藥物血漿半衰期的測定實驗報告

1、藥物血漿半衰期的測定實驗報告【實驗?zāi)康摹空莆账幬锇胨テ诘臏y定方法【實驗原理】藥物消除半衰期是血漿藥物濃度下降一半所需要的時間。其長短可反映體內(nèi)藥物消除速度，根據(jù)半衰期可確定給藥間隔時間。按一級動力學(xué)消除的藥物，其血漿半衰期是一個固定的值，不受藥物初始濃度和給藥劑量的影響，僅取決于ke值（一級動力學(xué)的消除速率常數(shù)）的大小。t1/2=0.693ke磺胺嘧啶（SD）的測定原理：磺胺類藥物為氨基苯類化合物，在酸性溶液中可與亞硝酸鈉起重氮反應(yīng)生成重氮鹽，此鹽在堿性溶液中與麝香草酚溶液起偶聯(lián)反應(yīng)形成橙紅色偶氮化合物，將該化合物在525nm波長下比色，其光密度與磺胺類藥物的濃度成正比（朗伯比爾定律）。【實驗

2、對象】家兔。體重1.52.5kg?！緦嶒炘噭?0%磺胺嘧啶鈉，肝素，7.5%三氯醋酸，0.5%麝香草酚，0.5%亞硝酸鈉，蒸餾水?！緦嶒炂鞑摹侩x心機，分光光度計，離心管，試管，注射器，移液管，吸球，燒杯，玻璃棒?！緦嶒灧椒ā?1) 取藥前血取家兔1只稱重，0.5%肝素生理鹽水潤濕注射器和抗凝瓶，由耳緣靜脈取藥前血2ml（空白對照）于抗凝瓶內(nèi)。(2) 給藥由一側(cè)耳緣靜脈注射10%磺胺嘧啶鈉溶液3ml/kg（藥物濃度為200mg/10ml）準(zhǔn)確記錄給藥結(jié)束時間。(3) 取藥后血分別于給藥后5min和35min，取另一側(cè)耳緣靜脈血各2ml分別置于抗凝瓶內(nèi)（每次取血后，洗凈注射器并用肝素生理鹽水濕潤

3、備用）。準(zhǔn)確記錄實際采血時間。(4) 測定血液樣本SD濃度3次血液樣本各準(zhǔn)確吸取0.2ml，分別加至編號的含7.5%三氯醋酸2.8ml離心管中，混勻。3000r/min，離心10min。準(zhǔn)確吸取離心管各管上清液1.5ml，分別至相應(yīng)編號的試管中。各管分別加入0.5%亞硝酸鈉溶液0.5ml，充分混勻；再加入0.5%麝香草酚溶液1ml，混勻。以給藥前的空白管作參比，使用分光光度計在525nm波長處測定各管光密度值，按下列公式計算血中SD濃度。血中SD濃度（g/ml）=OD樣品OD標(biāo)準(zhǔn)品1000(5) 半衰期的計算t1/2=0.693keke=2.303斜率斜率=logC1-logC2/T代入上述公

4、式：t1/2=0.301logC1-logC2/T公式中T為給藥后兩次取血的間隔時間，C1、C2分別為給藥后兩次取血的血漿藥物濃度。(6) 計算零時濃度（C0） C0=C1log-10.301t1t1/2(7) 計算表觀分布容積（Vd） Vd=D0/C0計算本次實驗的半衰期、預(yù)期零時濃度及表觀分布容積?！咀⒁馐马棥?、 采血量要準(zhǔn)確。采血時可用食指輕彈兔耳根部，使兔耳充血后有助于家兔耳緣靜脈取血。若耳緣靜脈采血不暢，可用刀片劃破耳緣靜脈采血或心臟取血。若未能及時采血，須以實際采血間隔時間代入公式計算。每次采血應(yīng)避免采血器械交叉污染。2、 離心管及試管要注意標(biāo)記編號，以免實驗操作中混淆。3、 血

5、液樣本SD濃度測定時，注意所加溶液的正確順序?！舅伎碱}】測定藥物血漿半衰期有何臨床意義？原始數(shù)據(jù)體重：2.7kg 給藥：8.1ml給藥結(jié)束時間：15：34第一次取血結(jié)束時間：15：52第二次取血結(jié)束時間：16：44t1=18min，t2=70.7min，T=52.7min實驗室結(jié)果5min35min10.5450.45220.3270.27030.7530.46040.5900.32850.8220.92460.9200.71970.5820.41380.9130.784本組實驗數(shù)據(jù)為第8組數(shù)據(jù)，實驗數(shù)據(jù)處理如下：t1/2=0.301log913-log784/52.7=231.5minC0=

6、913log-10.30118231.5=963.5g/mlVd=60/963.5=0.062l/kg思考與討論：實驗過程中，存在一些因素使藥物濃度降低，進而影響半衰期大小，這些因素可能是：1. 加三氯醋酸過程中未立即搖勻，出現(xiàn)凝血塊，血液樣本中少量藥物可能與蛋白結(jié)合被沉淀。2. 給藥過程中，有少許藥物流落未注入耳緣靜脈。3. 注射器取血、釋血過程中殘留少許全血于器壁。此外，采血過程中，2次采血時長（18min，52.7min）均超過規(guī)定時長（5min，35min）血藥濃度會因藥物代謝的變化而產(chǎn)生較大誤差，再者，在吸取上清液的過程中，不慎吸入少量沉淀物，沉淀雜質(zhì)影響藥物濃度測量。本組藥物SD濃度值變動不大，可能是比色皿里的溶液混合不均勻，或是受殘余藥物的影響，也可能是從吸取上清液至比色的過程中，上清液浸于酸性、堿性溶液的時間較短、混合程