DC婦科達(dá)誠(chéng)沉降式液基制片系統(tǒng)操作步驟-修

1、.達(dá)誠(chéng)液基制片操作步驟全自動(dòng)制片染色機(jī)的使用打開(kāi)染色機(jī)電源參數(shù)設(shè)置保存參數(shù)開(kāi)始一、全自動(dòng)制片流程1、前期處理1.1標(biāo)本瓶用旋渦混合器充分振蕩 30秒以上，目的是將細(xì)胞刷上的細(xì)胞震落到保存液中，并且將粘液及血液震散。1.2 給標(biāo)本編號(hào)：準(zhǔn)確把離心管、申請(qǐng)單用條碼標(biāo)簽對(duì)應(yīng)貼好（或用記號(hào)筆注上相應(yīng)編號(hào)）1.3 將過(guò)濾器套在12ml離心管里，用3ml軟吸管轉(zhuǎn)移樣本至離心管中，樣本轉(zhuǎn)移量約為8ml（如樣本粘液較多，堵塞濾網(wǎng)，可用軟吸管輕輕攪動(dòng)幫助過(guò)濾）1.4 樣本轉(zhuǎn)移完畢后取出過(guò)濾器，離心：1650rpm，5min（注意離心配置平衡）1.5離心完后，傾倒出上清液體，并對(duì)細(xì)胞量少的離心管做標(biāo)記（在樣本轉(zhuǎn)移

2、時(shí)將細(xì)胞量少的樣本全部倒入染色倉(cāng)中）。1.6將離心管置于漩渦混合器上，震蕩細(xì)胞塊30秒以上使其打散。2、制片染色2.1將載玻片放置在制片染色室底板上并扣好制片染色艙，按順序?qū)μ?hào)放置好樣本離心管和吸嘴，在載玻片上注上相應(yīng)編號(hào)（如下圖），檢查試劑是否足夠。2.2開(kāi)啟制片染色機(jī)電源，設(shè)置參數(shù)1.開(kāi)機(jī)后顯示畫(huà)面，按“設(shè)置”進(jìn)行參數(shù)設(shè)置，按“上”、“下”選擇數(shù)字，按左右選擇參數(shù)項(xiàng)目Sample ：樣本數(shù)（可選擇1-12）Settle ：沉降時(shí)間選擇完后按“設(shè)置”進(jìn)入下一頁(yè)H2O ：預(yù)置緩沖液（1000ml）Shift ：樣本轉(zhuǎn)移量（200ml-400ml）選擇完后按“設(shè)置”進(jìn)入下一頁(yè)H2O ：預(yù)置緩沖液

3、（1000ml）Shift ：樣本轉(zhuǎn)移量（200ml-400ml）選擇完后按“設(shè)置”進(jìn)入下一頁(yè)Drain ：離心功能，選擇“ON”表示只執(zhí)行離心功能，可用于手工制片染色，選擇“OFF”表示執(zhí)行制片和染色功能選擇完后按“設(shè)置”進(jìn)入下一頁(yè)Dye liquor：染液報(bào)警功能，當(dāng)染液量不足時(shí)機(jī)器報(bào)警，選擇“ON”選擇完后按“設(shè)置”進(jìn)入下一頁(yè)頁(yè)面回到參數(shù)設(shè)置的第一頁(yè)，表示所有參數(shù)設(shè)置完畢，按“退出”退出后頁(yè)面如圖顯示，按“運(yùn)行”開(kāi)始實(shí)驗(yàn)，“R_time”顯示實(shí)驗(yàn)所用時(shí)間3、濕式封片3.1 制片結(jié)束后，依次拆除制片倉(cāng)，將完成制片染色的樣片插入酒精缸（無(wú)水乙醇）中的玻片架上進(jìn)行脫水，約30秒鐘；（注意必須在

4、玻片上液體未干前放入酒精缸）3.2 放入二甲苯內(nèi)透明約5分鐘以上3.3 中性樹(shù)膠濕式封片。1.放入酒精缸中脫水，再放入二甲苯缸透明2.中性樹(shù)膠濕式封片 3.樣片二、手工制片染色步驟1、前期處理同全自動(dòng)制片流程的前處理2、制片染色2.1將載玻片放置在染色架上并扣好制片染色艙，放置樣本和吸嘴，在載玻片上注上相應(yīng)編號(hào)2.2 打開(kāi)機(jī)器電源設(shè)置參數(shù)開(kāi)機(jī)后顯示畫(huà)面，按“設(shè)置”進(jìn)行參數(shù)設(shè)置按“設(shè)置”直至跳到此頁(yè)面將Drain項(xiàng)設(shè)置為“ON”，然后按“設(shè)置”，再按“退出”參數(shù)設(shè)置完畢，此時(shí)按“運(yùn)行”機(jī)器只執(zhí)行離心功能，不制片染色置參數(shù)電源處理 2.2用軟吸管加入次緩沖液1000ml至離心管，抽吸8次（混勻）后轉(zhuǎn)移200ml400ml至制片艙（視細(xì)胞量多少確定轉(zhuǎn)移量，細(xì)胞量少的全部轉(zhuǎn)移至制片艙），注意轉(zhuǎn)移時(shí)要垂直居中轉(zhuǎn)移，使樣品均勻分布在玻片上。2.3 靜置沉降10分鐘，按“運(yùn)行”將制片艙內(nèi)液體甩出。2.4 染色（500l /次）無(wú)水乙醇1次（起固定作用）緩沖液2次（調(diào)節(jié)PH值）蘇木素1次停留(60-80)秒緩沖液2次無(wú)水乙醇2次EA/OG 1次停留(120-180)秒