后變褐而死亡的現(xiàn)象。二 填空植物組織培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)方式分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)。2、植物組織培養(yǎng)類型分為愈傷組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、胚培養(yǎng)、細(xì)胞和原生質(zhì)體培養(yǎng)。3、組織培養(yǎng)的主要應(yīng)用領(lǐng)域有快速繁殖、脫毒、體細(xì)胞無性系變異和新品種培育、單倍體育種、種質(zhì)保存、遺傳轉(zhuǎn)化、次生代謝物的生產(chǎn)等幾個(gè)方面。4、莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為快速繁殖和脫毒培養(yǎng)兩種類型。5的表面滅菌和接種，培養(yǎng)；試管苗的馴化、移栽與初期管理。6實(shí)驗(yàn)室、攝影室等分室，另加馴化室、溫室和大棚。7、培養(yǎng)基的成分主要包括無機(jī)營養(yǎng)、氨基酸、有機(jī)附加物、維生素、糖、瓊脂、激素、活性炭、PH。8、植物器官培養(yǎng)主要是指植物的根、莖、葉、花器和幼小果實(shí)的無菌培養(yǎng)。9、細(xì)胞全能性是指植物的每一個(gè)細(xì)胞都攜帶有一完整的基因組，并具有發(fā)育成完整植株的潛在能力。10、玻璃化現(xiàn)象是指試管苗的一種生長失調(diào)癥狀，當(dāng)植物材料進(jìn)行離體繁殖時(shí)，有些培養(yǎng)物的嫩莖、葉片往往會出現(xiàn)半透明狀和水漬狀，這種現(xiàn)象稱為玻璃化。其苗稱為玻璃化苗。11、液體培養(yǎng)是將培養(yǎng)物方在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，又稱為液體震蕩培養(yǎng)。三、1、簡述培養(yǎng)基的配制、分裝、包扎和滅菌。答：（1）確定培養(yǎng)基的配方。（2）貯備液（或母液）的配制與保存配一些濃溶液，用時(shí)稀釋，這種濃溶液叫貯備液或母液。按藥品種類和性質(zhì)分別配制，單項(xiàng)、單獨(dú)保存或幾種混合保存。一般應(yīng)按配方順序依次稱量，分別溶解在少量蒸餾水中，最后再依次加到一起，并定容到規(guī)定體積。貯備液配好后貼上標(biāo)簽，保存在冰箱中。（3）配制培養(yǎng)基先在潔凈的不銹鋼鍋理放入約750ml蒸餾水，加入所需要的瓊脂和糖，最好能在水浴鍋理將瓊脂溶化，如直接加熱應(yīng)不停地?cái)嚢瑁乐乖阱伒谉够蚍序v溢出。按需要加入相應(yīng)量的母液。按需要加入相應(yīng)量的植物激素和其它物質(zhì)。加蒸餾水定容， 充分混合好后，用1NKOH（或NaOH）調(diào)整PH值到所需值。（4）分裝：按容器的大小和培養(yǎng)要求，趁熱將適量培養(yǎng)基分注到三角瓶或試管中，并即刻用封口膜封住瓶口。（5）滅菌：壓力108kPa，溫度121度，時(shí)間1530分鐘。2、什么叫接種？簡述無菌操作注意事項(xiàng)。 答：把經(jīng)過表面滅菌后的外植體切碎或分離出器官、組織、細(xì)胞，轉(zhuǎn)放到無菌培養(yǎng)基上的全部操作過程叫接種。無菌操作注意事項(xiàng)好下：（1）進(jìn)無菌室之前，操作人員需著經(jīng)滅菌的白色工作服，戴口罩。操作人員雙手必順進(jìn)行滅菌。 植物組織培養(yǎng)室的核心是無菌室（又叫接種室），怎樣進(jìn)行無菌室的滅菌 ？答：（1）常規(guī)滅菌法用70%酒精（或0.1%新潔爾滅）朝天花板、四周墻壁方向噴灑；待整個(gè)室噴灑完畢后依次用70%酒精將臺子揩一遍；用濕拖把（70%酒精打濕），把地板拖一次；然后將無菌室的門關(guān)閉，開紫外燈，照射530分鐘；0.52小時(shí)后進(jìn)入室內(nèi)操作，待工作完畢后，將室門打開換氣。以后每用一次滅菌一次。（2）無菌室發(fā)現(xiàn)霉斑（墻上）時(shí)的滅菌用70%酒精擦一遍（里里外外）；用新配70%酒精重復(fù)再擦一遍；甲醛蒸：方法是每立方米空間用2ml甲醛（福爾馬林）加0.2克高錳酸鉀的比例，蒸房間24小時(shí)（門窗密閉），然后開啟房門，放走甲醛氣體。常規(guī)滅菌法再滅菌一次。待用。4、什么叫污染？污染的原因有哪些？簡述預(yù)防污染的措施？污染是指在組培過程中，由于真菌、細(xì)菌等微生物的浸染，在培養(yǎng)器內(nèi)滋生大量的菌斑，使培養(yǎng)材料不能正常生長和發(fā)育的現(xiàn)象。污染原因有以下幾種：培養(yǎng)基及各種使用器具消毒不徹底；外植體滅菌時(shí)不徹底，在菌殘存在細(xì)胞組織中；操作時(shí)人為因素帶入； 環(huán)境不清潔；超凈工作區(qū)域污染。預(yù)防污染的措施：做好器具滅菌、外植體滅菌，做好無菌操作技術(shù)，搞好組培室環(huán)境條件，正確使用和維護(hù)好超凈工作臺。5、簡述培養(yǎng)物的玻璃化現(xiàn)象及其預(yù)防措施。答：玻璃化是試管苗的一種生量失調(diào)癥狀，當(dāng)植物材料進(jìn)行離體繁殖時(shí)，有些培養(yǎng)物的嫩莖、葉片往往會出現(xiàn)半透明狀和水漬狀，這種現(xiàn)象稱為玻璃化。其苗稱為玻璃化苗。結(jié)果是瓶內(nèi)的小苗過渡生長，但有用的苗很少。各種不同植物，玻璃化的發(fā)生頻率各不相同。大量的試驗(yàn)表明：玻璃幕化苗是在芽分化啟動后的生長過程中，由碳水化合物、氮代謝和水分狀態(tài)等發(fā)生生理性異常所引起，它由多種因素影響和控制，產(chǎn)生玻璃化的主要原因有：激素濃度、溫度、濕度、培養(yǎng)基的硬度、光照時(shí)間和培養(yǎng)成分。針對以上原因，可以通過降低培養(yǎng)基的水位；減少培養(yǎng)基中含氮化合物的用量；增加光照強(qiáng)度；調(diào)整培養(yǎng)溫度；降低培養(yǎng)基中細(xì)胞分例素的用量；提高培養(yǎng)基的硬度等措施，來減少玻璃化現(xiàn)象的發(fā)生。6、簡述外植體的褐變及其預(yù)防措施。褐變是指在組培過程中，由培養(yǎng)材料向培養(yǎng)基中釋放褐色物質(zhì)，致使培養(yǎng)基逐漸變成褐色，培養(yǎng)材料也隨之慢慢變褐而死亡的現(xiàn)象。它的發(fā)生是由外植體中的酚類化合物與多酚氧化酶作用被氧化形成褐色的醌類化合物，醌類化合物在酪氨酸酶的作用下，與外植體組織中的蛋白質(zhì)發(fā)生聚合，進(jìn)一步引起其他酶系數(shù)失活，導(dǎo)致組織代謝紊亂，生長受阻，最終逐漸死亡。引起褐變的原因包括外植體本身、培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件等方面的影響。減輕褐化現(xiàn)象的途徑有以下：外植體和培養(yǎng)材料進(jìn)行2040天的遮光培養(yǎng)或暗培養(yǎng)；選擇適宜的培養(yǎng)基，調(diào)整激素用量；控制溫度和光照，在不影響正常生長和分化的前提下，盡量降低溫度，減少光照；冬春季節(jié)選擇年齡適宜的外植體材料進(jìn)行組培，并加大接種數(shù)量；在培養(yǎng)基中加入抗氧化劑和其他抑制劑，如抗壞血酸、硫代硫酸鈉、有機(jī)酸、半光氨酸及其鹽酸鹽、亞硫酸氫鈉、氨基酸等，可以有效地抑制褐化；加快繼代傳瓶的速度，添加活性炭等吸附劑（0.5%2.5%），是生產(chǎn)上常用的有效方法。四、請?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)組織培養(yǎng)室，說明規(guī)模、面積、作用、目的、各室作用，并繪出平面圖。專題3 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)測試題一單選題1植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是（ ）A.給予適宜的營養(yǎng)和外部條件 B.導(dǎo)入其它細(xì)胞的基因C.脫離母體后，給予適宜的營養(yǎng)和外部條件D.將成熟篩管細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞內(nèi)2以下成為組織培養(yǎng)條件的是 ( ) C02 有機(jī)物 生長素 細(xì)胞分裂素 水 礦質(zhì)元素A. B. C. D. 3無菌技術(shù)是植物組織培養(yǎng)能否獲得成功的關(guān)鍵 , 以下說法正確的是 ( )由于植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差 , 對無菌操作的要求非常嚴(yán)格對培養(yǎng)基及器械用高壓蒸汽滅菌 對培養(yǎng)材料進(jìn)行表面滅菌時(shí)一方面要考慮藥劑的消毒效果 , 另一方面還要考慮植物材料的耐受能力 不同藥劑、不同植物材料甚至不同器官要區(qū)別對待 對培養(yǎng)材料可用高壓蒸汽滅菌 如果不小心導(dǎo)致污染 , 將可能造成培養(yǎng)工作的前功盡棄A. B. C. D. 4愈傷組織分化過程中 , 當(dāng)培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素 / 生長素的比值較低時(shí) , 誘導(dǎo)分化的器官是 ( )A. 根 B. 芽 C. 葉 D. 胚性細(xì)胞團(tuán)5 當(dāng)先使用細(xì)胞分裂素 , 后使用生長素時(shí) , 實(shí)驗(yàn)結(jié)果是 ( ) 。A. 有利于細(xì)胞分裂 , 但細(xì)胞不分化 B. 細(xì)胞既分裂又分化C. 分化頻率提高 D. 有利于細(xì)胞分化 , 但不分裂6.在植物組織培養(yǎng)中，切取胡蘿卜的外植體時(shí)一般選擇（ ）A具有木質(zhì)部的部分 B具有韌皮部的部分C具有形成層的部分 D具有髓的部分7菊花的組織培養(yǎng)一般選擇（ ）A開過花的老枝 B正在開花的枝條C未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝D任何枝條均可8動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的重要區(qū)別是（ ）A培養(yǎng)基不同 B動物細(xì)胞不需要在無菌條件下進(jìn)行C動物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能D動物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株9細(xì)胞具有全能性的原因是（ ）生物體細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能生物體的每一個(gè)細(xì)胞都具有全能性生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有個(gè)體發(fā)育的全部基因D.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都是由受精卵發(fā)育來的10.在月季花藥培養(yǎng)成單倍體植株的過程中，應(yīng)選擇哪個(gè)時(shí)期最易成活（ ）A單核期前的花藥 B單核期后的花藥 C單核期花藥 D雙核期 11.影響花藥培養(yǎng)的主要因素是A材料的選擇與培養(yǎng)基的組成 B親本植株的生理狀況C選擇合適的花粉發(fā)育時(shí)期 D材料的低溫處理與接種密度12粗糙脈孢菌的單倍體細(xì)胞中具有7條染色體。兩 個(gè)不同類型的粗糙脈孢菌A和a融合后成為二倍體，隨即發(fā)生典型的減數(shù)分裂，緊接著又進(jìn)行一次有絲分裂。此過程最終形成的子細(xì)胞數(shù)及每個(gè)子細(xì)胞中的染色體數(shù)分別為（ ）A8個(gè)、7條 B8個(gè)、14條 C4個(gè)、7條 D4個(gè)、14條13某高等植物體細(xì)胞內(nèi)假設(shè)有6條染色體，它們是AaBbDd，那么，一個(gè)花粉管中的兩個(gè)精子中的染色體是（ ）AABD和abd BAbD和abd CAaB和Bbd DAbd和Abd14如果某種植物的基因型為AABb，這兩對基因分別位于兩對同源染色體上，去雄后授以aabb植株的花粉，其胚乳可能的基因型是（ ）AAAaBBb、AAabbb、AAaBbb BAABB、AABbCAAaBBb、AAabbb DAaaBbb、Aaabbb15一個(gè)豆莢中種子的數(shù)目，從理論上講取決于（ ）A花中雌蕊的數(shù)目 B雌蕊中柱頭的數(shù)目C子房中受精胚珠的數(shù)目 D胚囊中胚的數(shù)二.多選題16(2003年高考江蘇卷)要將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株，需要( )A具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞 B離體狀態(tài)C導(dǎo)入外源基因 D一定的營養(yǎng)物質(zhì)和激素17.（2004年高考廣東、廣西卷）下面關(guān)于植物細(xì)胞工程的敘述，正確的是（）A葉肉細(xì)胞脫分化后可形成無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞B葉肉細(xì)胞經(jīng)再分化過程可形成愈傷組織C融合植物葉肉細(xì)胞時(shí)，應(yīng)先去掉細(xì)胞膜D葉肉細(xì)胞離體培養(yǎng)時(shí)，可以表現(xiàn)出全能性18MS培養(yǎng)基和微生物培養(yǎng)基相比有哪些不同 ? ( )A.MS培養(yǎng)基不含有機(jī)物 B. 微生物培養(yǎng)基以有機(jī)物為主C.MS培養(yǎng)基不含微量元素 D.MS培養(yǎng)基需提供大量無機(jī)營養(yǎng)三.非選擇題19下圖是被子植物的受精過程寫出圖中數(shù)字所代表的結(jié)構(gòu)的名稱： （2）草履蟲進(jìn)行 生殖；蘑菇進(jìn)行生殖，酵母菌和水螅常常進(jìn)行 生殖。（3）下列圖解表示水稻（2n=24）胚珠中胚囊的發(fā)育過程，試根據(jù)圖回答：薄壁細(xì)胞 直接發(fā)育 減數(shù)分裂珠心 孢原細(xì)胞（2n）三次有絲分裂水稻種子的種皮遺傳物質(zhì)應(yīng)為 n，其中遺傳物質(zhì)應(yīng)與 相同。水稻胚珠中的胚囊應(yīng)共有染色體 條，其中卵細(xì)胞中含染色體 條；若水稻授粉受精后發(fā)育成胚和胚乳，則胚細(xì)胞中含有染色體 條，胚乳細(xì)胞中含染色體 條。7細(xì)胞或8核中的7細(xì)胞其中就包括了一個(gè)卵細(xì)胞和兩個(gè)極核，若水稻的基因型為AaBb，則胚囊母細(xì)胞基因型為 。如果水稻卵細(xì)胞基因型應(yīng)為Ab，則極核的基因型為 ，其原因是。（4）番茄的染色體數(shù)目是24，一個(gè)番茄細(xì)胞發(fā)生減數(shù)分裂，形成的細(xì)胞中有三個(gè)退化消失。剩下一個(gè)細(xì)胞迅速發(fā)生了三次有絲分裂，你會找到多少個(gè)細(xì)胞核？這些核含有多少個(gè)染色體（ ）2A4個(gè)核，各有12個(gè)染色體 B4個(gè)核，各有24個(gè)染色體C8個(gè)核，各有24個(gè)染色體 D8個(gè)核，各有12個(gè)染色體（5）玉米的體細(xì)胞含有20條染色體。在正常情況下，它的卵細(xì)胞、一個(gè)極核、胚細(xì)胞、胚乳細(xì)胞、珠被細(xì)胞和子房壁細(xì)胞所含染色體數(shù)目依次應(yīng)為（ ）2A10、10、20、20、20、20 B10、10、30、30、20、20C10、10、20、30、20、20 D10、20、20、30、20、2020閱讀下列材料，分析后簡要回答問題：寫出以下過程或結(jié)構(gòu)的名稱：A ；B ；C ；D 。材料2中在獲得雜種細(xì)胞的容器中還有其他什么細(xì)胞？（3）A過程是否需要光照？ ；再分化是否需要光照？ 。（4）名貴花卉進(jìn)行離體培養(yǎng)時(shí)不應(yīng)采用該株的（ ）A莖尖 B.子房壁 C.花粉粒 D.葉片21.（1）植物的胚狀體是 繁殖的產(chǎn)物。培育胚狀體利用了 這一項(xiàng)生物技術(shù)。（2）包埋胚狀體的膠質(zhì)可看作種子的哪部分？（3）由人工種子萌發(fā)出的植株是否可育？說明理由。 。22參考答案：1-15：CCCAB CCACC AADCC16-18：ABD AD BD19. （1）花粉管 子房壁 珠被 受精極核 受精卵 珠孔（2）分裂 孢子 出芽（3）2 母方 96 12 24 36 AaBb Ab 卵細(xì)胞和極核是由單核胚囊經(jīng)三次有絲分裂而來（4）D（5）C20.(1)脫分化;愈傷組織;原生質(zhì)體a;原生質(zhì)體b(2)細(xì)胞a、一、選擇題3植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果是（C）A.產(chǎn)生雜種植株B產(chǎn)生雜種細(xì)胞C原生質(zhì)體融合D形成愈傷組織4科學(xué)家把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合，培育出的驅(qū)蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的達(dá)到驅(qū)蚊且對人體無害的效果。下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的敘述中，錯誤的是（C）A驅(qū)蚊草的培育屬于細(xì)胞工程育種，其優(yōu)點(diǎn)是能克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙B驅(qū)蚊草培育過程要用到纖維素酶果膠酶、PEG等試劑或離心、振動、電刺激等方法C驅(qū)蚊草培育過程是植物體細(xì)胞雜交，不同于植物組織培養(yǎng)無愈傷組織和試管苗形成D驅(qū)蚊草不能通過天竺葵和香茅草雜交而獲得是因?yàn)椴煌锓N間存在生殖隔離5（2005，上海）將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)，下列條件中不需要的是（D）A、具有完整細(xì)胞核的細(xì)胞B、一定的營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素C、離體狀態(tài)D、導(dǎo)入指定基因6植物體細(xì)胞雜交的目的中錯誤的是（A）A.把兩個(gè)植物體的優(yōu)良性狀集中在雜種植株上B.獲得雜種植株C.克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙D.實(shí)現(xiàn)原生質(zhì)體的融合7植物組織培養(yǎng)的用途中不正確的是（D）A.快速繁殖B.生產(chǎn)新品種C生產(chǎn)生物堿D生產(chǎn)白細(xì)胞介素28A種植物的細(xì)胞和B種植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)如右圖所示（僅顯示細(xì)胞核），將A、B兩種植物細(xì)胞去掉細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合，形成單核的雜種細(xì)胞，若經(jīng)過組織培養(yǎng)后得到了雜種植株，則該雜種植株是（）A二倍體；基因型是DdYyRrB三倍體；基因型是DdYyRrC四倍體；基因型是DdYyRrD四倍體；基因型是DDddYYyyRRrr9以下關(guān)于原生質(zhì)的敘述，正確的是（C）A、原生質(zhì)泛指細(xì)胞內(nèi)的基質(zhì)B、原生質(zhì)就是細(xì)胞質(zhì)C、一個(gè)動物細(xì)胞就是一團(tuán)原生質(zhì)D、細(xì)胞膜、細(xì)胞核和細(xì)胞壁是原生質(zhì)10不能人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法是（D）A.振動B.電刺激C.PEG試劑D重壓11植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是（C）A.給予適宜的營養(yǎng)和外界條件B.導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因C.脫離母體后給予適宜營養(yǎng)和外界條件D.將成熟篩管細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞內(nèi)12細(xì)胞具有全能性的原因是（C）A.生物體細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能B.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都具有全能性C.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有個(gè)體發(fā)育的全部基因D.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都是由受精卵發(fā)育來的13植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化是指（C）A.植物體的分生組織通過細(xì)胞分裂產(chǎn)生新細(xì)胞B未成熟的種子經(jīng)過處理培育出幼苗的過程C植物的器官、組織或細(xì)胞，通過離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的過程14.下列植物細(xì)胞全能性最高的是（B）A.形成層細(xì)胞B.韌皮部細(xì)胞C.木質(zhì)部細(xì)胞D.葉肉細(xì)胞15植物組織培養(yǎng)過程的順序是（A）離體的植物器官、組織或細(xì)胞根、芽愈傷組織脫分化再分化植物體ABCD16下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述不正確的是（C）A.在細(xì)胞整體水平上定向改變遺傳物質(zhì)B在細(xì)胞器水平上定向改變遺傳物質(zhì)C在細(xì)胞器水平上定向改變細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)D在細(xì)胞整體水平上獲得細(xì)胞產(chǎn)品17下列細(xì)胞全能性最高的是（C）A植物的卵細(xì)胞B植物的精子細(xì)胞C被子植物的受精卵D被子植物的的葉肉細(xì)胞18植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是（A）A、產(chǎn)生新的細(xì)胞壁B、細(xì)胞膜發(fā)生融合C、細(xì)胞膜發(fā)生融合D、細(xì)胞膜發(fā)生融合19.植物體細(xì)胞雜交的目的是（D）A.用酶解法去掉細(xì)胞壁分離出有活力的原生質(zhì)體B.以人工誘導(dǎo)法使兩個(gè)不同植物的原生質(zhì)體融合C.用植物組織培養(yǎng)法培養(yǎng)融合的原生質(zhì)體得到雜種植株D.通過以上三者來完成20.下列提法正確的是：（D）A、原生質(zhì)專指細(xì)胞質(zhì)B、人體內(nèi)的水都屬于原生質(zhì)C、細(xì)胞核不是原生質(zhì)D、一個(gè)動物細(xì)胞就是一團(tuán)原生質(zhì)21（多選）有關(guān)原生質(zhì)體的下列敘述中，正確的是(AB)A組成原生質(zhì)體的主要生命物質(zhì)是蛋白質(zhì)和核酸B原生質(zhì)體包括細(xì)胞膜、液泡膜及兩者之間的原生質(zhì)C被脫掉細(xì)胞壁的植物裸露細(xì)胞是原生質(zhì)體D原生質(zhì)體只能用于植物細(xì)胞工程緒論復(fù)習(xí)題及參考答案一、填空：1、根據(jù)培養(yǎng)的材料，植物組織培養(yǎng)分：愈傷組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)等類型。2、植物組織培養(yǎng)的發(fā)展分為三個(gè)階段：萌芽階段、奠基階段和快速發(fā)展和應(yīng)用階段。3、1902年，Haberlandt提出了植物細(xì)胞“全能性”學(xué)說，1934年，White出版了植物組織培養(yǎng)手冊從而使植物組織培養(yǎng)為一門新興學(xué)科。二、名詞解釋：1、植物組織培養(yǎng)(planttissueculture)：是指通過無菌和人工控制的環(huán)境條件下，利用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，對離體的植物器官、組織、細(xì)胞及原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)，使其再生細(xì)胞或完整植株的技術(shù)。由于培養(yǎng)材料已脫離了母體，又稱為植物離體培養(yǎng)（Plantcultureinvitro）。2、脫分化（dedifferentiation）：由高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細(xì)胞的脫分化。3、再分化（redifferentiation）：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)又可以重新分化成根或芽等器官，這一過程稱為植物細(xì)胞的再分化。4、外植體(explant)：由活體（invivo)植物體上切取下來的，用于組織培養(yǎng)的各種接種材料。包括各種器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體等5、愈傷組織(callus)：原指植物在受傷之后于傷口表面形成的一團(tuán)薄壁細(xì)胞，在組培中則指在離體培養(yǎng)過程中形成的具有分生能力的一團(tuán)不規(guī)則的薄壁細(xì)胞，多在植物體切面上產(chǎn)生。三、問答題：1、簡述植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)？植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是細(xì)胞全能性學(xué)說，即植物體的每一個(gè)細(xì)胞都攜帶有一套完整的基因組，并具有發(fā)育成為完整植株的潛在能力。2、植物組織培養(yǎng)有哪些特點(diǎn)？（1）培養(yǎng)條件可以人為控制（2）生長周期短，繁殖率高：（3）管理方便，利于工廠化生產(chǎn)和自動化控制：3、植物組織培養(yǎng)的分類？（1）根據(jù)培養(yǎng)對象不同：組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、胚胎培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)等；（2）根據(jù)培養(yǎng)物培養(yǎng)過程：初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)；（3）根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)：固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)。4、植物組織培養(yǎng)主要應(yīng)用于哪些方面？（1）快速繁殖運(yùn)用組織培養(yǎng)的途徑，一個(gè)單株一年可以繁殖幾萬到幾百萬個(gè)植株；（2）種苗脫毒針對病毒對農(nóng)作物造成的嚴(yán)重危害，通過組織培養(yǎng)可以有效地培育出大量的無病毒種苗；（3）培育和創(chuàng)制新品種利用組織培養(yǎng)可以使難度很大的遠(yuǎn)緣雜交取得成功，從而育成一些罕見的新物種；（4）大量生產(chǎn)次生代謝物質(zhì)通過植物細(xì)胞培養(yǎng)獲得的生物堿、維生素、色素、抗生素以及抗腫瘤藥物不下50多個(gè)大類，其中已有30多種次生物質(zhì)的含量在人工培養(yǎng)時(shí)已達(dá)到或超過親本植物的水平。植物細(xì)胞次生物質(zhì)的研制與生產(chǎn)碩果累累，后來居上。（5）植物種質(zhì)資源的離體保存植物組織培養(yǎng)結(jié)合超低溫保存技術(shù)，可以給植物種質(zhì)保存帶來一次大的飛躍。因?yàn)楸４嬉粋€(gè)細(xì)胞就相當(dāng)于保存一粒種子，但所占的空間僅為原來的幾萬分之一，而且在-193度的液氮中可以長時(shí)間保存，不像種子那樣需要年年更新或經(jīng)常更新。（6）人工種子人工種子便于貯藏和運(yùn)輸，適合機(jī)械化播種；繁殖速度快，不受季節(jié)和環(huán)境限制，利于工廠化生產(chǎn)；體細(xì)胞胚由無性繁殖體系產(chǎn)生，可以固定雜種優(yōu)勢。植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)題（習(xí)題）一、名詞解釋愈傷組織：在培養(yǎng)基上由培養(yǎng)物產(chǎn)生的無序生長且沒有一定結(jié)構(gòu)的薄壁細(xì)胞團(tuán)。外植體：在組織培養(yǎng)中，由植物體上取下來進(jìn)行離體培養(yǎng)的那部分組織或器官.脫分化：由高度分化的植物器官，組織或細(xì)胞經(jīng)過離體培養(yǎng)，產(chǎn)生愈傷組織的過程。半連續(xù)培養(yǎng)：利用培養(yǎng)罐進(jìn)行大量細(xì)胞培養(yǎng)的一種方式。無性系變異：由任何形式的細(xì)胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株所表現(xiàn)出來的差異。胚狀體：在離體植物細(xì)胞、組織或器官培養(yǎng)過程中，由一個(gè)或一些體細(xì)胞，經(jīng)過胚胎發(fā)生和發(fā)育過程，形成的與合子胚相類似的結(jié)構(gòu)。看護(hù)培養(yǎng)：用同種或異種材料的愈傷組織作為看護(hù)組織培養(yǎng)細(xì)胞的一種方法。無融合生殖：由配囊中卵細(xì)胞以外的其他細(xì)胞發(fā)育成的單倍體植株。種質(zhì)：親代通過生殖細(xì)胞活體細(xì)胞直接傳遞給子代并決定固有生物性狀的遺傳物質(zhì)。懸浮培養(yǎng)：將游離的植物單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，按一定的細(xì)胞密度在受到不斷拉動或搖動的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的一種方式。早熟萌發(fā)：在培養(yǎng)后迅速萌發(fā)為幼苗，不繼續(xù)進(jìn)行胚狀生長，超過正常發(fā)育階段。選擇壓：在2個(gè)相對性狀之間，一個(gè)性狀被選擇而生存下來的優(yōu)勢。細(xì)胞全能性：任何有完整細(xì)胞核的植物細(xì)胞具有全部的遺傳信息，在一定條件下，均具有分化，發(fā)育成完整植株的潛在能力。條件培養(yǎng)基：在培養(yǎng)集中加入高密度的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)過一段時(shí)間后，這些細(xì)胞向培養(yǎng)基中分泌一些促進(jìn)細(xì)胞生長的活性物質(zhì)，使培養(yǎng)基條件化，使原來在合成培養(yǎng)基上不能分裂的細(xì)胞發(fā)生分裂。離體授粉：將未授粉的胚珠，子房或柱頭從母體上分離下來，進(jìn)行無菌培養(yǎng)，并通過一定的方式授給 無菌花粉，使其在試管內(nèi)實(shí)現(xiàn)受精的技術(shù)。同步化培養(yǎng)：培養(yǎng)基中大多數(shù)細(xì)胞都能同時(shí)通過細(xì)胞周期的各個(gè)階段。植板率：(每個(gè)平板上形成的細(xì)胞團(tuán)數(shù) / 每個(gè)平板上接種的細(xì)胞總數(shù)) * 100%、繼代培養(yǎng)：對來自于外植體所增殖的培養(yǎng)物通過更換新鮮培養(yǎng)基及不斷切割分離進(jìn)行的連續(xù)多代的培養(yǎng)。無性系：由任何形式的細(xì)胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株。細(xì)胞融合：在自發(fā)或人工誘導(dǎo)下，兩個(gè)不同基因型的細(xì)胞或原生質(zhì)體融合形成一個(gè)雜種細(xì)胞。二、填空題1、根據(jù)外植體的的種類不同，組織培養(yǎng)可以分為組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)、原生質(zhì)培養(yǎng)和胚胎培養(yǎng)五種類型。根據(jù)培養(yǎng)基的物理性狀，組織培養(yǎng)可以分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩種類型。2、對高溫高壓條件下易降解變質(zhì)的物質(zhì)，在滅菌時(shí)應(yīng)采用過濾滅菌方法。3、植物組織培養(yǎng)過程中，細(xì)胞分裂素與生長素比值（CTK/IAA）高低決定了器官的分化類型，其比值高有利于芽，比值低有利于根，而兩者相等時(shí)則促進(jìn)愈傷組織形成。4、在細(xì)胞懸浮培養(yǎng)過程中，細(xì)胞的生長周期呈“S”型曲線，可分為五個(gè)階段，分別是延滯期、對數(shù)生長期、直線生長期、緩慢期和靜止期。5、酒精和升汞是兩種常用的外植體表面消毒劑，它們的使用濃度分別為70-75%和 0.1-1%；消毒時(shí)間的范圍分別為 0.2-2min和 2-15min。6、單細(xì)胞培養(yǎng)的方法有平板培養(yǎng)法、看護(hù)培養(yǎng)法、微室培養(yǎng)法和條件培養(yǎng)基培養(yǎng)法等四種方法。7、在細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)，實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)細(xì)胞同步化的方法有饑餓法和抑制法。8、實(shí)現(xiàn)細(xì)胞全能性的條件是組織或器官解離和給予所需的營養(yǎng)物質(zhì)。9、常用于誘導(dǎo)愈傷組織的植物激素是2，4-D。10、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為0.10.25mm。11、在冷凍保存中，對植物材料傷害最小的防護(hù)劑一般是二甲基亞砜（DMSO)。12、支撐植物組織培養(yǎng)作為一門技術(shù)的兩個(gè)重要模式是培養(yǎng)基模式和激素調(diào)控模式。13、無病毒植株的鑒定方法主要有直接測定法、指示植物法、抗血清鑒定法、核酸分析法和電鏡顯微檢測法等14、用于細(xì)胞活力的測定方法有 TTC、FDA和 伊凡藍(lán)染色法。15、通過離體培養(yǎng)可獲得單倍體植株的材料有花粉和未受精胚珠。16、用來做莖尖脫毒的外植體大小一般為小于0.3mm。17、植物離體快速繁殖的方式中，遺傳性狀穩(wěn)定的有器官型、短枝發(fā)生型。18、典型的人工種子由體細(xì)胞胚、人工胚乳和人工種皮構(gòu)成。19、原生質(zhì)體的分離純化過程中要添加滲透壓穩(wěn)定劑和原生質(zhì)膜穩(wěn)定劑提高原生質(zhì)產(chǎn)量和活力，屬于質(zhì)膜穩(wěn)定劑的有葡聚糖硫酸鉀 、CaCl2。20、根據(jù)不同植物的生長發(fā)育特點(diǎn)，快速繁殖的途徑有短株發(fā)生型、器官發(fā)生型、胚胎發(fā)生型和原球莖發(fā)生型。21、組織培養(yǎng)中碳源的主要作用是合成有機(jī)物和維持合適的滲透壓。22、目前用于細(xì)胞融合的方法主要有自發(fā)融合和誘導(dǎo)融合兩種。23、原生質(zhì)體的純化方法有沉降法、懸浮法和界面法。24、懸浮培養(yǎng)中細(xì)胞生長的測定方法：細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞密實(shí)體積（PCV）及細(xì)胞總體積、細(xì)胞鮮重和干重、細(xì)胞有絲分裂的指數(shù)。25、振蕩培養(yǎng)的目的：改善液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)材料的通氣狀況。26、單倍體育種的主要有優(yōu)點(diǎn)是：縮短育種年限、后代不出現(xiàn)性狀分離。27、常用于誘導(dǎo)胡蘿卜胚性愈傷組織的植物激素是生長素，胚狀體的形成則是在細(xì)胞分裂素的促進(jìn)下。28、在組織培養(yǎng)的發(fā)展史上，1958年Steward報(bào)道了胡蘿卜細(xì)胞懸浮培養(yǎng)；1978年Melchers報(bào)道了馬鈴薯和番茄的融合培養(yǎng)；1960年Cooking報(bào)道了誘導(dǎo)雞紅細(xì)胞與酵母細(xì)胞融合培養(yǎng)。29、在胚乳培養(yǎng)中，由裸子植物胚乳發(fā)育成的植株為單倍體；被子植物胚乳發(fā)育成的植株為三倍體。30、組織培養(yǎng)中的突變可分為體細(xì)胞無性系變異和加選擇壓（化學(xué)物質(zhì)）誘導(dǎo)產(chǎn)生的變異。三、單選題1、常用于誘導(dǎo)愈傷組織的植物激素是（ B ）。A 6-BA B 2，4-D C IBA D ZT2、在用物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合時(shí)，下列哪種方法不在此列（ C ）。A 電刺激 B 顯微操作 C 多聚化