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文檔簡(jiǎn)介

1、課時(shí)作業(yè)41細(xì)胞工程1. (2018重慶巴蜀中學(xué)期中)某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí),以動(dòng) 物肝細(xì)胞為材料,測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。 供培養(yǎng)的細(xì)胞有 甲、乙兩種,甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞,乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題:(1) 將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),培養(yǎng)液及其它培養(yǎng)條件均相同。一段時(shí)間后,觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞 數(shù)量。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含 5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,CO2的 主要作用是(3) 在兩種細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中,當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí),會(huì)出現(xiàn) 象,若乙細(xì)胞傳代培養(yǎng)10 50代左右,發(fā)現(xiàn)增殖逐漸緩 慢,以至于完全停止,這時(shí)部分細(xì)胞的 能會(huì)發(fā)生變化。藥

2、物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞,兩種細(xì)胞頻繁傳代,甲細(xì)胞與乙細(xì)胞相比,可 以傳代次數(shù)更多的是 田胞。若用動(dòng)物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液,需用肖化處理。(4) 理論上,甲細(xì)胞可與某種 B淋巴細(xì)胞合成田胞,從而來(lái)制備,使患者獲得特異性免疫。【解析】(1)將動(dòng)物肝腫瘤細(xì)胞與正常肝細(xì)胞在相同條件下培 養(yǎng)一段時(shí)間后,培養(yǎng)液中肝腫瘤細(xì)胞會(huì)比正常肝細(xì)胞多, 原因是癌細(xì) 胞的細(xì)胞周期比正常細(xì)胞短。(2) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,需要保持適宜的培養(yǎng)條件,恒溫培養(yǎng) 箱中CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。(3) 動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)容器中培養(yǎng)時(shí)具有貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制的特點(diǎn);動(dòng)物細(xì)胞在最初的培養(yǎng)過(guò)程中能很好地保持遺傳特性,隨著分裂次數(shù)的

3、增多,有部分細(xì)胞的遺傳特性會(huì)發(fā)生改變,成為癌細(xì)胞;癌細(xì) 胞在體外培養(yǎng)條件下能無(wú)限增殖,其傳代次數(shù)多于正常細(xì)胞;動(dòng)物細(xì) 胞培養(yǎng)前可用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)處理組織塊,使細(xì)胞相互分 散。將癌細(xì)胞與漿細(xì)胞融合,得到的雜交瘤細(xì)胞可同時(shí)具有兩種 細(xì)胞的特性,在體外培養(yǎng)條件下既能無(wú)限增殖、又能產(chǎn)生單一抗體, 雜交瘤細(xì)胞可用來(lái)制備單克隆抗體?!敬鸢浮?1)多(2)維持培養(yǎng)液的pH(3) 接觸抑制 遺傳特性 甲 胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)(4) 雜交瘤 單克隆抗體2. (2018棗陽(yáng)一中一模)在20世紀(jì)初,科學(xué)家用植物體細(xì)胞雜交 的方法,將番茄的原生質(zhì)體和馬鈴薯的原生質(zhì)體融合, 成功地培育出 了 “番茄一馬鈴

4、薯”雜種植株。如下圖,其中 一表示過(guò)程,英文 字母表示細(xì)胞、組織或植株。據(jù)圖回答下列問題:馬宦翳堀凰 b(1) 實(shí)現(xiàn)過(guò)程的技術(shù)是 。與過(guò)程密切相關(guān)的具有單層膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器為。(2) 在利用雜種細(xì)胞培育成為雜種植株的過(guò)程中,依據(jù)的原理是其中過(guò)程相當(dāng)于程,涉及的分裂方式為若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體,馬鈴薯細(xì)胞含n條染色體,則 “番茄一馬鈴薯”細(xì)胞內(nèi)含 染色體;若雜種細(xì)胞培育成為“番茄一馬鈴薯”植株為四倍體,則此雜種植株的花粉經(jīng)離體培育得 到的植株屬于幾倍體植株? 。(4) 如果形成c細(xì)胞的a、b細(xì)胞都是番茄細(xì)胞,那么更簡(jiǎn)單的得到番茄植株f的處理方法是。(5) 若a、b依次為小鼠骨髓瘤細(xì)胞和 B淋巴細(xì)

5、胞,那么該方案的目的是?!?1)過(guò)程的技術(shù)是植物原生質(zhì)體融合技術(shù)。過(guò)程 為雜種原生質(zhì)體再生細(xì)胞壁,與植物細(xì)胞高爾基體密切相關(guān)。(2) 利用雜種細(xì)胞培育成為雜種植株的過(guò)程為植物組織培養(yǎng),依 據(jù)的原理是植物細(xì)胞全能性。過(guò)程為高度分化的植物體細(xì)胞脫分化 形成沒有分化的愈傷組織,為脫分化。為愈傷組織再分化形成組織, 進(jìn)行有絲分裂。(3) “番茄一馬鈴薯”細(xì)胞內(nèi)含(m+n)條染色體。花粉經(jīng)離體培育 得到的植株屬于單倍體,不管其花粉含幾個(gè)染色體組。(4) 誘導(dǎo)植物多倍體形成用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗,誘 導(dǎo)染色體組加倍,形成多倍體番茄植株 f。(5) 制備單克隆抗體需要小鼠骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞,融合

6、為雜交瘤細(xì)胞,生成單克隆抗體。【答案】(1)原生質(zhì)體融合 高爾基體(2) 細(xì)胞的全能性 脫分化 有絲分裂(3) m + n單倍體(4) 用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗(5) 制備單克隆抗體3. (2018云南師大附中月考)下圖表示植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的過(guò) 程,請(qǐng)據(jù)圖回答:杭物細(xì)艙A啟生質(zhì)怵A(1) 過(guò)程使用 理細(xì)胞,以去除植物細(xì)胞壁。雜種細(xì)胞經(jīng)過(guò)和過(guò)程可以培育成雜種植株,說(shuō)明(3) 過(guò)程常用的物理誘導(dǎo)方法包括 ?;瘜W(xué)方法一般用的誘導(dǎo)劑是。(4) 過(guò)程中進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式是 ,該過(guò)程形成愈傷組織后要將其轉(zhuǎn)接到的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)其分化。(5) 若番茄的體細(xì)胞內(nèi)含a條染色體,馬鈴薯的體細(xì)胞內(nèi)含b條染色體,

7、則番茄一馬鈴薯的體細(xì)胞內(nèi)含 染色體;在自然狀態(tài)下番茄和馬鈴薯不能有性雜交,原因是它們之間存在 ?!窘馕觥?(1)進(jìn)行植物細(xì)胞雜交的第一步,就是要去掉位于細(xì) 胞最外層的細(xì)胞壁,但在去掉細(xì)胞壁時(shí)又不能損傷細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)和 功能,細(xì)胞壁的主要成分是纖維素,利用酶的專一性,選用纖維素酶 無(wú)疑是最佳方法;(2) 去掉細(xì)胞壁以后的植物細(xì)胞稱為原生質(zhì)體,必須經(jīng)過(guò)人工誘 導(dǎo)后才能實(shí)現(xiàn)二者的融合,形成一個(gè)新的細(xì)胞,稱為雜種細(xì)胞;雜種 細(xì)胞再經(jīng)過(guò)脫分化 后通過(guò)多次分裂,形成愈傷組織;愈傷組織經(jīng)再 分化形成各種組織,最終形成一個(gè)完整的新個(gè)體,這說(shuō)明雜種細(xì)胞 具有全能性;(3) 過(guò)程是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過(guò)程,常用的方

8、法有:物理法(離 心、振動(dòng)、電刺激等)和化學(xué)法聚乙二醇(PEG);(4) (脫分化)過(guò)程中進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式是有絲分裂, 雜種細(xì)胞 通過(guò)多次有絲分裂形成愈傷組織,然后將其轉(zhuǎn)接到含有不同激素成分 的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)其分化;(5) 番茄有a條染色體,馬鈴薯含b條染色體,則“番茄一馬鈴薯” 細(xì)胞內(nèi)含a+b條染色體;番茄與馬鈴薯是兩個(gè)不同的物種,它們之 間存在著生殖隔離,在自然狀態(tài)下番茄和馬鈴薯不能進(jìn)行有性雜交。【答案】(1)纖維素酶(或纖維素酶和果膠酶)(2) 雜種細(xì)胞具有全能性(3) 離心、振動(dòng)、電激聚乙二醇(4) 有絲分裂 含有不同激素成分(5) a + b生殖隔離4. (2018玉溪一中月考)以下

9、為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖,其 中甲和乙分別表示兩種二倍體植物細(xì)胞,其基因型分別是AA和BB 據(jù)圖分析回答。(1)經(jīng)過(guò)過(guò)程得到的是 ,此過(guò)程中用到的試劑是(2) 將若干a和b等量混合后轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基上培養(yǎng),再經(jīng)過(guò)和,得到的c細(xì)胞可能的類型有 用基因型表示)。(3) 植物體細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是 ,其產(chǎn)生與細(xì)胞內(nèi)(細(xì)胞器)有關(guān)。(4) 和過(guò)程分別是 ,獲得的雜種植物有 個(gè)染色體組。(5)植物體細(xì)胞雜交與自然狀況下的雜交育種相比,前者 的主要意義是。【解析】是用纖維素酶和果膠酶處理獲得原生質(zhì)體,是采用物理或化學(xué)方法促進(jìn)其融合,融合的細(xì)胞有三種,甲與甲、乙與乙 和甲與乙融合,甲與乙融合的基因型為AaBb

10、,化學(xué)方法通常用聚乙二醇處理,是再生出新細(xì)胞壁,是脫分化過(guò)程形成愈傷組織, 是再分化過(guò)程,細(xì)胞全能性降低,是發(fā)育成幼苗,融合細(xì)胞中有同 源染色體,所以是可育的,轉(zhuǎn)基因植物防止基因污染,通常是導(dǎo)入到 葉綠體或線粒體中。(1) 過(guò)程是利用酶的專一性原理,采用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。(2)誘導(dǎo)a和b融合形成的c細(xì)胞有5種(只考慮不融合和兩 兩融合的情況),艮卩AABB、AAAA、BBBB、AA、BB。(3)植物體細(xì) 胞融合成功的標(biāo)志是形成新的細(xì)胞壁,其產(chǎn)生與細(xì)胞內(nèi)高爾基體有 關(guān)。(4)和過(guò)程分別是脫分化和再分化,獲得的雜種植物有四個(gè) 染色體組。(5)植物體細(xì)胞雜交與自然狀況下的生殖細(xì)胞雜交相比,

11、 前者能克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙。【答案】(1)原生質(zhì)體 纖維素酶和果膠酶(2) AABB、AAAA、BBBB、AA、BB(3) 形成新的細(xì)胞壁 高爾基體(4) 脫分化和再分化四(5) 克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙5. (2018大慶鐵人一中段考)科學(xué)家用番茄(2N)和馬鈴薯(4N)利 用如圖技術(shù)得到“番茄一馬鈴薯”植株。請(qǐng)回答下列問題:璽(1)獲得a、b所選用的酶為 , c和d的名稱依次是、 。(2)圖示技術(shù)名稱是 由d培育成植株的過(guò)程運(yùn)用的技術(shù)手段是,其依據(jù)的原理是。(3)過(guò)程稱為,所用的化學(xué)誘導(dǎo)劑一般是,過(guò)程成功的標(biāo)志是。(4)過(guò)程是,過(guò)程增殖的方式為 ,誘導(dǎo)f中植株生根過(guò)程中培養(yǎng)基中生長(zhǎng)

12、素與細(xì)胞分裂素的比值較過(guò)程 (高/低);最終獲得的“番茄一馬鈴薯”屬于倍體植 株,則“番茄 一馬鈴薯”植株的花粉經(jīng)離體培育得到的植物屬于倍體植株。(5)如果過(guò)程的a、b細(xì)胞都是番茄細(xì)胞,那么更簡(jiǎn)單的得到番茄多倍體植株的方法是?!窘馕觥浚?)a、b是原生質(zhì)體,獲得原生質(zhì)體需要去壁,植物 細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,所以所選用的酶為纖維素酶和果 膠酶,c是正在融合的原生質(zhì)體,d是融合后獲得的雜種細(xì)胞;(2)圖 示技術(shù)名稱是植物體細(xì)胞雜交技術(shù),包括植物細(xì)胞融合和植物組織培 養(yǎng);由d培育成植株的過(guò)程運(yùn)用的技術(shù)手段是植物組織培養(yǎng),其依據(jù)的原理是植物細(xì)胞全能型;(3)過(guò)程稱為原生質(zhì)體融合,所用的化 學(xué)

13、誘導(dǎo)劑一般是PEG,過(guò)程成功的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁; (4)過(guò)程是由分化狀態(tài)回到未分化狀態(tài),即脫分化,圖中細(xì)胞是植 物的體細(xì)胞,所以過(guò)程增殖的方式為有絲分裂,誘導(dǎo)f中植株生根 過(guò)程中培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值較過(guò)程高,以促進(jìn)生根;番茄是二倍體生物,馬鈴薯是四倍體生物,體細(xì)胞雜交后最終獲 得的“番茄一馬鈴薯”屬于六倍體植株,花粉經(jīng)離體培育得到的植物 都屬于單倍體植株;(5)如果過(guò)程的a、b細(xì)胞都是番茄細(xì)胞,那么 更簡(jiǎn)單的得到番茄多倍體植株的方法是用秋水仙素處理萌發(fā)的種子 或幼苗。【答案】(1)纖維素酶和果膠酶(正在融合的)原生質(zhì)體 雜種細(xì)胞(2)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞

14、全能性原生質(zhì)體融合PEG(聚乙二醇)雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁(形成新的細(xì)胞壁)(4)脫分化有絲分裂高六單(5) 用秋水仙素處理明發(fā)的種子或幼苗6. (2018貴陽(yáng)一中月考)如圖甲表示利用生物技術(shù)制備抗 X的單 克隆抗體的過(guò)程;圖乙表示體外受精培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過(guò)程;圖丙表示 番茄和馬鈴薯植物細(xì)胞融合和再生植株的過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答下面的問題。(1) 在圖甲中注射到小鼠體內(nèi)的物質(zhì)是 。融合后的細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次篩選才能獲得理想的細(xì)胞,此類細(xì)胞的特點(diǎn)是。該過(guò)程所用的生物技術(shù)有和。(2) 圖乙中參與體外受精的精子需要經(jīng)過(guò)成熟和 的過(guò)程,才能使卵細(xì)胞受精。若要獲得多頭與此優(yōu)質(zhì)奶牛相同的小牛,可 對(duì)圖乙中囊胚中的 均等分

15、割后進(jìn)行胚胎移植。以上技術(shù)是在填“體內(nèi)”或“體外”)完成的。(3) 圖丙中過(guò)程是植物細(xì)胞形成 的階段,該階段所用的酶是?!窘馕觥?1)圖甲所示為單克隆抗體的制備過(guò)程。小鼠的B細(xì)胞經(jīng)過(guò)免疫,再與能無(wú)限增殖的骨髓瘤細(xì)胞融合,形成的雜交瘤細(xì)胞 同時(shí)具備了分泌抗體和無(wú)限增殖的能力。(2)圖乙所示為胚胎工程中的體外受精和胚胎移植技術(shù)。精子只有經(jīng)過(guò)獲能處理后才具備使卵細(xì) 胞受精的能力。將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行均等切割后,每個(gè)部分都可以再發(fā)育 成一個(gè)個(gè)體,以上操作過(guò)程都在體外進(jìn)行。(3)圖丙所示為植物體細(xì)胞雜交和植物組織培養(yǎng)過(guò)程。體細(xì)胞雜交的第一步就是制備原生質(zhì) 體,可以利用纖維素酶和果膠酶將植物細(xì)胞壁分解掉?!敬鸢?/p>

16、】(1)抗原X(1分)既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗 X的抗體 獲能內(nèi)細(xì)胞團(tuán)體外(3) 原生質(zhì)體纖維素酶和果膠酶7. (2018天津聯(lián)考)犬細(xì)小病毒(Canine Parvovirus, CPV)主要感 染幼犬,傳染性極強(qiáng),死亡率極高。犬細(xì)小病毒單克隆抗體(CPV McAb) 可抑制病毒對(duì)宿主細(xì)胞的侵染及病毒的復(fù)制,進(jìn)而殺滅犬體內(nèi)病毒。 請(qǐng)回答下列問題:(1) 在單克隆抗體CPV McAb的制備過(guò)程中,所用到的細(xì)胞工程 技術(shù)有和。(2) 將經(jīng)免疫處理后的犬的 B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得 能分泌CPV McAb的雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程中至少要進(jìn)行兩次篩選,一 次是通過(guò) 養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,另一次是通過(guò)

17、 檢測(cè)篩選出能分泌CPV McAb的雜交瘤細(xì)胞。誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合最常用的方法是 ;對(duì)雜交細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),需要 的環(huán)境,及營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH和境適宜的條件。(4) 通過(guò)上述方法得到的單克隆抗體可快速準(zhǔn)確地識(shí)別CPV,其原因是該抗體具有 的特點(diǎn)。【解析】(1)在單克隆抗體的制備過(guò)程中使用的細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。(2) 在單克隆抗體的制備過(guò)程中,至少需要進(jìn)行兩次篩選,第一 次是通過(guò)選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,第二次篩選是通過(guò)抗體檢測(cè) 篩選出能分泌CPV McAb的雜交瘤細(xì)胞。(3) 誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合最常用的方法是滅活的病 毒;對(duì)雜交細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),需要無(wú)

18、菌無(wú)毒的的環(huán)境,及營(yíng)養(yǎng)、溫度、 pH和氣體環(huán)境適宜的條件。(4) 單克隆抗體的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備?!敬鸢浮?1)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(2) 選擇抗體(3) 滅活的病毒無(wú)菌無(wú)毒 氣體(4) 特異性強(qiáng)、靈敏度高8. (2018珠海模擬)閱讀如下資料:資料甲:科學(xué)家將牛生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫阎?,得到了體型巨大的“超級(jí)小鼠”;科學(xué)家用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出了轉(zhuǎn)基因煙 草。資料乙:T4溶菌酶在溫度較高時(shí)容易失去活性??茖W(xué)家對(duì)編碼 T4溶菌酶的基因進(jìn)行了改造,使其表達(dá)的T4溶菌酶第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?,在該半胱氨酸與第 97位的半胱氨酸之間形成一個(gè) 二硫鍵,提高了 T4溶菌酶

19、的耐熱性。資料丙:植物甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物, 甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時(shí)含有 A和 B的新型藥用植物。回答下列問題:(1) 資料甲屬于基因工程范疇,將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用的方法是 。構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶是和。在培養(yǎng)有些轉(zhuǎn)基因植物時(shí),常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 法,農(nóng)桿菌的作用是。(2) 資料乙中的技術(shù)屬于 工程的范疇,該工程是以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ),通過(guò) 基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種 的技術(shù)。在該實(shí)例中,引起T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶的肽鏈的 序列發(fā)生了改變。(3)資料丙屬于細(xì)胞工程范疇。為了培育該新型藥用植物,可取 甲和乙的葉片,先用酶去除細(xì)胞壁,再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合, 形成的融合細(xì)

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