縮宮素的質(zhì)量鑒定 畢業(yè)論文

u)0畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文） 題 目： 縮宮素的質(zhì)量鑒定 學(xué) 院： 藥學(xué)院 專 業(yè)： 藥學(xué)類 班 級(jí)： 藥學(xué) 0803 姓 名： 導(dǎo)教師： 授 起訖日期： 2012 年 2 月 2012 年 6 月 摘 要 I 縮宮素的質(zhì)量鑒定 摘 要 縮宮素為一種多肽激素，自 20 世紀(jì) 50 年代合成純化的縮宮素后，一直被廣泛應(yīng)用于臨床，尤其在引產(chǎn)或催產(chǎn)中有著重要的使用價(jià)值，為產(chǎn)科必備藥，所以縮宮素需求量巨大。 通過對(duì) 本品的性狀、鑒別、檢查、效價(jià)測定等方面進(jìn)行研究， 本文 確定縮宮素生物測定法為本品效價(jià)的測定方法，本法具有簡便、 準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。參照縮宮素溶液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和中國藥典 2005 年版二部的有關(guān)規(guī)定 ，對(duì)公司生產(chǎn)的縮宮素得相關(guān)質(zhì)量進(jìn)行了研究工作。 關(guān)鍵詞 ： 縮宮素 縮宮素生物測定法 效價(jià)限度 he u)0as a 950 s of in in or an so is in as 2005 of of of of 錄 I 目 錄 中文摘要 第一章 文獻(xiàn)綜述 1 品名稱 1 體背景 1 產(chǎn) 2 產(chǎn) 2 療產(chǎn)后出血 2 忌癥 3 題依據(jù)和目的 3 關(guān)本品的研究開發(fā)、生產(chǎn)、銷售及臨床應(yīng)用情況的概述： 4 識(shí)產(chǎn)權(quán)情況 4 理毒理研究資料綜述 4 代動(dòng)力學(xué) 5 宮素的生理作用 5 理作用和給藥方式 5 物相 互作用 6 第二章 實(shí)驗(yàn)部分 8 效價(jià)限度 8 性狀 8 別 8 查 11 11 2基酸比值 11 2壓物質(zhì) 11 2菌內(nèi)毒素 11 南京工業(yè)大學(xué)本科生畢業(yè)論文 u)0價(jià)測定 13 2器設(shè)備 13 2定方法 13 2法學(xué)考察 13 2品效價(jià)測定結(jié)果 14 論 15 結(jié)語 16 參考文獻(xiàn) 17 致謝 18 第一章 文獻(xiàn)綜述 1 第一章 文獻(xiàn)綜述 藥品名稱 1. 通用名：縮宮素溶液 2. 英文名： . 漢語拼音： . 化學(xué)名 ：半胱氨酰 異亮氨酰 酰胺 )酰胺 )脯氨酰 甘氨酰胺 (1硫鍵 )。 5. 結(jié)構(gòu)式：本品結(jié)構(gòu)為含有二硫鍵的 9 個(gè)氨基酸組成的肽鏈。 2N 26. 分子式： . 分子量： . 命名依據(jù)及分類：本品為已有國家標(biāo)準(zhǔn)的藥品，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于地標(biāo)升國標(biāo)第 9 冊，標(biāo)準(zhǔn)號(hào) 2002，按照標(biāo)準(zhǔn)上的名稱將本品命名為縮宮素溶液。根據(jù)藥品注冊分類，本品屬于化學(xué)藥品 6 類。 題背景 縮宮素為一種多肽激素，自 20 世紀(jì) 50 年代合成純化的縮宮素后，一直被廣泛應(yīng)用于臨床，其主要作用機(jī)制為促進(jìn)子宮平滑肌收縮。子宮對(duì)縮宮素 的敏感性與子宮肌組織中縮宮素受體含量有關(guān)，個(gè)體差異較大，在產(chǎn)程中如使用得當(dāng)則安全有效，可起到減少難產(chǎn)率南京工業(yè)大學(xué)本科生畢業(yè)論文 u)0剖宮產(chǎn)率得作用；反之，可危及母兒生命。 產(chǎn) 縮宮素適用于過期妊娠及妊娠中斷，一般引產(chǎn)成功率為 90。 過期妊娠是指妊娠超過 42 周尚未臨產(chǎn)者。過期妊娠的原因，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為是由于妊娠末期孕激素過高而雌激素過少所致。這樣妊娠子宮對(duì)內(nèi)源縮宮素部敏感，因此，過期妊娠引產(chǎn)時(shí)，在口服雌激素制劑（如乙烯雌酚） 3 天后，開始給予縮宮素 5 的濃度，以 6 /速度滴入，并嚴(yán)密觀察宮縮及胎心音變 化。如果藥物引產(chǎn)效果不佳，可采用其他方法。 中斷妊娠系指在妊娠 14 周后，即失去早期人工流產(chǎn)機(jī)會(huì)而又必須中斷妊娠者，可用縮宮素配合其他方法（如水囊引產(chǎn)、利凡諾爾引產(chǎn)法）進(jìn)行引產(chǎn)。 妊娠中期引產(chǎn)，目前在理論和實(shí)踐中存在著許多沒有解決的問題。臨床上單獨(dú)使用縮宮素藥物引產(chǎn)，效果常常不理想，其主要原因可能仍與孕酮水平較高和雌激素水平較低有關(guān)，以及前列腺素分泌不足。中孕時(shí)子宮蛻膜發(fā)育不完善，蛻膜受體乏感應(yīng)所致，或許因?yàn)樘ヮ^未直接壓迫宮頸。因此中孕使用縮宮素引產(chǎn)，要求藥物濃度高，劑量大、適當(dāng)?shù)牡巫⑺俣?。常?10 5葡萄糖 500，以 40 滴 /度靜脈點(diǎn)滴。 產(chǎn) 縮宮素催生，主要用于原發(fā)性或繼發(fā)性宮縮乏力者。一般催產(chǎn)成功率為 98。在正常情況下，臨產(chǎn)宮縮是具有一定的強(qiáng)度、頻率、持續(xù)時(shí)間、間歇時(shí)間。當(dāng)宮縮乏力時(shí)，產(chǎn)程延長甚至出現(xiàn)滯產(chǎn)，可危及胎兒生命。恰當(dāng)使用縮宮素，是非常必要和重要的。由于每個(gè)產(chǎn)婦的個(gè)體差異，所以對(duì)縮宮素的敏感程度不一。所需劑量和濃度也不盡相同。因此臨床上一般采用 2葡萄糖 500靜脈滴注。一般以 8 /始?？s宮素對(duì)子宮迅速發(fā)生作用，一般 3鐘后就出現(xiàn)宮縮，停藥后仍可維持半小時(shí)。使用縮宮素催產(chǎn)，必須嚴(yán)密觀察宮縮情況。應(yīng)控制宮縮在 2鐘 1 次，每次持續(xù) 40。并要嚴(yán)格觀察宮口開大程度，其擴(kuò)張速度至少為 h 以上。同時(shí)注意胎心音的變化，防止胎兒窘迫癥的發(fā)生。用縮宮素催生，注意產(chǎn)程的變化，監(jiān)測產(chǎn)婦血壓、脈率，隨時(shí)調(diào)節(jié)滴數(shù)。如果發(fā)生血壓升高，胎心異?；蜃訉m強(qiáng)直收縮，要立即停止縮宮素滴注。 療產(chǎn)后出血 產(chǎn)后出血為產(chǎn)婦嚴(yán)重危急并發(fā)癥之一。處理產(chǎn)后出血，應(yīng)迅速查明原因進(jìn)行緊急止血。給予麥角新堿注射液或用縮宮素 10加入 25葡萄 糖 40靜脈緩注。當(dāng)胎兒娩出后，為了促進(jìn)胎盤剝離和子宮復(fù)原以及預(yù)防產(chǎn)后出血，應(yīng)常規(guī)給予縮宮素 10入葡萄糖第一章 文獻(xiàn)綜述 3 500體中靜滴。吳堅(jiān)、周漫天報(bào)道，湖南省株洲化工集團(tuán)公司醫(yī)院還進(jìn)行了縮宮素治療藥物流產(chǎn)后出血臨床觀察的研究：治療組 81 例，對(duì)照組 72 例。兩組藥物流產(chǎn)方法相同，即米非司酮，早 50 25空服 2d，第 3d 晨空腹頓服米素前列醇片 600g，當(dāng)日來院留觀 6論孕囊是否完整排出。治療組：留觀當(dāng)日出現(xiàn)陰道流血后，加用縮宮素 10，肌注 次 ;對(duì)照組：加用 3 次 /d，口服，連用 5d，作安慰劑。兩組藥流后 8d， 15d， 42d 門診或電話隨訪。結(jié)果治療組治愈率達(dá) 總有效率 對(duì)照組治愈 總有效率 經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩組有顯著性差異，治療組明顯優(yōu)于對(duì)照組。 忌癥 ： 明顯頭盆不相稱、完全性前置胎盤、產(chǎn)道梗阻、雙胎或多胎，以及瘢痕子宮特別是深入宮腔的子宮肌瘤剔除術(shù)和子宮體部剖宮產(chǎn)者，嚴(yán)重的胎盤功能低下及胎兒宮內(nèi)窘迫，嚴(yán)重的心肺功能不良，均應(yīng)作為應(yīng)用縮宮素的禁忌癥。 注意事項(xiàng) ： 縮宮素催產(chǎn)過程中，要注 意防止低鈉血癥和低滲透壓的發(fā)生， 5%的葡萄糖作溶劑經(jīng)代謝迅速形成血管內(nèi)低滲溶液，尤其輸液總量 2000，產(chǎn)婦及新生兒低鈉血癥和低滲透壓發(fā)生率更高，而低鈉時(shí)新生兒黃疸的發(fā)生率增高，因此輸液達(dá) 1000，應(yīng)加適量含鈉溶液，輸液總量應(yīng) 2000 嚴(yán)格鑒別產(chǎn)婦是真臨產(chǎn)還是假臨產(chǎn)，對(duì)于假臨產(chǎn)嚴(yán)禁使用縮宮素。 胎位不正，軟產(chǎn)道梗阻未糾正以前，不允許應(yīng)用縮宮素催產(chǎn)。 格掌握縮宮素用量。縮宮素用量過大、濃度過高、滴素過快能夠引起子宮強(qiáng)直收縮，甚至子宮破裂，直接 危及母子生命，所以都要從常規(guī)用量開始，嚴(yán)格觀察宮縮變化，胎心音變化，對(duì)于已出現(xiàn)強(qiáng)直收縮的要用杜冷丁、魯米那等藥物治療，阿托品等抗膽堿藥物無效。對(duì)于先兆子宮破裂，應(yīng)立即停止使用各種宮縮劑，必要時(shí)可進(jìn)行全麻，以使子宮松弛。 立題依據(jù)和目的 縮宮素為一種多肽激素，自 20 世紀(jì) 50 年代合成純化的縮宮素后，一直被廣泛應(yīng)用于臨床，尤其在引產(chǎn)或催產(chǎn)中有著重要的使用價(jià)值，為產(chǎn)科必備藥，所以縮宮素需求量巨大?？s宮素目前主要開發(fā)的品種為注射劑，主要用于引產(chǎn)、催產(chǎn)、產(chǎn)后及流產(chǎn)后因?qū)m縮無力或縮復(fù)不良而引起的子宮出血。 我公司現(xiàn)有縮宮素注射液（ 10 單位）；注射用縮宮素（ 5單位、 10 單位），需要用到大量的縮宮素溶液，購買原料已經(jīng)不能滿足需要，所以現(xiàn)在擬南京工業(yè)大學(xué)本科生畢業(yè)論文 u)0制縮宮素溶液，用于滿足生產(chǎn)需要。 關(guān)本品的研究開發(fā)、生產(chǎn)、銷售及臨床應(yīng)用情況的概述： 縮宮素是 1920 年從動(dòng)物垂體后葉分離提純的一種多肽激素。 1953 年人工合成了縮宮素，它是人類第一個(gè)合成的多肽激素?，F(xiàn)在已經(jīng)明確，幾種動(dòng)物源性縮宮素的氨基酸組成和結(jié)構(gòu)與人體的完全相同。醫(yī)藥上應(yīng)用的縮宮素有兩種，一種是垂體后葉提取得到的制劑，另一種由化學(xué)合成法生產(chǎn)的。比較兩 種方法，我公司將采用化學(xué)合成法生產(chǎn)縮宮素，因?yàn)榛瘜W(xué)合成法合成的縮宮素純度較高，而天然縮宮素由于含有少量加壓素，不太容易達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求。 在國內(nèi)，共有 5 家單位生產(chǎn)縮宮素溶液，他們分別為上海第一生化藥業(yè)有限公司；寧波人健藥業(yè)有限公司；安徽豐原藥業(yè)股份有限公司馬鞍山藥廠；浙江尖峰藥業(yè)有限公司；深圳市翰宇藥業(yè)有限公司。 縮宮素作為子宮收縮藥，臨床上 主要用于引產(chǎn)、催產(chǎn)、產(chǎn)后及流產(chǎn)后因?qū)m縮無力或縮復(fù)不良而引起的子宮出血 。 本品臨床應(yīng)用時(shí)有注射用縮宮素和縮宮素注射液兩種劑型。引產(chǎn)或催產(chǎn)時(shí)的用法用量為靜脈滴注，一次 5 單位，用氯化鈉注射液稀釋至每 1含有 位。靜脈開始時(shí)每分鐘不超過 位，每 15 30 分鐘增加 位，至達(dá)到宮縮與正常分娩期相似，最快每分鐘不超過 位，通常為每分鐘 位?？刂飘a(chǎn)后出血的用法用量為每分鐘靜滴 位，胎盤排出后可肌肉注射 5 10 單位。本品偶有惡心、嘔吐、心率加快或心率失常的不良反應(yīng)。 縮宮素用于過期妊娠及妊娠中斷的引產(chǎn)時(shí)，成功率一般為 90?？s宮素作催生用途時(shí)，主要用于原發(fā)性或繼發(fā)性宮縮乏力者。一般催 產(chǎn)成功率為 98。吳堅(jiān)、周漫天報(bào)道過湖南省株洲化工集團(tuán)公司醫(yī)院進(jìn)行了縮宮素治療藥物流產(chǎn)后出血臨床觀察的研究，結(jié)果治療組治愈率達(dá) 總有效率 知識(shí)產(chǎn)權(quán)情況 縮宮素溶液為已有國家標(biāo)準(zhǔn)的藥品，縮宮素溶液收載于地標(biāo)升國標(biāo)第 9 冊，標(biāo)準(zhǔn)號(hào)為檢索，本品的原料無專利保護(hù)，因此，開發(fā)本品無知識(shí)產(chǎn)權(quán)問題。 理毒理研究資料綜述 代動(dòng)力學(xué) 本藥口服易被胰蛋白酶、胱氨酸氨基肽酶、縮宮素酶破壞失效，故多采用肌注、第一章 文獻(xiàn)綜述 5 靜注或 粘膜給藥。后一給藥途徑，作用較弱，主要用于產(chǎn)后止血或子宮復(fù)舊。肌注吸收良好，在 3效，維持 20 為 5注立即起效， 15子宮收縮頻率與強(qiáng)度逐漸增加，然后穩(wěn)定。滴注完畢 20效應(yīng)逐漸減退。 為 1藥大部分經(jīng)肝及腎迅速破壞，少部分以結(jié)合型由尿排出。 宮素的生理作用 縮宮素對(duì)子宮平滑肌和乳腺有強(qiáng)大的選擇性的興奮作用，因而可以推論這種多肽在這些部位具有一種真正的激素作用?？s宮素引起的子宮底收縮與妊娠后期和自然分娩期的子宮底 收縮，在振幅、持續(xù)時(shí)間和頻率上均無明顯區(qū)別。然而內(nèi)源性縮宮素在分娩開始之間的直接關(guān)系尚難于肯定。雖然已經(jīng)清楚來自子宮頸、陰道或乳房適當(dāng)?shù)母杏X刺激可以反射性地引起垂體后葉釋放縮宮素，但分娩開始時(shí)血漿縮宮素的濃度未見升高，然而，子宮對(duì)縮宮素的敏感性隨妊娠時(shí)間的延長而增加，這種調(diào)節(jié)人類分娩可能是重要的。這種學(xué)說與在相應(yīng)時(shí)間里觀察到的在大鼠子宮肌上的縮宮素受體數(shù)明顯增加的現(xiàn)象是一致的。雖尚未證明完全沒有縮宮素時(shí)分娩和哺乳就不能發(fā)生，但是已發(fā)現(xiàn)，縮宮素完全缺乏時(shí)，分娩延長，射乳反射消失，已知由縮宮素釋放而造成對(duì)象畜子 宮的興奮作用有利于精子的上行，在人類生殖道內(nèi)是否有此種作用尚未肯定，至少可以認(rèn)為，縮宮素對(duì)分娩起有利作用，對(duì)射乳、反射起著重要作用，它對(duì)男性有何作用尚不清楚。 理作用和給藥方式 奮子宮 縮宮素的主要作用是直接加強(qiáng)子宮平滑肌的收縮，其收縮強(qiáng)度與性質(zhì)明顯受用藥劑量與女性激素的影響，小劑量就能增強(qiáng)妊娠末期子宮的節(jié)律性收縮，隨劑量增加，張力也增高，更大劑量（ 10u）則能引起強(qiáng)直性收縮。子宮對(duì)縮宮素的反應(yīng)大致與子宮自發(fā)活動(dòng)增加平行，雌激素能增加子宮對(duì)縮宮素的敏感性，而孕激素則能降低其敏 感性，妊娠初期由于孕激素水平高，故子宮對(duì)縮宮素?zé)o反應(yīng)，妊娠后期則因雌激素 /孕激素的比值上升，使敏感性妊娠中期增強(qiáng)八倍，臨產(chǎn)子宮最為敏感，產(chǎn)后有逐漸下降。在大白鼠體內(nèi)已觀察到妊娠末期子宮肌層的縮宮素受體有明顯增加?？s宮素與平滑肌上的受體結(jié)合時(shí)，改變受體的構(gòu)型，啟動(dòng)細(xì)胞膜上的離子通道開放，發(fā)生相關(guān)離子的跨膜運(yùn)動(dòng)，使膜去極化并發(fā)出動(dòng)作電位。膜的電興奮使細(xì)胞膜 的活性受到抑制，鈣泵的運(yùn)轉(zhuǎn)受阻， 道的開放，使細(xì)胞內(nèi)游離 子濃度急劇上升，游離 子結(jié)合細(xì)胞肌絲上的特異位點(diǎn)后，激活肌凝蛋白輕鏈 激酶，造成肌絲的相對(duì)滑動(dòng)而引起肌細(xì)胞的收縮?？s宮素與蛻膜上的受體結(jié)合，受體刺激 功的引產(chǎn)伴有 1513,14南京工業(yè)大學(xué)本科生畢業(yè)論文 u)0氫 高。 靜滴縮宮素 3鐘后，即出現(xiàn)子宮興奮作用，由于很快被血漿中縮宮酸氨滅活，故維持時(shí)間短暫（ 20鐘，對(duì)子宮體的興奮作用強(qiáng)，對(duì)子宮頸的興奮弱，用量適當(dāng)不會(huì)引起強(qiáng)直性收縮，這些特點(diǎn)不同于麥角新堿，是用于催產(chǎn)、引產(chǎn)安全有效的重要依據(jù)。 進(jìn)排乳 乳腺的小泡分支被變形的平滑肌網(wǎng)即肌上皮所包圍，這些細(xì)胞收縮迫使乳汁從小泡管道進(jìn)入大竇，由此嬰兒容易吸出乳汁，這種功能叫射乳。肌上皮對(duì)縮宮素呈高度的反應(yīng)性，雖然兒茶酚氨抑制射乳，然并不認(rèn)為肌上皮收縮依賴自主神經(jīng)支配，但認(rèn)為它是受縮宮素和引起激素釋放的反射途徑所控制，縮宮素能使乳腺導(dǎo)管收縮，促使乳汁排出，產(chǎn)后乳房漲痛，用縮宮素滴鼻有一定療效。 心血管系統(tǒng)的作用 給人大量應(yīng)用縮宮素，有明顯而短暫的直接松弛血管平滑肌的作用，收縮壓與舒張壓均下降，尤以舒張壓下降更為突出，皮膚潮紅以 及肢體血流增加，降壓時(shí)反射性的引起心動(dòng)過速和心輸出量增加，當(dāng)連續(xù)的以大劑量輸入時(shí)，血壓短暫下降后，繼之輕度而更為持久的升高。例如，與神經(jīng)節(jié)阻滯劑或交感神經(jīng)阻滯劑合用時(shí)，由于減弱了緩沖反射活性，以致降壓作用更顯著。由于產(chǎn)科多應(yīng)用小劑量縮宮素，一般不出現(xiàn)明顯的血壓變化，但是大劑量縮宮素用于治療性流產(chǎn)或子宮外科手術(shù)時(shí)，特別在深度麻醉的病人，可使動(dòng)脈血壓明顯下降。 縮宮素的擴(kuò)張血管作用與自主神經(jīng)受體無關(guān)，輸入生理劑量范圍的縮宮素時(shí)可顯著增加狗的腎血流量（尤其是切除垂體的狗）。 藥方式 : 傳統(tǒng)的持續(xù)性 靜脈滴注縮宮素引產(chǎn)， 血藥濃度一般經(jīng)過 20 30 分鐘才能達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)， 用藥是否有效， 必須等待 30 分鐘才能肯定， 劑量大小不易發(fā)動(dòng)宮縮， 劑量過大易引起子宮強(qiáng)直性收縮及胎兒窘迫， 甚至子宮破裂 文獻(xiàn)報(bào)道， 從用藥到規(guī)律所需時(shí)間一般 90 120 分鐘， 縮宮素達(dá)到有效濃度后持續(xù)在高水平上， 不利于子宮肌細(xì)胞的舒張 但該方法簡便易行， 而且已有廣泛應(yīng)用的經(jīng)驗(yàn)通過對(duì)縮宮素藥代動(dòng)力學(xué) 受體活性和臨床資料分析認(rèn)為， 縮宮素輸注時(shí)劑量增加的間隔必須在 20 40 分鐘， 也有人認(rèn)為間隔時(shí)間可短至 15 分鐘或長至 60 分鐘由于體內(nèi)縮宮素以脈沖或間歇方式釋放， 又有已結(jié)合的縮宮素受體對(duì)未結(jié)合縮宮素的暫時(shí)性失活等因素， 使脈沖給藥方式越來越受到重視 在應(yīng)用縮宮素引產(chǎn)和增強(qiáng)產(chǎn)力的研究中觀察到， 脈沖給藥效果與持續(xù)性輸注給藥效果相同， 甚或更佳， 并可降低新生兒高膽紅素血癥的發(fā)生率， 而且減少縮宮素用量 但需脈沖式輸注泵等， 尚未廣泛應(yīng)用， 有待于進(jìn)一步探討為預(yù)防過強(qiáng)宮縮所致胎死宮內(nèi)或子宮破裂的發(fā)生， 引產(chǎn)時(shí)不宜行縮宮素肌肉注射穴位注射或黏膜給藥 因第一章 文獻(xiàn)綜述 7 為這些給藥方法因人而異， 對(duì)縮宮素的敏感度劑量不好控制 他作用 給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物靜脈注射縮宮素，雖然通常能看到促進(jìn)鈉的排泄，但給予人時(shí)，自腎排出的電解質(zhì)卻無預(yù)期的改變，因治療目的需大量應(yīng)用縮宮素時(shí)，由于此激素有輕度的內(nèi)源性抗利尿激素樣作用，從而引起泌尿減少，在此用藥期間，由于過量的靜脈輸液，可以見到水中毒征候，除子宮、血管和乳腺肌上皮外，其他組織和平滑肌對(duì)縮宮素不敏感。在實(shí)驗(yàn)研究中，縮宮素與加壓素相似，高濃度時(shí)對(duì)許多與激素原發(fā)作用無明顯關(guān)系的組織可產(chǎn)生作用。 物相互作用 丙烷等碳?xì)浠衔镂肴闀r(shí)，使用縮宮素可導(dǎo)致產(chǎn)婦出現(xiàn) 低血壓 ，竇性心動(dòng)過緩或（和）房室節(jié)律失常。 恩氟烷 濃度 氟烷濃度 入全麻時(shí)，子宮對(duì)縮宮素的效應(yīng)減弱。恩氟烷濃度 消除反應(yīng)，并可導(dǎo)致子宮出血。 他宮縮藥與縮宮素同時(shí)用，可使子宮張力過高 ，產(chǎn)生子宮破裂或（和）宮頸撕裂。 南京工業(yè)大學(xué)本科生畢業(yè)論文 u)0二章 實(shí)驗(yàn)部分 本品為化學(xué)合成九肽，收載于化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)（第 9 冊），標(biāo)準(zhǔn)號(hào)為 2002，根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品注冊管理辦法，本品屬化學(xué)藥品注冊分類 照縮宮素溶液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和中國藥典 2005 年版二部的有關(guān)規(guī)定，對(duì)本品的相關(guān)質(zhì)量進(jìn)行了研究工作。 對(duì)照品來源及批號(hào)：合成縮宮素：批號(hào)為 1229國藥品生物制品檢定所；垂體后葉：批號(hào)為 502國藥品生物制品檢定所。 樣品來源：南京新百 藥業(yè)有限公司；批號(hào)： 120307， 120310， 120314 市售樣品：縮宮素溶液；批號(hào)： 120104（寧波人健藥業(yè)有限公司） 價(jià)限度 根 據(jù) 本 品 三 批 樣 品 效 價(jià) 檢 測 結(jié) 果 及 縮 宮 素 溶 液 國 家 藥 品 標(biāo) 準(zhǔn)2002，將本品的效價(jià)限度訂為：每 1縮宮素的效價(jià)不得少于 150單位。 狀 目測檢視，本品三批樣品和市售樣品性狀檢查的結(jié)果如下： 表 2狀檢查結(jié)果 批號(hào) 120307 120310 120314 市售 性狀 無色澄明液體 無色澄明液體 無色澄明液體 無色澄明液 體 結(jié)果表明：目測觀察本品三批樣品和市售樣品，其性狀均為無色澄明液體。 別 參照國家藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn) 2002 進(jìn)行鑒別。 物測定法鑒別 方法：照縮宮素生物測定法（中國藥典 2005 年版二部附錄 F）測定，應(yīng)有子宮收縮反應(yīng)。 本法系比較垂體后葉或合成縮宮素標(biāo)準(zhǔn)品（ S）與供試品（ T）引起離體大鼠子宮收縮的作用，以測定供試品的效價(jià)。 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制：迅速精密稱取垂體后葉標(biāo)準(zhǔn)品適量，注意避免吸潮，酸溶液，仔細(xì)研磨，移置硬質(zhì)大試 管中，再精密加 酸溶液使成每 1含縮宮素 1 單位的溶液。管口輕放一玻璃塞，浸入沸騰的水中，時(shí)時(shí)振搖，加熱煮沸 5 分鐘第二章 實(shí)驗(yàn)部分 9 取出，迅速冷卻，濾過，濾液分裝于適宜的容器內(nèi)， 4 8 貯存，如無沉淀析出，可在 3個(gè)月內(nèi)使用。 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的配制：試驗(yàn)當(dāng)日，精密量取垂體后葉標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量或取合成縮宮素標(biāo)準(zhǔn)品，按標(biāo)示效價(jià)加入 化鈉溶液配成每 1含縮宮素 1 單位的溶液，按高低劑量組（ 化鈉溶液配成兩種濃度的稀釋液，一般高濃度稀釋液可配成每1含 位，高低劑量的比 值（ r）一般不得大于 1:節(jié)劑量使低劑量能引起子宮收縮，一般在 20 50劑量應(yīng)不致使子宮收縮達(dá)到極限，記錄儀指針一般為 50 85高低劑量所致子宮的收縮應(yīng)有明顯差別。 供試品溶液與稀釋液的配制：按供試品的標(biāo)示量或估計(jì)效價(jià)（ 照標(biāo)準(zhǔn)品溶液與其稀釋液的配制法配成，高低兩種濃度的稀釋液，其比值（ r）應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品相等，供試品和標(biāo)準(zhǔn)品高低劑量所致的反應(yīng)均值應(yīng)相近。 子宮肌蓄養(yǎng)液的配制：試驗(yàn)當(dāng)日，取氯化鈉 9g、氯化鉀 化鈣（按無水物計(jì)算） 葡萄糖 水 700 溶解，另取碳酸氫鈉 水約 200解后，緩緩傾注于前一溶液中，隨加隨攪拌，最后加水適量使成 1000 供試用動(dòng)物：取健康合格的成年雌性大鼠，斷乳后即與雄鼠隔離，出生后不超過 3 個(gè)月，體重 160 240g。試驗(yàn)當(dāng)日，選擇陰道涂片在動(dòng)情前期的動(dòng)物，也可用雌性激素處理使子宮涂片為動(dòng)情前期或動(dòng)情期的動(dòng)物。 測定法：取選定的大鼠迅速處死，剖腹取出子宮，仔細(xì)分離附在子宮肌上的結(jié)締組織，注意避免因牽拉使子宮肌受損。在子宮分叉處剪下左右 2 條，取一條將其下端固定于離體器官恒溫水浴裝置的浴杯底部，上端用線與記錄裝 置相連，以描記子宮收縮；浴杯中加入一定量的子宮肌蓄養(yǎng)液（約 30 50連續(xù)通入適量空氣。蓄養(yǎng)液應(yīng)調(diào)節(jié)至 32 35 之間并保持恒溫（ ），子宮放入浴杯后，靜置約 15 分鐘，按次序準(zhǔn)確注入等體積的標(biāo)準(zhǔn)品或供試品兩種濃度的稀釋液（ 待子宮肌收縮至最高點(diǎn)開始松馳時(shí)（約 6090 秒鐘），放去蓄養(yǎng)液并用蓄養(yǎng)液洗滌一次，再加入等量蓄養(yǎng)液，靜置；相鄰兩次給藥的間隔時(shí)間應(yīng)相等（約 3 5 分鐘），每次給藥應(yīng)在前一次反應(yīng)恢復(fù)穩(wěn)定以后進(jìn)行。標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液和供試品稀釋液各取高低兩個(gè)劑量（ 一組，按隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)的次序輪流注入每組 4 個(gè)劑量，重復(fù) 4 6 組。測量各劑量所致子宮收縮的高度，照生物檢定統(tǒng)計(jì)法（附錄 - ）中的量反應(yīng)平行線測定法計(jì)算效價(jià)及實(shí)驗(yàn)誤差。 本法的可信限率 %）不得大于 10%。 南京工業(yè)大學(xué)本科生畢業(yè)論文 u)0取空白試劑，同法試驗(yàn)。三批樣品及市售品鑒別結(jié)果見表 2 表 2物測定法鑒別結(jié)果 批號(hào) 120307 120310 120314 市售 空白試劑 鑒別 有子宮收縮反應(yīng) 有子宮收縮反應(yīng) 有子宮收縮反應(yīng) 有子宮收縮反應(yīng) 無子宮收縮反應(yīng) 結(jié)果表明：本品三批樣品和市售樣品均呈正反 應(yīng)，空白試劑無干擾。本方法可以用以鑒別本品。 效液相法保留時(shí)間鑒別 方法：取本品，加氯化鈉注射液稀釋成每 1含 5 個(gè)單位或 10 個(gè)單位的溶液，作為供試品溶液；另取合成縮宮素標(biāo)準(zhǔn)品適量，同法配制，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。照高效液相色譜法（中國藥典 2005 年版二部附錄 D），用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以 磷酸二氫鈉溶液 82 18）為流動(dòng)相；流速為每分鐘 0.8 測波長為 220標(biāo)準(zhǔn)品溶液和供試品溶液各 20l，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試品主峰和標(biāo)準(zhǔn)品主峰的保留 時(shí)間一致。另取空白試劑，同法試驗(yàn)。三批樣品及市售品鑒別結(jié)果見表 2圖 2 表 2效液相保留時(shí)間鑒別結(jié)果 批號(hào) 對(duì)照品 120307 120310 120314 市售 保留時(shí)間（ 果表明：本品三批樣品和市售樣品按上述方法檢測，結(jié)果均符合規(guī)定，空白試劑無干擾。 2查 取本品適量，依法測定 （中國藥典 2005 年版二部附錄 H）。 表 2檢查結(jié)果 批號(hào) 120307 120310 120314 市售 果表明：本品三批樣品和市售樣品的 均在 圍內(nèi)，暫將本品的 限度定為 基酸比值 （ 1）色譜條件 第二章 實(shí)驗(yàn)部分 11 儀器： 普） 1050 型液相色譜儀 色譜柱： 150連依利特 流動(dòng)相： A 相： 20 乙酸鈉， 乙胺， 氫呋喃，用 15%磷酸調(diào) 相： 100 乙酸鈉 甲醇 乙腈（ 200 450 350） 流速： 1ml/度： 027 B ： 060% 28.5 100% 30 100% 檢測波長： 025 3382530 262 （ 2）氨基酸對(duì)照品：濃度為 1l 司出品） （ 3）測定原理 鄰苯二甲醛 氯甲酸芴甲酯全自動(dòng)柱前衍生化， 反相分離；利用氨基酸對(duì)照品外標(biāo) 法進(jìn)行定性、定量計(jì)算。 （ 4）測定 取本品 3硬質(zhì)安瓿中，加鹽酸 3勻，減壓封口，置 110 加熱 20 小時(shí)，冷卻，啟封，轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿中，蒸發(fā)至干，加 鹽酸溶液 10殘留物溶解，作為供試品溶液。準(zhǔn)確吸取供試品溶液 1l，分別加硼酸緩沖液（ ，5l，鄰苯二甲醛 1l，氯甲酸芴甲酯 1l，進(jìn)行衍生化，注入液相色譜儀，分離測定。另取天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、亮氨酸、酪氨酸、異亮氨酸和半胱氨酸對(duì)照品適量，加 鹽酸溶液制成每 1約 含各氨基酸 溶液，作為對(duì)照品溶液，同法測定。同時(shí)另取市售縮宮素溶液同法測定，結(jié)果見表 2圖 2 南京工業(yè)大學(xué)本科生畢業(yè)論文 u)0 2基酸比值檢查結(jié)果 批號(hào) 比值 120307 120310 120314 市售 天冬氨酸 氨酸 氨酸 氨酸 氨酸 亮氨酸 氨酸 胱氨酸 果表明：三批樣品中各氨基酸的比值：天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、氨酸、異亮氨酸均為 氨酸均為 胱氨酸均為 品氨基酸比值與市售樣品相差不大。 壓物質(zhì) 取本品適量，用氯化鈉注射液稀釋成每 1 2 個(gè)單位的溶液，依法檢查（中國要藥典 2005 年版二部附錄 F），每 10 單位縮宮素 溶液中的升壓物質(zhì)不得過 位。 表 2壓物質(zhì)檢查結(jié)果 批號(hào) 120307 120310 120314 市售 升壓物質(zhì) 符合規(guī)定 符合規(guī)定 符合規(guī)定 符合規(guī)定 結(jié)果表明：三批樣品及市售樣品升壓物質(zhì)檢查結(jié)果均符合規(guī)定。 菌內(nèi)毒素 取本品，依法檢查（中國要藥典 2005 年版二部附錄 E），每 1 單位縮宮素中含內(nèi)毒素的量應(yīng)不得過 查結(jié)果見下表 表 2菌內(nèi)毒素檢查結(jié)果 批號(hào) 120307 120310 120314 市售 細(xì)菌內(nèi)毒素 符合規(guī)定 符合規(guī)定 符合規(guī)定 符合規(guī) 定 結(jié)果表明：三批樣品及市售樣品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查結(jié)果均符合規(guī)定。 價(jià)測定 第二章 實(shí)驗(yàn)部分 13 器設(shè)備 （見表 2 表 2主要實(shí)驗(yàn)儀器表 器名稱 儀器型號(hào)和規(guī)格 生產(chǎn)廠家 電子天平 海精密科學(xué)儀器公司 電動(dòng)攪拌器 津市化興科學(xué)儀器廠 液相色譜儀 海申盛生物技術(shù)有限公司 三口燒瓶 9 100玻 移液管 0C 水浴鍋 海申盛生物 技術(shù)有限公司 量筒 01C 離體子宮測定儀 京分析儀器廠有限公司 燒杯 牛 定方法 參照國家藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn) 20 02 縮宮素溶液效價(jià)測定的方法，采用縮宮素生物測定法（中國藥典 2005 年版二部附錄 F）測定。 本法系比較垂體后葉或合成縮宮素標(biāo)準(zhǔn)品（ S）與供試品（ T）引起離體大鼠子宮收縮的作用，以測定供試品的效價(jià)。 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制：迅速精密稱取垂體后葉標(biāo)準(zhǔn)品適量，避免吸潮，先加少量 酸 溶液，仔細(xì)研磨，移置硬質(zhì)大試管中，再精密加 酸溶液使成每 1含縮宮素 1 單位的溶液。管口輕放一玻璃塞，浸入沸騰的水中，時(shí)時(shí)振搖，加熱煮沸 5 分鐘取出，迅速冷卻，濾過，濾液分裝于 1凈的安瓿中，熔封， 4 8 貯存，如無沉淀析出，可在 3 個(gè)月內(nèi)使用。 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的配制：試驗(yàn)當(dāng)日，精密量取垂體后葉標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量或取合成縮宮素標(biāo)準(zhǔn)品，按標(biāo)示效價(jià)加 化鈉溶液配成每 1含縮宮素 1 單位的溶液，按高低劑量組（ 化鈉溶液配成兩種濃度的稀釋液，一般高濃度稀釋液可配成每 1位，高低劑量的比值（ r）一般不得大于 1 節(jié)劑量使低劑量能引起子宮收縮，記錄儀指針一般在 2050劑量應(yīng)不致使子宮收縮達(dá)到極限，記錄儀指南京工業(yè)大學(xué)本科生畢業(yè)論文 u)0一般在 5085高低劑量所致子宮的收縮應(yīng)有明顯的差別。 供試品溶液與稀釋液的配制：按供試品的標(biāo)示量或估計(jì)效價(jià)（ 照標(biāo)準(zhǔn)品溶液與其稀釋液的配制法配制，高低兩種濃度的稀釋液，其比值（ r）應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)品相等，供試品和標(biāo)準(zhǔn)品高低劑量所致的反應(yīng)均值應(yīng)相近。 子宮蓄養(yǎng)液的配制：試驗(yàn)當(dāng)日，取氯化鈉 9g、氯化鉀 化鈣（按無水物 計(jì)算）葡萄糖 水 700溶解，另取碳酸氫鈉 水約 200解后，緩緩傾注于前一溶液中，隨加隨攪拌，最后加水適量使成 1000 供試用動(dòng)物：取健康合格的成年雌性大鼠，斷乳后即與雄鼠隔離，出生后不超過 3 個(gè)月，體重 160240g。試驗(yàn)當(dāng)日，選擇陰道涂片在動(dòng)情前期的動(dòng)物，也可用雌性激素處理使子宮涂片為動(dòng)情前期或動(dòng)情期的動(dòng)物。 測定法：取選定的大鼠迅速處死，剖服取出子宮，仔細(xì)分離附在子宮肌上的結(jié)締組織，注意避免因牽拉使子宮肌受損。在子宮分叉處剪下左右 2 條，取一條將其下端固定 于離體器官恒溫水浴裝置的浴杯底部。上端用線與記錄裝置相連，以描記子宮收縮；浴杯中加入一定量的子宮肌蓄養(yǎng)液（約 3050連續(xù)通入適量空氣。蓄養(yǎng)液應(yīng)調(diào)節(jié)至 3235 并保持恒溫（ ），子宮放入浴杯后，靜置約 15 分鐘，按次序準(zhǔn)確注入等體積的標(biāo)準(zhǔn)品和供試品兩種濃度的稀釋液（ 待子宮肌收縮至最高點(diǎn)開始松弛時(shí)（約 6090 秒鐘），放去蓄養(yǎng)液并用蓄養(yǎng)液洗滌一次，再加入等量蓄養(yǎng)液，靜置；相鄰兩次給藥的間隔時(shí)間應(yīng)相等（約 35 分鐘），每次給藥應(yīng)在前一次反應(yīng)恢復(fù)穩(wěn)定以后進(jìn)行。標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液和供 試品稀釋液各取高低兩個(gè)劑量（ 為一組，按隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)的次序輪流注入每組 4 個(gè)劑量，重復(fù) 46 組。測量各劑量所致子宮收縮的高度，照生物檢定統(tǒng)計(jì)法（附錄 的量反應(yīng)平行線測定法計(jì)算效價(jià)及實(shí)驗(yàn)誤差。 本法的可信限率 %）不得大于 10%。 法學(xué)考察 （ 1）重復(fù)性 取 120307 批樣品，照效價(jià)測定法平行配制六份樣品，測定樣品效價(jià)，考察該效價(jià)測定方法的重復(fù)性，結(jié)果見下表。 第二章 實(shí)驗(yàn)部分 15 表 2復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果 序號(hào) 效價(jià)（ / 平均效價(jià)（ / 21 1 果表明：采用本法對(duì)同批樣品平行試驗(yàn)六份，六次效價(jià)測定結(jié)果的 ，本方法重復(fù)性較好。 （ 2）中間精密度 取 120307、 120310、 120314 批樣品，分別于不同時(shí)間、不同儀器，由不同的操作者試驗(yàn)，照前述效價(jià)測定方法依法測定樣品效價(jià)，結(jié)果見下表。 表 2間精密度試驗(yàn)結(jié)果 時(shí)間 2012 年 3 月 20 日 2012 年 3 月 21 日 %） 儀器 離體子宮測定儀 體子宮測定儀 號(hào) 效價(jià)（ / 120307 20310 20314 果表明：本品效價(jià)測定方法的中間精