第八章染菌的防治

1、第八章染菌的防治,染菌（contamination）的危害 影響產(chǎn)量 影響質(zhì)量 使能耗主耗上升,第一節(jié)染菌的檢查與判斷一、雜菌污染的檢查,培養(yǎng)基 （1）細(xì)菌培養(yǎng)基 營養(yǎng)肉湯：glucose 10 g, peptone 5 g, beef extract 5 g, NaCl 5 g, distilled water 1000 ml, pH 7.27.4。 酚紅肉湯：營養(yǎng)肉湯+1% phenol red 3 ml。 營養(yǎng)瓊脂：glucose 5 g, peptone 10 g, beef extract 3 g, NaCl 5 g, agar 1520 g, distilled water 100

2、0 ml, pH 7.27.4,2）酵母培養(yǎng)基 薩氏培養(yǎng)基（Sabourauds agar）：glucose 40 g, peptone 10 g, agar 1520 g, distilled water 1000 ml, pH 5.6。 （3）霉菌培養(yǎng)基 察氏培養(yǎng)基（Czapeks agar）：sucrose 30 g, NaNO3 3 g, K2HPO4 1 g, MgSO47H2O 0.5 g, KCl 0.5 g, agar 1520 g, distilled water 1000 ml, pH 6.6,無菌檢查的流程,二、通過異?，F(xiàn)象判斷,溶解氧水平異常變化顯示染菌,污染噬菌體,污

3、染好氣性雜菌,污染非好氣性雜菌,排氣中CO2異常變化顯示染菌,二、通過異常現(xiàn)象判斷,工藝一定，尾氣中CO2量變化有一定規(guī)律 污染雜菌，糖耗加快，尾氣中CO2量增加 污染噬菌體，糖耗減慢，尾氣中CO2量減少,種子系統(tǒng) 空氣帶菌 設(shè)備滲漏 培養(yǎng)基滅菌不徹底 操作失誤,第二節(jié)染菌原因的分析,從染菌規(guī)模分析,大規(guī)模染菌 空氣凈化系統(tǒng) 種子染菌、接種管道滲漏 部分罐批染菌 某一批號(hào)種子染菌 某一套連消系統(tǒng)染菌 補(bǔ)料管路滲漏或補(bǔ)料液帶菌 個(gè)別罐批連批染菌 設(shè)備問題 個(gè)別罐不連批染菌 培養(yǎng)基滅菌不徹底或操作失誤,早期染菌 培養(yǎng)基滅菌不徹底 種子帶菌 接種管道滅菌不徹底或接種操作不當(dāng) 中期染菌 培養(yǎng)基滅菌不徹

4、底 加消沫劑、補(bǔ)料系統(tǒng)滅菌不徹底或滲漏 發(fā)酵設(shè)備滲漏 泡沫頂罐 后期染菌 空氣系統(tǒng)有問題,從染菌時(shí)間分析,酵母菌：種子室、搖瓶間、計(jì)量罐、進(jìn)料補(bǔ)料閥門、攪拌軸封、被倒流的空氣介質(zhì) 霉菌：種子室、搖瓶間、攪拌軸封、被倒流的空氣介質(zhì)、空氣 普通桿菌：空氣過濾介質(zhì)、冷水設(shè)備滲漏、設(shè)備死角滲漏 芽孢桿菌：培養(yǎng)基滅菌不徹底、設(shè)備有死角 球菌：空氣系統(tǒng)、無菌間搖瓶間空氣中,從染菌的菌型分析,第三節(jié)染菌的防治措施一、一般染菌的防治,預(yù)防種子帶菌： 環(huán)境清潔， 無菌操作設(shè)備完好、可靠， 無菌操作用品滅菌徹底， 操作熟練， 制度嚴(yán)格,一、一般染菌的防治,消滅培養(yǎng)基染菌： 嚴(yán)格物料采購、運(yùn)輸、倉貯 配料（防止塊狀

5、物料、清洗配料罐） 滅菌（保證蒸汽的壓力、穩(wěn)定及暢通、按操作規(guī)程操作） 保壓 （防治培養(yǎng)基倒流,嚴(yán)防空氣帶菌： 提高空氣進(jìn)口的潔凈度 除盡壓縮空氣中的油和水 空氣過濾器滅菌時(shí)防止被沖翻 保證空氣過濾器介質(zhì)的填裝質(zhì)量,一、一般染菌的防治,杜絕設(shè)備污染： 良好的設(shè)計(jì)（無死角） 規(guī)范的安裝 徹底的清洗 嚴(yán)密的維修 有效的滅菌,一、一般染菌的防治,染菌罐的處理,種子罐染菌 滅菌后放下水道 并對(duì)種子罐、管道進(jìn)行檢查和滅菌 啟用備用罐或倒種,發(fā)酵灌染菌 前期： 危害大的 滅菌后放下水道 危害不大，可重新滅菌，重新接種 中后期： 降低培養(yǎng)溫度，降低通風(fēng) 提前放罐 控制補(bǔ)料量,染菌罐的處理,二、噬菌體污染的防治,噬菌體污染的鑒別 現(xiàn)象鑒別： 發(fā)酵液變稀、發(fā)粘，OUR，DO，NH4+N，泡沫。 平板鑒別： 觀察噬菌斑,污染的預(yù)防 選育抗噬菌體菌株； 環(huán)境、明溝、下水道定期消毒； 排氣過濾，菌體排放前滅菌； 選用孔徑為0.01 m的微濾膜空氣過濾器； 發(fā)酵車間遠(yuǎn)離農(nóng)田、排污明渠、污水處 培養(yǎng)基中加入適量化學(xué)消毒劑： 三聚磷酸鈉 0.2%0.3%， 植酸0.1%0.2%，檸檬酸0.2%