第一課時(shí)-動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

1、專題2 細(xì)胞工程,2.2.1 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程,取燒傷病人的健康皮膚進(jìn)行自體移植,取該患者的皮膚進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),獲得足量的細(xì)胞后再移植,Q1：燒傷病人通常怎么治療呢,Q2：但對(duì)于大面積燒傷病人來(lái)講，健康皮膚很有限，請(qǐng)同學(xué)們想一想如何來(lái)治療該病人,完整的植株,植物細(xì)胞的全能性,細(xì)胞增殖,動(dòng)物細(xì)胞,閱讀P44頁(yè)“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)”概念，回答問(wèn)題,從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)組織， 將它們分散成單個(gè)細(xì)胞， 然后放在適宜的培養(yǎng)基中， 讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),聚焦一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程,所以，通常取動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官,因?yàn)槠浞只潭鹊?、增殖能力?qiáng)，更容易培養(yǎng),1.取動(dòng)物組織塊,

2、1）幼齡與老齡動(dòng)物的組織細(xì)胞比較，分化程度低（胚胎細(xì)胞）的與分化程度高（體細(xì)胞）的組織細(xì)胞比較，哪一種更易于培養(yǎng)？為什么,1.取動(dòng)物組織塊,2） 為什么在培養(yǎng)前要將組織分散成單個(gè)細(xì)胞,使細(xì)胞和培養(yǎng)液接觸更充分，便于物質(zhì)交換。（營(yíng)養(yǎng)容易供應(yīng)，代謝產(chǎn)物容易排出,方法：用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,1.取動(dòng)物組織塊,2.剪碎組織，并分散細(xì)胞,蛋白質(zhì),3）用胰蛋白酶分散成細(xì)胞，說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么？用胃蛋白酶處理可以嗎？（Tip：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液PH7.27.4,4）細(xì)胞膜的成分是什么？胰蛋白酶不會(huì)把細(xì)胞消化掉嗎？為什么,胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白外，長(zhǎng)時(shí)間的作用也會(huì)消化細(xì)胞膜蛋白，因此必須控

3、制好胰蛋白酶的處理時(shí)間,小知識(shí)：由蛋白質(zhì)構(gòu)成的細(xì)胞外基質(zhì)將動(dòng)物細(xì)胞粘連在一起構(gòu)成組織,胃蛋白酶，不可以,1.取動(dòng)物組織塊,2.剪碎組織，并分散細(xì)胞,3.原代培養(yǎng),閱讀P44最后一段，找出以下術(shù)語(yǔ)并并理解它們的含義,懸液中分散的細(xì)胞貼附在瓶壁上,貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,細(xì)胞懸浮液第一次在瓶中培養(yǎng)即沒(méi)有分瓶培養(yǎng)之前的細(xì)胞培養(yǎng),1.取動(dòng)物組織塊,2.剪碎組織，并分散細(xì)胞,3.原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng)：將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞懸浮液， 分裝到兩個(gè)或兩個(gè)以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng),分瓶之前為原代，分瓶之后為傳代,用什么處理貼滿壁的細(xì)胞，使其分散,方法：用胰

4、蛋白酶或膠原蛋白酶處理,1.取動(dòng)物組織塊,2.剪碎組織，并分散細(xì)胞,3.原代培養(yǎng),10代,衰老死亡,50代（細(xì)胞株,增殖停止，衰老死亡，核型可能改變,細(xì)胞系（50代，無(wú)限增殖,保持二倍體核型,核型：表現(xiàn)出染色體的數(shù)目和形態(tài)的模型,動(dòng)物細(xì)胞,原代培養(yǎng)細(xì)胞,細(xì)胞株（10-50代,細(xì)胞系50代,傳代到10代,原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng),核型保持二倍體,核型可能改變,癌變,5）目前使用的或冷凍保存的是哪類細(xì)胞呢？為什么,10代以內(nèi)的細(xì)胞,因?yàn)?050代部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能發(fā)生變化， 有少部分還發(fā)生突變向癌細(xì)胞方向發(fā)展,6）細(xì)胞培養(yǎng)有接觸抑制現(xiàn)象，可能跟細(xì)胞膜上的什么物質(zhì)有關(guān)呢？細(xì)胞系有無(wú)接觸抑制現(xiàn)象呢？為什

5、么,當(dāng)細(xì)胞互相挨在一起的時(shí)候,糖蛋白識(shí)別了這種信息,就會(huì)使細(xì)胞停止繼續(xù)繁殖,多細(xì)胞動(dòng)物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)你所學(xué)的內(nèi)環(huán)境的知識(shí)，思考以下問(wèn)題： 1.體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供哪些物質(zhì)和環(huán)境條件呢？（提示：跟植物組織培養(yǎng)的條件類比,討 論,植物組織培養(yǎng) 物質(zhì)：營(yíng)養(yǎng)和激素 環(huán)境條件：溫度；光照；無(wú)菌,請(qǐng)閱讀課本P46頁(yè)“動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件,聚焦二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件,1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行 ； 在培養(yǎng)液中添加一定量的 ; 定期更換培養(yǎng)液，,2、營(yíng)養(yǎng),糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、促生長(zhǎng)因子、微量元素等,動(dòng)物血清、血漿,3、溫度和pH,4、氣體環(huán)境,是一類具有刺激細(xì)胞生長(zhǎng)活性的物

6、質(zhì),無(wú)菌處理,抗生素,以清除細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,俺無(wú)糖醋，微雪,血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì),聚焦二、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件,1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境,2、營(yíng)養(yǎng),3、溫度和pH,溫度36.50.5度，pH7.27.4,4、氣體環(huán)境,O2和CO2（95%空氣和5% CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2維持培養(yǎng)液的pH,聚焦三、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用,1、生產(chǎn)生物制品 病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等,2、動(dòng)物基因工程離不開動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞可作為基因工程的受體細(xì)胞,許多致畸、致癌物質(zhì)加入培養(yǎng)液后，培養(yǎng)細(xì)胞會(huì)發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異,3、用于檢測(cè)有毒物質(zhì)及毒性,蘇丹紅號(hào)”，三類致癌物,4、培養(yǎng)正常

7、或各種病變的細(xì)胞，用于生理、病理、 藥理等方面的研究,如用于篩選抗癌藥物等，為治療和預(yù)防癌癥 及其他疾病提供依據(jù),細(xì)胞的全能性,大量細(xì)胞,植物體,培養(yǎng)結(jié)果,相同點(diǎn),營(yíng)養(yǎng)、促生長(zhǎng)因子 動(dòng)物血清,營(yíng)養(yǎng)、植物激素,培養(yǎng)基成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基性質(zhì),細(xì)胞增殖,原理,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),比較項(xiàng)目,植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較,均進(jìn)行有絲分裂，無(wú)減數(shù)分裂,均無(wú)菌操作，需適宜的溫度、PH等條件,小試牛刀,1、用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞，最好選用（ ） A、任何個(gè)體的細(xì)胞 B、成熟個(gè)體的體細(xì)胞 C、動(dòng)物的受精卵 D、胚胎或幼齡動(dòng)物的器官和組織細(xì)胞 2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程的順序是（ ） 原代培養(yǎng) 傳代培養(yǎng) 用胰蛋白酶處理組織，形成分散的細(xì)胞懸液 A、 B、 C、 D、 3、動(dòng)物組織培養(yǎng)中胰蛋白酶所起的作用是（ ） A、消化細(xì)胞膜易于融合 B、分散培養(yǎng)基的蛋白質(zhì)供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng) C、使組織分散成單個(gè)細(xì)胞 D、用于細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的分解,D,D,C,4、貼