新生兒溶血病血清學檢查操作規(guī)程.doc

遵醫(yī)附院輸血科主題：血清學技術(shù)操作規(guī)范編號：01-3 內(nèi)容：新生兒溶血病血清學檢查操作規(guī)程第1頁 共 3 頁 版本2008 修訂頒布日期：2008年8月修訂日期：2008年7月新生兒溶血病血清學檢查操作規(guī)程原理新生兒溶血病是由母嬰血型不合引起，可見于ABO、Rh及MN等血型系統(tǒng)。胎兒和新生兒紅細胞被來自母親的IgG抗體包被，并在嬰兒的單核-巨噬細胞系統(tǒng)（網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)）受到免疫性破壞，出現(xiàn)溶血，表現(xiàn)出相應的癥狀。病情嚴重程度因個體差異、抗體類型、抗體效價等不同而異。目的規(guī)范新生兒溶血病血清學檢查操作；查找新生兒溶血病發(fā)生的原因，協(xié)助臨床進行實驗室診斷及治療；保證臨床用血的安全性和有效性。職責輸血科技術(shù)人員負責新生兒溶血病血清學檢查。適用范圍母嬰血型不合引起的新生兒溶血病的血標本。支持文件中國輸血技術(shù)操作規(guī)程（血站部分）.天津：天津科學技術(shù)出版社1997輸血技術(shù)學第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002輸血科（血庫）工作手冊莞市中心血站2006材料或設備1、 材料 抗-A、抗-D定型試劑、抗球蛋白試劑、ABO反定型試劑紅細胞、篩選細胞、譜細胞、生理鹽水、新生兒靜脈血、產(chǎn)婦及患兒父親血標本2、 設備 血清雪專用離心機、電熱恒溫水浴箱、水浴振蕩儀、顯微鏡、小試管、滴管、小玻棒操作步驟一、 血標本采集及處理采集患兒及其父親與母親血標本各3-5ml，分離出血清，配制3%-5%紅細胞鹽水懸液。如果患兒血標本為不抗凝血，則在一小玻璃漏斗頸部置一適當大小的棉球上，一邊加生理鹽水，一邊用玻棒擠壓血塊，收集漏斗下面的紅細胞懸液。二、 患兒血標本具體操作執(zhí)行ABO和Rh血型鑒定操作規(guī)程。ABO血型測定只做正定型。1、 直接抗球蛋白試驗具體操作執(zhí)行抗球蛋白操作試驗規(guī)程中的直接抗球蛋白試驗部分。2、 游離抗體檢測1、 取小試管3支，分別標明A、B、O細胞，每管加患兒血清2滴，再分別加入3%-5%的A、B、O、反定型試劑紅細胞懸液1滴。2、 37致敏1h后取出，若發(fā)生凝集，不必繼續(xù)往下做。3、 若不凝集，用鹽水充分洗滌3次反應物后加入抗球蛋白血清1滴。1300g離心15s，輕輕懸浮細胞，肉眼觀察凝集反應，記錄結(jié)果。若肉眼不見凝集，以顯微鏡檢查。按表一析結(jié)果。3、放散實驗依據(jù)結(jié)果，采用合適的放散方法進行放散試驗，具體操作執(zhí)行放散試驗操作規(guī)程，放散試驗結(jié)果判斷見表二三、 患兒母親血標本1、 血型鑒定（執(zhí)行ABO和Rh（D）血型鑒定操作規(guī)程）2、 IgG抗-A（B）效價測定具體操作執(zhí)行IgG抗-A（B）效價測定規(guī)程3、 抗體篩選、鑒定試驗具體操作執(zhí)行紅細胞血型抗體篩選、鑒定操作規(guī)程四、 患兒父親血標本ABO和Rh（D）血型鑒定。具體操作執(zhí)行ABO和Rh（D）血型鑒定操作規(guī)程五、根據(jù)表三，分析結(jié)果表一患兒血清中游離抗體檢查結(jié)果意義指示紅細胞意義Ac Bc Oc+ - - + -+ + -+/- +/- +- - -游離的抗-A游離的抗-B游離的抗-A、抗-B或者抗-AB游離的ABO系統(tǒng)以外抗體無游離抗體表二患兒紅細胞抗體釋放試驗意義指示紅細胞意義Ac Bc Oc+ - - + -+ + -+/- +/- +- - -放散出IgG抗-A放散出IgG抗-B放散出抗-AB，或同時放散出IgG抗-A或抗-B放散出ABO血型以外的抗體沒有放散抗體表三新生兒溶血病檢測結(jié)果判斷直抗試驗 游離試驗 釋放試驗 結(jié)論 - - - 不能證實為血型免疫引起的新生兒溶血 + - - 可疑為新生兒溶血 - + - 可疑為新生兒溶血 - - + 能證實為血型免疫引起的新生兒溶血 + - + 能證實為血型免疫引起的新生兒溶血 + + - 能證實為血型免疫引起的新生兒溶血 - + + 能證實為血型免疫引起的新生兒溶血 + + + 能證實為血型免疫引起的新生兒溶血 注意事項1、 新生兒血標本要求比較高，要求采集血液4-5ml，分為大約相等的兩份，一份不抗凝，另一份采用EDTA抗凝。2、 如果只有不抗凝血標本，不宜在試管中用竹簽擠壓血塊。3、 臍血標本不宜作為檢測標本，尤其對ABO新生兒溶血病容易出現(xiàn)無臨床意義的陽性指標。4、 一旦懷疑為新生兒溶血病時，應立即盡送檢，5天后采集的血標本檢出陽性率的機會很少。5、 母親IgG抗-A抗-B效價高低具有參考價值說法不一，劉達莊主編免疫血液學2002上?？茖W技術(shù)出版社P137 為64以上有參考意義。王培華主編輸血技術(shù)學P233效價