顯微鑒定的基本操作技能-PPT課件

1、Page 1,第三章 顯微鑒定的基本操作,利用顯微技術(shù)對藥材進(jìn)行顯微分析，以確定其品種和質(zhì)量的一種鑒定方法。 包括：組織鑒定 粉末鑒定,Page 2,第一節(jié) 顯微標(biāo)本片的制作,一、組織透化劑及應(yīng)用 （一）定義 （二）作用 （三）常見的透化劑,Page 3,二、組織封藏劑及應(yīng)用 三、顯微標(biāo)本片的制法 四、粉末標(biāo)本片 五、表面標(biāo)本片 六、切片制片法 七、解離組織標(biāo)本片,Page 4,第二節(jié) 顯微測量法,一、目鏡測微尺 二、載物臺測微尺 三、兩尺的關(guān)系及應(yīng)用 四、目微尺的標(biāo)定 五、測量方法,Page 5,一、目鏡測微尺 放在目鏡筒內(nèi)的一種標(biāo)尺，為一個(gè)直徑1820mm的圓形玻璃片，中央有相互垂直的兩條

2、線，其上刻有精確的刻度，常為50格或100格，如圖（a）,Page 6,二、載物臺測微尺 在特制的載玻片中央粘貼一刻有精細(xì)尺度的圓形玻片，通常將長1mm（或2mm）精確等分成10（或20）大格， 100（或200）小格。每小格長為0.01mm即10m，用以標(biāo)定目鏡測微尺，如圖（b）,Page 7,Page 8,三、兩尺的關(guān)系及應(yīng)用 臺微尺是標(biāo)定目微尺的，不能直接用來測量顯微鏡下物體。其每小格10m，是定值。目微尺是測量尺。每一格的長度是變值，是隨目鏡和物鏡的倍數(shù)變化而改變的，只有在放大倍數(shù)固定之后才能比量出目微尺每一格的相當(dāng)長度因此，必須借助于臺微尺才能比量出目微尺每格的相當(dāng)長度。標(biāo)定好的目微

3、尺才是在標(biāo)定的倍數(shù)下測量物體的尺子。,Page 9,四、目微尺的標(biāo)定 用以確定使用同一顯微鏡及特定倍數(shù)的物鏡、目鏡和鏡筒長度時(shí)，目微尺上每一格所代表的長度。 1.將臺微尺放置在載物臺上、將目微尺（正面向上）放入目鏡鏡筒內(nèi) 2.低倍物鏡下，將臺微尺刻度移至視野中央 3.旋轉(zhuǎn)目鏡，使兩尺平行。 4.移動臺微尺，使目微尺零端與臺微尺的某刻度線相重合,Page 10,5.再找兩尺的第二條重合刻度線，數(shù)二條重合線間兩尺的小格數(shù)，記錄。如圖（c） 6.計(jì)算出目微尺每一格在該物鏡條件下相當(dāng)?shù)拈L度（m）。 7.計(jì)算公式：標(biāo)定值=兩重合線間臺微尺小格數(shù)X10m/兩重合線間目微尺小格數(shù) 8.高倍物鏡下標(biāo)定（進(jìn)入高

4、倍物鏡只調(diào)細(xì)調(diào)） 當(dāng)測定時(shí)要用不同的放大倍數(shù)時(shí)，應(yīng)分別標(biāo)定。,Page 11,五、測量方法 1.將需測量的目的物顯微制片置顯微鏡載物臺上 2.旋轉(zhuǎn)目鏡，使目微尺與測量目的物平行；數(shù)小格數(shù)，記錄。 3.計(jì)算 實(shí)際長度（m）=測得小格數(shù)X標(biāo)定值 通常是在高倍鏡下測量，但欲測量較長的目的物，如纖維、導(dǎo)管、非腺毛等的長度時(shí)，需在低倍鏡下測量。記錄最大值與最小值（m），允許有少量數(shù)值略高或略低于規(guī)定。 例：目鏡為10*，物鏡為40*時(shí)，測得淀粉粒直徑占目微尺9小格，則該淀粉粒直徑為3.8m*9=34.2m,Page 12,第三節(jié) 顯微繪圖法,一、平描 二、纖維描繪器描繪,13,1、木栓層 2、石細(xì)胞 3

5、、皮層 4、中柱鞘纖維 5、韌皮部 6、形成層 7、木質(zhì)部 8、射線 9、髓部 10、髓部石細(xì)胞,味連,雅連,Page 14,黃連（味連）粉末圖,黃柏（關(guān)黃柏）粉末圖,15,掃描電鏡圖,1.花粉粒,2.草酸鈣簇晶,3.種臍,4.氣孔,5.花絲非腺毛,6.導(dǎo)管,Page 16,第四節(jié) 常用顯微化學(xué)分析,一、細(xì)胞壁性質(zhì)的鑒別 二、細(xì)胞內(nèi)含物性質(zhì)的鑒別,17,人參顯微,18,19,20,圖1-4-4 八珍丸 1. 黨參(a.乳汁管b.木栓石細(xì)胞) 2. 白術(shù)(草酸鈣針晶) 3. 茯苓(a.多糖團(tuán)塊 b.菌絲) 4.甘草（a. 木栓細(xì)胞b.晶鞘纖維） 5.當(dāng)歸（紡錘形韌皮薄壁細(xì)胞，示斜向交錯(cuò)網(wǎng)狀紋理）

6、 6.白芍（草酸鈣簇晶） 7.川芎（草酸鈣圓簇狀結(jié)晶） 8. 熟地（薄壁細(xì)胞，示核狀物）,Page 21,典型的植物細(xì)胞的構(gòu)造圖,1.細(xì)胞壁 2.葉綠體 3.晶體 4.細(xì)胞質(zhì) 5.液泡 6.線粒體 7.紋孔 8.細(xì)胞核 9.核仁 10.核質(zhì) 11.細(xì)胞間隙,Page 22,細(xì)胞核 質(zhì)體：葉綠體、有色體、白色體 線粒體 高爾基體 核糖體 溶酶體,貯藏的營養(yǎng)物質(zhì)：淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪和脂肪油 液泡：細(xì)胞液及其內(nèi)含物,細(xì)胞器,細(xì)胞質(zhì),后含物,生理活性物質(zhì) ：酶、維生素、植物激素、殺 菌劑等,原生質(zhì)體,細(xì)胞后含物和生理活性物質(zhì),細(xì)胞壁,典型的植物細(xì)胞,Page 23,一、細(xì)胞壁性質(zhì)的鑒別 1.木質(zhì)化細(xì)胞

7、壁 間苯三酚+濃鹽酸紅色或紫紅色。 例：導(dǎo)管、木纖維、石細(xì)胞。,甘草的導(dǎo)管和纖維,肉桂的纖維和石細(xì)胞,Page 24,2.木栓化或角質(zhì)化 蘇丹試液桔紅色。例：蓖麻的種子、甘蔗的莖皮。,女貞葉表皮角質(zhì)化,Page 25,3.粘液質(zhì)化 ： 釕紅試劑紅色；玫紅酸鈉醇試劑玫瑰紅色。例：車前子、亞麻子的表皮細(xì)胞中。 4.礦質(zhì)化 硅質(zhì)能溶于氟化氫，但不溶于醋酸或濃硫酸（區(qū)別于碳酸鈣和草酸鈣）。 例：禾本科植物的莖和葉，木賊莖和硅藻的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量硅質(zhì)。,26,二、細(xì)胞內(nèi)含物性質(zhì)的鑒別,草酸鈣結(jié)晶體、碳酸鈣鐘乳體、淀粉粒、菊糖、油脂及類脂化合物、糊粉粒、粘液皆是一些顯微鏡下常見的一些有形而有鑒別意義的植物

8、細(xì)胞內(nèi)含物。,淀粉粒的形狀、大小、臍點(diǎn)與層紋是否顯著，以及彼此間的復(fù)合狀況，皆隨種屬而有所不同。常見的有單粒淀粉、半復(fù)粒淀粉、復(fù)粒淀粉。,1. 淀粉粒,28,鑒 別：含有直鏈淀粉的淀粉粒遇稀碘液顯藍(lán)紫色， 支鏈淀粉則顯紫紅色。,圖淀粉粒1，2，3為山藥的淀粉粒，三角狀卵圓形或矩圓形，臍點(diǎn)短縫狀和人字形。4，5為絞股藍(lán)的淀粉粒，4單粒不規(guī)則橢圓形，5為復(fù)粒。,2. 菊糖,可把觀察材料放在乙醇中浸漬數(shù)天，使之結(jié)晶析出，然后以甘油裝片進(jìn)行顯微觀察。這樣，就很易看到球狀、半球狀或扇狀或由數(shù)個(gè)輻射瓣組成的菊糖結(jié)晶。,3.脂肪油、揮發(fā)油、樹脂 加蘇丹溶液或紫草試液，均顯橘紅色、紅色或紫紅色。,在大多數(shù)情況

9、下，多呈細(xì)小結(jié)晶或無定形粒狀，并密集充斥于細(xì)胞中（如：玉蜀黍種子中的糊粉粒）。由于蛋白質(zhì)遇碘呈黃色，如加入碘甘油溶液，不但糊粉粒各部更加清晰，同時(shí)可進(jìn)一步確證糊粉粒為蛋白質(zhì)組成。 糊粉粒和淀粉粒常在同一細(xì)胞中互相混雜。,4. 糊粉粒,.豌豆的子葉細(xì)胞 1. 細(xì)胞壁 2.糊粉粒 3. 淀粉粒 4.細(xì)胞間隙 .小麥潁果外部的構(gòu)造 1.果皮 2.種皮 3.糊粉層 4.胚乳細(xì)胞 .篦麻的胚乳細(xì)胞 1.糊粉粒 2.蛋白質(zhì)晶體 3.基質(zhì) 4.球晶體,粘液（mucilage）多含于單子葉植物及錦葵目等類植物地下部份的一些細(xì)胞中。常為一折光性較強(qiáng)的粘稠狀液體，無特定形狀。它也是植物體糖類的一種積貯形式。常與草酸鈣針晶束同時(shí)并存。,5.粘液,6. 草酸鈣結(jié)晶體 常見的草酸鈣晶體有簇晶、砂晶、塊晶、棱晶、針晶以及由針狀結(jié)晶集合而成的針晶束 。,1.簇晶（大黃根莖） 2.針晶 （半夏塊莖） 3.方晶 （甘草） 4.砂晶 （顛茄根） 5.棱形及菱形晶體（買麻藤）,