腸道感染性細(xì)菌[1]課件

1、腸道感染性細(xì)菌1,1,第10章 腸桿菌科,第10章 腸桿菌科,寄居人和動(dòng)物腸道中 一大群生物學(xué)性狀相似的 革蘭陰性桿菌 包括： 致病菌：傷寒沙門菌、志賀菌等 機(jī)會致病菌：大腸桿菌 由正常菌群轉(zhuǎn)變來的致病菌：致病性大腸桿菌,腸道感染性細(xì)菌1,3,形態(tài)結(jié)構(gòu)相似 培養(yǎng)要求不高 生化反應(yīng)活潑 抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜 抵抗力不強(qiáng) 易發(fā)生變異,共 同 特 性,腸道感染性細(xì)菌1,4,1. 形態(tài)結(jié)構(gòu)相似,中等大小 G- 桿菌 無芽孢 大多有菌毛、鞭毛 少數(shù)有莢膜,腸道感染性細(xì)菌1,5,腸道感染性細(xì)菌1,6,生化反應(yīng)： 常用SS培養(yǎng)基（選擇培養(yǎng)基）分離細(xì)菌 乳糖發(fā)酵試驗(yàn) SS培養(yǎng)基 非致病菌(大腸） + 有色大菌落(分解

2、乳糖) 致病菌 (傷寒、痢疾） - 無色透明小菌落(不分解乳糖) SS培養(yǎng)基: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基,乳糖(底物), 膽鹽、煌綠(抑制非 致病菌),中性紅(指示劑,乳糖發(fā)酵試驗(yàn)： 初步鑒別腸道致病菌和腸道非致病菌,腸道感染性細(xì)菌1,7,SS培養(yǎng)基,腸道感染性細(xì)菌1,8,抗原：耐熱性菌體抗原；細(xì)胞壁脂多糖，穩(wěn)定， 屬特異性，刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM抗體 抗原：鞭毛蛋白，不耐熱，失去后運(yùn)動(dòng)消失， 刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG抗體 莢膜抗原（抗原）：多糖類物質(zhì)，位于抗 原外圍,4 抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜,腸道感染性細(xì)菌1,9,6.易變異,溶原性轉(zhuǎn)換,生化反應(yīng)變異,通過,引起,耐藥性變異,毒力變異,轉(zhuǎn)導(dǎo),接合,H-O抗原及S-R菌落變異

3、等,第一節(jié) 埃希菌屬,有6個(gè)種，其中普通大腸埃希菌（E.coli）最常見，重要的一個(gè)菌種 腸道中重要的正常菌群，出生后數(shù)小時(shí)就進(jìn)入腸道，終生伴隨，為宿主提供具有營養(yǎng)作用的合成代謝產(chǎn)物 免疫力下降或侵入到腸道外組織器官， 成為條件致病菌，引起腸道外感染 有一些血清型大腸埃希菌具有致病性 作為水源、食物糞便污染的指標(biāo),一、生物學(xué)性狀,G-菌 多有周鞭毛， 普通菌毛、性菌毛 致病性與菌毛有關(guān),培養(yǎng)特性與生化反應(yīng),營養(yǎng)要求不高，普通平板，灰白色、圓形、光滑、中等大小的菌落；液體培養(yǎng)呈渾濁生長 生化反應(yīng)活波，IMViC實(shí)驗(yàn)結(jié)果 發(fā)酵葡萄糖等，產(chǎn)酸產(chǎn)氣 分解乳糖、硫化氫陰性、動(dòng)力陽性，可與沙門菌、志賀菌區(qū)

4、別,腸道感染性細(xì)菌1,13,腸道感染性細(xì)菌1,14,主要有O、H、K 抗原，血清型分型的基礎(chǔ),抗原血清學(xué)分型 超過170種 抗原鞭毛抗原 56種 抗原抗原外層 菌毛抗原莢膜抗原 100種以上,抗原結(jié)構(gòu),二、致病性,黏附素: 黏附在泌尿道和腸道細(xì)胞 、致病物質(zhì) 志賀毒素和 外毒素不耐熱腸毒素和 耐熱腸毒素a和b 溶血素A 其他：內(nèi)毒素、III型分泌系統(tǒng)等,腸道感染性細(xì)菌1,16,腸道外感染：-普通型大腸埃希菌（E.coli）：化膿性感染和泌尿道感染最常見，屬于內(nèi)源性感染 （1）泌尿道感染 （2）敗血癥 （3）新生兒腦膜炎 胃腸炎：致病性大腸埃希菌引起，屬外源性感染，食入污染的食物和水，主要有五種

5、類型,所致疾病,五種引起胃腸炎的大腸埃希菌,1、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(enterotoxigenic E.coli, ETEC) 嬰幼兒和旅游者腹瀉的主要病原菌，癥狀從輕度腹瀉到嚴(yán)重霍亂樣腹瀉 致病物質(zhì) 腸毒素：不耐熱腸毒素(LT) LT-主要致病物質(zhì) 耐熱腸毒素(ST) STa 致病 定植因子(菌毛）：黏附作用，失去定植因子的菌株 不引起腹瀉,腸毒素（LT、ST）的作用機(jī)制 LT：B亞單位與神經(jīng)節(jié)苷脂GM1結(jié)合 A亞單位穿膜活化腺苷酸環(huán)化酶 ATP轉(zhuǎn)化成cAMP，cAMP升高 水、電解質(zhì)過度分泌，腹瀉 LT與霍亂腸毒素氨基酸同源性達(dá)75% 一個(gè)A亞單位 ST的中間產(chǎn)物為cGMP 五個(gè)B亞單位,2

6、.腸侵襲性大腸埃希菌(enteroinvasive E.coli, EIEC) 似菌痢，膿血便，有里急后重 致病機(jī)理 不產(chǎn)生腸毒素 靠侵襲力侵襲結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞，生長繁殖 導(dǎo)致組織破壞，引起炎癥、潰瘍 血性黏液便,3.腸致病型大腸埃希菌(enteropathogenic E.coli, EPEC) 嬰幼兒腹瀉的主要病原菌 致病機(jī)理 不產(chǎn)生毒素，靠粘附于微絨毛，大量繁殖破壞腸粘膜微絨毛 黏膜上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損，導(dǎo)致腹瀉,4、腸出血性大腸桿菌(enterohemorrhagic E.coli, EHEC) 出血性結(jié)腸炎和溶血性尿毒綜合征的病原 污染食品是EHEC感染的重要傳染源，如牛肉 致病物

7、質(zhì)：菌毛和毒素 志賀毒素：細(xì)胞毒，干擾蛋白質(zhì)合成，破壞腸絨毛 選擇性破壞腎小球內(nèi)皮細(xì)胞-急性腎衰 臨床表現(xiàn): 輕重不一 10%為十歲以下患兒，有嚴(yán)重并發(fā)癥(急性腎衰竭)，死亡率高 重要血清型：O157：H7,5、腸集聚型大腸桿菌(enteroaggregative E.coli, EAEC) 引起嬰兒持續(xù)性腹瀉、脫水、偶有血便 致病物質(zhì)：質(zhì)粒編碼的蛋白 致病機(jī)制：介導(dǎo)細(xì)菌聚集性黏附與腸粘膜細(xì)胞，阻 止液體的重吸收，導(dǎo)致腹瀉,腸道感染性細(xì)菌1,23,腸道感染 1）腸產(chǎn)毒型大腸桿菌（ETEC） 2）腸致病型大腸桿菌（EPEC） 3）腸侵襲型大腸桿菌（EIEC） 4）腸出血型大腸桿菌（EHEC） 5

8、）腸聚集型大腸桿菌（EAEC,三、微生物檢查,1.標(biāo)本： 腸外感染 尿、血等 腹瀉 糞便 2.分離培養(yǎng)與鑒定： 涂片染色鏡檢 （選擇培養(yǎng)基）分離培養(yǎng) 生化鑒定 *尿路感染需計(jì)數(shù)細(xì)菌總數(shù)， 10萬/mL,腸道感染性細(xì)菌1,25,在環(huán)境和食品衛(wèi)生學(xué)上，常被用作糞便污染的 檢測指標(biāo),3個(gè)大腸菌群/1L飲水 5個(gè)大腸菌群/100ml瓶裝汽水、果汁,衛(wèi)生學(xué)指標(biāo),大腸菌群數(shù),37度24h內(nèi)發(fā)酵產(chǎn)酸產(chǎn)氣的腸道桿菌數(shù),我國的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),腸道感染性細(xì)菌1,26,防 治,治療：早期糾正體液平衡，抗生素治療 預(yù)防：防止糞便污染 切斷糞-口傳播途徑 疫苗：ETEC 的菌毛抗原是關(guān)鍵抗原，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已獲成功 另：合成ST

9、與LT 非毒性亞單位，疫苗正在研制中,腸道感染性細(xì)菌1,27,G-菌，球桿狀 又稱痢疾桿菌 是人類細(xì)菌性痢疾最為常見的病原菌,第二節(jié) 志賀菌屬,腸道感染性細(xì)菌1,28,能分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣， 不分解乳糖,除宋內(nèi)志賀菌,G-短小桿菌，無鞭毛，無芽孢，有菌毛,生化反應(yīng),低于其他腸道桿菌，對酸和一般 消毒劑敏感,形態(tài),對理化因素的抵抗力,一.生物學(xué)性狀,區(qū)別于其他腸道桿菌,SS培養(yǎng)基上為無色透明菌落,腸道感染性細(xì)菌1,29,動(dòng)力實(shí)驗(yàn),腸道感染性細(xì)菌1,30,抗原與分類：有K、O抗原，無H抗原,根據(jù)O抗原分類,腸道感染性細(xì)菌1,31,致 病 性,侵襲力：菌毛粘附腸粘膜M細(xì)胞，波及臨近細(xì) 胞，生長繁

10、殖-細(xì)胞壞死膿血便,加重局部和全身癥狀,外毒素（A群1型,細(xì)胞毒，與內(nèi)毒素協(xié)同作用,致病物質(zhì),腸道感染性細(xì)菌1,32,所致疾病,特點(diǎn)：病灶局限于結(jié)腸粘膜，一般不入血 病后免疫期短，也不鞏固,所致疾?。杭?xì)菌性痢疾 傳染源:患者和帶菌者,傳播途徑：糞口傳播,腸道感染性細(xì)菌1,33,急性細(xì)菌性痢疾 急性典型：發(fā)熱、腹痛、膿血粘液便、里急后重 急性非典型：易誤診，導(dǎo)致帶菌和慢性 中毒性痢疾：小兒，全身中毒癥狀（嚴(yán)重，死亡率高） 慢性細(xì)菌性痢疾：病程遷移兩個(gè)月以上 帶菌者：細(xì)菌定植在結(jié)腸，無癥狀，傳染源,所致疾病,腸道感染性細(xì)菌1,34,微生物學(xué)檢查,及時(shí)送/暫用30%甘油緩沖水保存,SS平板（無色透明

11、小菌落,血清學(xué)反應(yīng)（玻片凝集,明確診斷,分離培養(yǎng),新鮮膿血便/肛拭,雙糖培養(yǎng)基（生化反應(yīng),快速診斷,熒光菌球試驗(yàn),協(xié)同凝集試驗(yàn),腸道感染性細(xì)菌1,35,預(yù)防,口服減毒活疫苗,治療,多種抗生素可選擇,但很易引起耐藥性,防治原則,及時(shí)治療患者，切斷傳播途徑等 加強(qiáng)衛(wèi)生管理,腸道感染性細(xì)菌1,36,其中許多為人畜共患病,第三節(jié) 沙門菌屬（Salmonella,一大群寄生在人與動(dòng)物腸道中的G-桿菌,菌群菌型甚多，僅少數(shù)對人致病,引起腸熱癥的傷寒沙門菌、甲型副傷寒沙門菌等；引起食物中毒的鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌,腸道感染性細(xì)菌1,37,生物學(xué)性狀,1、形態(tài)與染色 G-桿菌 有周鞭毛;無芽胞

12、、莢膜,腸道感染性細(xì)菌1,38,腸道感染性細(xì)菌1,39,2、培養(yǎng)特性與生化反應(yīng) 普通平板無色半透明S型菌落，SS平板無色菌落 生化反應(yīng)：不發(fā)酵乳糖和蔗糖 腸道致病菌 分離鑒定依據(jù),四類腸道桿菌的生化反應(yīng): 代表種 動(dòng)力 葡萄糖 乳糖 靛基質(zhì) H2S 尿素酶 埃希菌屬 大腸埃希菌 + + + + - - 志賀菌屬 痢疾志賀菌 - + - +/- - - 沙門菌屬 傷寒沙門菌 + + - - -/+ - 變形桿菌屬 變形桿菌 + + - + +,腸道感染性細(xì)菌1,41,3、抗原構(gòu)造 （1）O抗原：1、脂多糖，耐熱 2、可刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM （2）H抗原：1、蛋白質(zhì)，不耐熱 2、可刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG

13、 （3）Vi抗原（強(qiáng)毒株），表面抗原：抗吞噬,4、抵抗力 不強(qiáng)，對熱及一般消毒劑敏感 對氯霉素極敏感,腸道感染性細(xì)菌1,43,致病性,侵襲力：. 菌毛黏附并侵入M細(xì)胞，吞噬細(xì)胞 內(nèi)生長繁殖 . 耐酸應(yīng)答基因：耐胃酸 C. Vi抗原：抗吞噬 內(nèi)毒素：沙門菌重要的毒力因子-內(nèi)毒素效應(yīng) 激活補(bǔ)體-產(chǎn)生炎癥反應(yīng) 腸毒素：如鼠傷寒沙門菌可產(chǎn)生腸毒素,1.致病物質(zhì),腸道感染性細(xì)菌1,44,2、所致疾病,腸熱癥: 由傷寒沙門菌引起的傷寒、甲型副傷 寒沙門菌等引起的副傷寒 胃腸炎(食物中毒) 敗血癥 無癥狀帶菌者,腸道感染性細(xì)菌1,45,膽囊-腸道-糞排菌 皮膚-血栓出血-玫瑰疹 腎-尿 肝、脾-腫大 骨髓,

14、傷寒和副傷寒的致病過程,傷寒和副傷寒桿菌,小腸,腸系膜淋巴結(jié),腸壁固有層 淋巴結(jié)（致敏,進(jìn)入血液,再次入血液,第一次菌血癥,第二次菌血癥,發(fā)熱、不適、 全身酸痛,高熱 相對緩脈 皮疹 肝脾腫大 白細(xì)胞減少,經(jīng)口,經(jīng)胸導(dǎo)管,細(xì)菌大量繁殖,腸道感染性細(xì)菌1,46,膽囊中 排出體外（糞便） 超敏反應(yīng): 引起腸壁淋巴結(jié)壞死 腸出血、穿孔 （注意飲食） 腎臟 隨尿排出,典型的傷寒病程 34 周，癥狀相對較重 恢復(fù)期帶菌者排菌 3周3月 長期帶菌者 1年以上 重要傳染源,腸道感染性細(xì)菌1,48,2）急性胃腸炎（食物中毒） 最常見沙門菌感染，常為集體食物中毒 食用由鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌污染

15、食物引起 發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、水樣腹瀉 血培養(yǎng)陰性，糞便培養(yǎng)陽性,腸道感染性細(xì)菌1,49,3）沙門菌敗血癥 多見于兒童和免疫功能低下者 血培養(yǎng)陽性，糞便培養(yǎng)陰性 高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血，菌可隨血流導(dǎo)致腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、心內(nèi)膜炎 （4）無癥狀帶菌者 1的患者癥狀消失后年仍可在糞便中檢出沙門菌 細(xì)菌貯留在膽囊內(nèi),腸道感染性細(xì)菌1,50,3、免疫性,依靠細(xì)胞免疫，增強(qiáng)了巨噬細(xì)胞殺滅細(xì)菌的功能；恢復(fù)機(jī)制靠細(xì)胞免疫 體液免疫（sIgA、抗O、抗Vi）：只能對胞外細(xì)菌有殺死或溶菌作用 可獲一定免疫力，黏膜抗體形成局部免疫,腸道感染性細(xì)菌1,51,三、微生物學(xué)檢查,1、沙門菌的分離鑒定,第1周 血

16、液 第2周 糞便 第3周 尿液 第13周 骨髓,腸熱癥,胃腸炎,敗血癥,糞便、嘔吐物、可疑食物,血液,1）標(biāo)本,2）分離培養(yǎng)和鑒定 血液、骨髓穿刺液 肉湯基 （增菌培養(yǎng)） 糞便、尿液、嘔吐物 選擇培養(yǎng)基 雙糖鐵培養(yǎng)基 SS瓊脂平板 （分離培養(yǎng)） （純分離及初步鑒定） 血清學(xué)鑒定 系列生化反應(yīng) 動(dòng)力試驗(yàn),腸道感染性細(xì)菌1,53,微生物學(xué)檢查,血清學(xué)診斷,1、肥達(dá)試驗(yàn)（Widal試驗(yàn),原理：用已知傷寒沙門菌O、H抗原，以及引起副傷寒的甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌、希氏沙門菌的H抗原與受檢血清作凝集試驗(yàn)，測定受檢血清中有無相應(yīng)抗體及其效價(jià)的試驗(yàn)。 用途：輔助診斷傷寒、副傷寒,腸道感染性細(xì)菌1,54,

17、肥達(dá)試驗(yàn)的結(jié)果判斷,考慮正常人群抗體水平正常值：傷寒 1/80 1/160 有診斷價(jià)值 副傷寒 1/80 動(dòng)態(tài)觀察：恢復(fù)期效價(jià)增加4倍 O IgM,出現(xiàn)早，維持時(shí)間短 H IgG,出現(xiàn)遲，維持時(shí)間長 O高 H高 腸熱癥可能性大 O低 H低 排除 O高 H低 感染早期或有交叉反應(yīng)的其它沙門菌感染 O低 H高 預(yù)防接種或非特異性回憶反應(yīng),玻片凝集實(shí)驗(yàn),腸道感染性細(xì)菌1,56,1.結(jié)果解釋必須結(jié)合臨床表現(xiàn)、病程、病史、地 區(qū)流行病學(xué)等 2.其他：例外，整個(gè)病程中肥達(dá)試驗(yàn)結(jié)果無變化 使用抗生素 免疫功能低下,腸道感染性細(xì)菌1,57,四、防治原則,加強(qiáng)衛(wèi)生管理 早發(fā)現(xiàn)，及時(shí)治療 藥物治療：環(huán)丙沙星 疫苗

18、：傷寒Vi莢膜多糖疫苗,腸道感染性細(xì)菌1,58,弧菌屬,菌體短小、彎曲呈弧狀或逗點(diǎn)狀 G-菌，單鞭毛 分布廣泛，水中居多，大多數(shù)是非致病菌 致病菌主要是霍亂弧菌和副溶血弧菌,霍亂 食物中毒,腸道感染性細(xì)菌1,59,腸道感染性細(xì)菌1,60,第一節(jié) 霍亂弧菌,引起烈性傳染病霍亂 曾發(fā)生過7次世界性霍亂大流行，病原體均為O1群，前6次古典生物型；第7次是Eltor生物型。 1992年出現(xiàn)新流行菌株O139，首次由非O1群引起，是目前在東南亞各國流行的主要病原菌,腸道感染性細(xì)菌1,61,一、生物學(xué)性狀,1、形態(tài)與染色,液體中 運(yùn)動(dòng)非?；顫?呈穿梭樣 涂片中 排列整齊 呈魚群狀,G-, 弧型或逗點(diǎn)狀，有

19、菌毛，單鞭毛,腸道感染性細(xì)菌1,62,腸道感染性細(xì)菌1,63,2、培養(yǎng)特性與生化反應(yīng),營養(yǎng)要求不高，耐堿不耐酸 在pH 8.89.0的堿性蛋白胨水/堿性瓊脂平板上生長良好 無鹽環(huán)境生長，其他致病性弧菌否 過氧化氫酶陽性 吲哚實(shí)驗(yàn)陽性,腸道感染性細(xì)菌1,64,3、抗原構(gòu)造與分型 抗原: 現(xiàn)已有155多個(gè)血清群 O1群與O139群引起霍亂,抗原: 特異性低,O1群,古典生物型,El Tor生物型,腸道感染性細(xì)菌1,65,4、抵抗力 較弱，不耐熱 對酸敏感，耐堿耐低溫 對一般消毒劑都敏感 對鏈霉素、氯霉素敏感 按比例加漂白粉處理嘔吐物、 排泄物,腸道感染性細(xì)菌1,66,二、致病性,1、致病物質(zhì)鞭毛、菌毛、霍亂腸毒素 鞭毛運(yùn)動(dòng)、穿透 穿過腸粘膜粘液層接 近腸黏膜細(xì)胞 菌毛粘附、定居作用,腸道感染性細(xì)菌1,67,霍亂腸毒素(CT)：致瀉毒素中最強(qiáng)烈的毒素 蛋白質(zhì), 不耐熱，甲醛脫毒成類毒素,毒性部位A,結(jié)合部位B,亞單位與受體結(jié)合,亞單位作用于腺苷環(huán)化酶,ATP轉(zhuǎn)化成cAMP， cAMP,水、電解質(zhì)過度分泌，腹瀉、嘔吐,腸道感染性細(xì)菌1,68,B亞單位與小腸粘膜上皮細(xì)胞GM1神經(jīng)節(jié)苷脂