YY 0993-2015醫(yī)療器械生物學(xué)評價(jià) 納米材料-體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)（MTT試驗(yàn)和LDH試驗(yàn)）.pdf

ICS1104030 C30 . . 中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) YY/T09932015 醫(yī)療器械生物學(xué)評價(jià) 納米材料 : 體外細(xì)胞毒性試驗(yàn) MTT試驗(yàn)和LDH 試驗(yàn) ( ) BioloicalevaluationofmedicaldevicesNanomaterial g : Invitroctotoxicit tests MTTassa andLDHassa y y ( y y)2015-03-02發(fā)布 2016-01-01實(shí)施 國家食品藥品監(jiān)督管理總局 發(fā) 布YY/T09932015 目 次 前言 引言 范圍1 1 規(guī)范性引用文件2 1 術(shù)語 定義和縮略語3 、 1 樣品 對照品和試劑制備4 、 2 細(xì)胞系5 3 培養(yǎng)液6 3 試驗(yàn)過程7 4 數(shù)據(jù)記錄與分析8 5 接受準(zhǔn)則9 6 結(jié)果評定10 6 附錄 資料性附錄 試劑 耗材及設(shè)備 A ( ) 、 8 附錄 資料性附錄 孔板加樣模板示例 B ( ) 96 9 參考文獻(xiàn) 10 YY/T09932015 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)按照 給出的規(guī)則起草 GB/T1.12009 。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利 本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任 。 。本標(biāo)準(zhǔn)由國家食品藥品監(jiān)督管理總局提出 。本標(biāo)準(zhǔn)由中國食品藥品檢定研究院歸口 。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位 中國食品藥品檢定研究院 : 。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人 徐麗明 邵安良 袁博 付海洋 姜華 馮曉明 王春仁 : 、 、 、 、 、 、 。 YY/T09932015 引 言 納米材料引起細(xì)胞毒性的機(jī)理主要包括對細(xì)胞線粒體功能的影響及對細(xì)胞膜的損傷 可以分別用 , 二甲基 噻唑 二苯基 氫 四氮唑溴 試驗(yàn)和乳酸脫氫酶 試驗(yàn)進(jìn)行檢測3-(4,5- -2- )-2,5- -2 - (MTT) (LDH) 。 然而 有些納米材料可能對 測試和 測試有一定的干擾 檢測時(shí)需要排除干擾因素來獲得準(zhǔn) , MTT LDH , 確結(jié)果 為建立 適 合 納 米 材 料 及 組 合 在 醫(yī) 療 器 械 中 納 米 材 料 的 細(xì) 胞 毒 性 評 價(jià) 方 法 本 標(biāo) 準(zhǔn) 作 為 。 , 細(xì)胞毒性試驗(yàn)的補(bǔ)充 增加了排除干擾因素的處理方法以及陽性對照的選擇 同時(shí) 增GB/T16886.5 , 。 , 加了 試驗(yàn)方法 用以定量地評價(jià)納米顆粒對細(xì)胞膜的損傷 本標(biāo)準(zhǔn)作為適合納米材料的 試 LDH , 。 MTT 驗(yàn)和 試驗(yàn)的試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn) 為正確評價(jià)納米材料及組合在醫(yī)療器械中納米材料的細(xì)胞毒性提供 LDH , 技術(shù)支持 。 YY/T09932015 醫(yī)療器械生物學(xué)評價(jià) 納米材料 : 體外細(xì)胞毒性試驗(yàn) MTT試驗(yàn)和 LDH 試驗(yàn) ( )1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了納米材料及組合在醫(yī)療器械中的納米材料的體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)方法 試樣制備 操作 、 、 步驟及評價(jià) 。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于納米材料及組合在醫(yī)療器械中的納米材料 顆?；蚶w維被包裹或結(jié)合在一種不能釋 ( 放或非游離狀態(tài)的除外 的體外細(xì)胞毒性評價(jià) 包括以 為受試細(xì)胞的 試驗(yàn)和 試驗(yàn) ) , L929 MTT LDH 。 本標(biāo)準(zhǔn)是 的補(bǔ)充 GB/T16886.5 。2 規(guī)范性引用文件 下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 僅注日期的版本適用于本文 。 , 件 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改單 適用于本文件 。 , ( ) 。 醫(yī)療器械生物學(xué)評價(jià) 第 部分 風(fēng)險(xiǎn)管理過程中的評價(jià)與試驗(yàn) GB/T16886.1 1 : 醫(yī)療器械生物學(xué)評價(jià) 第 部分 體外細(xì)胞毒性試驗(yàn) GB/T16886.5 5 : 醫(yī)療器械生物學(xué)評價(jià) 第 部分 樣品制備與參照樣品 GB/T16886.12 12 :3 術(shù)語 定義和縮略語 、31 術(shù)語和定義 . 界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件 GB/T16886 。311 . 納米材料 nanomaterial 物質(zhì)結(jié)構(gòu)在三維空間中至少有一維處于納米尺度 或由納米結(jié)構(gòu)單元構(gòu)成的且具 有 特 殊 性 質(zhì) 的 , 材料 。312 . 納米材料醫(yī)療器械 nanomaterialmedicaldevices 組合有或含有納米材料的醫(yī)療器械 。32 縮略語 . 下列縮略語適用于本文件 。 對乙酰氨基酚 APAP: (acetaminophen) 二甲基亞砜 DMSO: (dimethylsulfoxide) 胎牛血清 FBS: (fetalbovineserum) 小鼠成纖維細(xì)胞