食品中脂肪含量測定-酸水解法

1、實驗一 食品中脂肪含量測定-酸水解法通過實驗掌握食品中脂肪含量測定原理及操作步驟，充分認(rèn)識脂肪含量測定的重要性， 增強學(xué)生對酸水解法提取脂肪的理解。1原理將試樣與鹽酸溶液一同加熱進(jìn)行水解，使鍵合或包藏在組織里的脂類游離出來，提取脂肪，回收溶劑，干燥后稱重，即得游離態(tài)及結(jié)合態(tài)脂肪總量。2試劑(1) 鹽酸(2) 乙醚(3) 乙醇：95%(4) 石油醚：沸程 30 C60 C3主要儀器100mL具塞量筒、烘箱4操作步驟(1) 樣品處理固體樣品：精密稱取約 2.0 g，置于50 mL具塞量筒中，加8 mL水，混勻后加10 mL 濃鹽酸。液體樣品：準(zhǔn)確稱取 10.0 g置于50mL具塞量筒中，加10 m

2、L,濃鹽酸。(2) 將量筒放入70 C80C水浴中，每隔510 min用玻璃棒攪拌一次，至樣品脂肪 游離消化完全為止，時間約需4050 min。(3) 取出試管，加入 10 mL乙醇，混合。冷卻后將混合物移人 100 mL具塞量筒中， 用25 mL乙醚分次洗試管，洗液一并倒人量筒中。加塞振搖1 min，小心開塞放出氣體，再 塞好，靜置12 min，小心開塞，用石油醚一乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪。靜置1020min，待上部液體澄清，吸出上清液于已恒重的錐形瓶內(nèi)，再加5 mL乙醚等量混合液于具塞量筒內(nèi)，振搖，靜置后，仍將上層乙醚吸出，放人原燒瓶內(nèi)。放入將錐形瓶置于 水浴鍋中蒸發(fā)至干， 取

3、出擦去外壁水珠， 置于100C5C烘箱中干燥2h，取出，放入干燥器 內(nèi)冷卻0.5h后稱重，重復(fù)以上操作至恒重。5計算樣品中脂肪含量(%) = (M2-M1) /M式中，M :樣品的質(zhì)量，gMi：錐形瓶質(zhì)量，gM2 :錐形瓶和脂類的質(zhì)量，g實驗二原花青素提取及含量測定-鹽酸比色的通過實驗掌握原花青素提取及含量測定的原理和操作方法，加強對香草醛 認(rèn)識和理解。1實驗原理：原花青素和兒茶素類單體A環(huán)的化學(xué)活性較高，在酸性條件下，其上的間苯二酚或間苯三酚與香草醛發(fā)生縮和，產(chǎn)物在濃酸作用下形成紅色的正碳離子，樣品的濃度與產(chǎn)生的顏色呈正相關(guān)，用兒茶素為對照品，在500nm下測定吸光度。2實驗試劑及儀器香草醛

4、、鹽酸、甲醇；可見分光光度計。3操作步驟取2g樣品于50mL離心管中，加入 10mL 1% （ w/w ）的HCI甲醇溶液，室溫下避光搖 床密封提取20 min，4000g離心10min，取上清1mL進(jìn)行測定。測定前先配制香草醛鹽酸溶 液：在試管中通過混合等體積的1%（ w/w） vanillin甲醇溶液和8% （ w/w）HCI甲醇溶液至5mL（ 1min間隔混合1 mL等量溶液）。香草醛試劑每天新鮮制備，加入1mL上清，充分振搖后于30 C水浴保溫反應(yīng) 20min , 500nm測定吸光度。3結(jié)果計算根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)方程計算原花青素含量，每g樣品中原花青素含量以兒茶素ug數(shù)來表示。實驗三

5、游離多酚含量測定通過本實驗了解游離多酚提取、測定原理，掌握多酚化合物含量測定操作方法，加深對福林酚法測定多酚含量的理解。1實驗原理多酚類化合物在堿性溶液中，鎢鉬酸可以將多酚化合物定量氧化，自身被還原(使W6+變?yōu)閃5+)生成藍(lán)色的化合物，藍(lán)色的深淺程度與含酚基團(tuán)的數(shù)目成正比，該藍(lán)色化合物在725nm下有最大吸收峰。以阿魏酸為對照品，通過比色測定可對多酚化合物進(jìn)行定量。2實驗試劑及器材丙酮、鹽酸、搖床、乙醚、福林酚試劑、3游離多酚提取稱取脫脂樣品2g于50mL離心管中，加入 40mL 70%(v/v)丙酮，室溫下避光搖床提取2h, 4000g離心10min得上清。重復(fù)3次，合并上清，得到可溶性多

6、酚化合物。上清于 30 C 真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約 50mL,用12 M HCI調(diào)節(jié)pH為2，利用乙醚按提取液 1:1 (v/v)萃取5 次，有機相在 30C下真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，得到游離的和非共軛的多酚化合物。用甲醇溶解 并轉(zhuǎn)移到25mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度線，0C4C下避光儲存?zhèn)溆谩?多酚含量測定吸取甲醇溶解的可溶性多酚粗提液2mL置于離心管中，加入 0.5mL ( 2moI/L )Folin -Ciocalteau試劑，充分振搖，加入1mL飽和碳酸鈉溶液，補加蒸餾水使總體積至 10mL , 充分混勻，室溫下避光反應(yīng)35分鐘，于4000g離心10分鐘，取藍(lán)色上清液于 725nm下測定吸光

7、度。用甲醇代替樣品提取液， 相同條件下作為空白進(jìn)行調(diào)零。用阿魏酸制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，每g樣品中多酚含量用阿魏酸ug數(shù)表示。清代 紅頂商人”胡雪巖說： 做生意頂要緊的是眼光，看得到一省，就能做一省的生意；看得到天下，就能做天下的生意；看得到外國，就能做外國的生意?！笨梢?，一個人的心胸和眼光，決定了他志向的短淺或高遠(yuǎn)；一個人的希望和夢想，決定了他的人生暗淡或輝煌。人生能有幾回搏，有生不搏待何時！所有的機遇和成功，都在充滿陽光，充滿希望的大道之上！我們走過了黑夜，就迎來了黎明；走過了荊棘，就迎來了花叢；走過了坎坷，就走出了泥濘；走過了失敗，就走向了成功!一個人只要心存希望，堅強堅韌，堅持不懈，勇往直前地去追尋，去探索，去拼搏，他總有一天會成功。正如鄭板橋所具有的人格和精神：皎定青山不放松，立根原在破巖中。千磨萬擊還堅勁，任爾東南西北風(fēng)。夢想在，希望在，人就有奔頭；愿奮斗，勇拼搏，事