細(xì)胞工程一輪復(fù)習(xí)ppt課件

.(2012新課卷) 40，生物選礦3現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)專集(15點(diǎn))基于對(duì)基因工程的知識(shí)，回答以下問題： (1)限制酶切斷DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類型和諧。 粘性末端、平末端、(2)質(zhì)粒載體經(jīng)ecori切割后產(chǎn)生的片段，為了將載體與目標(biāo)基因連接起來，除了含目標(biāo)基因的DNA可以經(jīng)ecori切割外，還具有可以用另一種限制酶切割的特征。 被切斷的DNA片段的末端與被EcoR切斷的DNA片段相同，(3)根據(jù)其來源，基因工程中使用的DNA連接酶有DNA連接酶和DNA連接酶兩種。 E.Coli，T4，(5)基因工程中除質(zhì)粒外，和也可作為載體使用。 (4)逆轉(zhuǎn)錄作用的模板為產(chǎn)物。 體外獲得大量逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，多采用技術(shù)。 (6)用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌一般不能直接將未處理大腸桿菌作為受體細(xì)胞的原因是mRNA (或RNA )、cDNA (或DNA )、噬菌體、未處理大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA )的能力極弱【生物-現(xiàn)代生物技術(shù)專輯】為擴(kuò)大耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等堿地的開發(fā)利用備受矚目。 我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育耐鹽水稻新品系。 (1)獲得耐鹽性基因后，用于重建DNA分子的限制酶作用于圖中的處理，DNA連接酶作用于處理。 將(a或b填埋)，(2)重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的一般方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和方法。 (3)從導(dǎo)入目標(biāo)基因的水稻細(xì)胞中培育植物體需要利用_技術(shù)。 這項(xiàng)技術(shù)的核心是。 (4)為確認(rèn)耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻的培育是否成功，應(yīng)用放射性同位素標(biāo)記探針進(jìn)行分子雜交檢測，并應(yīng)用方法從個(gè)體水平鑒定水稻株的耐鹽性?；驑尫?花粉管道法)、植物組織培養(yǎng)、去分化和再分化、耐鹽基因、一定濃度鹽水灌溉(移植鹽堿地)、專題2、細(xì)胞工程學(xué)、1、概念：植物細(xì)胞工程學(xué)、所采用技術(shù)的理論基礎(chǔ)、植物細(xì)胞工程學(xué)、通常采用的技術(shù)手段、植物組織培養(yǎng)、植物細(xì)胞雜交、 植物細(xì)胞的全能性、一、植物細(xì)胞工程. (離體植物器官、組織或細(xì)胞)、去分化遮光、再分化光、培養(yǎng)條件：離體、含有全營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、激素、一定溫度、空氣、無菌環(huán)境、適當(dāng)?shù)腜H、適當(dāng)?shù)墓獾韧庵搀w，例如花藥離體培養(yǎng)； 基因工程培育的抗棉鈴蟲棉花株細(xì)胞工程培育的“西紅柿土豆”雜種株等。 1、植物組織培養(yǎng)，去壁，纖維素酶，原生質(zhì)體，植物細(xì)胞，融合原生質(zhì)體，離心，振動(dòng)，電刺激聚乙二醇，再生細(xì)胞壁，雜種細(xì)胞，去分化，愈傷組織，雜種植物體，激素，篩選，激素，再分化，2， 植物細(xì)胞雜交過程的形象是，(1)分離原生質(zhì)體的酶解法(2)原生質(zhì)體融合-物、化學(xué)法(3)新細(xì)胞壁形成-雜交細(xì)胞形成標(biāo)志(4)植物組織培養(yǎng)-植物細(xì)胞雜交的技術(shù)環(huán)節(jié)之一，意義：克服遠(yuǎn)緣雜交親和性障礙，培育新品種。 6、下圖是植物體細(xì)胞雜交過程的示意圖，圖中：步驟去除，最常用的方法是用酶去除，使植物細(xì)胞成為。 程序常用化學(xué)試劑，有目的。 在利用雜種細(xì)胞培育雜種株的過程中，運(yùn)用的技術(shù)手段相當(dāng)于其中的步驟，相當(dāng)于步驟。誘導(dǎo)細(xì)胞壁、纖維素酶與果膠酶、原生質(zhì)體、聚乙二醇、原生質(zhì)體融合，誘導(dǎo)植物組織培養(yǎng)、去分化、再分化，植物細(xì)胞雜交的目的是獲得新的雜交株，使兩株植物的性狀可以表現(xiàn)在新的植物體內(nèi)。 理論上雜種植株的育成性。 用傳統(tǒng)的有性雜交法能實(shí)現(xiàn)嗎？ 因此，該研究對(duì)培育作物新品種具有重要意義。 在利用植物體細(xì)胞雜交方法培育作物新品種的過程中，遺傳物質(zhì)的傳遞是否遵循孟德爾的遺傳規(guī)律？ 為什么雜交細(xì)胞具有兩個(gè)親本遺傳物質(zhì)，能夠培育，不能克服遠(yuǎn)緣雜交的無親和性障礙，不服從，植物細(xì)胞雜交是無性生殖。(1)的過程，在實(shí)際融合過程中原生質(zhì)體可能形成種細(xì)胞團(tuán)(只考慮兩個(gè)細(xì)胞融合的情況)。 與工藝密切相關(guān)的細(xì)胞器。 3、高爾基體和線粒體，教室練習(xí)，原生質(zhì)體融合，2 )番茄細(xì)胞中含有a條染色體，馬鈴薯細(xì)胞中含有b條染色體時(shí)，用有性雜交的育種方法培育番茄和馬鈴薯，得到的后代中含有條染色體，體細(xì)胞雜交技術(shù)得到的株中含有條染色體，3 )番茄練習(xí)題是(A B)/2，A B，6，(4)在培養(yǎng)雜種苗的過程中，一般在2428小時(shí)后，大部分原生質(zhì)體再生了細(xì)胞壁。 如何判別細(xì)胞壁是否再生的？ 植物細(xì)胞質(zhì)壁的分離和恢復(fù)實(shí)驗(yàn)，植物組織培養(yǎng)技術(shù)有哪些應(yīng)用？ 植物繁殖的新途徑微繁殖：不僅能夠維持優(yōu)良品種的遺傳特性，而且能夠有效地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。 作物脫毒：利用植物的分生組織(如莖尖、根尖)培養(yǎng)，可以脫毒新生植物。 應(yīng)注意，人工種皮可加入適量養(yǎng)分、無機(jī)鹽、有機(jī)碳源及農(nóng)藥、抗生素、有益菌等，有利于胚狀體的生長。 人工種子：植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽或腋芽，包裹人工種皮后成為人工種子。 右圖為人工種子的結(jié)構(gòu)圖。人工種子、自然種子、胚狀體包埋在膠囊內(nèi)形成球狀結(jié)構(gòu)：解決膠質(zhì)化合物薄膜種皮營養(yǎng)成分和植物激素人工胚乳胚狀體新植物幼體、優(yōu)點(diǎn)：快速繁殖、作物繁殖能力下降、結(jié)子困難、發(fā)芽率等問題。 保持雜種優(yōu)勢。轉(zhuǎn)基因植物(如抗蟲棉等)培育；(2)作物新品種培育1倍體育種：花離體培養(yǎng)過程為植物組織培養(yǎng)過程。 單倍體育種的優(yōu)點(diǎn)是后代不發(fā)生性狀分離，均為純子，穩(wěn)定遺傳，顯著縮短育種年數(shù)。突變體的利用：在植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)細(xì)胞常處于分裂狀態(tài)，易受培養(yǎng)條件和應(yīng)激(放射線、化學(xué)物質(zhì)等)的影響。 從這些發(fā)生突變的個(gè)體中篩選出對(duì)人們有用的突變體，能夠培育出新品種。 細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，可大量生產(chǎn)蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料、生物堿等細(xì)胞產(chǎn)物。. 1細(xì)胞全能表達(dá)正確的是a .非離體植物細(xì)胞全能性b .動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞全能性c .單克隆抗體的制備原理是細(xì)胞全能性d .花粉單倍體培育是細(xì)胞全能性的表達(dá)2 .植物細(xì)胞表達(dá)全能性的必要條件是a .適當(dāng)?shù)臓I養(yǎng)和外界條件b .給予離體后適當(dāng)?shù)臓I養(yǎng)和給予外界條件的c .其他植物細(xì)胞的基因d .將成熟的篩管核移植到去核卵泡內(nèi)，3 .生物體全部細(xì)胞中，全能性最高的是a .卵泡b植物花粉c .體細(xì)胞d .受精卵4 .生物體內(nèi)，細(xì)胞不顯示全能性，分化為不同的組織、器官，a .細(xì)胞失去全能性的b .基因的表達(dá)有選擇性c .不同5、對(duì)植物組織培養(yǎng)可形成愈傷組織的以下愈傷組織的描述，a .愈傷組織或離體細(xì)胞去分化形成的b .形成愈傷組織的培養(yǎng)基不包括有機(jī)分子c。 愈傷組織具有定影能力的胚狀結(jié)構(gòu)d .愈傷組織細(xì)胞的線粒體和核糖體可能形成堿基互補(bǔ)對(duì)6 .刺激愈傷組織的誘導(dǎo)劑是a .細(xì)胞因子和生長素b .赤霉素c .生長素和赤霉素d .細(xì)胞因子和乙烯， 7 .胡蘿卜麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻麻植物組織培養(yǎng)過程a .基因10 .植物細(xì)胞雜交的目的是通過a .酶解法去除細(xì)胞壁有活力的原生質(zhì)體b .人工誘導(dǎo)法融合兩種不同植物原生質(zhì)體c .植物組織培養(yǎng)法培養(yǎng)融合的原生質(zhì)體獲得雜交株d.11 .細(xì)胞工程原生質(zhì)體在托融育種技術(shù)中，其技術(shù)的一個(gè)重要環(huán)節(jié)是去除營養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞壁，通常采用纖維素酶的酶解壁法處理。 取出細(xì)胞壁后將成熟的植物細(xì)胞置于清水中，細(xì)胞最終將a .皺紋b .膨脹破壞c .保持球形d .二是動(dòng)物細(xì)胞工程、植物細(xì)胞工程中常用的技術(shù)手段：植物組織培養(yǎng)、植物細(xì)胞雜交等動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、單克隆抗體制備等，回顧： 常用技術(shù)手段：動(dòng)物組織塊、細(xì)胞懸液、原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)、胰蛋白酶和膠原酶處理分散于單一細(xì)胞、幼年動(dòng)物器官組織中。 動(dòng)物胚胎，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程，加入培養(yǎng)液，用胰蛋白酶等處理壁細(xì)胞，適宜條件，無菌，無毒環(huán)境，營養(yǎng)適宜溫度和pH適宜氣體環(huán)境，1 .動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理是什么？ 2 .動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么3 .動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料的一般特征是離體細(xì)胞能夠在適當(dāng)?shù)臈l件下增殖(細(xì)胞增殖)，通常包括葡萄糖、氨基酸、生長促進(jìn)因子、無機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清等。 一般對(duì)胚胎組織和幼齡動(dòng)物組織進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。 胚胎組織和幼齡動(dòng)物組織細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng)。4.哪些細(xì)胞會(huì)失去接觸抑制？ 5 .體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞需要什么物質(zhì)和環(huán)境條件6 .動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用價(jià)值是？ 腫瘤細(xì)胞，無菌無毒環(huán)境，充分營養(yǎng)(血清或血漿)，適溫，PH，氣體環(huán)境(O2和CO2，C02的主要作用是維持培養(yǎng)液的PH值)。大量生產(chǎn)病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等生物制品藥性、毒性檢測基因工程中受體細(xì)胞的培養(yǎng)、動(dòng)物組織、單一細(xì)胞、細(xì)胞懸濁液、附壁生長、分瓶培養(yǎng)、10代細(xì)胞、50代細(xì)胞、不死細(xì)胞、原代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、胰蛋白酶、剪切、 培養(yǎng)液、接觸抑制、少數(shù)癌變、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)流程、畸形分化、細(xì)胞質(zhì)、核移植、多力羊育成過程動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)與克隆動(dòng)物、動(dòng)物細(xì)胞核移植：將動(dòng)物細(xì)胞核移植到去除細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，制成新胚胎，該新胚胎最終為動(dòng)物個(gè)體(克隆動(dòng)物)、分類： 細(xì)胞分化程度低，易于恢復(fù)全能性，細(xì)胞分化程度高，難于恢復(fù)全能性，原理：動(dòng)物細(xì)胞核全能性體核移植過程中，卵母細(xì)胞取核，體細(xì)胞取核，重組細(xì)胞，體核移植技術(shù)的應(yīng)用前景，1、加快畜牧業(yè)家畜遺傳改良進(jìn)程，2、保護(hù)瀕危物種， 3、醫(yī)療衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)和組織器官的移植、細(xì)胞膜流動(dòng)性、滅活病毒、PEG、電擊等，融合細(xì)胞有絲分裂，形成和誘導(dǎo)完整的雜交細(xì)胞的手段？ 融合的細(xì)胞類型是什么？ AB雜種細(xì)胞遺傳物質(zhì)有哪些特征，包括3種AA、AB、BB、2種生物遺傳物質(zhì)，1.2動(dòng)物細(xì)胞融合過程、原理？1.2動(dòng)物細(xì)胞的融合過程，為什么滅活病毒會(huì)成為誘導(dǎo)劑？ 滅活失去感染性，保持融合活性，反復(fù)注射植物細(xì)胞雜交技術(shù)、抗原、動(dòng)物，從動(dòng)物血清中分離抗體，用這種方法制備抗體的缺點(diǎn)：產(chǎn)量低、純度低現(xiàn)在，怎么解決這個(gè)問題呢？ 單克隆抗體！閱讀以下資料，找到單克隆抗體的概念，發(fā)現(xiàn)在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的b細(xì)胞能產(chǎn)生百萬種以上的特異抗體，但每個(gè)b細(xì)胞只能產(chǎn)生化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。 要獲得大量的單一抗體，必須在單一的b細(xì)胞中進(jìn)行無性繁殖，即克隆。 2.1單克隆抗體概念：單克隆抗體：單一b細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，單一b淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生特異性抗體的骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的雜交瘤細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、設(shè)計(jì)方案：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、單克隆抗體、 1975年英國科學(xué)家米爾斯坦和可樂實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生了大量的特異性抗體，有多少融合方式？ 雜交瘤細(xì)胞是如何篩選出來的？ 有什么特點(diǎn)所有雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生特異性抗體？ 如何大規(guī)模培養(yǎng)獲得大量的單克隆抗體？BB、b瘤、腫瘤(b、瘤)、(一選)選擇性培養(yǎng)基：選擇只有雜交瘤細(xì)胞存活、能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的b細(xì)胞，(二選):選擇能產(chǎn)生所需特異抗體的雜交瘤細(xì)胞，體外培養(yǎng)、小鼠腹腔培養(yǎng)、雜交瘤細(xì)胞特征：產(chǎn)生特異抗體，能大量增殖。單克隆抗體、雜交瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞、特異性雜交瘤細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞系、提取、免疫后b淋巴細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、單克隆抗體的制備過程：特征：產(chǎn)生特異性抗體，可大量繁殖，特異性強(qiáng)靈敏度高，可大量制備，強(qiáng)調(diào)：其他動(dòng)物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、單抗制造過程分為多少步驟？請用箭頭按正確順序連接圖解性文字，表示以下單克隆抗體制造過程的順序。 順序怎么樣？ 現(xiàn)在記住了嗎？2.3單克隆抗體的應(yīng)用，1、診斷試劑應(yīng)用最廣泛，準(zhǔn)確、高效、簡易、快速、單克隆抗體的最主要優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。.“生物導(dǎo)彈”=單克隆抗體藥物的單克隆抗體誘導(dǎo)，藥物用于彈頭、2、疾病治療和藥物搬運(yùn)，主要用于癌癥治療，單克隆抗體作為載體搬運(yùn)抗癌劑，形成“生物導(dǎo)彈”，正確殺傷癌變細(xì)胞。例.下圖顯示了單克隆抗體的制備工藝階段。 (1) _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。 (2)按培養(yǎng)基用途分類，圖中HAT培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。 (3)單克隆抗體與通常的血清抗體相比，最大的優(yōu)勢是 (4)動(dòng)物細(xì)胞融合除了使用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用誘導(dǎo)劑外，還可