唾液淀粉酶實驗

1、唾液淀粉酶最適ph值的測定實驗實驗?zāi)康?掌握設(shè)計性實驗的基本思路，并完成設(shè)計報告。2掌握唾液淀粉酶最適ph的測定原理和方法。3熟悉影響酶促反應(yīng)速度的因素。實驗原理1酶促反應(yīng)速度受到許多因素的影響，如溫度、ph、激動劑和抑制劑等。上述諸因素對唾液淀粉酶催化淀粉水解反應(yīng)速度的影響，可用定性或定量的反應(yīng)來觀察。利用碘與淀粉機器不同程度紓解產(chǎn)物反應(yīng)的顏色，來衡量酶促反應(yīng)的速度的快慢。藍(lán)色紫紅色黃色，顏色由藍(lán)變黃，表示酶促反應(yīng)速度由慢到快。此為定性觀察。2.進一步利用郎伯比爾定律來判定溶液的吸光度與溶液的濃度符合一定的比例關(guān)系。由于在被水解的程度也不一樣。當(dāng)唾液淀粉酶不能將完全水解時，淀粉遇碘呈藍(lán)色，吸

2、收波長位于660nm處。不同ph環(huán)境中唾液淀粉酶與淀粉的反應(yīng)程度不同，吸光度值也不同。因此，通過測量660nm處的吸光度值，可以了解ph對酶促反應(yīng)的影響，吸光度最小的溶液其ph即為唾液淀粉酶的最適ph。a660ph最適ph實驗器材儀器材料：方盤，試管架，中試管，毛刷，吸耳球，玻璃鉛筆，小燒杯，白瓷板，坐標(biāo)紙，漱口杯。0.1ml、0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml刻度吸管，膠頭滴管，37 c恒溫水浴箱，分光光度計，電磁爐。 試劑藥品： 0.02淀粉溶液. 0.2mol/l磷酸二氫鈉溶液、0.2mol/l磷酸氫二鈉溶液 碘液；稱取碘1g,碘酸鉀2g，溶于300ml蒸餾水中

3、。實驗步驟：1、 緩沖液的配置 ph 0.2mol/l 0.2mol/lnah2po4(ml) na2hpo4(ml)5.7 93.5 6.55.8 92.0 8.05.9 90.0 10.06.0 87.7 12.36.1 85.0 15.0 6.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51.0 49.06.9 45.0 55.07.0 39.0 61.07.1 33.0 67.07.2 28.0 72.07.3 23.0 67.07.4 19.0 81.07.5 16.0

4、 84.07.6 13.0 87.07.7 10.5 89.5 7.8 8.5 91.57.9 7.0 93.08.0 5.3 94.72、唾液的取法：（1）先給備取者一杯純凈水讓其漱口，將漱口液吐掉，再將一塊消毒脫脂棉球用鑷子放在備取者的舌下，過大約半分鐘至一分鐘，備取者感覺棉球濕透，用鑷子將棉球取出，置于燒杯中，倒入蒸餾水，用玻璃棒充分?jǐn)嚢瑁瑢⒚耷蛉〕?，即制成唾液實驗備用液。?）讓備取者下嘴唇抵住干凈的杯子口，在備取者眼前放上一些話梅，這時，備取者的唾液會不停地流出來。（3）準(zhǔn)備一個干凈的杯子，用手扯住嘴角，等待大約2分鐘后，就可以獲得唾液。實驗方案（1）唾液的稀釋：取10支試管，分別編

5、上號0009編號 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9唾液 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1蒸餾水 4.9 9.9 14.9 19.9 24.9 29.9 34.9 39.9 44.9 49.9(2)最適唾液稀釋倍數(shù)的選取取上述稀釋的唾液各1ml，分別加入另取的10支試管中，分別編上aj號的試管里，向10支試管內(nèi)同時加入1ml的0.02的淀粉溶液，振蕩混勻后放入37 c恒溫水浴幾分鐘后取出，滴加12滴碘液，振蕩混勻，觀察顏色，選取顏色變?yōu)榈S色最快的一支，記錄其稀釋倍數(shù)，作為下面實驗的最適唾液稀釋倍數(shù)。（3）最適ph的測定編號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 ph顏色a660a660ph實驗結(jié)果最適ph=？實驗分析思考題1）本實驗為什么要尋找較合適的唾液稀釋倍數(shù)？答：為了跟好的找到唾液淀粉酶的合適濃度，是的最后測定的最適ph精確。2）在研究ph對酶促反應(yīng)速度的影響是，前提條件是什么？答：溫度，底物濃度，酶濃度保持恒定。3）所測吸光度中，吸光度值最小溶液所對應(yīng)的ph一定是唾液淀粉酶的最適ph嗎？答：不一定，最適ph值應(yīng)當(dāng)是根據(jù)a-ph的圖來確