傳染性疾病標本采集方法.doc

. 傳染性疾病標本采集方法 標本采集、 運送與報告操作規(guī)程 一、 血培養(yǎng)指征 患者出 現(xiàn)寒戰(zhàn)， 體溫超過 38或低體溫， 懷疑血流感染時， 尤其存在以下情況時， 應(yīng)抽血做細菌和真菌培養(yǎng)： 醫(yī)院內(nèi)肺炎； 留置中心靜脈導(dǎo)管超過 72 h； 感染性心內(nèi)膜炎； 骨髓炎； 有嚴重基礎(chǔ)疾病、 免疫缺陷伴全身感染癥狀； 臨床醫(yī)生懷疑有血流感染可能的其他情況。 二、 采血時機 一旦懷疑有血流感染可能， 應(yīng)立即采血做血培養(yǎng)， 最好在抗菌治療前或停用抗菌藥物 24 h 后， 以寒戰(zhàn)、 發(fā)熱時采集為宜。 三、 采血流程 （ 一） 消毒 1 培養(yǎng)瓶消毒程序： 用消毒液消毒培養(yǎng)瓶橡皮塞， 待干燥后使用。 2 皮膚消毒程序： 用消毒液從穿刺點向外畫圈消毒， 至消毒區(qū)域直徑達 5 cm 以上， 待消毒液揮發(fā)干燥后（ 常需 30 s 以上） 穿刺采血。 （ 二） 靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種 成人用 注射器無菌穿刺取血后， 排盡針頭內(nèi)空氣， 直接注入血培養(yǎng)瓶， 勿換針頭（ 如果行第二次穿刺或用頭皮針取血時， 應(yīng)換針頭）， 先注于厭氧培養(yǎng)瓶， 避免注入空氣， 然后注入需氧培養(yǎng)瓶， 輕輕混勻以防血液凝固。 近年來， 臨床普遍采用負壓血培養(yǎng)瓶， 將血從患者靜脈直接吸入血培養(yǎng)瓶， 減少污染環(huán)節(jié)。 （ 三） 注意事項 1 檢驗單需注明抗菌藥物使用情況、 血液采集時間和部位、 臨床診 斷等患者信息。 2 采血部位通常為肘靜脈， 疑為細菌性心內(nèi)膜炎時以肘動脈或股動脈采血為宜， 切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈處采血。 除非懷疑有導(dǎo)管相關(guān)的血流感染， 否則不應(yīng)從留置靜脈或動脈導(dǎo)管取血， 因為導(dǎo)管易被皮膚正常菌群污染。 3 采血次數(shù)： 對于成年患者， 應(yīng)該同時分別在兩個部位采集血標本，在兩個不同部位分離到同樣菌種才能確定是病原菌。 4 細菌性心內(nèi)膜炎： 在 24 h 內(nèi)取血 3 次， 每次間隔不少于 30 min;必要時次日 再做血培養(yǎng) 2 次。 5 采血量： 以培養(yǎng)基與血液之比 10： 1 為宜， 以稀釋血液中的抗菌藥物、 抗體等殺菌物質(zhì)。 采血量過少會明顯降低陽性率。 成人每次每培養(yǎng)瓶采血 8 10 ml， 嬰幼兒每次每培養(yǎng)瓶采血 2 ml。 四、 運送要求 1 所有標本采集后都應(yīng)立即送往實驗室， 最好在 2h 內(nèi)。 如果不能及時送檢， 宜置于室溫環(huán)境。 血培養(yǎng)瓶送到檢驗科放入培養(yǎng)箱前， 不應(yīng)暫存于冰箱內(nèi)。 2 送檢標本應(yīng)正確粘貼條形碼， 注明采樣時間和送檢時間。 3 安全防護： 放標本的容器必須防漏， 禁止將滲漏的標本送往實驗室。 五、 報告要求 （ 一） 緊急口 頭（ 電話） 報告 血培養(yǎng)出現(xiàn)陽性報警時， 立即進行革蘭氏染色、 鏡檢， 并在最短時間內(nèi)將結(jié)果向臨床主管醫(yī)生進行緊急口 頭（ 電話） 報告。 口 頭報告包含以下內(nèi)容， 并記錄在案。 (1) 報告者全名 （ 或工號）； (2) 報告的時間； XXXX 年 XX 月 XX 日 XX 時 XX 分（ 24 小時制） (3) 所聯(lián)系醫(yī)生的全名 （ 或工號）； (4) 報告鏡檢結(jié)果并強調(diào)其緊急價值； (5) 確認臨床醫(yī)生收到報告并復(fù)述結(jié)果。 （ 二） 最終結(jié)果（ 書面） 報告 (1) 無菌生長（ 培養(yǎng) 5 天無需氧菌和厭氧菌生長）； (2) 陽性培養(yǎng)結(jié)果（ 最終鑒定結(jié)果、 最終藥敏結(jié)果）。 （ 三） 其他報告和記錄 1 標本被拒收時， 需即刻通知臨床立即重新采血， 并記錄在案。 2 最終結(jié)果與緊急口 頭報告結(jié)果不符， 需要變更時， 需立即通知臨床， 同時必須在書面報告上提供正確的結(jié)果， 注明變更的內(nèi)容。 3 其他需臨床注意的事項的記錄， 如： 采血量不足、 標本轉(zhuǎn)運時間過長、 標本采集份數(shù)不夠等信息。 痰標本采集與 運送標準操作規(guī)程 一、 采集目 的 一般可用于普通細菌、 分枝桿菌、 真菌和軍團菌的涂片或培養(yǎng)檢測，經(jīng)氣管穿刺吸引 物可用 于厭氧菌的檢測。 二、 一般原則 1 采集標本的最佳時機應(yīng)在使用 抗菌藥物之前。 2 宜采集清晨第二口 痰液。 3 對于普通細菌性肺炎， 痰標本送檢每天 1 次， 連續(xù) 2 3 天。 不建議 24 h 內(nèi)多次采樣送檢， 除非痰液外觀性狀出 現(xiàn)改變。 4 懷疑分枝桿菌感染者， 應(yīng)連續(xù)收集 3 天清晨痰液送檢。 三、 采集方法 （ 一） 自 然咳痰法與霧化導(dǎo)痰法 1 用 物準備： 無菌容器（ 盒）、 生理鹽水(250 ml 或 500 ml) 、 化驗單。 2 核對患者床號、 姓名 等。 3 無痰或痰量極少者可用 3% 5%氯化鈉溶液 5 ml 霧化吸入約 5 min后留取痰液。 4 如有可能， 應(yīng)在醫(yī)護人員 直視下留取清晨第二口 痰。 囑咐患者留取前摘去牙托， 清潔口 腔， 如刷牙后反復(fù)用生理鹽水漱口 ； 深吸氣后用力自 氣管深部咳出痰液， 置無菌容器內(nèi)。 應(yīng)盡可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入樣品， 不應(yīng)用 紙巾 包裹痰液。 （ 二） 支氣管鏡法 鼻或口 腔插入支氣管鏡。 常用采集方法有經(jīng)支氣管鏡吸引 、 支氣管肺泡灌洗、 防污染毛刷采樣或防污染支氣管肺泡灌洗等。 （ 三） 經(jīng)人工氣道吸引 法 1 用 物準備： 負 壓吸引 器、 生理鹽水、 一次性吸痰管、 無菌手套，無菌容器（ 試管）、 化驗單。 2 核對患者床號、 姓名 等。 3 將患者頭部轉(zhuǎn)向操作者一側(cè)。 4 進行手衛(wèi)生后將一次性吸痰管末端拆開， 連接吸引 器， 調(diào)節(jié)吸引器至適宜負 壓(成人： 40. 0 53. 3 kPa; 小兒： 40. 0 kPa) 。 5 將一次性吸痰管外包裝去除， 戴手套持吸痰管試吸生理鹽水， 檢查管道是否通暢。 6 折疊一次性吸痰管末端， 插入口 腔或鼻腔或人工氣道至適宜深度， 放開吸痰管末端， 輕柔、 靈活、 迅速地左右旋轉(zhuǎn)上提吸痰管吸痰。 見吸痰管內(nèi)有痰液吸出， 即折疊一次性吸痰管退出 ， 將一次性吸痰管與 吸引器分離(使用人工呼吸機者， 一次吸痰時間不超過 15 s， 吸痰前后需吸入高濃度氧氣 1 2 min) 。 7 將痰液注入無菌容器（ 試管） 內(nèi)， 如痰液黏稠可用一次性針筒向吸痰管末端注入少量生理鹽水， 將痰液沖人無菌容器（ 試管） 內(nèi)。 四、 運送和保存 應(yīng)在 2h 之內(nèi)送至實驗室， 否則 應(yīng) 4冷藏， 但放置時間不可超過 24 h。 尿液標本采集和運送標準操作規(guī)程 一、 采集時機 宜為抗菌藥物使用之前的清晨第一次尿液。 二、 采集方法 （ 一） 清潔中段尿 1 女性： 采樣前用 肥皂水或 0. 1%的高錳酸鉀溶液等沖洗外陰， 用手指分開陰唇， 棄其前段尿， 不終止排尿， 留取中段尿 10 20 ml 于無菌容器內(nèi)。 2 男 性： 采樣前用肥皂水或 0. 05% 0. 1%的聚維酮碘（ 碘伏） 溶液等消毒液清洗尿道口 ， 擦干后上翻包皮， 棄其前段尿， 不終止排尿， 留取中段尿 10 20 ml 于無菌容器內(nèi)。 （ 二） 恥骨上膀胱穿刺 主要用 于厭氧菌培養(yǎng)或留取標本困難的嬰兒、 脊柱損傷患者的尿液采集。 先用 0. 25%的聚維酮碘溶液等消毒液消毒穿刺部位皮膚， 然后使 用無菌注射器直接從恥骨聯(lián)合與 臍連線上高于恥骨聯(lián)合2 cm處刺入膀胱吸取尿液 10-20 ml 于無菌容器內(nèi)。 （ 三） 導(dǎo)尿管尿 1 直接導(dǎo)尿法： 使用 0. 05% 0. 1%的聚維酮碘溶液等消毒劑消毒會陰局部， 用 導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱， 先棄其前段尿液約 15 ml， 再留取中段尿液 10 20 ml 于無菌容器內(nèi)。 2 留置導(dǎo)尿管法： 醫(yī)院內(nèi)尿路感染中， 臨床最常用 此法。 采集前先夾住導(dǎo)尿管， 采集時則 松管棄其前段尿液， 使用 0. 25% 0. 5%的聚維酮碘溶液等消毒劑消毒導(dǎo)尿管的采樣部位， 使用 無菌注射器斜刺入導(dǎo)尿管（ 從采樣口 或靠近尿道的導(dǎo)尿管管壁） 抽取 10 20 ml 尿液于無菌容器內(nèi)。 3 回腸造口 導(dǎo)尿管法： 摘除導(dǎo)管， 棄去里面的尿液， 先用 0. 05%0. 1%的聚維酮碘溶液等消毒劑消毒吻合口 ， 再將導(dǎo)尿管插入到清潔的吻合口 ， 直至筋膜的深部采集 1020 ml 尿液于無菌容器內(nèi)。 （ 四） 小兒收集包 對于無自 控能力的小兒可應(yīng)用收集包采集尿液， 這種裝置由于很難避免會陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性， 所以只 有在檢驗結(jié)果為陰性時才有意義。 如果檢驗結(jié)果為陽性， 應(yīng)結(jié)合臨床進行分析， 必要時可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍羧∧蛞哼M行復(fù)檢。 三、 標本運送 標本采集后應(yīng)及時送檢并接種， 室溫下保存時間不應(yīng)超過 2 h（ 夏季保存時間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存）。 如果不能及時運送或接種， 應(yīng) 4冷藏， 但保存時間也不應(yīng)超過 8h。 四、 注意事項 1 不應(yīng)從集尿袋中采集尿液。 2 尿液中不應(yīng)加防腐劑或消毒劑。 3 若尿液培養(yǎng)前患者曾使用 抗菌藥物， 應(yīng)反復(fù)多次送檢。 4 多次采集或 24 h 尿不應(yīng)用于尿液培養(yǎng)。 5-除非進行流行病學(xué)調(diào)查， 不應(yīng)對長期留置導(dǎo)尿管患者常規(guī)進行尿液培養(yǎng)。 6 培養(yǎng)結(jié)果應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)、 菌落計數(shù)以及微生物種類等， 進行綜合判斷。 糞便標本采集法 【目 的】 1、 常規(guī)糞標本 檢查糞便的顏色、 形狀及有無膿血。 2、 隱血糞標本 檢查糞便內(nèi)肉眼不能看見的微量血液。 3、 寄生蟲及蟲卵糞標本 檢查寄生蟲成蟲、 幼蟲及蟲卵并計數(shù)， 進行濃縮集卵、 日 本血吸蟲毛蚴孵化等。 4、 培養(yǎng)糞標本 檢查糞便中的致病菌。 【操作前準備】 1、 患者評估 （ 1） 了 解患者的臨床診斷及合作能力。 （ 2） 了 解需做的檢查項目 ， 以明確收集糞便標本的種類及注意事項。 2、 患者準備 使患者了 解留取糞標本的目 的、 意義和方法， 能夠配合， 3、 用物準備 干凈便盆， 常規(guī)檢查應(yīng)備集便盒（ 內(nèi)附棉簽 2 支 ） ， 糞便培養(yǎng)應(yīng)備培養(yǎng)皿， 寄生蟲檢查應(yīng)備寄生蟲檢便盆。 【操作步驟】 1、 核對醫(yī)囑， 貼檢驗單副聯(lián)于集便盒上。 2、 核對患者姓名 ， 做好解釋。 3、 告知患者正確的留取方法。 （ 1） 常規(guī)糞標本采集： 用 棉簽取較中 央的糞便或膿血黏液部分少許于集便盒內(nèi)。 （ 2） 培養(yǎng)糞標本采集： 解大便之前用 消毒液沖洗肛門， 用無菌棉簽取糞便中央處置于培養(yǎng)皿中， 蓋好蓋子。 如患者無便意時可用 無菌棉簽蘸取等滲鹽水， 由肛門插入 6-7cm， 輕輕轉(zhuǎn)動棉簽取出糞便少許，插入培養(yǎng)試管中送檢。 （ 3） 寄生蟲及蟲卵標本采集： 如查阿米巴原蟲， 便盆需要先加溫， 因阿米巴原蟲在低溫下失去活力難以找到， 便后連同便盆立即送檢；查絳蟲有時需多次收集糞便， 查找絳蟲頭； 查蟲卵則 需取大便的黏液膿血部分； 查蟯蟲蟲卵， 需在患者清晨起床前用特制的肛門拭子輕擦肛周皺褶處， 放入置有溫鹽水的試管中立即送檢。 4、 標本及時送檢， 做好記錄， 追蹤記錄檢驗結(jié)果。 【注意事項】 1、 采集培養(yǎng)標本應(yīng)取未接觸便盆的大便， 注意無菌操作， 以免因污染而影響培養(yǎng)效果。 2、 若留取的標本時做隱血試驗， 則 囑患者在檢查前三天禁食肉、 肝、肉類食物、 含大量葉綠素的食物和含鐵劑的藥物。 3、 如留取寄生蟲或蟲卵糞標本時， 當(dāng) 服用 驅(qū)蟲劑 或做血吸蟲孵化檢查， 需留取全部糞便送檢。 急性遲緩性麻痹糞便標本： 在麻痹出現(xiàn)后 14 天內(nèi)采集兩份糞便標本（ 臨床高度疑似脊灰病例、高危病例和 0 劑次 AFP 病例采集 3 份） 至少間隔 24 小時， 每份標本重量 5 克（ 約為標本盒的 1/2） 置專用 糞便盒內(nèi)， -2