獸醫(yī)藥理學實驗課件

1、實驗十八 兩種抗菌藥物的體外聯(lián)合藥敏試驗,獸醫(yī)學院實驗教學中心,獸醫(yī)藥理學實驗,實驗目的,聯(lián)合應用抗菌藥物，目的在于獲得協(xié)同作用，提高療效，減少用藥劑量，減輕毒性反應，防止或延緩耐藥菌株的產生。體外測定抗菌藥物對細菌的聯(lián)合抗菌作用，可為臨床選用最有效的抗菌藥物組合進行治療提供實驗依據(jù),獸醫(yī)藥理學實驗,病因不明又危及生命的嚴重感染； 單一抗菌藥不能有效控制的混合感染及嚴重感染，如敗血癥、腹膜炎、創(chuàng)傷感染等； 較長期治療、細菌易產生耐藥性的慢性感染；一般抗菌藥不易透入病灶的感染，如細菌性腦炎； 毒性較大，聯(lián)合用藥減少劑量后可降低毒副反應的抗菌藥,聯(lián)合用藥的指征,抗菌藥物聯(lián)用，常用的測試法有棋盤法及

2、殺菌曲線法,獸醫(yī)藥理學實驗,抗菌藥物分類,藥物聯(lián)用時，必須根據(jù)抗菌藥的作用特性和機理進行選擇，避免盲目組合,獸醫(yī)藥理學實驗,藥效學相互作用,類與 類合用可能呈現(xiàn)協(xié)同作用。如青霉素和鏈霉素合用，前者破壞細菌細胞壁的完整性，有利于后者進入菌體內發(fā)揮作用。 類與 類合用可能呈現(xiàn)拮抗作用。如青霉素和氯霉素或四環(huán)素類合用出現(xiàn)拮抗，在四環(huán)素的作用下細菌蛋白合成迅速抑制，細菌停止生長繁殖，使青霉素的作用減弱。 類與 類可能有累加作用。 類與 類可能有累加或協(xié)同作用,獸醫(yī)藥理學實驗,實驗材料,菌種】 大腸桿菌ATCC25922，由中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供。 【藥品】 氨芐西林、阿米卡星 【培養(yǎng)基】 MH肉湯培養(yǎng)

3、基 【器材】 96孔板，移液槍（200l、1ml及對應槍頭），37恒溫培養(yǎng)箱，超凈工作臺,獸醫(yī)藥理學實驗,方法步驟,獸醫(yī)藥理學實驗,16倍MIC 8倍 4倍 2倍 MIC 倍 倍,1 2 3 4 5 6 7,7個管加入2mL菌液，第1管加入2mL 32倍MIC值濃度的氨芐西林或阿米卡星,棄去,獸醫(yī)藥理學實驗,1 2 3 4 5 6 7 8 9 10,B藥加入排，P1管至A排的18孔，2管至B排1-8孔以此類推,A藥P1管,藥加入列, 管入 列， 管至 列，以此類推,A,P1,P1,2,2,A藥P2管,H G F E D C B A,A藥P7管,B藥P1管100l,B藥P7管,A藥8倍MIC濃度

4、 B藥8倍MIC濃度,H排1-7孔分別加菌液100L，第八列A-G孔分別加菌液100L,P9列陰性對照，空白肉湯200l P10列陽性對照，菌液200 l,A藥：阿米卡星 B藥：氨芐西林,獸醫(yī)藥理學實驗,聯(lián)合藥敏試驗的結果判斷,協(xié)同作用：兩種抗菌藥物合用時所得效果比兩藥作用相加的好； 累加作用：總的作用相當于兩藥作用相加的總和； 無關作用：總的作用不超過聯(lián)合中作用較強者； 拮抗作用：兩藥合用時其作用相互抵消,獸醫(yī)藥理學實驗,在實驗室中以部分抑菌濃度（Fractional inhibitory concentration index 簡稱FIC指數(shù)）的計算作為聯(lián)合藥敏試驗的判斷依據(jù),獸醫(yī)藥理學實驗,結果判定,FIC指數(shù)=1/4+4/16=0.5(協(xié)同,獸醫(yī)藥理學實驗,注意事項,建立無菌觀念，