醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)方法

1、1 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)方法 2 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)的定義 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)的定義: 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)是指長(zhǎng)期地、系統(tǒng)地、有計(jì)劃地、主動(dòng)地觀察一定人群中醫(yī)院感染發(fā)生和分布以及影響 醫(yī)院感染的各種因素，對(duì)監(jiān)測(cè)資料進(jìn)行定期的整理分析，確定其分布動(dòng)態(tài)和變化趨勢(shì)，向有關(guān)人員和 單位發(fā)送、反饋，并及時(shí)采取防治對(duì)策和措施，同時(shí)對(duì)其防治效果和經(jīng)濟(jì)效益作出評(píng)價(jià)，不斷改進(jìn)， 以期達(dá)到控制和降低醫(yī)院感染的目的。 3 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)的內(nèi)涵 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)的內(nèi)涵 要有一個(gè)長(zhǎng)期的監(jiān)測(cè)計(jì)劃，連續(xù)系統(tǒng)地收集資料 定期匯總并經(jīng)分析和解釋所收集的資料，使之成為有意義的材料，向有關(guān)人員或單位反饋或報(bào)送 準(zhǔn)確地確定醫(yī)院感染的各種問題，以便有針對(duì)性地采取控制

2、措施 對(duì)各種監(jiān)測(cè)方法和手段要進(jìn)行評(píng)價(jià) 要確定診斷標(biāo)準(zhǔn) 4 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)的目的 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)是醫(yī)院感染控制的先行，醫(yī)院感染控制水平是反映醫(yī)療技術(shù)水平的重要評(píng)價(jià)指標(biāo)之一。 目的是為了控制醫(yī)院感染的各種危險(xiǎn)因素，降低醫(yī)院感染的各種危險(xiǎn)因素、降低醫(yī)院感染的發(fā)生率，保證 和提高醫(yī)療質(zhì)量和醫(yī)療安全 5 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)簡(jiǎn)史 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)源于19世紀(jì)中葉，產(chǎn)褥熱發(fā)生原因的調(diào)查研究 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)的系統(tǒng)發(fā)展始于20世紀(jì)50年代歐美MRSA感染的流行 美國在60年代開始成立醫(yī)院感染控制委員會(huì)，在醫(yī)院中開展空氣和環(huán)境的細(xì)菌學(xué)監(jiān)測(cè) 6 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)的組織系統(tǒng) 由下列機(jī)構(gòu)和部門構(gòu)成 院長(zhǎng)領(lǐng)導(dǎo)下的醫(yī)院感染管理委員會(huì) 醫(yī)院感染

3、科 科室醫(yī)院感染管理小組 組成三級(jí)醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)管理網(wǎng)絡(luò) 7 8 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)的人員分工和職責(zé) 醫(yī)院感染委員會(huì)負(fù)責(zé)醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)與控制的全面領(lǐng)導(dǎo)與管理工作。 醫(yī)院感染科由專職人員組成，是醫(yī)院感染管理委員會(huì)的辦事機(jī)構(gòu)，負(fù)責(zé)全面醫(yī)院感染管理工作 9 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)的人員分工和職責(zé) 病房醫(yī)院感染管理小組一般由主治醫(yī)師、護(hù)士長(zhǎng)、感控醫(yī)生和 監(jiān)控護(hù)士組成。 監(jiān)控護(hù)士負(fù)責(zé)對(duì)空氣、物體表面、醫(yī)護(hù)人員的手進(jìn)行定期監(jiān)測(cè) 和對(duì)本科進(jìn)行全面監(jiān)督檢查 住院醫(yī)師負(fù)責(zé)對(duì)住院病人醫(yī)院感染的臨床檢查、診斷、合理使 用抗菌藥物并填寫醫(yī)院感染病例登記表，由科主任、主治醫(yī)師 審核簽字后上報(bào)醫(yī)院感染管理科。 由醫(yī)院感染科匯總制表，送醫(yī)院感

4、染管理委員會(huì)主任審核后上 報(bào)上級(jí)部門 10 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)的信息反饋系統(tǒng) 和醫(yī)院感染三級(jí)管理機(jī)構(gòu)一起組成完整的管理體系 在醫(yī)院感染管理工作中具有互通情報(bào)、承上啟下、發(fā)現(xiàn)問題、改進(jìn)工作的重要作 用。 11 12 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)內(nèi)容 醫(yī)院感染率及其病種與部位分布 常用的統(tǒng)計(jì)指標(biāo)有 醫(yī)院感染發(fā)生率 例次發(fā)病率 患病率及構(gòu)成比、均數(shù)等 13 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)內(nèi)容 漏報(bào)率 采用回顧性調(diào)查，一般以月為單位 漏報(bào)率= 漏報(bào)病例數(shù) 100% 原上報(bào)病例數(shù)+漏報(bào)例數(shù) 14 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)內(nèi)容 估計(jì)（實(shí)際）發(fā)病率 估計(jì)（實(shí)際）發(fā)病率= 報(bào)告發(fā)病率 100% 1漏報(bào)率 “實(shí)際”病例數(shù)= 估計(jì)發(fā)病率 報(bào)告病例數(shù) 報(bào)告發(fā)病率 1

5、5 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)內(nèi)容 病原體與藥物敏感性的監(jiān)測(cè) 病原體變遷趨勢(shì)的監(jiān)測(cè) 病原體耐藥性的變化趨勢(shì)的監(jiān)測(cè) 平時(shí)及醫(yī)院感染暴發(fā)時(shí)微生物實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)資料需及時(shí)報(bào)告，并在一定時(shí)期做出微生物報(bào)告小結(jié) 應(yīng)做好菌種保存及耐藥譜變化記錄，將菌株生化、血清、分子生物學(xué)分型結(jié)果存于計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)庫以便 于分析生物型、血清型、分子生物型變化 16 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)內(nèi)容 環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測(cè) 病房保潔制度執(zhí)行情況監(jiān)測(cè) 是預(yù)防醫(yī)院感染的基本要求，尤其是重點(diǎn) 病房及科室 對(duì)醫(yī)院環(huán)境細(xì)菌學(xué)監(jiān)測(cè) 醫(yī)院空氣微生物學(xué)檢驗(yàn) 微生物氣溶膠感染的預(yù)防：污染源的監(jiān)測(cè)、對(duì)“排菌者”和“帶菌者”的調(diào)查 17 附：醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)專用表格 18 19 20 21 22

6、 23 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)方法 監(jiān)測(cè)方法的類型 全面綜合性監(jiān)測(cè) 指對(duì)全院所有病人、工作人員及感染有關(guān)因素和環(huán)境的綜合監(jiān)測(cè)，了解全院感染率、各科感染率、 病原體及其耐藥性和因院感造成的經(jīng)濟(jì)損失等，對(duì)全院人員進(jìn)行宣傳教育，發(fā)現(xiàn)問題，采取措施， 預(yù)防發(fā)生、中止流行。 目前我國大多數(shù)醫(yī)院都需要進(jìn)行全面綜合性監(jiān)測(cè) 24 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)方法 目標(biāo)性監(jiān)測(cè) 在全面綜合性監(jiān)測(cè)基礎(chǔ)上才能進(jìn)行目標(biāo)性監(jiān)測(cè)，包括部門監(jiān)測(cè)、輪轉(zhuǎn)監(jiān)測(cè)、從優(yōu)監(jiān)測(cè)等方法 是醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)的一種新觀點(diǎn)和方法 25 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)方法 資料收集方法 醫(yī)生自報(bào) 漏報(bào)率高，需提高醫(yī)生對(duì)醫(yī)感的認(rèn)識(shí)，加強(qiáng)制度與責(zé)任管理。 橫斷面（現(xiàn)況）調(diào)查 由醫(yī)院感染專職人員完成，

7、可初步了解醫(yī)院感染率的本底及其變動(dòng)情況， 同時(shí)分析醫(yī)院感染的危險(xiǎn)因素，找出薄弱環(huán)節(jié)，采取控制措施，工作 量大，容易做到，結(jié)果快速，漏報(bào)率高，可連續(xù)定期進(jìn)行以使結(jié)果盡 量符合醫(yī)院感染的真實(shí)情況 26 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)方法 回顧性調(diào)查 一般回顧性調(diào)查（無對(duì)照組） 病例-對(duì)照感染危險(xiǎn)因素調(diào)查 為分析感染原因提供初步依據(jù)，常因原始病歷記載不完整，漏診難以避 免，不能真實(shí)反映醫(yī)院感染水平 感染監(jiān)控護(hù)士登記 每個(gè)病房應(yīng)設(shè)一名兼職醫(yī)院感染監(jiān)控護(hù)士，加以培訓(xùn)，對(duì)其病房發(fā)生的感染病例進(jìn)行登記，隨時(shí)與 感染控制科聯(lián)系 27 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)方法 醫(yī)院感染專職人員做前瞻性調(diào)查 要監(jiān)測(cè)醫(yī)院感染的發(fā)病率，必須由專職醫(yī)院感染人員

8、組織進(jìn)行前瞻性調(diào)查 有計(jì)劃地對(duì)某些重點(diǎn)科室或全院進(jìn)行某時(shí)期的醫(yī)院感染前瞻調(diào)查，以發(fā)現(xiàn)該時(shí)期某病房或全院發(fā) 生的感染病例 計(jì)算醫(yī)院感染發(fā)病率，以及有關(guān)危險(xiǎn)因素的分析 也可對(duì)暴露與未暴露于某危險(xiǎn)因素的病例進(jìn)行隊(duì)列研究，以進(jìn)一步證實(shí)感染的原因。 結(jié)果較為真實(shí)可靠，但需一定人力、物力及較長(zhǎng)時(shí)間，有時(shí)難于堅(jiān)持 28 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)方法 資料整理 原始資料整理核實(shí) 是否按要求認(rèn)真完整填寫院感病例登記表及其它相關(guān)表格，缺項(xiàng)要立即補(bǔ)上 對(duì)診斷不確定的感染病例再核實(shí) 去除重復(fù)的病例 29 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)方法 統(tǒng)計(jì)指標(biāo) 對(duì)核實(shí)好的資料計(jì)算以下指標(biāo) 前瞻性調(diào)查資料，要計(jì)算全院及各科的醫(yī)院感染病例發(fā)病率及例次發(fā)病率 橫斷

9、面調(diào)查資料可計(jì)算醫(yī)院感染現(xiàn)患率及各部位感染率及構(gòu)成比 對(duì)平時(shí)醫(yī)生自報(bào)資料，要定期整理計(jì)算以上各指標(biāo) 30 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)方法 除以上指標(biāo)外，可根據(jù)調(diào)查登記表項(xiàng)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，如 抗生素使用率 病原菌及其耐藥率 各種危險(xiǎn)因素情況等 應(yīng)對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行編號(hào)以便輸入計(jì)算機(jī)管理 31 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)方法 結(jié)果分析（一） 比較醫(yī)院感染率的變動(dòng)性況，與本底感染率比較是否有上升或下降， 分析其原因是什么 分析各種危險(xiǎn)因素與醫(yī)院感染病例發(fā)生的關(guān)系 抗生素使用率與細(xì)菌耐藥性的情況 各種感染病原菌變動(dòng)及流行株情況 32 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)方法 結(jié)果分析（二） 醫(yī)院感染對(duì)本院醫(yī)護(hù)人員健康的損害及影響出勤率等情況 因醫(yī)院感染增加病人

10、痛苦、延長(zhǎng)住院天數(shù)以及造成的經(jīng)濟(jì)損失等 如醫(yī)院感染暴發(fā)，則需立即查清原因，采取針對(duì)性措施并觀察其效果 如何 33 院感監(jiān)測(cè)資料的利用 對(duì)醫(yī)院感染發(fā)展趨向預(yù)測(cè)和預(yù)報(bào) 發(fā)現(xiàn)某時(shí)期散發(fā)感染病例增加，已明顯超過了本底感染率 流行菌株及耐藥性有變化 可預(yù)測(cè)將有可能發(fā)生醫(yī)院感染的流行或暴發(fā) 34 院感監(jiān)測(cè)資料的利用 探索危險(xiǎn)因素 除傳統(tǒng)的院感危險(xiǎn)因素外，我們面臨著： 各種新型侵入性醫(yī)療檢查治療手段的大量使用 患者增加、床位增加、老年與嬰幼兒、免疫低下、 慢性病患者不斷增加 新型廣譜抗生素的大量使用、多重甚至泛耐藥細(xì)菌、 “超級(jí)細(xì)菌”的出現(xiàn) 高致性微生物不斷出現(xiàn)（SARS、H5N1、禽流 感 ） 使醫(yī)院感染

11、不斷出現(xiàn)新的危險(xiǎn)因素，亟需通過監(jiān) 測(cè)去探索與專題研究 35 院感監(jiān)測(cè)資料的利用 防治效果的評(píng)價(jià) 通過監(jiān)測(cè)工作可跟蹤觀察某項(xiàng)防治措施對(duì)醫(yī)院感染發(fā)病率的動(dòng)態(tài)變化，凡是使用后發(fā)病率能明顯降低 者，可認(rèn)為該項(xiàng)措施是有效的，反之則認(rèn)為無效。 36 醫(yī)院微生物監(jiān)測(cè)方法 37 環(huán)境空氣的監(jiān)測(cè) 采樣時(shí)間 清毒處理后與進(jìn)行醫(yī)療活動(dòng)之前 采樣方法 儀器采樣法:精確,結(jié)果接近實(shí)際,有JWL、LWC-、Anderson 等型號(hào)空氣采樣器。 自然沉降法:簡(jiǎn)便易行、國內(nèi)應(yīng)用廣泛。 38 環(huán)境空氣的監(jiān)測(cè) 自然沉降法 培養(yǎng)基：直徑9cm普通營養(yǎng)瓊脂平板 布點(diǎn)方法：室內(nèi)面積30m2,設(shè)內(nèi)、中、外對(duì)角線3點(diǎn)，內(nèi)、外點(diǎn) 布點(diǎn)部位距

12、墻壁1m處；室內(nèi)面積30m2，設(shè)4角及中央5點(diǎn)，4 角的布點(diǎn)部位距墻壁1m處。 采樣方法：將直徑9cm的普通瓊脂平板放在室內(nèi)各采樣點(diǎn)處，高 度距地面1.5m，將平板蓋打開，蓋子扣在平板的邊緣上暴露5分 鐘后送檢。 39 環(huán)境空氣的監(jiān)測(cè) 培養(yǎng)方法：送檢平板置361溫箱培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)各平板菌 落數(shù)并計(jì)算平均菌落數(shù)（小數(shù)點(diǎn)后一位、四舍五入），并分離 致病菌。 結(jié)果報(bào)告 計(jì)算公式： 細(xì)菌總數(shù)（cfu/m3)=50000N/(AT) A：平板面積（cm2)；T：暴露時(shí)間（min) N：平均菌落數(shù)（cfu) 40 環(huán)境空氣監(jiān)測(cè)的結(jié)果計(jì)算（自然沉降 法） 41 物體表面的監(jiān)測(cè) 采樣時(shí)間 消毒處理后4h內(nèi)

13、進(jìn)行采樣 采樣方法： 棉拭子采樣法 壓印法 42 物體表面的監(jiān)測(cè) 拭子采樣法： 采樣面積：被采表面100cm2 時(shí),取全部表面；被采表面 100cm2時(shí),取100cm2。 采樣方法：用55cm2的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面。 用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌采樣液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫 豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，連續(xù)采樣14個(gè)規(guī)格板 面積，剪去或折去手接觸部份，棉拭子放入裝有10ml采樣液的 試管中送檢，門把手等小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體的 方法采樣 43 物體表面的監(jiān)測(cè) 檢測(cè)方法： 將采樣管在混勻器上振蕩20s或用力振搖80次，用無菌吸管吸取 1.0ml接種于滅菌平皿，每一

14、樣本接種2個(gè)平皿，內(nèi)加入已溶化 的45480C的營養(yǎng)瓊脂1518ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固 后置361溫箱培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。 44 物體表面的監(jiān)測(cè) 結(jié)果報(bào)告（菌落總數(shù)） 計(jì)算公式： 物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)(cfu/cm2)=平皿上菌落的平均數(shù) 其中小件物品以cfu/件報(bào)告結(jié)果 采樣面積(cm2 ) 45 醫(yī)務(wù)人員手生物學(xué)監(jiān)測(cè) 采樣時(shí)間 清毒后立即采樣 采樣方法：被檢人五指并攏,用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的棉 拭子在雙手指屈面從指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面積 約30 cm2),并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣棉拭子,剪去操作者手接觸部位,將棉 拭子投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi),

15、立即送檢. 46 醫(yī)務(wù)人員手生物學(xué)監(jiān)測(cè) 檢測(cè)方法：同前。 計(jì)算公式： 手細(xì)菌菌落總數(shù)(cfu/cm2)=（平皿上菌落的平均 數(shù)采樣液稀釋倍數(shù)）/（30 2） 47 皮膚黏膜的監(jiān)測(cè) 采樣時(shí)間：消毒后立即采樣 采樣方法：用55cm2的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板，放在被檢皮膚處，用 浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎 往返均勻涂擦各5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，剪去手接觸部位后。 將棉拭子投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的試管內(nèi)，立即 送檢。不規(guī)則的粘膜皮膚處可用棉拭子直接涂擦采樣。 48 皮膚黏膜的監(jiān)測(cè) 檢測(cè)方法：將采樣管在混勻器上振蕩20s或用力振搖80次，用無 菌吸管吸取1.0ml接種

16、于滅菌平皿，每一樣本接種2個(gè)平皿，內(nèi) 加入已溶化的45480C的營養(yǎng)瓊脂1518ml，邊傾注邊搖勻， 待瓊脂凝固后置361溫箱培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。 49 皮膚黏膜的監(jiān)測(cè) 50 使用中消毒液染菌量測(cè)定 涂抹法: 用無菌吸管吸取消毒液1.0ml,加入9.0ml含有相應(yīng)中和劑的采 樣管內(nèi)混勻,用無菌吸管吸取上述溶液0.2ml,滴于干燥普通瓊脂 平板,每份樣品同時(shí)做2個(gè)平行樣,一平板置200C培養(yǎng)7天,觀察霉 菌生長(zhǎng)情況,另一個(gè)平板置350C溫箱培養(yǎng)72h,記數(shù)菌落數(shù),同時(shí) 檢測(cè)致病菌 消毒液染菌量(cfu/ml)=每個(gè)平板上菌落數(shù)50 51 使用中消毒液染菌量測(cè)定 傾注法: 用無菌吸管吸取消毒

17、液1.0ml,加入到9.0ml含有相應(yīng)中和劑的 無菌生理鹽水采樣管內(nèi)混勻,分別取0.5ml放入2只滅菌平皿內(nèi), 加入已溶化的45480C的營養(yǎng)瓊脂1518ml，邊傾注邊搖勻， 待瓊脂凝固,一平板置200C培養(yǎng)7天,觀察霉菌生長(zhǎng)情況,另一個(gè) 平板置36 10C溫箱培養(yǎng)72h,記數(shù)菌落數(shù),同時(shí)檢測(cè)致病菌 消毒液染菌量(cfu/ml)=每個(gè)平板上菌落數(shù)20 52 使用中消毒液染菌量測(cè)定 結(jié)果判斷: 消毒液染菌量100 cfu/ml,并未檢出致病菌為合格 注意事項(xiàng):采樣后1h內(nèi)監(jiān)測(cè) 53 消毒滅菌的衛(wèi)生學(xué)標(biāo)準(zhǔn) 54 沙門菌檢驗(yàn)程序 樣品 膽鹽乳糖采樣管 SS或伊紅美藍(lán)平板 三糖鐵瓊脂 血清凝集試驗(yàn) 葡

18、萄糖 乳糖 甘露醇 靛基質(zhì) 尿素 賴氨酸脫羧酶 55 大腸菌群檢驗(yàn)程序 樣品 膽鹽乳糖采樣管 麥康凱平板或伊紅美藍(lán)平板 染色鏡檢 乳糖復(fù)發(fā)酵 56 金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)程序 樣品 7.5%氯化鈉肉湯 血平板或甘露醇高鹽平板 染色鏡檢 甘露醇發(fā)酵試驗(yàn) 血漿凝固酶試驗(yàn) 57 綠膿桿菌檢驗(yàn)程序 樣品 膽鹽乳糖采樣液 普通瓊脂平板或血瓊脂平板 染色鏡檢 氧化酶試驗(yàn) 陰性 綠膿菌素試驗(yàn) 陰性 陽性 明膠液化試驗(yàn) 硝酸鹽還原試驗(yàn) 42C0生長(zhǎng)試驗(yàn) 58 乙型溶血性鏈球菌檢測(cè)程序 樣品 1%葡萄糖肉湯 血平板 染色鏡檢、生化反應(yīng) 59 醫(yī)療器械采樣及檢查方法 無菌檢驗(yàn)的定義：指檢查經(jīng)滅菌的敷料、縫線、一次性使

19、用的 醫(yī)療用品、無菌器械以及適用于無菌室的其他品種是否無菌的 一種方法。 無菌檢驗(yàn)應(yīng)在潔凈度為100級(jí)單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行 應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，避免微生物污染 對(duì)單向流空氣區(qū)域及工作臺(tái)面，必須進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證 60 醫(yī)療器械采樣及檢查方法 采樣時(shí)間 在滅菌處理后，存放有效期內(nèi)采樣 61 醫(yī)療器械采樣及檢查方法 采樣方法 縫合針、針頭、刀片等小件醫(yī)療器械： 取5件直接浸入6管需-厭氧培養(yǎng)管（其中一管作陽性對(duì)照）與 4管霉菌培養(yǎng)管。培養(yǎng)基用量為15ml/管 62 醫(yī)療器械采樣及檢查方法 注射器： 取5付注射器，在5ml洗脫液中反復(fù)抽吸5次，洗下管內(nèi)細(xì)菌， 混和后接種需厭氧菌培養(yǎng)管（共6管，其中1管作

20、陽性對(duì)照）與 霉菌培養(yǎng)管（共4管）接種量為1ml注射器0.5ml, 2ml注射器 1ml, 510ml注射器2ml ,2050ml注射器5ml。培養(yǎng)基用量 為接種量2ml以下15ml/管,接種量5ml為40ml/管。 63 醫(yī)療器械采樣及檢查方法 手樣鉗、鑷子等大件醫(yī)療器械： 取2件用蘸有無菌洗脫液的棉拭子反復(fù)涂抹采樣，將棉拭子投 入5ml無菌洗脫液中，將采樣液混勻，接種于需氧-厭氧培養(yǎng)管 （共6管，其中1管作陽性對(duì)照）與霉菌培養(yǎng)基（共4管）。接 種量為1ml/管，培養(yǎng)基用量為15ml/管。 64 醫(yī)療器械采樣及檢查方法 檢測(cè)方法： 需設(shè)陽性及陰性對(duì)照管 待檢樣品的需氧-厭氧培養(yǎng)管及陽性與陰性

21、對(duì)照管30 35 培 養(yǎng)5天，霉菌培養(yǎng)管與陰性對(duì)照管20 25 培養(yǎng)7天，培養(yǎng)期 間逐日檢查是否有菌生長(zhǎng)。如不能從外觀判斷的樣品需作涂片 染色鏡檢。 65 醫(yī)療器械采樣及檢查方法 無菌檢驗(yàn)的結(jié)果判斷 陽性對(duì)照在24h內(nèi)應(yīng)有菌生長(zhǎng)，陰性對(duì)照在培養(yǎng)期間應(yīng)無菌生 長(zhǎng) 如需-厭氧管及霉菌培養(yǎng)管內(nèi)均為澄清或雖顯混濁但經(jīng)證明并非 有菌生長(zhǎng)，判為滅菌合格。 如任何一管明顯混濁并證實(shí)有菌生長(zhǎng)，應(yīng)重新取樣，分別按同 樣方法復(fù)試2次，除陽性對(duì)照外，其他各管均不得有菌生長(zhǎng)，否 則判為滅菌不合格。 66 無菌檢驗(yàn)注意事項(xiàng) 送檢時(shí)間不得超過6h，若樣品保存于0 4 則不得超過24h 被采表面100cm2 時(shí),取全部表面

22、；被采表面100cm2時(shí),取 100cm2。 若消毒因子為化學(xué)消毒劑，采樣液中應(yīng)加入相應(yīng)中和劑。 67 醫(yī)療用品細(xì)菌菌落衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) 68 洗脫液的配制方法 69 常用消毒液的相應(yīng)中和劑 70 手術(shù)室環(huán)境的監(jiān)測(cè) 層流手術(shù)室的空氣監(jiān)測(cè)方法 浮游菌濃度監(jiān)測(cè)法（CFU/m3） 沉降菌濃度監(jiān)測(cè)法（CFU/皿） 71 手術(shù)室環(huán)境的監(jiān)測(cè) 沉降菌濃度監(jiān)測(cè)法 采樣時(shí)間: 級(jí)潔凈手術(shù)室和潔凈輔助用房檢測(cè)前,系統(tǒng)已運(yùn)行15min,其 他潔凈房間應(yīng)已運(yùn)行40min 采樣方法: 用直徑90mm培養(yǎng)皿在空氣中暴露30min,采樣點(diǎn)可布置在地 面上或不高于地面0.8m的任意高度上,蓋好培養(yǎng)皿后經(jīng)過培養(yǎng) 得出的菌落數(shù),代表空氣

23、中可以沉降下來的細(xì)菌數(shù),單位CFU/皿 72 手術(shù)室環(huán)境的監(jiān)測(cè) 層流手術(shù)室沉降法空氣監(jiān)測(cè)采樣布點(diǎn)數(shù) 73 手術(shù)室環(huán)境的監(jiān)測(cè) 培養(yǎng)方法: 采樣后的培養(yǎng)基,應(yīng)立即置于37 條件下培養(yǎng)24h。 結(jié)果報(bào)告: 計(jì)數(shù)生長(zhǎng)的菌落數(shù)，求出菌落數(shù)的平均值（四舍五入到小數(shù)點(diǎn) 后1位），單位CFU/皿) 74 手術(shù)室環(huán)境的監(jiān)測(cè) 層流手術(shù)室沉降法空氣監(jiān)測(cè)菌落數(shù)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) (單位:CFU/30min) 75 血液凈化系統(tǒng)的監(jiān)測(cè) 采樣時(shí)間： 血液凈化系統(tǒng)監(jiān)測(cè)應(yīng)在透析用水和透析液制做好后即將進(jìn)行透 析前 采樣方法： 用滅菌注射器吸取透析用水或透析液25ml,放入無菌管中送 檢 76 血液凈化系統(tǒng)的監(jiān)測(cè) 檢測(cè)方法 用無菌吸管吸取1.0ml待檢樣品接種于滅菌平皿,每一樣本接種 2個(gè)平皿,內(nèi)加入已溶化的4548 的營養(yǎng)瓊脂1518ml,邊 傾注邊