人體氣味的成分以及檢測方法.doc

人體氣味的成分以及檢測方法摘 要人體氣味是人體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的氣味。據(jù)生物學家測定，人體氣味中含有好幾百種化學物質(zhì)。在刑偵方面：體氣味追蹤罪犯, 進行人體氣味的比對鑒別。利用警犬根據(jù)罪犯的特異性氣味來抓捕犯罪分子。在醫(yī)學方面，它是一種信號，能夠幫助人們診斷疾病，當人的健康狀況發(fā)生變化時，由體內(nèi)排出的化學物質(zhì)的成分也會隨著發(fā)生變化，訓練有素的醫(yī)生可借助體味的辨別對某些疾病進行診斷。而有的體味甚至是是一種潛形藥物，能幫助人們治病。另外，研究體味成分對香水、抑汗劑等去體味產(chǎn)品的開發(fā)起到指導、和推進作用。人體氣味具有信息素的功能，研究人體氣味的組成及性質(zhì)對于刑偵、醫(yī)學等領(lǐng)域具有重要的意義。本文全面研究了人體氣味樣品的分析程序，對以往研究人體氣味的采樣部位、采樣介質(zhì)、預處理方法等環(huán)節(jié)進行了比較。通過不同的檢測方法，以及對不同的人進行體味檢測，發(fā)現(xiàn)人體氣味主要是由脂肪酸、酯、醇、胺、酮等物質(zhì)組成,。并且多次分析同一個體氣味樣品的色譜圖有較好的相似性。本論文還根據(jù)對以往研究方法的總結(jié)，圍繞人體氣味的組成及檢測方法為主題，利用SPEM技術(shù)，與GC-MS技術(shù)設(shè)計實驗，對人體腋窩的氣味進行定性分析，以及相對量的比較。關(guān)鍵詞：人體氣味；成分分析；SPEM；GC-MSThe constituents and Detection methods of human body odorAbstractHuman body odor has the function of the pheromone, study of composition and nature of human body odor is crucial to the investigation, medical science and other fields. Human body odor has the function of the pheromone, study of composition and nature of human body odor is crucial to the investigation, medical science and other fields.This paper gives a comprehensive study of the analytical procedures of the human body odor samples, which were compared with the previous studies of human body odor sampling site, sampling media, pretreatment methods and other aspects. Odor detection by different detection methods, as well as different people, found that body odor is mainly composed of fatty acids, esters, alcohols, amines, ketones, and other substances. And repeated analyzes the similarity of the chromatograms of the same individual odor samples. This thesis is based on a summary of previous research methods, around the composition of body odor and test methods for the theme of using SPEM technology, technical design of experiments by GC-MS, and have the qualitative analysis and the relative amount of comparison of human axillary odor.Key words: Body Odor; Component Analysis; SPEM；GC-目 錄1 引言11.1 人體氣味概況11.2 人體氣味的應用21.3 國內(nèi)外對于人體氣味研究32 人體氣味的檢測方法52.1 提取與濃縮52.1.1 固相微萃取法（SPME）52.1.2 樣品預濃縮捕集(SPT)62.1.3 兩種預處理方法的比較72.2 檢測與分離83 人體氣味成分檢測實驗設(shè)計93.1 實驗儀器93.2 實驗步驟93.2.1樣品采集93.2.2 樣品的預處理103.2.3 色譜條件103.3 結(jié)果預測及處理103.4 結(jié)論10參考文獻11致 謝121 引言1.1 人體氣味概況自然界存在著許多可以釋放出氣味的物質(zhì)，在Macku等人的研究中發(fā)現(xiàn)大多數(shù)的植物揮發(fā)出的氣味具有物種共性，即同一物種的植物具有大致相同的氣味。對動物的氣味進行研究也得到了相同的結(jié)論1。人作為自然界的一部分也會揮發(fā)出氣味。人體就是一個氣味源。人體氣味(通常稱作“體味”)是人體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的氣味，每時每刻都在向外散發(fā)。據(jù)生物學家測定，人體氣味中含有好幾百種化學物質(zhì)。這些代謝產(chǎn)物中有二氧化碳、硫化氫、還有醛、酮、醚、苯以及鹵代烴等烴的衍生物等2。其中，由呼吸器官排出的化學物質(zhì)有149種、胃腸氣體中有250種、尿液中有299種、糞便中有196種、汗液中有151種，皮膚表面排出的有271種。而本次著重研究討論由皮膚釋放氣味的組成成分及檢測方法。人與人之間的氣味存在個體特殊性。原因在于每個人身體上的腺體與微生物相互作用過程的不同。人體皮膚上有三大腺體即汗腺、皮膚腺和項漿分泌腺。這些腺體分泌物本身往往是無氣味的，但當腺體分泌的分泌物與不同種類和密度的微生物相互作用時則產(chǎn)生各種不同氣味。不同皮膚腺的分泌物的化學成分和數(shù)量不同，以及身體不同部位濕度和氧濃度決定了皮膚細菌群落，同時也決定了產(chǎn)生的氣味的不同3。汗腺被認為是產(chǎn)生體味的主要腺體，它廣泛分布于身體表面。汗腺分泌的汗液主要成分是水，也含有少量糖蛋白、乳酸、糖、氨基酸、電解質(zhì)等其它成分。因此汗液與不同種類以及不同濃度的菌群相互作用，就產(chǎn)生不同的人體氣味。 人類的氣味同時也受基因、飲食、情緒、環(huán)境、時間等因素的影響和干擾，成分及其含量會隨之發(fā)生一些變化。所以每個人都有自己與眾不同的、特定的人體氣味。但是在一定特定的時期具有相對穩(wěn)定性4。正因為這一點，使得人體氣味的研究變得更有規(guī)律可循，更有價值，更有意義。1.2 人體氣味的應用在刑偵方面：體氣味追蹤罪犯, 進行人體氣味的比對鑒別, 已為多年的公安實踐所證明。利用警犬根據(jù)罪犯的特異性氣味來抓捕犯罪分子?，F(xiàn)代偵察學工作者還可以在案犯現(xiàn)場采集人體氣味，分析處理后得到罪犯的“味紋”，在氣味檔案匣中進行對照鑒別，根據(jù)此破案比指紋破案更具優(yōu)越性。目前，有關(guān)犯罪現(xiàn)場人體氣味鑒別的研究有兩種：一是利用警犬鑒別人體氣味；二是利用儀器分析鑒別人體氣味。前者在理論上和操作方法上均較為成熟，已被國內(nèi)外廣泛應用；后者則處于研究的起始階段，遠不能應用于實踐。因此，對人體氣味的深入研究十分有必要，十分有價值5。在醫(yī)學方面，它是一種信號，能夠幫助人們診斷疾病，當人的健康狀況發(fā)生變化時，由體內(nèi)排出的化學物質(zhì)的成分也會隨著發(fā)生變化，常會散發(fā)出某些特殊的氣味，訓練有素的醫(yī)生可借助體味的辨別對某些疾病進行診斷。醫(yī)學上稱為“嗅診”。此外體內(nèi)內(nèi)分泌系統(tǒng)發(fā)生變化時,體味也會隨之發(fā)生變化, 青春期前后, 婚前及婚后體味是各不相同的。其中最為明顯的是女性體味變化。沒有進人青春期的少女體味較為恬淡、清新。而進人青春期后,體香逐漸明顯, 渾身散發(fā)出一種清出淡雅的香,且一般對甜味和果香味有著強烈的愛好者更為明顯。隨著性成熟期的到來則體味越來越濃郁,這種變化是隨著性成熟體內(nèi)內(nèi)分泌的改變而引起的,并且女性的體味又會隨著自身月經(jīng)周期或排卵等生理活動而發(fā)生周期性的變化6。所以，需要對人體氣味進行深入研究。而有的體味甚至是是一種潛形藥物，能幫助人們治病。有研究發(fā)現(xiàn)，月經(jīng)不調(diào)的未婚女性在連續(xù)吸入一段時間男性腋部分泌物的氣味后，可使不規(guī)則的月經(jīng)周期正常。同時，人體氣味具有標志人類情緒的信息，它是一種無聲語言，能起到潛在的融洽人際關(guān)系，有助于社交和提高工作效率的作用。科學研究已經(jīng)證實, 一個人的氣味和其免疫系統(tǒng)有著密切的關(guān)系, 由基因決定的人類白細胞抗原通過免疫系統(tǒng)控制著一個人獨有氣味的產(chǎn)生。人體氣味的這種和基因相關(guān)的遺傳獨特性是人們利用個體氣味識別不同個體的科學依據(jù)7。人體氣味對配偶選擇還有一定的影響。在一個研究人類白細胞抗原和氣味相關(guān)性的個體識別試驗中, 讓女性選擇其喜歡的男性氣味, 有較多的女性選擇和其氣味基因不同的男性氣味, 并顯示出顯著性8。另外，研究體味成分對香水、抑汗劑等去體味產(chǎn)品的開發(fā)起到指導、和推進作用。市面上的去體味產(chǎn)品的作用的機理通常為，殺滅或者抑制產(chǎn)生異味的細菌，并用香味加以掩蓋身體難聞的氣味。當體味的產(chǎn)生的機理及其中成分的種類及含量研究得很清楚之后。這類去體味產(chǎn)品就可以發(fā)揮更有效的效果，以及帶給使用者跟清新自然的味道9。1.3 國內(nèi)外對于人體氣味研究國內(nèi)外對于人體氣味分析方法的研究還處于探索階段。Somerville等人采用動態(tài)頂空即吹掃捕集的方法對人體氣味樣品進行分析。實驗中首先將采集氣味的棉布洗凈、晾干后在150烘箱中烘10分鐘，然后放于采樣者腋下采集8小時，得到氣味樣品。樣品置于樣品瓶中，通入70、120mL的干空氣循環(huán)2min、3min和5min，使易揮發(fā)性、半揮發(fā)性、難揮發(fā)性氣體依次流出。吸附了氣味的吸附劑在320下解吸，進入氣相色譜進行分析。氣相色譜升溫程序為：初溫40，以6min的速度升到190。實驗中還對人體氣味的性質(zhì)進行了探索，選擇了兩對雙胞胎和不相關(guān)人群進行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)雙胞胎的匹配度要遠遠超過不相關(guān)人群，人體氣味與基因組合有著較大的關(guān)聯(lián)。McCormick等人改進了捕集裝置，為了控制各種影響氣味分析的因素，采用一個循環(huán)系統(tǒng)，其它實驗條件同Somerville，得到的4個統(tǒng)計參數(shù)優(yōu)于前者10。目前研究中發(fā)現(xiàn)特定類周醇、脂肪酸是人體氣味中生物學構(gòu)成的主要成分。在對腋窩氣味樣品分析中，發(fā)現(xiàn)135種組成成分，其中有3040個組成可以被鑒定出來，碳環(huán)為C3C30。在以往的分析試驗中，大多采用固相微萃取與氣質(zhì)聯(lián)用的方法對氣味進行分析（分析樣本為亞洲人種），共檢測出人體氣味中的物質(zhì)約有135種，。根據(jù)各物質(zhì)的性質(zhì)將它們歸納為烴(H)、芳香類(AR)、醛(ALD)、酯(ES)、醇(ALC)、酮(K)、醚(ETH)、酚(PH)、酸(AC)、含雜原子(HA)及鹵代烴(HH)等類別。部分主要成分見下表。表1 人體氣味主要化學成分表序號 保留時間 名稱 化學式 1 2.023 Acetic acid, chloro, ethyl ester(氯代乙酸乙酯) C4H7ClO2 2 2.225 Acetic acid, anhydride(乙酸酐) C4H6O3 3 3.080 4,6 - Heptadiyn-3-one(4,6-庚二炔-3-酮) C7H6O 4 3.081 Acetic acid,chloro,anhydride(氯代乙酸酐) C4H4Cl2O3 5 3.961 2-Methyl-propanoic acid(2-甲基丙酸) C4H8O2 6 12.363 Nonanal(正壬醛) C9H18O 7 12.590 2-Ethyl-hexanoic acid(2-乙基己酸) C8H16O2 8 12.912 Trimethyl-phenylacetyl (三甲基苯乙酰) C11H16O5 9 13.533 Camphor(2-莰酮) C10H16O 10 13.951 Octanoic acid(辛酸) C8H16O2 11 14.161 1-Borneol(1-莰醇) C10H18O 12 14.299 p-Menthan-4-ol(對烷-4-醇) C10H20O 13 14.525 Naphthalene(萘) C10H8 14 14.875 5-Dodecenol(5-十二烯醇) C12H24O 15 16.266 Nonanoic acid(壬酸) C9H18O2 16 18.067 Cyclopentane,1,1,3-trimethyl-3-(2-methyl) ( 1, 1, 3-三甲基-3(2-甲基) 環(huán)戊烷) C12H22 17 18.721 Butanoic acid, 2-ethyl-3-hydroxyhexyl ester (丁酸2-乙基-3-羥基己基酯) C12H24O3 18 19.252 2-Ethyl-1-decanol(2-乙基-1-癸醇) C12H26O 19 19.518 Cyclododecanol(環(huán)十二醇) C12H24O 20 19.833 _Cedrene(-雪松烯) C15H24 21 20.323 5, 9-Undecalactone(5, 9-十一烷酸內(nèi)酯) C13H22O 22 20.680 2, 5-Cyclohexadiene(2, 5-環(huán)己二烯) C14H20O2 23 21.353 2-Butyl-1-octanol(2-丁基-1-辛醇) C12H26O 24 21.503 Phenol, 2, 6-bis(1, 1-dimethylethyl)-4-methyl (4-甲基-2, 6-二( 1, 1-二甲基乙基酚) ) C15H24O 25 22.500 3, 5-Di-tert-butyl-4-hydroxybenzaldehyde (3, 5-二叔丁基-4-羥基苯甲醛) C15H22O2 26 23.139 Propanoldiacid, 2-methyl (2-甲基丙醇二酸) C16H30O5 27 23.224 Diethyl phthalate(鄰苯二甲酸二乙酯) C12H14O4 28 23.345 2-Butyl-1-octanol(2-丁基-1-辛醇) C12H22O 29 24.299 2-Butenedioic acid(E)-,dibutyl ester (2-丁烯二酸二丁酯) C12H20O4 30 24.876 4-Morpholineethanamine(4-嗎啉乙胺) C6H14N2O 31 25.241 2-Ethyl-1-dodecanol(2-乙基十二醇) C14H30O 32 27.511 Nonadecane(十九烷) C19H40 33 28.700 1, 2-Benzenedicarboxylic acid dibutyl ester (1, 2-羧基苯酸二丁酯) C16H22O4 34 29.301 Formic acid octyl ester(甲酸辛基酯) C9H18O2 35 31.510 Dibutyl phthalate(鄰苯二甲酸二丁酯) C16H22O4 36 37.210 2,3,3-Trimethyl cyclobutanone (2, 3, 3-三甲基環(huán)丁酮) C7H12O由上表可見，人體氣味組成復雜，所含物質(zhì)種類繁多，一般一個氣味樣品的氣相色譜檢出物質(zhì)達上百種。而且每種成分的含量極其微小，對其中每一種物質(zhì)進行詳盡的量化分析目前還不具備相應的條件，具有很大的困難。2 人體氣味的檢測方法人體氣味的特點為成分多，含量微，結(jié)構(gòu)復雜，有一定檢測難度。對于與人體氣味屬性特點相當?shù)倪€有花朵香味、香料，香水香味等等。下面介紹幾種用于含量微，成分多，結(jié)構(gòu)復雜化合物的檢測方法。2.1 提取與濃縮 對于人體氣味這種揮發(fā)性的氣體樣品，目前比較流行的提取與濃縮方法為固相微萃取(SPME)和樣品預濃縮捕集(SPT)兩種方法對樣品進行預處理。樣品采集于采樣介質(zhì)后，被上述兩種預處理裝置的吸附介質(zhì)吸附富集，在氣相色譜分析時，氣味樣品從吸附介質(zhì)上解吸下來進入色譜柱分離后經(jīng)檢測器檢測。經(jīng)氣相色譜分析得到人體氣味樣品的色譜圖，含有樣品中各種物質(zhì)的出峰信息。2.1.1 固相微萃取法（SPME）固相微萃取(solid-phase microextraction,SPME)技術(shù)，是20世紀90年代興起的一項新穎的樣品前處理與富集技術(shù),它最先由加拿大Waterloo大學的Pawliszyn教授的研究小組于1989年首次進行開發(fā)研究,屬于非溶劑型選擇性萃取法。其裝置類似于一支氣相色譜的微量進樣器，萃取頭是在一根石英纖維上涂上固相微萃取涂層，外套細不銹鋼管以保護石英纖維不被折斷，纖維頭可在鋼管內(nèi)伸縮。將纖維頭浸入樣品溶液中或頂空氣體中一段時間,同時攪拌溶液以加速兩相間達到平衡的速度,待平衡后將纖維頭取出插入氣相色譜汽化室,熱解吸涂層上吸附的物質(zhì)。被萃取物在汽化室內(nèi)解吸后,靠流動相將其導入色譜柱,完成提取、分離、濃縮的全過程。固相微萃取技術(shù)幾乎可以用于氣體、液體、生物、固體等樣品中各類揮發(fā)性或半揮發(fā)性物質(zhì)的分析。發(fā)展至今短短10年時間，已在環(huán)境、生物、工業(yè)、食品、臨床醫(yī)學等領(lǐng)域的各個方面得到廣泛的應用。固相微萃取原理是當被分析有機物在萃取頭與萃取體系之問達到平衡，分析物與萃取頭之間有一分配系數(shù)K，該分配系數(shù)與分析物在萃取體系中的量及萃取頭分析物的量有以下關(guān)系： 式中：N吸附于萃取頭上分析物的量K分析物在萃取頭和樣品問的分配系數(shù)C0萃取前分析物在樣品中的濃度CS分析物在萃取后樣品中的濃度Cf分析物在萃取頭中的濃度Vf萃取頭的體積Vs樣品的體積由于VfV0，所以N=KVfC0，K值取決于萃取頭一定的固定相類型，而對于一定的萃取頭類型來說，其體積Vf是固定的，故N與C0之間成線性關(guān)系。C0可通過氣象色譜測定。從而確定N值。 SPME有三種基本的萃取模式：直接萃?。―irect Ectraction SPME）、頂空萃取(Headspace SPME)和膜保護萃?。╩embrane-protected SPME）。在揮發(fā)性物質(zhì)的檢測當中，主要采取頂空萃取模式。此法收集的氣相部分與嗅覺感覺的成分在比例上一致。代表著氣味的真實成分和濃度。特別適于低沸點化合物的研究，例如人體氣味的分析。 在頂空萃取模式中，萃取過程可以分為兩個步驟：、被分析組分從液相中先擴散穿透到氣相中；、被分析組分從氣相轉(zhuǎn)移到萃取固定相中。這種改型可以避免萃取固定相受到某些樣品基質(zhì)（比如人體分泌物或尿液）中高分子物質(zhì)和不揮發(fā)性物質(zhì)的污染。在該萃取過程中，步驟2的萃取速度總體上遠遠大于步驟的擴散速度，所以步驟成為萃取的控制步驟。因此揮發(fā)性組分比半揮發(fā)性組分有著快得多的萃取速度。實際上對于揮發(fā)性組分而言，在相同的樣品混勻條件下，頂空萃取的平衡時間遠遠小于直接萃取平衡時間。2.1.2 樣品預濃縮捕集(SPT) 樣品預濃縮捕集(Sample Pre-concentration Trap，SPT)是一種新型的樣品預處理裝置，適于預處理空氣及氣相介質(zhì)中的揮發(fā)性有機物。它與氣相色譜的頂端直接相連，由氣相色譜控制操作。裝置主要由以下幾個部分組成：（1)SPT吸附部分；(2)十通閥；(3)可替換的進樣口通道；(4)電子質(zhì)量流速控制儀；（5)控光裝置泵。吸附狀態(tài)下的SPT工作原理如圖2.1.2所示，樣品由4號閥進入，經(jīng)5、8、9、2號閥暇附，流速由3號閥連接的流速控制儀和控光裝置泵控制。吸附完成之后，閥進行切換解吸，載氣通過l號閥經(jīng)2號閥，進入吸附管中將解吸下來的物質(zhì)帶入氣相色譜柱進入檢測器檢測。 SPT與其他預處理裝置相比，優(yōu)勢在于：具有較高的升溫速度，可達到40min，保證了從捕集器到氣相色譜之問的快速進樣。冷卻劑用量較少。SPT的結(jié)構(gòu)緊密，具有精確設(shè)計的控制SPT冷卻的程序，保證了較少的冷卻劑用量，節(jié)省了用戶的支出。具有長、短兩種捕集尺度，并配有液氮，液體C02兩種冷卻劑?？筛鶕?jù)具體的檢測對象選擇應用。通常短尺寸捕集器適于預處理沸點較低的化合物，長尺寸捕集器用于吸附沸點接近于捕集溫度的物質(zhì)。2.1.3 兩種預處理方法的比較分別采用SPME和SPT分析同一氣味樣品得到色譜圖比較如圖2.1.3所示： 由圖2.1.3可見，采用SPME預處理氣味樣品檢出效果明顯優(yōu)于SPT，SPT檢出氣味樣品物質(zhì)少且出峰強度較低，不能全面的反映人體氣昧樣品組成。同時，采用固相微萃取對人體氣味樣品進行預處理，總檢出物質(zhì)種類大大多于樣品預縮捕集法，其總峰數(shù)是后者的3倍多?？梢娽槍θ梭w氣味樣品，SPME比SPT能更大程度的檢測出其中所含物質(zhì)，更具有優(yōu)越性。因而確定了固相微萃取法作為處理人體氣味樣品的最佳方法。2.2 檢測與分離色譜是一種很好的分離手段，可以將復雜的混合物中的各個組分分離開，但它的定性、定結(jié)構(gòu)的能力較差，通常只能利用各組分的保留特性來定性，這在欲定性的組分完全未知的情況下進行定性分析就更加困難了。而隨著一些定性和定結(jié)構(gòu)的分析手段質(zhì)譜(MS)，紅外光譜(IR)，紫外光譜(UV)，原子吸收光譜(AAS)，等離子體發(fā)射光譜(ICP-ACE)，核磁共振光譜（NMR)等技術(shù)的發(fā)展，確定一個純組分是什么化合物，其結(jié)構(gòu)如何已是比較容易的事。因此由一種分離手段與一種鑒定方法組成的聯(lián)用技術(shù)，是當前儀器分析和分析儀器的發(fā)展方向之一。2.2.1 GC-MS法氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)是分析儀器中較早實現(xiàn)聯(lián)用技術(shù)的儀器。毛細管氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)中，質(zhì)譜儀相當于氣相色譜儀的檢測器，而氣相色譜儀則成了質(zhì)譜儀的進樣裝置。GC-MS有兩種工作方式：全掃描(SCAN)和選擇離子儲存(SIS)。全掃描工作方式適應于未知化合物的定性分析，SIS方式只掃描所選定的一個或幾個特征離子，因此色譜圖本底小，其靈敏度比全掃描提高23個數(shù)量級，且選擇性強，適合目標化合物的微量分析。當基體背景或協(xié)同流出物相對于目標化合物很大時，利用選擇離子儲存方式可以有選擇地將特種離子存儲在離子阱中，可以通過控制離子阱中的離子數(shù)量來獲得最佳分辨率。GC-MS儀工作流程圖見圖2.23 人體氣味成分檢測實驗設(shè)計 本實驗為了了解人體氣味的組成成分，優(yōu)化氣味分子的檢測條件。采用頂空固相微萃取氣相色譜-質(zhì)譜法研究不同個體的腋窩部位的氣味，探討了利用氣相色譜質(zhì)譜指紋圖譜區(qū)別不同個體腋窩氣味的方法。3.1實驗儀器Varian Saturn 2000氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,美國Varian公司制造;；手動SPME進樣器, 美國Supelco公司制造；70m乙烯二醇-二乙烯基苯共聚物(CW-DVB)萃取頭。3.2 實驗步驟3.2.1樣品采集分別選男性8名，女性8名，總共16名20到22歲的志愿者作為本次實驗的對象。并確保在提取樣品前的24小時以內(nèi)沒有沐浴或使用香水，以免對實驗結(jié)果造成干擾。把醫(yī)用紗布、密封樣品瓶等用酒精浸泡過夜，并置于烘箱內(nèi)，設(shè)置100烘干12小時。徹底清除干擾雜質(zhì)。在采集樣本前，工作人員要用無味肥皂徹底清洗手部，并穿戴一次性PE手套。采集樣本的環(huán)境應無異味，無較大空氣流動的實驗室內(nèi)。采集樣本時，把經(jīng)過除雜處理的紗布固定在志愿者腋窩處采集30min。完成采集后，取下放入密封樣品瓶中做好標記，等待檢測。每一名志愿者進行兩次樣本采集，分別標記為A1和A2。則16名志愿者樣品號為：A1A2,B1B2,C1C2,D1D2,P1P2以此類推。3.2.2 樣品的預處理 根據(jù)本論文之前對SPME法與SPT法預處理樣品效果的比較，得出SPME法進行預處理的樣本得出的數(shù)據(jù)更好，因此，實驗將采用SPME法對采集的樣本進行處理。根據(jù)SPME法萃取膜的老化要求，在氣相色譜儀的進樣口，對固相微萃取的萃取頭進行老化處理。將裝有氣味樣品的樣品瓶于60恒溫，將固相微萃取器的萃取頭通過瓶蓋的橡皮墊插入到樣品中，推出纖維頭。注意不要使萃取頭碰到樣品紗布，吸附40 min，隨后抽回纖維頭，從樣品瓶上拔出萃取頭，再將萃取頭插入氣相色譜-質(zhì)譜儀進樣口，推出纖維頭，同時啟動儀器采集數(shù)據(jù)，于220不分流解吸5 min，抽回纖維頭后拔出萃取頭。3.2.3 色譜條件DB-5MS毛細管色譜柱，30 m0.25 mm0.25m，載氣為高純度氦氣(He)，不分流；迸樣口溫度250，柱溫：起始溫度40，保持1 min，以6min升溫至190，保持10 min，以10/min升溫至250。3.2.4 質(zhì)譜條件接口溫度230，離子阱溫度150，電離方式EI，電子能量70 eV，掃描質(zhì)量范圍為10500 amu。