微生物的生長(zhǎng)及其控制工業(yè)微生物學(xué)07

1、微生物通過(guò)新陳代謝把營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)變成細(xì)胞物質(zhì)，微生物通過(guò)新陳代謝把營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)變成細(xì)胞物質(zhì)， 增加個(gè)體重量的過(guò)程。增加個(gè)體重量的過(guò)程。 細(xì)胞生長(zhǎng)到一定程度進(jìn)行分裂，產(chǎn)生同親代相似的細(xì)胞生長(zhǎng)到一定程度進(jìn)行分裂，產(chǎn)生同親代相似的 子代細(xì)胞的過(guò)程。子代細(xì)胞的過(guò)程。 生長(zhǎng)是一個(gè)逐步發(fā)生的生長(zhǎng)是一個(gè)逐步發(fā)生的量變量變過(guò)程過(guò)程; 繁殖是一個(gè)產(chǎn)生繁殖是一個(gè)產(chǎn)生新的生命個(gè)體新的生命個(gè)體的質(zhì)變過(guò)程。的質(zhì)變過(guò)程。 在高等生物里這兩個(gè)過(guò)程可以明顯分開(kāi)，但在低等在高等生物里這兩個(gè)過(guò)程可以明顯分開(kāi)，但在低等 特別是在特別是在單細(xì)胞的生物單細(xì)胞的生物里，由于細(xì)胞小，這兩個(gè)過(guò)程是里，由于細(xì)胞小，這兩個(gè)過(guò)程是 緊密聯(lián)系又很難劃分

2、的過(guò)程。緊密聯(lián)系又很難劃分的過(guò)程。 一、細(xì)菌細(xì)胞的生長(zhǎng)一、細(xì)菌細(xì)胞的生長(zhǎng) 1. 染色體染色體DNA的復(fù)制和分離的復(fù)制和分離 細(xì)胞伸長(zhǎng)和細(xì)胞伸長(zhǎng)和DNA復(fù)制復(fù)制 DNA分配和分配和隔隔 膜開(kāi)始形成膜開(kāi)始形成 桿菌在生長(zhǎng)過(guò)程中，新合桿菌在生長(zhǎng)過(guò)程中，新合 成的肽聚糖是在多個(gè)位點(diǎn)成的肽聚糖是在多個(gè)位點(diǎn) 插入到老細(xì)胞壁中，新老插入到老細(xì)胞壁中，新老 細(xì)胞壁呈間隔分布。細(xì)胞壁呈間隔分布。 球菌在生長(zhǎng)過(guò)程中，新合球菌在生長(zhǎng)過(guò)程中，新合 成的肽聚糖是在赤道板附成的肽聚糖是在赤道板附 近插入，導(dǎo)致新老細(xì)胞壁近插入，導(dǎo)致新老細(xì)胞壁 明顯分開(kāi)，原來(lái)的老細(xì)胞明顯分開(kāi)，原來(lái)的老細(xì)胞 壁推向細(xì)胞兩端。壁推向細(xì)胞兩端。

3、2、細(xì)胞壁的擴(kuò)增、細(xì)胞壁的擴(kuò)增 熒光抗體技術(shù)熒光抗體技術(shù) 3、細(xì)菌的分裂、細(xì)菌的分裂 隔膜完全形成隔膜完全形成 子細(xì)胞分離子細(xì)胞分離 DNA分配和分配和隔隔 膜開(kāi)始形成膜開(kāi)始形成 當(dāng)細(xì)菌的各種細(xì)胞結(jié)構(gòu)當(dāng)細(xì)菌的各種細(xì)胞結(jié)構(gòu) 復(fù)制完成之后就進(jìn)入分裂復(fù)制完成之后就進(jìn)入分裂 時(shí)期，此時(shí)在細(xì)菌長(zhǎng)軸的時(shí)期，此時(shí)在細(xì)菌長(zhǎng)軸的 中間位置，通過(guò)細(xì)胞質(zhì)膜中間位置，通過(guò)細(xì)胞質(zhì)膜 內(nèi)陷并伴隨新合成的肽聚內(nèi)陷并伴隨新合成的肽聚 糖插入，導(dǎo)致橫隔壁向心糖插入，導(dǎo)致橫隔壁向心 生長(zhǎng)，最后在中心匯合，生長(zhǎng)，最后在中心匯合， 完成一次分裂，通常情況完成一次分裂，通常情況 下，將一個(gè)細(xì)胞分裂成兩下，將一個(gè)細(xì)胞分裂成兩 個(gè)大小相等

4、的子細(xì)胞。個(gè)大小相等的子細(xì)胞。 二、酵母細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖二、酵母細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖 細(xì)胞分裂期細(xì)胞分裂期M 間隔期間隔期G1 DNA合成期合成期S 第二間隔期第二間隔期G2 核膜上的紡錘體斑通過(guò)復(fù)制由一個(gè)變?yōu)閮珊四ど系募忓N體斑通過(guò)復(fù)制由一個(gè)變?yōu)閮?個(gè)，個(gè)，DNA開(kāi)始復(fù)制，芽體出現(xiàn)。開(kāi)始復(fù)制，芽體出現(xiàn)。 紡錘體斑產(chǎn)生約紡錘體斑產(chǎn)生約15根微管，其中一個(gè)紡錘根微管，其中一個(gè)紡錘 體斑沿核膜移動(dòng)體斑沿核膜移動(dòng)180度，從而使兩個(gè)紡錘度，從而使兩個(gè)紡錘 體斑通過(guò)直線形的微管連在一起。體斑通過(guò)直線形的微管連在一起。 芽體增大，細(xì)胞核移到母細(xì)胞與芽體交界芽體增大，細(xì)胞核移到母細(xì)胞與芽體交界 處，微管延長(zhǎng)。處，微

5、管延長(zhǎng)。 細(xì)胞核有絲分裂，其中一個(gè)核進(jìn)入芽體，細(xì)胞核有絲分裂，其中一個(gè)核進(jìn)入芽體， 芽體子細(xì)胞與母細(xì)胞之間的壁開(kāi)始合成，芽體子細(xì)胞與母細(xì)胞之間的壁開(kāi)始合成， 隨后子細(xì)胞與母細(xì)胞分離，或暫時(shí)不分離隨后子細(xì)胞與母細(xì)胞分離，或暫時(shí)不分離 （如假絲酵母屬）繼續(xù)出芽。（如假絲酵母屬）繼續(xù)出芽。 三、霉菌菌絲的延伸過(guò)程三、霉菌菌絲的延伸過(guò)程 頂端生長(zhǎng)需要高爾基體、內(nèi)頂端生長(zhǎng)需要高爾基體、內(nèi) 質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器參與。在菌絲的質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器參與。在菌絲的 亞頂端區(qū)富含內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和核糖體亞頂端區(qū)富含內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和核糖體 等細(xì)胞器。等細(xì)胞器。 細(xì)胞膜脂肪和蛋白質(zhì)在亞頂細(xì)胞膜脂肪和蛋白質(zhì)在亞頂 端區(qū)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中合成后，通過(guò)端區(qū)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

6、中合成后，通過(guò) 小泡囊轉(zhuǎn)移到高爾基體的近側(cè)小泡囊轉(zhuǎn)移到高爾基體的近側(cè) 潴泡中，由高爾基體轉(zhuǎn)向遠(yuǎn)側(cè)潴泡中，由高爾基體轉(zhuǎn)向遠(yuǎn)側(cè) 時(shí)，成熟而分泌泡囊。時(shí)，成熟而分泌泡囊。 分泌的泡囊從亞頂端區(qū)移向分泌的泡囊從亞頂端區(qū)移向 頂端，泡囊與細(xì)胞膜融合形成頂端，泡囊與細(xì)胞膜融合形成 細(xì)胞膜。同時(shí)釋放出細(xì)胞壁分細(xì)胞膜。同時(shí)釋放出細(xì)胞壁分 解酶與合成酶，分解酶使壁組解酶與合成酶，分解酶使壁組 份間的鍵斷裂，合成酶催化合份間的鍵斷裂，合成酶催化合 成新壁成分，并將其轉(zhuǎn)移到壁成新壁成分，并將其轉(zhuǎn)移到壁 區(qū)形成新壁。區(qū)形成新壁。 “菌絲尖端生長(zhǎng)的泡囊假設(shè)菌絲尖端生長(zhǎng)的泡囊假設(shè)” 一、單細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線一、單細(xì)

7、胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線 將少量純種非絲狀單細(xì)胞微生物接種到恒容積的新鮮液將少量純種非絲狀單細(xì)胞微生物接種到恒容積的新鮮液 體培養(yǎng)基中，在適宜的溫度、通氣等條件下培養(yǎng)，定時(shí)取樣體培養(yǎng)基中，在適宜的溫度、通氣等條件下培養(yǎng)，定時(shí)取樣 測(cè)定單位體積里的細(xì)胞數(shù)，以單位體積里細(xì)胞數(shù)的對(duì)數(shù)作縱測(cè)定單位體積里的細(xì)胞數(shù)，以單位體積里細(xì)胞數(shù)的對(duì)數(shù)作縱 坐標(biāo)，以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，畫(huà)出的曲線，就是非絲狀的單坐標(biāo)，以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，畫(huà)出的曲線，就是非絲狀的單 細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線。細(xì)胞微生物的典型生長(zhǎng)曲線。 典型生長(zhǎng)曲線根據(jù)微生物的典型生長(zhǎng)曲線根據(jù)微生物的生長(zhǎng)速率常數(shù)生長(zhǎng)速率常數(shù)R（即每小時(shí)的分（即每小時(shí)的分 裂

8、次數(shù)）的不同，一般可分為裂次數(shù)）的不同，一般可分為遲緩期（延滯期）遲緩期（延滯期）、指數(shù)期指數(shù)期、穩(wěn)定穩(wěn)定 期期和和衰亡期衰亡期等四個(gè)時(shí)期等四個(gè)時(shí)期。 1. 延滯期（延滯期（Lag phase），也稱遲緩期、延遲期、適應(yīng)期。，也稱遲緩期、延遲期、適應(yīng)期。 將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后,在開(kāi)始一段時(shí)間內(nèi)菌數(shù)不在開(kāi)始一段時(shí)間內(nèi)菌數(shù)不 立即增加立即增加,或增加很少，生長(zhǎng)速度接近于零。此時(shí)細(xì)胞特點(diǎn)可或增加很少，生長(zhǎng)速度接近于零。此時(shí)細(xì)胞特點(diǎn)可 概括為：分裂遲緩、代謝活躍。概括為：分裂遲緩、代謝活躍。 該期的具體特點(diǎn)為：該期的具體特點(diǎn)為： 生長(zhǎng)速率常數(shù)為零；生長(zhǎng)速率常數(shù)為零； 細(xì)

9、胞形態(tài)變大或增長(zhǎng)，尤其是長(zhǎng)軸最為明細(xì)胞形態(tài)變大或增長(zhǎng)，尤其是長(zhǎng)軸最為明 顯，許多桿菌可長(zhǎng)成絲狀；顯，許多桿菌可長(zhǎng)成絲狀； 細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞內(nèi)的RNA尤其是尤其是rRNA含量增高，原含量增高，原 生質(zhì)呈嗜堿性；生質(zhì)呈嗜堿性； 合成代謝十分活躍，核糖體、酶類和合成代謝十分活躍，核糖體、酶類和ATP 的合成加速，容易產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶；的合成加速，容易產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶； 對(duì)外界條件如對(duì)外界條件如NaCl 溶液濃度、溫度和抗生溶液濃度、溫度和抗生 素等理化因素反應(yīng)敏感。素等理化因素反應(yīng)敏感。 微生物接種到一個(gè)新的環(huán)境，暫時(shí)缺乏分解和催化有關(guān)底物微生物接種到一個(gè)新的環(huán)境，暫時(shí)缺乏分解和催化有關(guān)底物 的酶，或是缺乏

10、充足的中間代謝產(chǎn)物等。為產(chǎn)生誘導(dǎo)酶或合成的酶，或是缺乏充足的中間代謝產(chǎn)物等。為產(chǎn)生誘導(dǎo)酶或合成 中間代謝產(chǎn)物，就需要一段適應(yīng)期。中間代謝產(chǎn)物，就需要一段適應(yīng)期。 遲滯期的長(zhǎng)短與菌種的遺傳性、菌齡以及移種前后所處的環(huán)遲滯期的長(zhǎng)短與菌種的遺傳性、菌齡以及移種前后所處的環(huán) 境條件等因素有關(guān)，短的只需要幾分鐘，長(zhǎng)的需數(shù)小時(shí)。境條件等因素有關(guān)，短的只需要幾分鐘，長(zhǎng)的需數(shù)小時(shí)。 (1)(1)通過(guò)遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短；通過(guò)遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短； (2)(2)利用對(duì)數(shù)期的細(xì)胞作為種子；利用對(duì)數(shù)期的細(xì)胞作為種子； (3)(3)盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大；盡量

11、使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大； (4)(4)適當(dāng)擴(kuò)大接種量。適當(dāng)擴(kuò)大接種量。 2. 指數(shù)期（指數(shù)期（Exponential phase），又稱對(duì)數(shù)期（，又稱對(duì)數(shù)期（Log phase) 指緊接遲滯期之后，細(xì)胞以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)的一段時(shí)期。指緊接遲滯期之后，細(xì)胞以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)的一段時(shí)期。 繁殖代數(shù)繁殖代數(shù)(n)、生長(zhǎng)速率常數(shù)、生長(zhǎng)速率常數(shù)(R)、代時(shí)、代時(shí)(G) 指數(shù)期的特點(diǎn)：指數(shù)期的特點(diǎn)： 生長(zhǎng)速率常數(shù)生長(zhǎng)速率常數(shù)R最大且為常數(shù)，細(xì)胞每分裂最大且為常數(shù)，細(xì)胞每分裂 一次所需的時(shí)間（稱為代時(shí)，或世代時(shí)間，一次所需的時(shí)間（稱為代時(shí)，或世代時(shí)間， 或增代時(shí)間，或倍增時(shí)間，用或增代時(shí)間，或倍增

12、時(shí)間，用G表示）最短表示）最短 且穩(wěn)定；且穩(wěn)定； 細(xì)胞進(jìn)行平衡生長(zhǎng)，菌體各部分的成分十細(xì)胞進(jìn)行平衡生長(zhǎng)，菌體各部分的成分十 分均勻；分均勻； 酶系活躍，代謝旺盛。酶系活躍，代謝旺盛。 t t1 1 t t0 0 1 1 G = G = = = n R n R 注意：只有處于指數(shù)期，才符合以上計(jì)算公式注意：只有處于指數(shù)期，才符合以上計(jì)算公式 納米細(xì)菌納米細(xì)菌(nanobacteria)， 三天才分裂一次；三天才分裂一次； 九十年代初期從地下數(shù)公九十年代初期從地下數(shù)公 里發(fā)現(xiàn)的超微型細(xì)菌，用代里發(fā)現(xiàn)的超微型細(xì)菌，用代 謝產(chǎn)生的謝產(chǎn)生的CO2作指標(biāo)，計(jì)算作指標(biāo)，計(jì)算 出這些超微菌的代謝速率僅出這些超

13、微菌的代謝速率僅 為地上正常細(xì)菌的為地上正常細(xì)菌的10-15，有，有 人認(rèn)為它們需要人認(rèn)為它們需要100年才能分年才能分 裂一次。裂一次。 適宜作適宜作“種子種子”； 研究基礎(chǔ)代謝的材料；研究基礎(chǔ)代謝的材料； 噬菌體增殖的最好階段；噬菌體增殖的最好階段； 革蘭氏染色；革蘭氏染色； 誘變育種；誘變育種； 3. 穩(wěn)定期（穩(wěn)定期（Stationary phase） 指數(shù)期之后，培養(yǎng)液中活細(xì)菌數(shù)最高并維持穩(wěn)定的階段指數(shù)期之后，培養(yǎng)液中活細(xì)菌數(shù)最高并維持穩(wěn)定的階段(可可 能由于細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等于細(xì)菌死亡數(shù)，或者細(xì)胞僅停止能由于細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等于細(xì)菌死亡數(shù)，或者細(xì)胞僅停止 分裂而保持代謝活性分裂而

14、保持代謝活性) 。 穩(wěn)定期特點(diǎn)：穩(wěn)定期特點(diǎn)： 生長(zhǎng)速率常數(shù)生長(zhǎng)速率常數(shù)R降低至降低至0； 代時(shí)代時(shí)G延長(zhǎng)；延長(zhǎng)； 細(xì)胞重要的分化階段；細(xì)胞重要的分化階段； 細(xì)胞開(kāi)始衰老，原生質(zhì)分布不均勻，出現(xiàn)液泡；細(xì)胞開(kāi)始衰老，原生質(zhì)分布不均勻，出現(xiàn)液泡； 開(kāi)始積累糖原等內(nèi)含物；開(kāi)始積累糖原等內(nèi)含物； 產(chǎn)芽孢的菌開(kāi)始形成芽孢；產(chǎn)芽孢的菌開(kāi)始形成芽孢； 次生代謝產(chǎn)物（抗生素等）開(kāi)始大量合成次生代謝產(chǎn)物（抗生素等）開(kāi)始大量合成 菌體的最大收獲期菌體的最大收獲期 穩(wěn)定期如果及時(shí)采取措施，補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或取走代謝產(chǎn)物穩(wěn)定期如果及時(shí)采取措施，補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或取走代謝產(chǎn)物 或改善培養(yǎng)條件（調(diào)整或改善培養(yǎng)條件（調(diào)整pH、溫度、

15、通氣），可以獲得更多、溫度、通氣），可以獲得更多 的菌體物質(zhì)或代謝產(chǎn)物。的菌體物質(zhì)或代謝產(chǎn)物。 對(duì)以收獲菌體或與菌體生長(zhǎng)相平行的代謝產(chǎn)物（對(duì)以收獲菌體或與菌體生長(zhǎng)相平行的代謝產(chǎn)物（SCP、乳、乳 酸等）為目的的發(fā)酵生產(chǎn)來(lái)說(shuō)，穩(wěn)定期是產(chǎn)物的最佳收獲酸等）為目的的發(fā)酵生產(chǎn)來(lái)說(shuō)，穩(wěn)定期是產(chǎn)物的最佳收獲 期。期。 通過(guò)對(duì)穩(wěn)定期到來(lái)原因的研究，促使了連續(xù)培養(yǎng)原理的提通過(guò)對(duì)穩(wěn)定期到來(lái)原因的研究，促使了連續(xù)培養(yǎng)原理的提 出和工藝、技術(shù)的創(chuàng)建。出和工藝、技術(shù)的創(chuàng)建。 4. 衰亡期（衰亡期（Decline或或Death phase） 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)耗盡和有毒代謝產(chǎn)物的大量積累，細(xì)菌死亡速率超營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)耗盡和有毒代謝產(chǎn)物

16、的大量積累，細(xì)菌死亡速率超 過(guò)新生速率，整個(gè)群體呈現(xiàn)出負(fù)增長(zhǎng)。過(guò)新生速率，整個(gè)群體呈現(xiàn)出負(fù)增長(zhǎng)。 衰亡期特點(diǎn)：衰亡期特點(diǎn)： 生長(zhǎng)速率常數(shù)生長(zhǎng)速率常數(shù)R小于小于0； 細(xì)胞形態(tài)發(fā)生多形化細(xì)胞形態(tài)發(fā)生多形化 出現(xiàn)畸形或細(xì)胞大小懸殊；出現(xiàn)畸形或細(xì)胞大小懸殊； 有些微生物因蛋白酶活力的增強(qiáng)而發(fā)生自有些微生物因蛋白酶活力的增強(qiáng)而發(fā)生自 溶，溶， 有些微生物產(chǎn)生或釋放出一些代謝產(chǎn)物如有些微生物產(chǎn)生或釋放出一些代謝產(chǎn)物如 氨基酸、轉(zhuǎn)化酶、外肽酶或抗生素等；氨基酸、轉(zhuǎn)化酶、外肽酶或抗生素等； 芽孢桿菌往往在此期釋放芽孢。芽孢桿菌往往在此期釋放芽孢。 衰亡期 在實(shí)際工作中多采用分光光度計(jì)測(cè)定在實(shí)際工作中多采用分光

17、光度計(jì)測(cè)定OD值的方法繪制細(xì)菌的生值的方法繪制細(xì)菌的生 長(zhǎng)曲線，但該法繪制的生長(zhǎng)曲線不能反映衰亡期。長(zhǎng)曲線，但該法繪制的生長(zhǎng)曲線不能反映衰亡期。 二二. . 絲狀真菌的生長(zhǎng)曲線絲狀真菌的生長(zhǎng)曲線 絲狀真菌是以菌絲干重（絲狀真菌是以菌絲干重（mg）作為衡量生長(zhǎng)狀況的縱坐作為衡量生長(zhǎng)狀況的縱坐 標(biāo)，時(shí)間為橫坐標(biāo)，繪制生長(zhǎng)曲線。標(biāo)，時(shí)間為橫坐標(biāo)，繪制生長(zhǎng)曲線。 絲狀真菌的生長(zhǎng)曲線絲狀真菌的生長(zhǎng)曲線 由三個(gè)時(shí)期組成：延由三個(gè)時(shí)期組成：延 滯期，滯期， 快速生長(zhǎng)期，快速生長(zhǎng)期， 衰亡期衰亡期 絲狀真菌不是單細(xì)絲狀真菌不是單細(xì) 胞，其繁殖不以幾何胞，其繁殖不以幾何 級(jí)數(shù)增加，故沒(méi)有指級(jí)數(shù)增加，故沒(méi)有指 數(shù)

18、生長(zhǎng)期數(shù)生長(zhǎng)期 三、同步生長(zhǎng)（三、同步生長(zhǎng)（Synchronous growthSynchronous growth） 同步培養(yǎng)同步培養(yǎng): 使群體中的所有個(gè)體細(xì)胞使群體中的所有個(gè)體細(xì)胞 處于同樣細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂周期中（即大處于同樣細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂周期中（即大 多數(shù)細(xì)胞能同時(shí)進(jìn)行生長(zhǎng)或分裂）的培多數(shù)細(xì)胞能同時(shí)進(jìn)行生長(zhǎng)或分裂）的培 養(yǎng)方法。養(yǎng)方法。 通過(guò)同步培養(yǎng)方法獲得的細(xì)胞被稱為同通過(guò)同步培養(yǎng)方法獲得的細(xì)胞被稱為同 步細(xì)胞或同步培養(yǎng)物。步細(xì)胞或同步培養(yǎng)物。 問(wèn)題：如何研究在單個(gè)細(xì)胞的生理與遺問(wèn)題：如何研究在單個(gè)細(xì)胞的生理與遺 傳特性。傳特性。 通過(guò)同步培養(yǎng)方法的處理，非同步群通過(guò)同步培養(yǎng)方法的處理，

19、非同步群 體細(xì)胞處于同一生長(zhǎng)階段，并能同時(shí)進(jìn)體細(xì)胞處于同一生長(zhǎng)階段，并能同時(shí)進(jìn) 行分裂的生長(zhǎng)狀態(tài)，稱為行分裂的生長(zhǎng)狀態(tài)，稱為同步生長(zhǎng)同步生長(zhǎng)。 同步培養(yǎng)的方法有兩類：同步培養(yǎng)的方法有兩類： 機(jī)械法優(yōu)點(diǎn)：不影響菌體的代謝與機(jī)械法優(yōu)點(diǎn)：不影響菌體的代謝與 活性，活性， 細(xì)胞保持自然狀態(tài)。細(xì)胞保持自然狀態(tài)。 環(huán)境環(huán)境控制法的缺點(diǎn)：細(xì)胞活性受到不同程度的影響。環(huán)境環(huán)境控制法的缺點(diǎn)：細(xì)胞活性受到不同程度的影響。 四、連續(xù)培養(yǎng)四、連續(xù)培養(yǎng)( (Continous cultureContinous culture） 培養(yǎng)基一次加入，不予補(bǔ)充，不再更換培養(yǎng)基一次加入，不予補(bǔ)充，不再更換 在微生物的整個(gè)培養(yǎng)期間

20、，通過(guò)一定的方式使微生物生長(zhǎng)在微生物的整個(gè)培養(yǎng)期間，通過(guò)一定的方式使微生物生長(zhǎng) 處于平衡生長(zhǎng)狀態(tài)，能以恒定的生長(zhǎng)速率生長(zhǎng)的一種培養(yǎng)方處于平衡生長(zhǎng)狀態(tài)，能以恒定的生長(zhǎng)速率生長(zhǎng)的一種培養(yǎng)方 法。法。 若在一個(gè)開(kāi)放的系統(tǒng)中若在一個(gè)開(kāi)放的系統(tǒng)中(恒定容積的流動(dòng)系統(tǒng)恒定容積的流動(dòng)系統(tǒng))培養(yǎng)微生物，培養(yǎng)微生物， 培養(yǎng)過(guò)程中不斷補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和以同樣的速率移出培養(yǎng)物，培養(yǎng)過(guò)程中不斷補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和以同樣的速率移出培養(yǎng)物， 是實(shí)現(xiàn)微生物連續(xù)培養(yǎng)的基本原則。是實(shí)現(xiàn)微生物連續(xù)培養(yǎng)的基本原則。 培養(yǎng)系統(tǒng)中的細(xì)胞數(shù)量和營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)恒定，即處于穩(wěn)態(tài)。培養(yǎng)系統(tǒng)中的細(xì)胞數(shù)量和營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)恒定，即處于穩(wěn)態(tài)。 單細(xì)胞微生物的生長(zhǎng)符合典型的

21、生長(zhǎng)曲線單細(xì)胞微生物的生長(zhǎng)符合典型的生長(zhǎng)曲線 最簡(jiǎn)單的連續(xù)培養(yǎng)裝置包括：最簡(jiǎn)單的連續(xù)培養(yǎng)裝置包括：培培 養(yǎng)室養(yǎng)室、無(wú)菌培養(yǎng)基儲(chǔ)存器無(wú)菌培養(yǎng)基儲(chǔ)存器和和調(diào)調(diào) 節(jié)流速的控制系統(tǒng)節(jié)流速的控制系統(tǒng)。 連續(xù)培養(yǎng)的主要參數(shù)連續(xù)培養(yǎng)的主要參數(shù) 稀釋率稀釋率D （h-1）：即培養(yǎng)基每）：即培養(yǎng)基每 小時(shí)流過(guò)培養(yǎng)容器的體積數(shù)。小時(shí)流過(guò)培養(yǎng)容器的體積數(shù)。 D= = 培養(yǎng)基的流動(dòng)速率培養(yǎng)基的流動(dòng)速率 培養(yǎng)室的容積培養(yǎng)室的容積 F V 無(wú)菌培養(yǎng)基儲(chǔ)存器無(wú)菌培養(yǎng)基儲(chǔ)存器 培養(yǎng)室培養(yǎng)室 調(diào)節(jié)流速的調(diào)節(jié)流速的 控制閥控制閥 根據(jù)控制培養(yǎng)基流入培養(yǎng)容器方式的不同可分兩種類型：根據(jù)控制培養(yǎng)基流入培養(yǎng)容器方式的不同可分兩種類型：

22、 恒濁器連續(xù)培養(yǎng)恒濁器連續(xù)培養(yǎng)和和恒化器連續(xù)培養(yǎng)恒化器連續(xù)培養(yǎng)。 A.恒濁培養(yǎng)系統(tǒng)恒濁培養(yǎng)系統(tǒng) B.恒化培養(yǎng)系統(tǒng)恒化培養(yǎng)系統(tǒng) 1. 盛無(wú)菌培養(yǎng)基的容器盛無(wú)菌培養(yǎng)基的容器 2. 控制流速閥控制流速閥 3. 培養(yǎng)室培養(yǎng)室 4. 排出管排出管 5. 光源光源 6. 光電池光電池 7. 排出物排出物 恒濁器：根恒濁器：根 據(jù)培養(yǎng)室內(nèi)據(jù)培養(yǎng)室內(nèi) 微生物的生微生物的生 長(zhǎng)密度，借長(zhǎng)密度，借 光電控制系光電控制系 統(tǒng)來(lái)控制培統(tǒng)來(lái)控制培 養(yǎng)基的流速，養(yǎng)基的流速， 以取得菌體以取得菌體 密度高、生密度高、生 長(zhǎng)速率恒定長(zhǎng)速率恒定 的微生物細(xì)的微生物細(xì) 胞的連續(xù)培胞的連續(xù)培 養(yǎng)器。養(yǎng)器。 恒化器：培恒化器：培 養(yǎng)

23、基流速恒養(yǎng)基流速恒 定，通過(guò)控定，通過(guò)控 制培養(yǎng)基中制培養(yǎng)基中 某一生長(zhǎng)限某一生長(zhǎng)限 制性底物的制性底物的 濃度來(lái)調(diào)節(jié)濃度來(lái)調(diào)節(jié) 微生物的生微生物的生 長(zhǎng)速率長(zhǎng)速率, ,使使 微生物維持微生物維持 恒定生長(zhǎng)速恒定生長(zhǎng)速 率的連續(xù)培率的連續(xù)培 養(yǎng)裝置。養(yǎng)裝置。 恒化器中的菌體濃度不由稀釋率決定，而由生長(zhǎng)限制性底物濃恒化器中的菌體濃度不由稀釋率決定，而由生長(zhǎng)限制性底物濃 度決定。通過(guò)控制流速可得到生長(zhǎng)速率不同但密度基本恒定的度決定。通過(guò)控制流速可得到生長(zhǎng)速率不同但密度基本恒定的 培養(yǎng)物，微生物始終在低于其最高生長(zhǎng)速率下進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖。培養(yǎng)物，微生物始終在低于其最高生長(zhǎng)速率下進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖。 遺傳學(xué)：突

24、變株分離；遺傳學(xué)：突變株分離； 生理學(xué)：不同條件下的代謝變化；生理學(xué)：不同條件下的代謝變化； 生態(tài)學(xué)：模擬自然營(yíng)養(yǎng)條件建立實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜕鷳B(tài)學(xué)：模擬自然營(yíng)養(yǎng)條件建立實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?如果根據(jù)連續(xù)培養(yǎng)器串聯(lián)的數(shù)目分，也可分為兩種類型：如果根據(jù)連續(xù)培養(yǎng)器串聯(lián)的數(shù)目分，也可分為兩種類型： 單級(jí)連續(xù)培養(yǎng)單級(jí)連續(xù)培養(yǎng) 多級(jí)連續(xù)培養(yǎng)多級(jí)連續(xù)培養(yǎng) 適用于：代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生速率與菌體生長(zhǎng)速率相平適用于：代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生速率與菌體生長(zhǎng)速率相平 行的培養(yǎng)行的培養(yǎng) 微生物代謝產(chǎn)物與菌體生長(zhǎng)不平行，例如丙酮、丁醇微生物代謝產(chǎn)物與菌體生長(zhǎng)不平行，例如丙酮、丁醇 或某些次級(jí)代謝產(chǎn)物（抗生素、維生素等）的生產(chǎn)，或某些次級(jí)代謝產(chǎn)物（抗生素、維

25、生素等）的生產(chǎn)， 應(yīng)采取多級(jí)連續(xù)培養(yǎng)法，第一級(jí)發(fā)酵罐中以培養(yǎng)菌體應(yīng)采取多級(jí)連續(xù)培養(yǎng)法，第一級(jí)發(fā)酵罐中以培養(yǎng)菌體 為主，后幾級(jí)則以產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物為主。為主，后幾級(jí)則以產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物為主。 連續(xù)培養(yǎng)應(yīng)用與生產(chǎn)就稱為連續(xù)發(fā)酵。連續(xù)培養(yǎng)應(yīng)用與生產(chǎn)就稱為連續(xù)發(fā)酵。 高效：簡(jiǎn)化操作單元，縮短生產(chǎn)周期，提高設(shè)備利用率；高效：簡(jiǎn)化操作單元，縮短生產(chǎn)周期，提高設(shè)備利用率； 便于自動(dòng)控制；便于自動(dòng)控制； 降低動(dòng)力消耗及體力勞動(dòng)強(qiáng)度；降低動(dòng)力消耗及體力勞動(dòng)強(qiáng)度； 產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定。產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定。 雜菌污染機(jī)會(huì)增多；雜菌污染機(jī)會(huì)增多； 易菌種退化；易菌種退化； 營(yíng)養(yǎng)物利用率低。營(yíng)養(yǎng)物利用率低。 單位時(shí)間里微生物數(shù)

26、量或生物量（單位時(shí)間里微生物數(shù)量或生物量（Biomass）的變化。的變化。 計(jì)數(shù)計(jì)數(shù) 評(píng)價(jià)培養(yǎng)條件、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響；評(píng)價(jià)培養(yǎng)條件、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響； 評(píng)價(jià)不同的抗菌物質(zhì)對(duì)微生物產(chǎn)生抑制評(píng)價(jià)不同的抗菌物質(zhì)對(duì)微生物產(chǎn)生抑制(或殺死或殺死)作用的效果；作用的效果； 客觀地反映微生物生長(zhǎng)的規(guī)律?？陀^地反映微生物生長(zhǎng)的規(guī)律。 質(zhì)量法質(zhì)量法 生理指標(biāo)法生理指標(biāo)法 一、計(jì)數(shù)法一、計(jì)數(shù)法 采用特殊的計(jì)數(shù)板（血球計(jì)數(shù)板），在顯微鏡下對(duì)微生物數(shù)采用特殊的計(jì)數(shù)板（血球計(jì)數(shù)板），在顯微鏡下對(duì)微生物數(shù) 量進(jìn)行直接計(jì)數(shù)（計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量）量進(jìn)行直接計(jì)數(shù)（計(jì)算一定容積里樣品中微生物

27、的數(shù)量） 缺點(diǎn)缺點(diǎn):(1)不能區(qū)分死不能區(qū)分死 菌與活菌；菌與活菌；(2)只適只適 用于單細(xì)胞狀態(tài)的用于單細(xì)胞狀態(tài)的 微生物或絲狀微生微生物或絲狀微生 物的孢子；不適于物的孢子；不適于 對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)；對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)； (3)需要相對(duì)高的菌需要相對(duì)高的菌 體濃度體濃度(106/mL以上以上)； (4)個(gè)體小的細(xì)菌在個(gè)體小的細(xì)菌在 顯微鏡下難以觀察。顯微鏡下難以觀察。 優(yōu)點(diǎn)：快速優(yōu)點(diǎn)：快速 將已知顆粒濃度的樣品（例如血液）與待測(cè)細(xì)胞濃度的樣品將已知顆粒濃度的樣品（例如血液）與待測(cè)細(xì)胞濃度的樣品 混勻后在顯微鏡下根據(jù)二者之間的比例直接推算待測(cè)微生物細(xì)胞混勻后在顯微鏡下根據(jù)二者之間的比例直接推算

28、待測(cè)微生物細(xì)胞 濃度。濃度。 當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí)，可以將一定體積的湖水、海水或飲用當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí)，可以將一定體積的湖水、海水或飲用 水等樣品通過(guò)膜過(guò)濾器。然后將濾膜干燥、熒光染色，并經(jīng)處理水等樣品通過(guò)膜過(guò)濾器。然后將濾膜干燥、熒光染色，并經(jīng)處理 使膜透明，再在顯微鏡下計(jì)算膜上使膜透明，再在顯微鏡下計(jì)算膜上(或一定面積中或一定面積中)的細(xì)菌數(shù)。的細(xì)菌數(shù)。 采用特定的染色技術(shù)也可分別對(duì)活菌和死菌進(jìn)行分別計(jì)數(shù)（采用特定的染色技術(shù)也可分別對(duì)活菌和死菌進(jìn)行分別計(jì)數(shù)（ 美蘭，能區(qū)分死菌和活菌的熒光試劑盒）美蘭，能區(qū)分死菌和活菌的熒光試劑盒） 該法最常用。通該法最常用。通 常用來(lái)測(cè)定細(xì)菌常用來(lái)測(cè)定細(xì)菌

29、、酵母菌等單細(xì)、酵母菌等單細(xì) 胞微生物的生長(zhǎng)胞微生物的生長(zhǎng) 情況或樣品中所情況或樣品中所 含微生物個(gè)體的含微生物個(gè)體的 數(shù)量（細(xì)菌、酵數(shù)量（細(xì)菌、酵 母菌、孢子）。母菌、孢子）。 即平板菌落計(jì)即平板菌落計(jì) 數(shù)法，又稱活數(shù)法，又稱活 菌計(jì)數(shù)法菌計(jì)數(shù)法 采用培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法要求操作熟練、準(zhǔn)確，否則難以得到采用培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法要求操作熟練、準(zhǔn)確，否則難以得到 正確的結(jié)果。正確的結(jié)果。 樣品充分混勻；樣品充分混勻； 每支移液管及涂布棒只能接觸一個(gè)每支移液管及涂布棒只能接觸一個(gè) 稀釋度的菌液；稀釋度的菌液； 同一稀釋度三個(gè)以上同一稀釋度三個(gè)以上 重復(fù)重復(fù),取平均值；取平均值； 每個(gè)平板上的菌落數(shù)目合適，便于

30、每個(gè)平板上的菌落數(shù)目合適，便于 準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。 樣品充分混勻；樣品充分混勻； 一個(gè)菌落可能是多個(gè)細(xì)胞一起形一個(gè)菌落可能是多個(gè)細(xì)胞一起形 成，所以在科研中一般用菌落形成單成，所以在科研中一般用菌落形成單 位（位（colony forming units， CFU）來(lái)來(lái) 表示，而不是直接表示為細(xì)胞數(shù)。表示，而不是直接表示為細(xì)胞數(shù)。 當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí)，可以將一定體積的湖水、海水或飲用當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時(shí)，可以將一定體積的湖水、海水或飲用 水等樣品通過(guò)膜過(guò)濾器，然后將濾膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基上進(jìn)行培水等樣品通過(guò)膜過(guò)濾器，然后將濾膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基上進(jìn)行培 養(yǎng)，對(duì)形成的菌落進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。養(yǎng)，對(duì)形成的菌落進(jìn)

31、行統(tǒng)計(jì)。 在一定波長(zhǎng)在一定波長(zhǎng) 下，測(cè)定菌懸下，測(cè)定菌懸 液的光密度，液的光密度， 以光密度以光密度 (optical density 即即OD值值)表示表示 菌量。菌量。 實(shí)驗(yàn)測(cè)量時(shí)應(yīng)控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內(nèi)，實(shí)驗(yàn)測(cè)量時(shí)應(yīng)控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內(nèi)， 否則不準(zhǔn)確。否則不準(zhǔn)確。 主要適用于能進(jìn)行液體培養(yǎng)的主要適用于能進(jìn)行液體培養(yǎng)的 微生物，或采用液體鑒別培養(yǎng)基微生物，或采用液體鑒別培養(yǎng)基 進(jìn)行直接鑒定并計(jì)數(shù)的微生物。進(jìn)行直接鑒定并計(jì)數(shù)的微生物。 對(duì)未知樣品進(jìn)行十倍稀釋，然后根據(jù)估算對(duì)未知樣品進(jìn)行十倍稀釋，然后根據(jù)估算 取三個(gè)連續(xù)的稀釋度平行接種多支試管，對(duì)這取三個(gè)連續(xù)

32、的稀釋度平行接種多支試管，對(duì)這 些平行試管的微生物生長(zhǎng)情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，長(zhǎng)菌些平行試管的微生物生長(zhǎng)情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，長(zhǎng)菌 的為陽(yáng)性，未長(zhǎng)菌的為陰性，然后根據(jù)數(shù)學(xué)統(tǒng)的為陽(yáng)性，未長(zhǎng)菌的為陰性，然后根據(jù)數(shù)學(xué)統(tǒng) 計(jì)計(jì)算出樣品中的微生物數(shù)目。計(jì)計(jì)算出樣品中的微生物數(shù)目。 二、質(zhì)量法二、質(zhì)量法 測(cè)定絲狀菌生長(zhǎng)的有效方法測(cè)定絲狀菌生長(zhǎng)的有效方法 采用凱氏定氮法測(cè)出含氮量。蛋白質(zhì)含氮量為采用凱氏定氮法測(cè)出含氮量。蛋白質(zhì)含氮量為16%，細(xì)，細(xì) 胞中蛋白質(zhì)含量占細(xì)胞固形物的胞中蛋白質(zhì)含量占細(xì)胞固形物的50%80%，一般以，一般以65%為代為代 表。表。 蛋白質(zhì)總量蛋白質(zhì)總量=含氮量含氮量 16%=含氮量含氮量 6.25

33、細(xì)胞總量細(xì)胞總量=蛋白質(zhì)總量蛋白質(zhì)總量 65%=蛋白質(zhì)總量蛋白質(zhì)總量 1.54 三、三、 生理指標(biāo)法生理指標(biāo)法 生理指標(biāo)法常用于對(duì)微生物的快速鑒定與檢測(cè)生理指標(biāo)法常用于對(duì)微生物的快速鑒定與檢測(cè) 常用的指標(biāo)：呼吸強(qiáng)度、耗氧量、酶活性、生物熱常用的指標(biāo)：呼吸強(qiáng)度、耗氧量、酶活性、生物熱 樣品中微生物數(shù)量越多或生長(zhǎng)越旺盛，這些指標(biāo)愈明樣品中微生物數(shù)量越多或生長(zhǎng)越旺盛，這些指標(biāo)愈明 顯，因此可以借助特定的儀器如瓦勃氏呼吸儀、微量量熱顯，因此可以借助特定的儀器如瓦勃氏呼吸儀、微量量熱 計(jì)等設(shè)備來(lái)測(cè)定相應(yīng)的指標(biāo)。計(jì)等設(shè)備來(lái)測(cè)定相應(yīng)的指標(biāo)。 與生長(zhǎng)量相平行的生理指標(biāo)很多，它們都可用作微生物與生長(zhǎng)量相平行的生

34、理指標(biāo)很多，它們都可用作微生物 生長(zhǎng)的測(cè)定。生長(zhǎng)的測(cè)定。 一、溫度一、溫度 二、二、pH 三、滲透壓三、滲透壓 四、氧四、氧 五、表面張力五、表面張力 六、輻射六、輻射 七、液體靜壓力七、液體靜壓力 八、聲能八、聲能 影響微生物生長(zhǎng)的環(huán)境因素主要有：影響微生物生長(zhǎng)的環(huán)境因素主要有： (1)嗜冷微生物（嗜冷微生物（psychrophile） 最低生長(zhǎng)溫度最低生長(zhǎng)溫度0 以下，以下，最適生長(zhǎng)溫度最適生長(zhǎng)溫度 15 ， 最高生長(zhǎng)溫度最高生長(zhǎng)溫度20左右；（地球兩極，海洋深處）左右；（地球兩極，海洋深處） 能在能在0 生長(zhǎng)，但最適生長(zhǎng)溫度生長(zhǎng)，但最適生長(zhǎng)溫度 2040 。（冷水。（冷水 ，土壤，引起冰

35、箱食物腐敗的主要微生物類群），土壤，引起冰箱食物腐敗的主要微生物類群） -耐冷微生物耐冷微生物(psychrotolernt),又稱兼性嗜冷微生物又稱兼性嗜冷微生物 嗜冷微生物的酶在低溫下能有效起催化作用，其酶的二級(jí)結(jié)構(gòu)嗜冷微生物的酶在低溫下能有效起催化作用，其酶的二級(jí)結(jié)構(gòu) 含有較多的含有較多的 螺旋，能使酶蛋白在寒冷環(huán)境中有較強(qiáng)的彈性。螺旋，能使酶蛋白在寒冷環(huán)境中有較強(qiáng)的彈性。 嗜冷微生物的酶有較強(qiáng)的極性，含有較少的親水性氨基酸，有嗜冷微生物的酶有較強(qiáng)的極性，含有較少的親水性氨基酸，有 助于在低溫下保持蛋白質(zhì)的彈性及酶的活性。助于在低溫下保持蛋白質(zhì)的彈性及酶的活性。 嗜冷微生物細(xì)胞膜的脂類中

36、不飽和脂肪酸的含量較高，在低溫嗜冷微生物細(xì)胞膜的脂類中不飽和脂肪酸的含量較高，在低溫 下膜也能保持半流動(dòng)狀態(tài)。下膜也能保持半流動(dòng)狀態(tài)。 根據(jù)微生物的最適生長(zhǎng)溫度，可將微生物分為三類：根據(jù)微生物的最適生長(zhǎng)溫度，可將微生物分為三類： （2）嗜溫微生物）嗜溫微生物(mesophiles) ，又稱中溫菌，又稱中溫菌 最低生長(zhǎng)溫度最低生長(zhǎng)溫度10左右，最適生長(zhǎng)溫度左右，最適生長(zhǎng)溫度 25 37，最高，最高 生長(zhǎng)溫度生長(zhǎng)溫度45左右（大多數(shù)微生物，人類病原菌）。左右（大多數(shù)微生物，人類病原菌）。 嗜溫微生物又可分為寄生和腐生兩類：嗜溫微生物又可分為寄生和腐生兩類： 寄生嗜溫微生物的最適生長(zhǎng)溫度相對(duì)較高，大

37、腸桿寄生嗜溫微生物的最適生長(zhǎng)溫度相對(duì)較高，大腸桿 菌是典型的寄生嗜溫微生物；菌是典型的寄生嗜溫微生物； 腐生嗜溫微生物的相對(duì)較低，發(fā)酵工業(yè)中常用的黑腐生嗜溫微生物的相對(duì)較低，發(fā)酵工業(yè)中常用的黑 曲霉、啤酒酵母、枯草桿菌均為腐生嗜溫微生物。曲霉、啤酒酵母、枯草桿菌均為腐生嗜溫微生物。 (3)嗜熱微生物（嗜熱微生物（thermophiles） 最低生長(zhǎng)溫度最低生長(zhǎng)溫度45 ，最適生長(zhǎng)溫度，最適生長(zhǎng)溫度 5565，最高生長(zhǎng)溫，最高生長(zhǎng)溫 度度80（大部分為細(xì)菌。溫泉，堆肥）（大部分為細(xì)菌。溫泉，堆肥） 發(fā)酵工業(yè)中應(yīng)用的德氏乳酸桿菌的最適生長(zhǎng)溫度為發(fā)酵工業(yè)中應(yīng)用的德氏乳酸桿菌的最適生長(zhǎng)溫度為4550

38、，嗜熱糖化芽孢桿菌為，嗜熱糖化芽孢桿菌為65. -嗜高溫微生物（嗜高溫微生物（hyperthermophiles） 最低生長(zhǎng)溫度最低生長(zhǎng)溫度65 ，最適生長(zhǎng)溫度，最適生長(zhǎng)溫度 8090，最高生長(zhǎng)溫度，最高生長(zhǎng)溫度 100以上（古生菌，熱泉、火山噴氣口、海底火山噴氣口）以上（古生菌，熱泉、火山噴氣口、海底火山噴氣口） 胞內(nèi)酶和蛋白質(zhì)在高溫時(shí)更穩(wěn)定（分子中胞內(nèi)酶和蛋白質(zhì)在高溫時(shí)更穩(wěn)定（分子中1個(gè)或多個(gè)部位被某些氨個(gè)或多個(gè)部位被某些氨 基酸所取代，能以特殊的方式折疊，抵抗溫度的變性作用）基酸所取代，能以特殊的方式折疊，抵抗溫度的變性作用）; 細(xì)胞質(zhì)膜富含飽和脂肪酸，因而膜在高溫下仍很穩(wěn)定并發(fā)揮功能細(xì)

39、胞質(zhì)膜富含飽和脂肪酸，因而膜在高溫下仍很穩(wěn)定并發(fā)揮功能; 其核酸有熱穩(wěn)定性的結(jié)構(gòu)，其核酸有熱穩(wěn)定性的結(jié)構(gòu)，tRNA在特定的堿基區(qū)域含較多在特定的堿基區(qū)域含較多GC對(duì)對(duì). (1) 冰凍對(duì)微生物的影響冰凍對(duì)微生物的影響 冰凍使細(xì)胞內(nèi)游離水形成冰晶，對(duì)細(xì)胞造成機(jī)械性損傷；冰凍使細(xì)胞內(nèi)游離水形成冰晶，對(duì)細(xì)胞造成機(jī)械性損傷； 冰凍導(dǎo)致細(xì)胞失去可利用的水分，形成脫水干燥狀態(tài)，細(xì)胞冰凍導(dǎo)致細(xì)胞失去可利用的水分，形成脫水干燥狀態(tài)，細(xì)胞 質(zhì)的質(zhì)的pH值和膠體狀態(tài)發(fā)生改變，甚至可引起胞內(nèi)蛋白質(zhì)部分值和膠體狀態(tài)發(fā)生改變，甚至可引起胞內(nèi)蛋白質(zhì)部分 變性等；變性等； 微生物所處的基質(zhì)也因冰凍而產(chǎn)生一系列復(fù)雜的變化。微生

40、物所處的基質(zhì)也因冰凍而產(chǎn)生一系列復(fù)雜的變化。 (2) 低溫對(duì)微生物作用的有關(guān)因素低溫對(duì)微生物作用的有關(guān)因素 冰點(diǎn)附近會(huì)加速微生物死亡冰點(diǎn)附近會(huì)加速微生物死亡 微生物種類不同抵抗低溫能力不同微生物種類不同抵抗低溫能力不同 微生物所處的環(huán)境不同，對(duì)低溫的抵抗能力不同微生物所處的環(huán)境不同，對(duì)低溫的抵抗能力不同 冰凍和解凍的反復(fù)交替容易造成微生物細(xì)胞破裂冰凍和解凍的反復(fù)交替容易造成微生物細(xì)胞破裂 (3) 低溫用于食品保藏低溫用于食品保藏 根據(jù)各類食品的特點(diǎn)和保藏要求不同，將低溫保藏食品根據(jù)各類食品的特點(diǎn)和保藏要求不同，將低溫保藏食品 的溫度可作如下的劃分：的溫度可作如下的劃分： 寒冷溫度：指在室溫和冷

41、藏溫度之間的溫度。嗜冷微寒冷溫度：指在室溫和冷藏溫度之間的溫度。嗜冷微 生物能在這一溫度范圍內(nèi)緩慢生長(zhǎng)，保藏食品的有效期較生物能在這一溫度范圍內(nèi)緩慢生長(zhǎng)，保藏食品的有效期較 短，一般僅適宜于保藏果蔬食品。短，一般僅適宜于保藏果蔬食品。 冷藏溫度：指在冷藏溫度：指在05之間的溫度。一些嗜冷微生物之間的溫度。一些嗜冷微生物 尚能緩慢生長(zhǎng)，能阻止幾乎所有的引起食物中毒的病原菌尚能緩慢生長(zhǎng)，能阻止幾乎所有的引起食物中毒的病原菌 生長(zhǎng)（除肉毒桿菌生長(zhǎng)（除肉毒桿菌E型尚能在型尚能在3.3生長(zhǎng)和產(chǎn)生毒素外）。生長(zhǎng)和產(chǎn)生毒素外）。 冷藏溫度可用于儲(chǔ)存果蔬、魚(yú)肉、禽蛋、乳類等食品。冷藏溫度可用于儲(chǔ)存果蔬、魚(yú)肉、

42、禽蛋、乳類等食品。 凍藏溫度：指低于凍藏溫度：指低于0以下的溫度。在以下的溫度。在18以下的溫以下的溫 度幾乎阻止所有微生物的生長(zhǎng)。度幾乎阻止所有微生物的生長(zhǎng)。 微生物對(duì)熱的忍受力依菌的種類、菌齡而異。微生物對(duì)熱的忍受力依菌的種類、菌齡而異。 微生物的營(yíng)養(yǎng)體、霉菌的孢子、細(xì)菌的芽孢等。微生物的營(yíng)養(yǎng)體、霉菌的孢子、細(xì)菌的芽孢等。 微生物對(duì)熱的忍受力還受微生物所處環(huán)境的其他條件的影響微生物對(duì)熱的忍受力還受微生物所處環(huán)境的其他條件的影響. 環(huán)境環(huán)境pH、滲透壓、培養(yǎng)基組成等的影響。、滲透壓、培養(yǎng)基組成等的影響。 如在酸性條件下，微生物對(duì)熱的耐受力明顯下降；如在酸性條件下，微生物對(duì)熱的耐受力明顯下降；

43、 環(huán)境中富含蛋白質(zhì)時(shí)，利于保護(hù)菌體，增加微生物細(xì)胞對(duì)環(huán)境中富含蛋白質(zhì)時(shí)，利于保護(hù)菌體，增加微生物細(xì)胞對(duì) 熱的抗性。熱的抗性。 pH = - - lg H+ 根據(jù)微生物生長(zhǎng)的根據(jù)微生物生長(zhǎng)的pH范圍，將其分以下幾類：范圍，將其分以下幾類： 只能生活在低只能生活在低pH（小于（小于4）條件下，在中性）條件下，在中性pH下即死亡的微下即死亡的微 生物（硫細(xì)菌屬，熱原菌屬等古生菌）生物（硫細(xì)菌屬，熱原菌屬等古生菌） 生長(zhǎng)最適生長(zhǎng)最適pH 5.58.0（大多數(shù)微生物以及病原菌等）（大多數(shù)微生物以及病原菌等） 專性生活在專性生活在pH1011的堿性條件下而不能生活在中性條件下的的堿性條件下而不能生活在中性

44、條件下的 微生物。微生物。(堿性鹽湖和碳酸鹽含量高的土壤中堿性鹽湖和碳酸鹽含量高的土壤中)。多數(shù)嗜堿菌為。多數(shù)嗜堿菌為 芽孢桿菌屬，少數(shù)屬于古生菌。芽孢桿菌屬，少數(shù)屬于古生菌。 黑曲霉：在黑曲霉：在pH2.02.5時(shí)，有利于合成檸檬酸，時(shí)，有利于合成檸檬酸， 在在pH2.56.5范圍內(nèi)，就以菌體生長(zhǎng)為主，范圍內(nèi)，就以菌體生長(zhǎng)為主， 在在pH7左右時(shí)，則大量合成草酸。左右時(shí)，則大量合成草酸。 丙酮丁醇梭菌：在丙酮丁醇梭菌：在pH5.57.0內(nèi)，以菌體生長(zhǎng)繁殖為主，內(nèi)，以菌體生長(zhǎng)繁殖為主， 在在pH4.35.3范圍內(nèi)進(jìn)行丙酮、丁醇發(fā)酵。范圍內(nèi)進(jìn)行丙酮、丁醇發(fā)酵。 微生物生長(zhǎng)環(huán)境微生物生長(zhǎng)環(huán)境pH調(diào)

45、節(jié)措施調(diào)節(jié)措施 加適當(dāng)?shù)醇舆m當(dāng)?shù)?（尿素、尿素、NaNO3、NH4OH或蛋白質(zhì)）或蛋白質(zhì)） 水活度（水活度（aw）可定量表示環(huán)境中微生物可實(shí)際利用的自由可定量表示環(huán)境中微生物可實(shí)際利用的自由 水水(游離水游離水)的含量的含量 w w w 各種微生物對(duì)干燥的抵抗力不同。各種微生物對(duì)干燥的抵抗力不同。 如：醋酸菌失水后很快會(huì)死亡；但酵母菌可保存數(shù)月；如：醋酸菌失水后很快會(huì)死亡；但酵母菌可保存數(shù)月； 產(chǎn)生莢膜的細(xì)菌的抗干燥能力較強(qiáng)；產(chǎn)生莢膜的細(xì)菌的抗干燥能力較強(qiáng)； 細(xì)胞小形、厚壁的細(xì)菌抗干燥能力較強(qiáng)。細(xì)胞小形、厚壁的細(xì)菌抗干燥能力較強(qiáng)。 細(xì)菌芽孢、放線菌孢子、酵母菌子囊孢子、霉菌孢子抗細(xì)菌芽孢、

46、放線菌孢子、酵母菌子囊孢子、霉菌孢子抗 干燥能力強(qiáng)，在干燥條件下可長(zhǎng)期不死，可用于菌種保藏。干燥能力強(qiáng)，在干燥條件下可長(zhǎng)期不死，可用于菌種保藏。 等滲環(huán)境：適宜生長(zhǎng)等滲環(huán)境：適宜生長(zhǎng) 低滲環(huán)境：吸水膨脹低滲環(huán)境：吸水膨脹 高滲環(huán)境：質(zhì)壁分離高滲環(huán)境：質(zhì)壁分離 低度嗜鹽菌：耐受低度嗜鹽菌：耐受3(0.20.5mol/L)左右左右NaCl的微生物；的微生物； 中度嗜鹽菌：耐受中度嗜鹽菌：耐受3%12%(0.52.5mol/L)NaCl的微生物；的微生物； 極端嗜鹽菌：能夠在極端嗜鹽菌：能夠在1230(2.55.2mol/L)NaCl中生長(zhǎng)的中生長(zhǎng)的 嗜鹽菌。嗜鹽菌。 耐鹽微生物：能在高鹽和低鹽環(huán)境

47、下均能正常生活的微生物。耐鹽微生物：能在高鹽和低鹽環(huán)境下均能正常生活的微生物。 O2 + e- O2 -. （超氧陰離子自由基）超氧陰離子自由基） O2-. + e- + H+ H2O2 （過(guò)氧化氫）過(guò)氧化氫） H2O2 + e- + H+ H2O + OH （羥基自由基）羥基自由基） 2 . 22 222 222 2 . 22 2 . 表面張力：液體表面的分子被它周圍和液體內(nèi)部的分子所表面張力：液體表面的分子被它周圍和液體內(nèi)部的分子所 吸引，在液體表面產(chǎn)生一種使液體表面積縮小的力。吸引，在液體表面產(chǎn)生一種使液體表面積縮小的力。 能改變?nèi)芤罕砻鎻埩Φ奈镔|(zhì)稱為表面活性劑。表面活性劑主要能改變?nèi)芤?/p>

48、表面張力的物質(zhì)稱為表面活性劑。表面活性劑主要 分為：陰離子型、陽(yáng)離子型和中性型（非離子型）三類。分為：陰離子型、陽(yáng)離子型和中性型（非離子型）三類。 陰離子型陰離子型: 包括高級(jí)脂肪酸的鈉鹽和鉀鹽、肥皂和磺酸鹽等。包括高級(jí)脂肪酸的鈉鹽和鉀鹽、肥皂和磺酸鹽等。 （抑制（抑制G+、影響細(xì)胞膜合成及肥皂的除菌作用）、影響細(xì)胞膜合成及肥皂的除菌作用） 陽(yáng)離子型陽(yáng)離子型: 由季胺化合物組成，能吸附在微生物細(xì)胞膜表面，由季胺化合物組成，能吸附在微生物細(xì)胞膜表面， 損傷細(xì)胞膜。（新潔爾滅）損傷細(xì)胞膜。（新潔爾滅） 中性型：在水中不電離，主要作為乳化劑用。中性型：在水中不電離，主要作為乳化劑用。 培養(yǎng)基液面菌膜

49、的形成和表面張力關(guān)系密切。培養(yǎng)基液面菌膜的形成和表面張力關(guān)系密切。 能量借助于波動(dòng)傳播的輻射稱為電磁輻射。與微生物生命能量借助于波動(dòng)傳播的輻射稱為電磁輻射。與微生物生命 活動(dòng)有關(guān)的主要有可見(jiàn)光及紫外線活動(dòng)有關(guān)的主要有可見(jiàn)光及紫外線 借助于原子及亞原子粒子的高速運(yùn)動(dòng)傳遞的輻射稱為微粒借助于原子及亞原子粒子的高速運(yùn)動(dòng)傳遞的輻射稱為微粒 輻射。與微生物有關(guān)的主要有輻射。與微生物有關(guān)的主要有X射線和射線和射線；該兩種射線均能射線；該兩種射線均能 使被作用物質(zhì)發(fā)生電離，故又稱電離輻射。使被作用物質(zhì)發(fā)生電離，故又稱電離輻射。 1、可見(jiàn)光：光能營(yíng)養(yǎng)微生物的能源。但是對(duì)于大多數(shù)化能營(yíng)、可見(jiàn)光：光能營(yíng)養(yǎng)微生物的

50、能源。但是對(duì)于大多數(shù)化能營(yíng) 養(yǎng)微生物可見(jiàn)光連續(xù)長(zhǎng)時(shí)間照射，可使微生物致死。養(yǎng)微生物可見(jiàn)光連續(xù)長(zhǎng)時(shí)間照射，可使微生物致死。 2、紫外線：波長(zhǎng)在、紫外線：波長(zhǎng)在139390nm的電磁輻射波，的電磁輻射波，265266nm的的 紫外線對(duì)微生物的作用最強(qiáng)，主要作用于核酸引起紫外線對(duì)微生物的作用最強(qiáng)，主要作用于核酸引起T=T形形 成。此外，紫外線還能使空氣中的氧變?yōu)槌粞?，臭氧分解成。此外，紫外線還能使空氣中的氧變?yōu)槌粞酰粞醴纸?放出的強(qiáng)氧化劑新生態(tài)氧放出的強(qiáng)氧化劑新生態(tài)氧O，也有殺菌作用。，也有殺菌作用。 3、電離輻射：、電離輻射：X射線與射線與射線、射線、射線和射線和射線均為電離輻射。射線均為電離輻

51、射。 能從分子中逐出電子而使之電離。因此，電離輻射的殺菌能從分子中逐出電子而使之電離。因此，電離輻射的殺菌 作用是間接地通過(guò)射線激發(fā)環(huán)境和細(xì)胞中的水分子，使水作用是間接地通過(guò)射線激發(fā)環(huán)境和細(xì)胞中的水分子，使水 分子在吸收能量后被電離產(chǎn)生自由基而起作用。分子在吸收能量后被電離產(chǎn)生自由基而起作用。 微生物種類、不同生理狀態(tài)的微生物以及處于不同環(huán)境微生物種類、不同生理狀態(tài)的微生物以及處于不同環(huán)境 的微生物細(xì)胞對(duì)電離輻射的敏感性也不同。的微生物細(xì)胞對(duì)電離輻射的敏感性也不同。 某些能生活在大洋底部的微生物不能在常壓下生某些能生活在大洋底部的微生物不能在常壓下生 長(zhǎng)，這種菌叫做嗜壓菌。人工培養(yǎng)只能在高壓的

52、特殊長(zhǎng)，這種菌叫做嗜壓菌。人工培養(yǎng)只能在高壓的特殊 容器里進(jìn)行。容器里進(jìn)行。 在食品發(fā)酵工業(yè)中，隨著發(fā)酵設(shè)備的大型化，處在食品發(fā)酵工業(yè)中，隨著發(fā)酵設(shè)備的大型化，處 于發(fā)酵設(shè)備底部的微生物的生長(zhǎng)代謝，也會(huì)受到液體于發(fā)酵設(shè)備底部的微生物的生長(zhǎng)代謝，也會(huì)受到液體 靜壓力的影響，曾有工廠發(fā)現(xiàn)靜壓力的影響，曾有工廠發(fā)現(xiàn)200m3發(fā)酵罐（高發(fā)酵罐（高18m） 底部的酵母在酒精發(fā)酵中形態(tài)發(fā)生了變化。底部的酵母在酒精發(fā)酵中形態(tài)發(fā)生了變化。 超聲波（頻率在超聲波（頻率在20,000赫茲以上）具有強(qiáng)烈的生物赫茲以上）具有強(qiáng)烈的生物 學(xué)作用。學(xué)作用。 超聲波的作用是使細(xì)胞破裂，所以幾乎所有的微生超聲波的作用是使細(xì)胞

53、破裂，所以幾乎所有的微生 物都能受其破壞，其效果與頻率、處理時(shí)間、微生物種物都能受其破壞，其效果與頻率、處理時(shí)間、微生物種 類、細(xì)胞大小、性狀及數(shù)量等均有關(guān)系。類、細(xì)胞大小、性狀及數(shù)量等均有關(guān)系。 高頻率比低頻率殺菌效果好；球菌較桿菌抗性強(qiáng)；高頻率比低頻率殺菌效果好；球菌較桿菌抗性強(qiáng)； 細(xì)菌芽孢具更強(qiáng)的抗性，大多數(shù)情況下不受超聲波的影細(xì)菌芽孢具更強(qiáng)的抗性，大多數(shù)情況下不受超聲波的影 響；病毒也有較強(qiáng)的抗性。響；病毒也有較強(qiáng)的抗性。 應(yīng)用：超聲滅菌、超聲細(xì)胞破碎儀應(yīng)用：超聲滅菌、超聲細(xì)胞破碎儀 氧。谷氨酸產(chǎn)生菌是好氧菌，通風(fēng)和攪拌不僅會(huì)影響菌種對(duì) 氮源和碳源的利用率，而且會(huì)影響發(fā)酵周期和谷氨酸的

54、合成 量。尤其是在發(fā)酵后期，加大通氣量有利于谷氨酸的合成 溫度。菌種生長(zhǎng)的最適溫度為3032 。當(dāng)菌體生長(zhǎng)到穩(wěn)定 期，適當(dāng)提高溫度有利于產(chǎn)酸，因此，在發(fā)酵后期，可將溫 度提高到3437 。 pH。谷氨酸產(chǎn)生菌發(fā)酵的最適pH在7.08.0。但在發(fā)酵過(guò)程 中，隨著營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用，代謝產(chǎn)物的積累，培養(yǎng)液的pH會(huì) 不斷變化。如隨著氮源的利用，放出氨，pH會(huì)上升；當(dāng)糖被 利用生成有機(jī)酸時(shí)，pH會(huì)下降。 磷酸鹽。它是谷氨酸發(fā)酵過(guò)程中必需的，但濃度不能過(guò)高， 否則會(huì)轉(zhuǎn)向纈氨酸發(fā)酵。發(fā)酵結(jié)束后，常用離子交換樹(shù)脂法 等進(jìn)行提取。 控制微生物的生長(zhǎng)速率或消滅不需要微生物的幾種措施控制微生物的生長(zhǎng)速率或消滅不需要微

55、生物的幾種措施 理化因素對(duì)微生物作用的方式理化因素對(duì)微生物作用的方式 影響理化因子作用效果的因素：理化因子的強(qiáng)度或濃度、影響理化因子作用效果的因素：理化因子的強(qiáng)度或濃度、 作用時(shí)間長(zhǎng)短、作用時(shí)間長(zhǎng)短、 微生物種類、微生物種類、 微生物生理狀態(tài)等。微生物生理狀態(tài)等。 理化因素控制微生物生長(zhǎng)繁殖的方式包括殺菌、溶菌、抑菌。理化因素控制微生物生長(zhǎng)繁殖的方式包括殺菌、溶菌、抑菌。 OD值值 活菌計(jì)數(shù)活菌計(jì)數(shù) 常用的物理因素：加熱法、過(guò)濾法和輻射法常用的物理因素：加熱法、過(guò)濾法和輻射法 當(dāng)溫度超過(guò)微生當(dāng)溫度超過(guò)微生 物的最高生長(zhǎng)溫物的最高生長(zhǎng)溫 度時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)度時(shí)，就會(huì)出現(xiàn) 致死效應(yīng)。高溫致死效應(yīng)。高溫

56、 可引起蛋白質(zhì)、可引起蛋白質(zhì)、 核酸和脂肪等重核酸和脂肪等重 要生物大分子降要生物大分子降 解或改變其空間解或改變其空間 結(jié)構(gòu)等，從而使結(jié)構(gòu)等，從而使 其功能喪失。其功能喪失。 不同微生物的耐熱性有所差別，在食品工業(yè)中，衡量滅菌不同微生物的耐熱性有所差別，在食品工業(yè)中，衡量滅菌 效果常用效果常用D值、值、Z值、熱致死時(shí)間等指標(biāo)。值、熱致死時(shí)間等指標(biāo)。 （1）十倍減少時(shí)間（）十倍減少時(shí)間（decimal reduction time，D值）值） 溫度愈高，十倍致死時(shí)間愈短溫度愈高，十倍致死時(shí)間愈短 溫度處理與存活率的關(guān)系溫度處理與存活率的關(guān)系 圖中顯示兩種微生物與滅菌溫度的關(guān)系圖中顯示兩種微生物

57、與滅菌溫度的關(guān)系 上面的直線代表了一種耐熱性的微生物。上面的直線代表了一種耐熱性的微生物。 （2）Z值值 （3）熱致死時(shí)間（）熱致死時(shí)間（thermal death time） （4）熱致死溫度（）熱致死溫度（ thermal death point） 在一定時(shí)間內(nèi)（一般為在一定時(shí)間內(nèi)（一般為10分鐘）殺死液體中所有微生分鐘）殺死液體中所有微生 物所需的最低溫度。物所需的最低溫度。 當(dāng)微生物的濃度一致時(shí)，可通過(guò)比較熱致死時(shí)間的長(zhǎng)短當(dāng)微生物的濃度一致時(shí)，可通過(guò)比較熱致死時(shí)間的長(zhǎng)短 或熱致死溫度的高低來(lái)衡量不同微生物的熱敏感性?；驘嶂滤罍囟鹊母叩蛠?lái)衡量不同微生物的熱敏感性。 啤酒酵母（啤酒酵母（5

58、2）和野生酵母（）和野生酵母（54-56）的熱致死溫的熱致死溫 度不同，可用來(lái)判斷發(fā)酵過(guò)程是否污染雜菌。度不同，可用來(lái)判斷發(fā)酵過(guò)程是否污染雜菌。 （1）干熱滅菌（）干熱滅菌（dry heat sterilization） (2）濕熱滅菌（）濕熱滅菌（moist heat sterilzation） 利用熱蒸汽滅菌的方法。在相同溫度下，比干熱滅菌更有效。利用熱蒸汽滅菌的方法。在相同溫度下，比干熱滅菌更有效。 原原 因因 濕熱滅菌的條件：濕熱滅菌的條件： 常用的濕熱滅菌方法：常用的濕熱滅菌方法： 適用于牛奶、啤酒、果酒和飲料等液態(tài)食品適用于牛奶、啤酒、果酒和飲料等液態(tài)食品 1）常壓法）常壓法 用較

59、低的溫度處理不宜進(jìn)行高溫滅菌的液態(tài)風(fēng)味食品用較低的溫度處理不宜進(jìn)行高溫滅菌的液態(tài)風(fēng)味食品 或調(diào)料，以殺滅其中的無(wú)芽孢病原菌，又不影響其原有風(fēng)或調(diào)料，以殺滅其中的無(wú)芽孢病原菌，又不影響其原有風(fēng) 味的消毒方法。味的消毒方法。 分段滅菌法，適用于不耐熱培養(yǎng)基（如含硫培養(yǎng)基）。分段滅菌法，適用于不耐熱培養(yǎng)基（如含硫培養(yǎng)基）。 80100 下蒸煮下蒸煮1560min，然后在然后在37 下保溫過(guò)夜，下保溫過(guò)夜， 如此重復(fù)如此重復(fù)23次。次。 采用在采用在100下煮沸數(shù)分鐘的方法，可殺死細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)下煮沸數(shù)分鐘的方法，可殺死細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng) 細(xì)胞和部分芽孢，一般用于飲用水的消毒。細(xì)胞和部分芽孢，一般用于飲用水的消毒

60、。 2）加壓法）加壓法 利用提高壓力使水的沸點(diǎn)升高，以提高水蒸氣的溫度，利用提高壓力使水的沸點(diǎn)升高，以提高水蒸氣的溫度， 從而有效地殺滅微生物。從而有效地殺滅微生物。 0.1MPa（121） 1530min 適用于各種耐熱耐濕物品適用于各種耐熱耐濕物品 的滅菌，如一般培養(yǎng)基、的滅菌，如一般培養(yǎng)基、 生理鹽水等各種溶液、工生理鹽水等各種溶液、工 作服及實(shí)驗(yàn)器材等。作服及實(shí)驗(yàn)器材等。 用于大規(guī)模發(fā)酵工廠的大批量培養(yǎng)基的滅菌。讓培養(yǎng)用于大規(guī)模發(fā)酵工廠的大批量培養(yǎng)基的滅菌。讓培養(yǎng) 基在管道的流動(dòng)過(guò)程中快速升溫、維持和冷卻。一般加熱基在管道的流動(dòng)過(guò)程中快速升溫、維持和冷卻。一般加熱 至至135140下維