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文檔簡(jiǎn)介

1、雙水相萃取技術(shù),主講人: 2014-12-25,一.概述 二. 基本原理及流程 三. 技術(shù)與設(shè)備 四. 研究及應(yīng)用 五、不足之處 六. 發(fā)展方向,一、概述,1.1 基本概念,萃?。╡xtraction):,萃取是利用溶質(zhì)在互不混溶的兩相之間分配系數(shù)的不同而使溶質(zhì)得到純化或濃縮的技術(shù)。,萃取劑:用以進(jìn)行萃取的溶劑,參與溶質(zhì)分配的兩相不同,液-固萃取,液-液萃取,萃取原理,物理萃取 化學(xué)萃取 雙水相萃取 超臨界萃取,萃取劑:用以進(jìn)行萃取的溶劑, 萃取法的分類(lèi):,1896年荷蘭微生物學(xué)家Berjerinck發(fā)現(xiàn)瓊脂水溶液與可溶性淀粉或明膠水溶液混合時(shí)形成雙水相現(xiàn)象。,1.2 發(fā)展歷程,1956年瑞典

2、Land大學(xué)的Albertsson教授及其同事開(kāi)始 對(duì)水相系統(tǒng)研究。測(cè)定了許多雙水相系統(tǒng)的相圖,考察 了蛋白質(zhì)、核酸、病毒、細(xì)胞及細(xì)胞顆粒在雙水相中的 分配行為,為雙水相萃取系統(tǒng)的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。 只局限于實(shí)驗(yàn)內(nèi)的測(cè)定和理論研究。,Kula教授研究小組對(duì)雙水相的應(yīng)用、工藝流程、操作參數(shù)、 設(shè)備、成本分析等進(jìn)行了大量研究,在應(yīng)用工程上獲得成功。 1978年首先將雙水相萃取技術(shù)用于酶的大規(guī)模分離鈍化, 建成了一套工業(yè)裝置,達(dá)到20Kg/h的處理能力,分離鈍化了 幾十種酶,也應(yīng)用與基因工程的分離。,國(guó)內(nèi)自20世紀(jì)80年代起也開(kāi)展了ATPE技術(shù)研究。,迄今為止, 雙水相萃取技術(shù)已被成功應(yīng)用于生物工程、

3、藥物提取、金屬離子分離等方面。在生物工程、藥物分析、環(huán)境科學(xué)等方面有著廣闊的應(yīng)用前景。盡管其已發(fā)展成為一種相對(duì)比較成熟的技術(shù), 然而, 相關(guān)研究和應(yīng)用還不夠深入, 一些技術(shù)難題還有待解決,但仍然有值得深入研究與完善的方面。,1.3 雙水相概念,將兩種不同的水溶性聚合物的水溶液混合時(shí),當(dāng)聚合物濃度達(dá)到一定值時(shí),體系自然地分成互不相溶的兩相.,二.雙水相萃取的原理及流程,2.1 原理 一定條件下,水相也可以形成兩相甚至多相。所以有可能將生物活性物質(zhì)(水溶性的酶、蛋白質(zhì)等)從一個(gè)水相轉(zhuǎn)移到另一個(gè)水相中,從而完成分類(lèi)任務(wù)。 因此雙水相萃取與溶媒萃取的原理相似。,當(dāng)兩種高聚物水溶液相互混合時(shí),他們之間的

4、相互作用可分為三類(lèi):,互不相容(imcompatibility) 復(fù)合凝聚(complex coacervation) 完全互溶(complete miscibility),2.1.1 雙水相體系的形成, 聚合物之間的不相溶性,即聚合物分子的空間阻礙作用(表面性質(zhì)、電荷作用、氫鍵、離子鍵、環(huán)境因素等),相互間無(wú)法滲透,分為兩相。 兩種聚合物水溶液的水溶性有差異,混合后發(fā)生相分離,并且水溶性差別越大,相分離的傾向越大。 加入鹽分,由于鹽析作用,聚合物與鹽類(lèi)溶液也能形成兩相。,2.1.2 雙水相體系的分類(lèi),雙聚物:,PEG/DEX、聚乙二醇/聚乙烯醇、聚乙烯醇/甲基纖維素、聚丙二醇/葡聚糖、聚丙二

5、醇/甲氧基乙二醇等,聚合物-低分子物質(zhì)的化合物:,PEG/磷酸鉀、PEG/磷酸胺、 PEG/硫酸鈉、PEG/葡糖糖等,2.1.3 分配系數(shù), 當(dāng)萃取體系的性質(zhì)不同時(shí),物質(zhì)進(jìn)入雙水相體系后,由于各種阻礙作用的存在,物質(zhì)分配不同,使其在上、下相中的濃度不同。,K=C上/C下,C上和C下分別為被分離物質(zhì)在上、下相的濃度。,分配系數(shù)K等于物質(zhì)在兩相的濃度比,由于各物質(zhì)的K不同,可用雙水相萃取體系對(duì)物質(zhì)進(jìn)行分離,其分配情況服從分配定律。,其中上下相組成分別為T(mén)和B, T和B量的遵循杠桿定律: 即T和B相質(zhì)量之比等于系線 上MB與MT的線段長(zhǎng)度之比。,2.1.4 相圖, 圖1是典型的高聚物-高聚物-水雙水

6、相體系的直角坐標(biāo)相圖。兩種聚合物A、B以適當(dāng)比例溶于水就會(huì)分別形成有不同組成密度的兩相。輕相組成用T點(diǎn)表示,重相組成用B點(diǎn)表示。曲線稱(chēng)為結(jié)線,直線稱(chēng)為系線。結(jié)線上方是兩相區(qū),下方為單相區(qū)。,2.2雙水相萃取工藝流程,雙水相萃取技術(shù)的工藝流程主要有三部分構(gòu)成:,(1)目的產(chǎn)物的萃取 (2)PEG循環(huán) (3)無(wú)機(jī)鹽的循環(huán),三、雙水相萃取技術(shù)及設(shè)備,離子液體雙水相體系( Ionic liquids aqueous two-phase system,ILATPS)通常由一種有機(jī)鹽 (親水性離子液體)、一種無(wú)機(jī)鹽 (如磷酸鹽、碳酸鹽、氫氧化物等)和水形成, 它綜合了離子液體和雙水相體系的優(yōu)點(diǎn)。,3.1

7、離子液體雙水相萃取,Gutowski等于 2003年首次提出了離子液體雙水相的概念, 研究發(fā)現(xiàn)了親水性離子液體 Bm im Cl和水合磷酸鉀可以形成上相富集離子液體和下相富集磷酸鉀的雙水相體系,并且證明這一雙水相體系可能在分離萃取上有極好地應(yīng)用前景。,1)體系易于放大,各種參數(shù)可以按比例放大而產(chǎn)物的回收率并不降低, 這點(diǎn)對(duì)于工業(yè)應(yīng)用尤為有利; 2)體系內(nèi)傳質(zhì)和平衡速度快,回收率高,可達(dá)到90%以上, 比起其他的一些分離過(guò)程,其能耗小; 3)體系的相間張力大大低于有機(jī)溶劑與水的相間張力,分離條件溫和,因而能保持絕大部分生物分子的活性; 4)操作條件溫和,整個(gè)過(guò)程可在常溫常壓下進(jìn)行; 5)離子液體

8、的蒸汽壓幾乎為零,不會(huì)出現(xiàn)像有機(jī)溶劑那樣因揮發(fā)而引起環(huán)境問(wèn)題; 6)與傳統(tǒng)的高聚物雙水相相比, 可更好的控制乳化現(xiàn)象。,3.1.1特點(diǎn),3.2兩水相反應(yīng)器,在兩水相系統(tǒng)中進(jìn)行轉(zhuǎn)化翻譯功能,如酶促反應(yīng),可以把產(chǎn)物移入另一相中,消除產(chǎn)物抑制,因而提高了產(chǎn)率。這實(shí)際上是一種反應(yīng)和分離耦合的過(guò)程,有時(shí)也成為萃取生物轉(zhuǎn)化;如果發(fā)生的是一種發(fā)酵過(guò)程,則也稱(chēng)為萃取發(fā)酵,因此此時(shí)也可以把兩水相系統(tǒng)稱(chēng)為兩水相反應(yīng)器。,3.3進(jìn)行兩水相生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)需滿足以下條件, 催化劑應(yīng)單側(cè)分配; 底物應(yīng)分配于催化劑所處的相中;產(chǎn)物應(yīng)分配 在另 一相中;要有合適的相比。如產(chǎn)物分配在上相中,則 相比要大,反之則相比要小。,由于這

9、些條件很難同時(shí)滿足,并且分離理論還不完善,因此常需要根據(jù)試驗(yàn)選擇最優(yōu)系統(tǒng)和操作條件。,3.4采用雙水相系統(tǒng)進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn):,與固定床反應(yīng)器相比,不需載體,不存在多孔載體中的擴(kuò)散阻力,故反應(yīng)速度較快,生產(chǎn)能力較高; 生物催化劑在兩水相系統(tǒng)中較穩(wěn)定;兩相間表面張力低,輕微攪拌即能姓曾高度分散系統(tǒng),分散相液滴在10m以下,有很大的表面積,有利于底物和產(chǎn)物的傳遞。,3.5 工業(yè)設(shè)備,在萃取過(guò)程中,要求在萃取設(shè)備內(nèi)兩相能密切接觸并伴有較高的湍動(dòng),以實(shí)現(xiàn)兩相之間的質(zhì)量傳遞;爾后,又能使兩相較快的分離。但是,由于兩相間的密度差較小,實(shí)現(xiàn)兩相的密切接觸和快速分離有一定的困難。 根據(jù)兩相接觸方式,萃取設(shè)

10、備分為逐級(jí)接觸和微分接觸式兩種;根據(jù)有無(wú)外功輸入分為外加能量和無(wú)外加能量?jī)煞N。,3.5.1 原則 當(dāng)兩相流量相差很大時(shí),將流量大的選做分散相可增加相際傳質(zhì)面積。但是,若所用的設(shè)備可能產(chǎn)生嚴(yán)重軸向返混時(shí),應(yīng)選擇流量小的作分散相,以減小返混的影響。 在填料塔、篩板塔等萃取設(shè)備中,應(yīng)將潤(rùn)濕性差的液體作為分散相。 當(dāng)兩相粘度相差較大時(shí),應(yīng)將粘度大的液體作為分散相,這樣液滴在連續(xù)相內(nèi)沉降(或升浮)速度較大,可提高設(shè)備生產(chǎn)能力。 為減小液滴尺寸并增加液滴表面的湍動(dòng),對(duì)于界面張力梯度大于零的物系,溶質(zhì)應(yīng)從液滴向連續(xù)相傳遞。 為降低成本和保證安全操作,應(yīng)將成本高的和易燃易爆的液體作為分散相。,為防止分散相液滴

11、過(guò)多聚結(jié),可增加塔內(nèi)流體的湍動(dòng),即向填料提供外加脈動(dòng)能量,造成液體脈動(dòng),這種填料塔成為脈動(dòng)填料塔。但須注意,向填料塔加入脈動(dòng)會(huì)使亂堆填料趨向定向排列,導(dǎo)致溝流,從而使脈動(dòng)填料塔的應(yīng)用受到限制。,3.5.2 脈動(dòng)填料塔,3.5.3 篩板萃取塔,塔體內(nèi)裝有若干層篩板,篩孔直徑比氣-液傳質(zhì)的孔徑有效。工業(yè)中所用孔徑一般為39mm,孔距為孔徑的34倍,板間距為150600mm。如果選輕相為分散相,則其通過(guò)塔板上的篩孔而被分散成細(xì)滴,與塔板上的連續(xù)相密切接觸后便分層凝聚,并聚結(jié)于上層篩板的下面,然后借助壓強(qiáng)差的推動(dòng),再經(jīng)篩孔而分散。重液相經(jīng)降液管流向下層塔板,水平橫向流到篩板另一端降液管。兩相如是依次反

12、復(fù)進(jìn)行接觸與分層,便構(gòu)成逐級(jí)接觸萃取。如果先重相為分散相,則應(yīng)使輕相通過(guò)盛液管進(jìn)入上層塔板。,篩板萃取塔內(nèi)由于塔板的限制,減小了軸向返混,同時(shí)由分散相的多次分散和聚結(jié),液滴表面不斷更新,使篩板萃取塔的效率比填料塔有所提高,再加上篩板塔結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,價(jià)格低廉,可處理腐蝕性料液,因而在許多萃取過(guò)程中得到廣泛應(yīng)用。,3.5.4 轉(zhuǎn)盤(pán)萃取塔,在塔體內(nèi)壁上按一定距離裝置若干個(gè)環(huán)形擋板,固定環(huán)使塔內(nèi)形成許多分開(kāi)的空間。在中心軸上按同樣間距安裝若干個(gè)轉(zhuǎn)盤(pán),每個(gè)轉(zhuǎn)盤(pán)處于分割空間的中間。轉(zhuǎn)盤(pán)的直徑小于固定環(huán)的內(nèi)徑,以便于裝卸。固定環(huán)和轉(zhuǎn)盤(pán)均有薄平板制成。轉(zhuǎn)盤(pán)隨中心軸做高速旋轉(zhuǎn)時(shí),對(duì)液體產(chǎn)生強(qiáng)烈的攪拌作用,增加了相際

13、接觸面積和液體的湍動(dòng)。固定環(huán)在一定程度上抑制了軸向返混,因而轉(zhuǎn)盤(pán)塔的效率較高。,轉(zhuǎn)盤(pán)萃取塔,填料轉(zhuǎn)盤(pán)塔,3.5.5結(jié)構(gòu)及特點(diǎn),1.塔身即萃取塔中間段是直立圓筒,也可根據(jù)萃取規(guī)模的大小設(shè)計(jì)成不同大小的不銹鋼材料或高硼硅玻璃。 2.萃取塔內(nèi)構(gòu)件及管道均由不銹鋼材質(zhì)制作。 3.該萃取裝置清洗簡(jiǎn)便,適合于粘度大的有機(jī)混合物。,四、雙水相萃取的研究及應(yīng)用,1、在生物大分子分離純化方面的應(yīng)用 2、在天然產(chǎn)物中提取小分子物質(zhì)方面的應(yīng)用 3、在醫(yī)藥行業(yè)的應(yīng)用 4、在廢水處理方面的應(yīng)用 5、在手性分子識(shí)別分離方面的應(yīng)用 6、在生物合成方面的應(yīng)用 7、在測(cè)定方面的應(yīng)用 8、在貴金屬分離方面的應(yīng)用,4.1在生物大分

14、子分離純化方面的應(yīng)用,蛋白質(zhì)、酶、多糖、核酸等大分子物質(zhì)可以利用雙水相進(jìn)行分離、純化,雙水相體系由于其溫和的特性,能夠保持酶本身應(yīng)有的活性,所以利用雙水相萃取技術(shù)分離純化酶得到廣泛的應(yīng)用。如:利用表面活性劑/鹽雙水相體系純化鵲腎樹(shù)葉中的絲氨酸蛋白酶。用 PEG6000/Na2HPO4雙水相提取脂肪酶。利用PEG /K3PO4雙水相室溫下純化-淀粉酶。,4.2 在天然產(chǎn)物中提取小分子物質(zhì)方面的應(yīng)用,天然產(chǎn)物中存在許多對(duì)人體有益的活性小分子物質(zhì),但是提取一直以來(lái)都是高投入低回收,目前許多活性物質(zhì)大多數(shù)是利用化學(xué)合成來(lái)滿足人們的需求,但是化學(xué)合成物質(zhì)的效果和天然活性成分比,仍有一定的差距,人們一直在

15、尋找能夠同時(shí)達(dá)到高提取率和高純度的方法,以降低成本“目前有很多關(guān)于雙水相分離純化活性小分子的研究。 如: 用 C2H5OH/磷酸鹽形成的雙水相體系從烏拉爾甘草提取液中分離甘草酸。 用(NH4)2SO4/C2H5OH雙水相體系結(jié)合超聲提取丹參中的紫草酸 B。,4.3 在醫(yī)藥行業(yè)的應(yīng)用,雙水相體系不僅可以用于分離醫(yī)藥行業(yè)需要的細(xì)胞,還可以用來(lái)高效的提取抗生素??股夭粌H能殺滅細(xì)菌,而且對(duì)支原體、衣原體等致病微生物也具有良好的抑制及殺滅效果。所以雙水相萃取技術(shù)在醫(yī)藥行業(yè)得到廣泛認(rèn)可。 如: 利用免疫親和性PEG/Dextran 雙水相體系從臍帶血中分離造血干細(xì)胞/源細(xì)胞。 親水性離子液體 1-丁基-

16、3- 甲基咪唑四氟硼 BF和 NaHPO形成的雙水相體系能夠快速?gòu)那嗝顾厮芤褐休腿∏嗝顾谿。 用親水性離子液體四氟硼酸 1-丁基-3- 甲基咪唑四氟硼 BF4和 NaH2PO組成的雙水相體系萃取分離四環(huán)素。,4.4 在廢水處理方面的應(yīng)用,工廠排放的廢水中往往既含有大量的對(duì)環(huán)境污染性極大的物質(zhì),如酚類(lèi)物質(zhì)及一些鎘等金屬污染物,也含有一些可以回收循環(huán)利用的物質(zhì),所以對(duì)廢水的處理意義重大,亟需一種快速高效的方法來(lái)解決這些問(wèn)題。 如: 用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化1-propanol/ (NH4)2SO4雙水相體系去除醫(yī)藥、橡膠等行業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中排放的廢水中的對(duì)氨基酚。 利用1-propanol/ (NH4)2SO

17、4雙水相體系除去電鍍廢水中鎘締合物。,4.5 在手性分子識(shí)別分離方面的應(yīng)用,手性分子,是化學(xué)中結(jié)構(gòu)上鏡像對(duì)稱(chēng)而又不能完全重合的分子。手性分子在藥力、毒性等方面往往存在差別,有的甚至作用相反,所以獲得藥物的單一旋光手性化合物意義重大。目前,利用雙水相分離手性分子達(dá)到了較高水平。 如: 用含手性選擇劑- 環(huán)糊精的PEG2000/(NH4)2SO4雙水相體系手性萃取拆分扁桃酸外消旋體。 用含手性選擇劑- 環(huán)糊精和HP- -環(huán)糊精的PEG/ (NH4)2SO4雙水相體系提取苯丙氨酸對(duì)映體。,4.6 在生物合成方面的應(yīng)用,許多生物反應(yīng)過(guò)程存在產(chǎn)物的反饋抑制高濃度的產(chǎn)物抑制細(xì)胞的生長(zhǎng),降低生物催化劑的活力

18、,目的產(chǎn)物往往和大量的底物、副產(chǎn)物混雜在一起,反應(yīng)體系的組成極其復(fù)雜,產(chǎn)物分離困難,分離時(shí)間長(zhǎng),分離效率低,制約著生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)化的快速發(fā)展。 如: 利用PEG400/MgSO4雙水相體系耦合酶法合成頭孢氨芐。 雙水相共聚合成陰離子型聚丙烯酰胺。 利用偶氮類(lèi)引發(fā)劑引發(fā)丙烯酞胺(AM)進(jìn)行雙水相共聚合,得到了穩(wěn)定的陰離子型聚丙烯酞胺(APAM)水分散液。,4.7 在測(cè)定方面的應(yīng)用,用C2H5OH/(NH4)2SO4雙水相體系以及分光光度法測(cè)定糧食中微量鉬。 C2H5OH/(NH4)2SO4雙水相體系萃取、熒光法測(cè)定 -萘乙酸。 用2-propanol/(NH4)2SO4雙水相體系選擇性分離富集維生

19、素B12。,4.8在貴金屬分離方面的應(yīng)用,貴金屬的分離提取及純化技術(shù)主要有火法和濕法兩類(lèi),但是這兩種方法的成本高!收率低,所以用經(jīng)濟(jì)有效!環(huán)境友好的方法提取貴金屬是大家共同追求的目標(biāo),雙水相以其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)逐漸被使用在貴金屬提取純化方面。 如: 1-propanol/鹽雙水相體系和鹽誘導(dǎo)浮選分離法實(shí)現(xiàn)了鉑、鈀、鍺、銥、金、鋨、等貴金屬元素的分離。 PEG2000 /(NH4)2SO4雙水相體系分離王水溶解剩余含金固體。,五、不足之處,雙水相萃取技術(shù)作為一種新型的分離技術(shù)日益受到重視,與傳統(tǒng)的萃取及其他分分離技術(shù)相比具有操作條件溫和、處理量大等優(yōu)點(diǎn)。且可以獲得較高的收率和較純的有效成分, 與常規(guī)的

20、有機(jī)溶劑萃取技術(shù)相比較, 最大的優(yōu)勢(shì)在于可保持生物物質(zhì)的活性及構(gòu)象, 因此在生物技術(shù)、藥物分析提取、金屬分離等方面有著廣闊的應(yīng)用前景。 但是體系自身也存在的一定的缺陷, 如:,(1)雙聚合物體系價(jià)格較高, 限制了其在工業(yè)中大規(guī)模的應(yīng)用; (2)體系的易乳化問(wèn)題, 導(dǎo)致萃取過(guò)程極不穩(wěn)定, 操作十分不方便, 條件難以控制; (3) 某些高聚合物雙水相體系分相時(shí)間較長(zhǎng), 大大降低了生產(chǎn)效率; (4)此外雙水相萃取缺乏理論基礎(chǔ), 目前的研究還停留在熱力學(xué)模型的探索階段。,(5)水溶性高聚物大多數(shù)粘度較大,不易定量控制; (6)水溶性的高聚物難以揮發(fā),使反萃必不可少,高聚物回收困難; (7)雖然通過(guò)選擇

21、適宜的雙水相體系和操作條件, 可獲得被分離物質(zhì)在兩相間較大的分配系數(shù)和較高的純化倍數(shù), 但目標(biāo)產(chǎn)物與成相物質(zhì)的分離比較困難;,六、發(fā)展方向,6.1 ATPE技術(shù)的優(yōu)化,ATPE技術(shù)在工業(yè)中還沒(méi)有被廣泛利用,部分是因?yàn)閮上嚅g的溶質(zhì)分配對(duì)于具有高度選擇性,需要從上千種蛋白中分離一種蛋白這種情況提供了很小的范圍。另一方面 ,如何從聚合相中回收目的產(chǎn)物、循環(huán)利用聚合物與鹽以降低成本問(wèn)題還有待進(jìn)一步研究。目前ATPE技術(shù)應(yīng)用的主要問(wèn)題是原料成本高和純化倍數(shù)低。因此 ,開(kāi)發(fā)廉價(jià)雙水相體系及后續(xù)層析純化工藝 ,降低原料成本 ,采用新型親和雙水相萃取技術(shù) ,提高分離效率將是雙水相分離技術(shù)的主要發(fā)展方向。,目前雙水相萃取技術(shù)走向工業(yè)化所需解決的最大問(wèn)題是構(gòu)成雙水相成相系統(tǒng)組分的價(jià)格十分昂貴,為了解決這個(gè)問(wèn)題 國(guó)內(nèi)外進(jìn)行了大量的研究。一方面用廉價(jià)的無(wú)機(jī)鹽代替以往常用的昂貴的葡聚糖、硫酸鈉、硫酸鎂碳酸鉀等鹽與 PEG形成的雙水相系統(tǒng)現(xiàn)已經(jīng)大量用于萃取操作,另一方面開(kāi)發(fā)可替代聚乙二醇和葡聚糖的高聚物變性淀粉、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羥基纖維素等替代PEG均取得階段性的成果此外有利用臨界膠束濃度下表面活性劑的特異自組織行為及良好的穩(wěn)定性形成的ATPS。此類(lèi)ATPS分相依據(jù)的是膠束的形成包

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