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文檔簡介
1、醫(yī)學專業(yè)的論文精選 醫(yī)學論文知道怎么寫嗎?下面是為大家整合關于藥學論文的范文,歡迎閱讀,希望對你有幫助。 糖尿病(Diabetes mellitus,DM)及其并發(fā)癥已成為繼心腦血管疾病、腫瘤之后嚴重危害人類健康的第三大常見病,據(jù)世界衛(wèi)生 _(WHO)報告,全世界目前約有1.5 億DM 患者,預測2025 年將上升到3億,近年糖尿病以及多種并發(fā)病的發(fā)生率越來越高,對糖尿病的研究也隨著成為研究熱點。糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展與整體血糖水平的升高有密切的關系,同時糖尿病長時間的高糖環(huán)境會引起糖脂代謝的紊亂引起臟器病變引起并發(fā)癥。血液中糖化血紅蛋白(HbAlc)與血糖濃度成正比,所以檢測血中HbA
2、lc 水平可以直觀的反映出血糖水平,更好地監(jiān)測機體糖代謝的情況4。國外有學者研究證實了HbA1c是診斷血糖水平的重要指標,而且HbA1c 與空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)低密度脂蛋白(LDL)呈正相關。在控制血糖水平的同時,有效調節(jié)血脂代謝紊亂對治療糖尿病及其并發(fā)癥有重要意義。植物多糖在自然界中廣泛存在,具有降血糖、提高免疫力、防止心肌缺血等復雜的生物活性與功能,主要能促進胰島素分泌,提高血漿胰島素水平,抑制糖異生途徑和調控糖原的合成、分解及促進血糖利用。目前,市場上治療糖尿病的藥物主要是化學合成藥,雖然短期療效顯著,但常伴有不同程度的副作用,如心血管疾病、過敏反應等。 拐棗(Hoven
3、ia a _rba Lindl.) 俗稱萬壽果屬鼠李科枳椇屬落葉喬木,因其果梗肉質膨大扭曲,肉質肥厚形似雞爪,味甘甜如棗,故名拐棗。營養(yǎng)豐富,清涼利尿,解酒醉不醒,可治風濕,有清熱利尿、止渴降火和解毒之功效,果梗性甘平有健胃補血的作用,主治頭風、潤五臟、利大小便,在甘肅省隴南市徽成盆地廣為栽培,產量很高。拐棗多糖(Hovenia a _rbaLindl. Polysaharides,HAP)系其主要有效成分,可治腋下狐臭和痔瘡,同其它藥用植物多糖一樣復雜的生物活性與功能,而拐棗多糖在降血糖、血脂方面的研究較少。為此,本文采用ALX 誘導建立糖尿病小鼠模型來研究拐棗多糖作用于化學性糖尿病小鼠模型
4、,觀察拐棗多糖對糖尿病小鼠的降血糖和降血脂作用效果,來 _ _無副作用的降糖替代藥物,對拐棗多糖綜合 _提供實驗技術,促進拐棗產業(yè)經濟的發(fā)展具有重大意義。 1 材料與方法 1.1 材料與儀器 1.1.1 實驗材料與動物 拐棗采自甘肅省隴南市成縣支旗鎮(zhèn)梁旗村;實驗動物和飼料均購自蘭州大學醫(yī)學院實驗動物中心飼料。 1.1.2 實驗藥品 四氧嘧啶,Sig _ 公司;鹽酸二甲雙胍片, _醫(yī)藥(集團)有限公司信誼制藥總廠生產;格列苯脲片, _信誼藥廠有限公司生產;血糖試紙,愛奧樂醫(yī)療器械(深圳)有限公司;普魯卡因腎上腺素注射液,遠大醫(yī)藥(中國)有限公司生產。 1.1.3 主要儀器RE52AA 1.2 實
5、驗方法 1.2.1 拐棗多糖的提取 將拐棗在 50 烘干后將其粉碎,用無水乙醇回流脫脂,50 烘干,取100 g 然后加入一定量的1000ml 蒸餾水,在40 溫度下溶解2 h 后,真空抽濾所得上清液經過減壓濃縮得濃縮液,與 Sevag 試劑(氯仿:正丁醇體積比4:1)按體積比5:1 混合,振蕩,離心棄去變性蛋白,重復4 次。合并水層,用 95% 的乙醇沉淀(體積比3:1),5000 r/min 離心10 min,沉淀物溶于40 熱水中,攪拌狀態(tài)下慢慢加入斐林試劑,析出銅絡合物,靜置1 h,傾出上清液,用水洗滌3 次,離心分離得絡合物,向絡合物中加4 蒸餾水,再滴加 0.5 mol/L HCl
6、 使之全部溶解,用 95% 的乙醇沉淀(體積比3:1),離心,所得絮狀物分別用乙醇、丙酮、乙醚洗滌,冷凍干燥得潔白拐棗多糖粉末。 1.2.2 拐棗多糖對正常小鼠血糖水平的影響 1.2.3 拐棗多糖對正常小鼠糖耐量的影響 取 KM 小鼠60 只,隨機分為6 組,設二甲雙胍對照組,拐棗多糖低、中、高劑量組,以喂食與格列本脲對照組相同體積的生理鹽水為空白組,各組灌胃給藥方法依照1.2.2,每天按10%葡萄糖20 mL/10 kgbw 灌胃一次為葡萄糖對照組,末次給藥前禁食12 h,給藥后30 min 眼眶采血測定0 h、0.5 h、1 h、2 h 各組小鼠的FBG。 1.2.4 拐棗多糖對腎上腺素引
7、起高血糖小鼠血 糖水平的影響取 KM 小鼠60 只,隨機分成6 組,分組及給藥方法同1.2.2,每天按0.2 mg/kg bw 的標準腹腔注射一次腎上腺素,為腎上腺素為對照組。末次給藥前禁食_ 12 h,給藥30 min 后眼眶采血測定FBG。 1.2.5 糖尿病小鼠模型建立 1.3 檢測指標 按照1.2.2方法給藥處理后,各組小鼠禁食不禁水12 h,采用血糖儀和血糖試紙,剪尾取血測各組小鼠FBG;測定FBG后,迅速處死動物并解剖在靜脈血管采血,離心收集血清,采用全自動生化分析儀測TC、TG、HDL和LDL水平,取主動脈頂端1 cm,10% 甲醛溶液分別固定24 h,常規(guī)石蠟切片,蘇木精-伊紅
8、染色,觀察 _形態(tài)學改變。 1.4 統(tǒng)計分析 實驗數(shù)據(jù)均以xs 表示,數(shù)據(jù)分析采用SPSS17.0軟件進行t 檢驗統(tǒng)計處理,p0.05 為差異顯著,p0.01 為差異極顯著。 2 結果與分析 2.1 拐棗多糖對正常小鼠血糖水平的影響 格列本脲是降低血糖的特效藥物之一,由于其能 _胰腺分泌胰島素而降低血糖,還通過增加門靜脈胰島素水平或對肝臟直接作用,抑制肝糖原分解和糖原異生作用,也可增加胰外 _對胰島素的敏感性和糖的利用,而緩解人體高糖環(huán)境,所以醫(yī)療使用范圍較廣。格列本脲灌胃小鼠后血糖降低明顯,而拐棗多糖低、中、高劑量組在灌胃處理小鼠后血糖均發(fā)生了降低。連續(xù)灌胃7 d 后三種劑量組與空白組比較降
9、血糖作用不存在顯著性的差異(p0.05),高劑量的多糖作用下血糖濃度為5.09 mmol/L,空白對照此時血糖為5.19 mmol/L;三種多糖劑量組與格列苯脲組相比不及格列苯脲對正常小鼠血糖的影響,血糖濃度為3.39 mmol/L。研究結果表明,連續(xù)7 d 灌胃給予多糖,對正常小鼠的空腹血糖無顯著影響,可能無 _正常胰島素分泌的作用。 2.2 拐棗多糖對正常小鼠葡萄糖耐量的影響 對各組小鼠灌胃給予葡萄糖后血糖開始升高,葡萄糖組在1 h后達到最高峰,拐棗多糖低、中劑量組對葡萄糖致高血糖有明顯的抑制作用,使血糖值高峰提前到0.5 h,血糖分別為10.73和11.26 mmol/L,而1 h后,二
10、甲雙胍組的血糖為5.79 mmol/L,高劑量的多糖灌胃后小鼠血糖為5.83 mmol/L,兩者在小鼠血糖降低作用上表現(xiàn)的非常顯著(p0.01),這說明拐棗多糖對正常小鼠口服葡萄糖耐量有明顯的改善作用,但不及二甲雙胍組。當正常小鼠灌胃一定量外源性葡萄糖時,血糖迅速升高,但預先給不同劑量多糖的小鼠可以顯著抑制血糖升高,增強對外源性葡萄糖的耐受量,改善小鼠糖耐量有可能是通過降低機體吸收葡萄糖的速率或數(shù)量,從而調節(jié)血糖,這說明對于預防糖尿病和大血管病變具有重要意義。 2.3 拐棗多糖對腎上腺素引起高血糖小鼠血糖的影響 ALX 是一種常用的誘導小鼠產生型糖尿病的物質,其致病原因在于它能破壞小鼠的胰島
11、細胞導致氧化應激而升高血糖,通過對小鼠進行腹腔注射3% ALX,對小鼠胰島 細胞進行特殊的破壞,從而減少胰島素的使小鼠血糖升高,小鼠進食量、飲水量、尿量顯著增加,體形明顯消瘦,行動遲緩,且血糖11.0 mmol/L,說明 ALX 誘導糖尿病模型成功,對糖尿病小鼠血糖的結果見表 4。小鼠通過連續(xù)灌胃拐棗多糖治療 28 d 后空腹血糖均明顯升高,低劑量組小鼠血糖為25.39 mmol/L,空白對照組小鼠血糖為6.40 mmol/L,兩者之間存在極顯著差異(p0.01),而ALX 模型小鼠血糖為29.10 mmol/L,與低劑量組之間相比無顯著差異(p0.05),與中、高劑量組之間相比成顯著差異(p
12、灌胃給藥二甲雙胍28 d 后小鼠的血糖為16.47 mmol/L,拐棗多糖中劑量治療小鼠的血糖值與模型組相比有顯著性差異(p0.05),而高劑量組血糖為16.74 mmol/L,與模型組比較血糖明顯降低,有極顯著性差異(p0.01)。以上結果表明,拐棗多糖對糖尿病模型小鼠具有明顯的降血糖作用,且高劑量組降血糖效果最好,與二甲雙胍組無顯著差異(p0.05)。Gong 等研究表明,馬齒莧粗多糖可顯著降低DM小鼠的空腹血糖濃度和提高血漿胰島素水平;Li 等報道黃芪多糖可顯著降低血糖水平,提高血漿胰島素濃度,降低 細胞凋亡率,也可改善胰島素與靶細胞特異性結合,增強對胰島素敏感性,有效保護和修復胰島細胞
13、,還可通過調節(jié)糖代謝酶活性來降低血糖水平。 2.5 拐棗多糖對糖尿病小鼠糖化血紅蛋白的影響 糖化血紅蛋白是人體血液中HbAlc與葡萄糖通過非酶促的緩慢結合所形成的一種血紅蛋白組分,與血糖濃度成正比,所以檢測血中 HbAlc水平可以直觀的反映出血糖水平,能更好地反映機體糖代謝的情況。小鼠口服拐棗多糖后結果見表5。在0 d時小鼠血糖高、中劑量組與模型組和對照組相比均成極顯著差異(p0.01),低劑量組與模型組和對照組相比均成極顯著差異(p小鼠口服高、中劑量拐棗多糖7 d 后血液中 HbAlc 含量顯著下降到10.95%和11.47%,與模型組的12.51%比較具有顯著性差異(p0.05),低劑量組
14、小鼠的HbAlc含量與模型組比較無顯著性差異(p0.05),而口服二甲雙胍的小鼠 HbAlc 含量明顯降低到10.24%,其高劑量效果與二甲雙胍組無顯著差異(p0.05)。這說明拐棗多糖能 _ALX致糖尿病小鼠現(xiàn)代食品科技Modern Food Scien _ and Technology xx, Vol.32, No.111剖學觀察正常組主動脈內膜光滑、有光澤,染色均勻,內膜下細胞排列整齊,中層平滑肌和彈力層完整。ALX 誘導糖尿病模型組小鼠主動脈內膜可見大量的內皮細胞增生、脂質沉積,中膜平滑肌細胞增生、排列紊亂,有些部位鈣化明顯。二甲雙胍組和拐棗多糖高劑量組相比模型組內膜較完整平坦,內皮黏
15、附及浸潤于內膜的單核細胞明顯少于模型組,內膜增厚明顯輕于模型組,說明拐棗多糖可以調節(jié)降低糖尿病小鼠血脂,對糖尿病小鼠的血管并發(fā)癥有一定的改善作用。的胰島細胞的再生并釋放胰島素,使胰島素分泌增多,降低糖尿病小鼠HbAlc水平,有效調節(jié)和改善糖代謝水平,也可能調節(jié)糖代謝酶的活性,降低小鼠血清葡萄糖水平,降低肝磷酸化酶和葡萄糖-6-磷酸脂酶的活性,顯著提高血清丙酮水平及肝糖原含量,增加葡萄糖的利用,所以通過用拐棗多糖來降低 HbAlc水平,能有效降低心血管病發(fā)病率,對控制和防治糖尿病具有重要意義。糖尿病小鼠在拐棗多糖高、中、低劑量的干預下,血脂代謝發(fā)生了變化,變化結果見表6。正常組小鼠TC、TG 和
16、HDL 分別為1.20、0.66 和0.44 mmol/L,糖尿病模型小鼠在連續(xù)灌胃多糖治療7 d 后TC、TG和HDL 分別為1.60、1.20 和0.63 mmol/L,均顯著升高(p0.05),而HDL 由0.50 mmol/L 顯著降低到0.35mmol/L(p0.05)。模型組與二甲雙胍組比較,TC、TG 和HDL 均有明顯升高(p0.05),分別為1.38、1.07 和0.49 mmol/L。給藥四周后,高劑量組與糖尿病模型組比較小鼠的TC、TG 和HDL,分別為1.32、0.80和0.40 mmol/L 兩者有極顯著性差異(p0.01),其對糖尿病模型小鼠血脂的調節(jié)作用與二甲雙胍
17、組相當,兩組的TC、TG 及HDL 含量均無顯著性差異(p高劑量多糖口服治療后各小鼠LDL 逐漸恢復到0.46 mmol/L,與正常和模型組比較均具有顯著性差異(p0.05)。對各組小鼠主動脈病理變化進行解。 2.6 拐棗多糖對糖尿病模型小鼠體重的影響 在ALX誘導糖尿病模型組小鼠成功后34 d 內出現(xiàn)飲水、進食及尿量明顯增加,體質量略有下降,活動減少等表現(xiàn),灌胃拐棗多糖后糖尿病小鼠體重變化結果。正常組小鼠隨時推移體重由19.02 g 逐漸增加到25.40 g,而造模成功后的各組小鼠體形則明顯消瘦,體重逐漸減少到16.05 g ,與模型組相比,在給藥第28 d后,拐棗多糖治療組小鼠體重逐漸恢復
18、增加,高劑量多糖治療后小鼠體重由18.30 g增加到18.40 g,小鼠活動與精神狀況逐漸好轉,多糖高劑量與二甲雙胍之間的治療效果相似。這可能是ALX誘導后糖尿病小鼠受到胰島素缺乏的原因,小鼠不能充分利用葡萄糖產生的能量,破壞了糖代謝的正常過程,而不能提供生理需要的能量,引起致脂肪和蛋白質分解加速,消耗過量,體重逐漸下降。而通過拐棗多糖的治療,小鼠體重逐漸恢復。 2.7 拐棗多糖對小鼠急性毒理試驗 3 結論 本文研究拐棗多糖對四氧嘧啶誘導糖尿病小鼠血糖和血脂的影響。以腹腔注射ALX建立小鼠糖尿病模型,連續(xù)灌胃給藥28 d,研究HAP對糖尿病小鼠空腹血糖(FBG)、糖化血紅蛋白(HbAlc)、總
19、膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)等指標的影響。研究表明,糖尿病模型組小鼠體重減少,而飲食量、飲水量及排尿量增加,符合糖尿病三多一少的癥狀,且胰島細胞破損明顯,導致糖尿病模型組小鼠的FBG明顯高于正常對照組;經過28 d的灌胃治療,拐棗多糖治療組不同程度降低了小鼠的FBG,高劑量治療組的降糖效果顯著;拐棗多糖處理降低了小鼠HbA1c含量,并作用效果與二甲雙胍組接近;與正常組相比,糖尿病模型組小鼠 TC和TG濃度顯著升高,HDL的含量有所下降,與糖尿病模型組相比,拐棗多糖各劑量組均能使糖尿病小鼠血清中G、TC含量降低,同時提高HDL含量,說明能夠改善
20、糖尿病小鼠血脂代謝紊亂的情況;拐棗多糖高劑量治療后主動脈內膜相比模型組較完整平坦,內皮黏附及浸潤于內膜的單核細胞明顯較少,內膜增厚明顯輕于模型組,說明拐棗多糖可以調節(jié)降低糖尿病小鼠血脂,對糖尿病小鼠的血管并發(fā)癥有一定的改善作用,對治療高脂血癥、預防動脈粥樣硬化、冠心病等方面是具有廣闊的 _前景的,有望成為一種新型調節(jié)血脂的保健食品。本研究中一次性灌服拐棗多糖最大劑量為 60000 mg/kg bw,遠遠大于毒理學評價標準,說明拐棗多糖對小鼠安全 _。正常組小鼠體質量隨時推移增加迅速,與正常組相比較,造模成功后的各組小鼠體形則明顯消瘦,體重逐漸變輕。表明拐棗多糖具有很好的促進糖尿病小鼠體重恢復的
21、作用。雖然拐棗多糖的降血糖作用不如口服降血糖藥二甲雙胍那么強,但其作用比較溫和,不會出現(xiàn)二甲雙胍那樣強烈的低血糖反應也是其突出的優(yōu)點,用來 _ _無副作用的降糖替代藥物具有重要意義。 黃連素俗稱小檗堿是從中藥黃連中提取的一種重要的生物堿,作為中藥黃連的有效成分應用極為廣泛。傳統(tǒng)用于治療急性結膜炎,急性細菌性痢疾,急性腸胃炎和口瘡等均有較好療效. 新的研究成果發(fā)現(xiàn)黃連素還兼有鎮(zhèn)靜催眠、擴張冠狀血管、解熱降溫、降低血壓和抗心律失常等新功效。黃連素目前還不能人工全合成生產,主要是利用中藥黃連、黃柏、南天竹、三顆針等草本或木本植物作為原料生產提取。隨著生態(tài)環(huán)境保護的強化,需要減少對黃柏等木本植物的砍伐
22、,使其原料更加稀少而黃連的生產對其生長環(huán)境要求極為嚴苛,并且生長速度較為緩慢。但目前仍然主要使用其干燥的根莖,對其生產過程中產生的大量莖葉、根須等下腳料大多拋棄未予利用。李英明等人研究表明,黃連根莖、葉柄和根須的紅外光譜圖均具有明顯的指紋圖譜。即黃連的葉柄、根須等黃連生產過程產生的下腳料可作為提取黃連素的原材料。目前報道的從黃連中提取黃連素工藝多種多樣,各有優(yōu)缺點,本著簡單有效、綠色環(huán)保和實用便捷的理念,本文試驗采用相對便于工業(yè)化生產的醇提法。 1 材料 ( 1) 原料與試劑: 黃連下腳料( 利川佛寶山) ,黃連素標準品( _) ,95%乙醇,37%HCl,冰醋酸等均為分析純。( 2) 儀器:
23、 粉碎機( 天津市泰斯儀器有限公司) 、電熱恒溫浴鍋( 江蘇省金壇市醫(yī)療儀器廠) 、SHB - 3 行循環(huán)水式多用真空泵( 鄭州杜甫儀器廠) 、旋轉蒸發(fā)器RE - 52A( _亞榮生化儀器廠) 、布氏漏斗、紫外可見分光光度計、滴定管、移液器、圓底燒瓶、三角瓶、電子天平等。 2 工藝流程與黃連素產品的檢測 2. 1 流程 黃連葉柄根須粉碎后置入回流燒瓶中加入提取劑,在一定溫度下回流提取一定時間后會取出上清液,再加入提取劑回流提取三次,合并三次浸提液減壓過濾,濾液回收乙醇直到棕紅色糖漿狀濃縮液,加入1%醋酸加熱溶解,抽濾以除去不溶物,然后于濾液中滴加濃鹽酸至溶液渾濁為止,放置到有黃色針狀體析出,抽
24、濾,結晶用蒸餾水洗滌兩次得黃連素粗品,粗品經重結晶、干燥得精品。 2. 2 黃連素的鑒定 ( 1) 取樣品50mg,加蒸餾水5ml,緩慢加熱使之溶解,加NaOH試液2 滴,顯橙色,溶液經放冷后,過濾,濾液中加丙酮數(shù)滴,即產生黃色的渾濁液或沉淀,與標準品一致。 ( 2) 取樣品少許,加H2SO42ml 溫熱至溶解,再加漂白粉少許,振蕩后即產生櫻桃紅色,與標準品一致。 ( 3) 于樣品的水溶液中,滴加濃硝酸數(shù)滴,溶液產生黃綠色硝酸小蘗堿沉淀,與標準品一致。經上述方法鑒別可以認為提取物為黃連素。 2. 3 黃連素含量的測定 2. 3. 1 黃連素標準溶液的配制 精密稱取黃連素對照品10. 00mg 于100ml 容量瓶中,加量無水乙醇在水浴上加熱溶解。放冷至室溫,用無水乙醇定容至刻度。再精密吸取1. 00mL 上述溶液加入10mL 容量瓶中用無水乙醇定容至刻度。搖勻,備用。其溶液濃度為0. 010mg /mL。 2. 3. 2 標準曲線的繪制 分別精密量取濃度為0. 010mg /mL 的黃連素標準溶液1. 0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL、5. 0mL,置于5 個10mL 容量瓶中,用無水乙醇定容至刻度,混勻。標準溶液的濃度分別為1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0 10 - 3mg /mL,以乙醇為空白,用紫外可見分光光度計進行掃描,測得在350
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