離體小腸平滑肌的生理特性

1、JU一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)離體小腸平滑肌灌流的實(shí)驗(yàn)方法；2、證明小腸平滑肌具有自動(dòng)節(jié)律性和緊張性活動(dòng)，觀察若干刺激對(duì)離體小腸運(yùn)動(dòng)的影響。二實(shí)驗(yàn)原理動(dòng)物的胃腸道由平滑肌組成，胃腸道平滑肌除具有肌肉的共性，如興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性之外，尚有自己的特性，主要表現(xiàn)為緊張性和自動(dòng)節(jié)律性收縮，可以形成多種形式的運(yùn)動(dòng)，主要有緊張性收縮， 蠕動(dòng)。此外，胃還有明顯的容受性舒張，小腸還有分節(jié)運(yùn)動(dòng)及擺動(dòng)。如果將動(dòng)物的小腸平滑肌離體，放置在各種化學(xué)成分、滲透壓、pH、溫度以及氣體供應(yīng)等因子十分接近機(jī)體的內(nèi)環(huán)境的溶液中時(shí)，可保持離體小腸段長(zhǎng)時(shí)間地存活下來，并可以觀察到小腸平滑肌的自動(dòng)節(jié)律性、緊張收縮性、伸展性和對(duì)機(jī)械牽拉、溫

2、度刺激、化學(xué)刺激十分敏感，而對(duì)電刺激和切割刺激不敏感等一系列特性。通常用臺(tái)式液做灌流液，將小腸的一端固定，另一端連張力換能器，即可通過一定的記錄裝置記錄下小腸肌的收縮曲線。三使用儀器、材料1 儀器：細(xì)線，注射器，恒溫平滑肌槽，計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)，張力換能器，萬 能支架，螺旋夾，雙凹夾，溫度計(jì)，橡膠管，制氧機(jī)等。2、材料：臺(tái)氏液，1:5000腎上腺素，1 : 10000乙酰膽堿，1%CaCl2溶液，1mol/LHCI溶液， 1mol/LNaOH溶液，阿托品等。四.實(shí)驗(yàn)步驟1、 開啟恒溫平滑肌槽電源，使其恒溫工作點(diǎn)定在37攝氏度。2、猝死兔子，剪取2-3cm長(zhǎng)的十二指腸，用臺(tái)氏液漂洗，置于

3、低溫臺(tái)氏液中備用。3、連接各種儀器，將小腸的兩端分別與標(biāo)本固定鉤和張力換能器連接，讓制氧機(jī)正常為臺(tái)氏液供氧，進(jìn)入計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)。4、先后觀察、記錄 37攝氏度臺(tái)氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線，待中央標(biāo)本槽內(nèi)的臺(tái)氏液溫度穩(wěn)定在37攝氏度后，停氧1min，記錄腸段節(jié)律性收縮曲線，恢復(fù)供氧，待臺(tái)氏液中的小腸穩(wěn)定后，分別換成22 C, 45 C的臺(tái)氏液，記錄腸段節(jié)律性收縮曲線。再灌流37 C臺(tái)氏液待腸段活動(dòng)恢復(fù)后，依次滴加1moI/LNaOH溶液，1moI/LHCI溶液，1%CaCl2溶液1: 5000腎上腺素，1: 10000乙酰膽堿，阿托品觀察腸段收縮曲線的改變。每次實(shí)驗(yàn) 在觀察到明顯變化

4、后，都應(yīng)用預(yù)先準(zhǔn)備好的37 C臺(tái)氏液沖洗3次。五實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析(1) 缺氧對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響17次/min,收縮張力最小值為從圖一可以看出，正常情況下，離體家兔腸段收縮頻率為26.8g,最大值為35g。對(duì)浴槽內(nèi)的離體小腸停氧的瞬間可以看到基線明顯上移接著又下降回 原來狀態(tài)，其節(jié)律為16次/min,收縮張力最小值為23.7g，最大值為34.6g。圖一缺氧對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響(_12.5s/Div )單位s分析：在缺氧情況下，家兔離體腸段收縮頻率和強(qiáng)度都略有下降，但在缺氧瞬間上移的基線是小腸對(duì)生理需要的適應(yīng)，故收縮有所加強(qiáng)但時(shí)間很短。從實(shí)驗(yàn)得到的數(shù)據(jù)可以說明， 氧氣也是影響小腸活動(dòng)的因素，缺氧時(shí)

5、對(duì)小腸收縮活動(dòng)有抑制作用。(2) 低溫對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響離體小腸在適宜的溫度下，其節(jié)律為17次/min，小腸收縮張力最小為16g,最大張力為35.4g。用25C的臺(tái)氏液代替 37C的臺(tái)氏液后，可以看到基線先上移后下降，但下降后 的基線仍較原來基線水平高，此時(shí)其節(jié)律變?yōu)?2次/min,小腸收縮張力最小為18g,最大為37.3g。i 張力：gbU i正當(dāng)II 25穏氏摩o圖二低溫對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響(12.5s/Div )單位：s分析：換為25C臺(tái)氏液后，由于代謝水平的降低，興奮性減弱，頻率變慢，由17/min變?yōu)?2/m in,收縮幅度變小。小腸平滑肌收縮活動(dòng)明顯受抑制，原因是小腸活動(dòng)對(duì)溫度變

6、化刺激敏感，溫度降低抑制小腸收縮活動(dòng)。(3) 高溫對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響如圖三所示，離體腸段在適宜的溫度 37C下，正常節(jié)律為16次/min,灌流45C的臺(tái)氏 液后，小腸節(jié)律性收縮曲線基線先上移后下降回原水平，其節(jié)律增加為19次/min，幅度先增加再減小，后恢復(fù)到接近原來水平。張力：g3分析：當(dāng)臺(tái)氏液溫度為45 C時(shí)，腸段中酶活性提高，離子通道活性增強(qiáng)，使得基線上移,幅度增加。腸管平滑肌對(duì)溫度改變極為敏感，也反映出酶對(duì)溫度的敏感。(4) NaOH寸離體小腸活動(dòng)的影響如圖四所示，正常情況下，小腸平滑肌收縮的節(jié)律為16次/min，收縮張力最小為26.1g,最大為47.1g ,滴加入1滴1mol/mL

7、NaOH后，可以明顯的看到基線上移后恢復(fù)回原水平，其圖四NaOH對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響(12.5s/Div )s分析：在加入 NaOH溶液1滴后，可見小腸活動(dòng)加強(qiáng)，幅度增加，基線上移。加入NaOH后,此時(shí)溶液的pH比較適合酶的活性作用，有利于小腸各種酶發(fā)揮作用，使小腸活動(dòng)加強(qiáng)。如 果所加入的NaOH量過多，上述現(xiàn)象就不會(huì)出現(xiàn)，因?yàn)槊傅幕钚允艿狡茐摹?5) HCl對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響如下圖五所示，正常情況下小腸平滑肌收縮節(jié)律為17次/min,小腸收縮張力最小為21.6g，最大為44.5g。在恒溫浴槽中加入一滴1M HCl后，基線略有下降，節(jié)律減少為16次/min,小腸的收縮幅度減小，小腸收縮最小張

8、力為14.5g，最大為21.8g。s鹽酸后，H+濃度升高，跨膜電位改變，Ca2+離子通道活性受到抑制，使得Ca2+內(nèi)流減少。(6) CaCl對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響如圖六所示，正常情況下，小腸收縮節(jié)律為16次/min,小腸平滑肌收縮張力最小為25.2g,最大為35g,在恒溫浴槽中加入 2滴Cacl后，基線沒有明顯變化，收縮頻率為17次/min，其收縮張力最小為16.7，最大為30g。拿張力：g（正第ICaCl圖六CaCl對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響(12.5s/Div )UU-504030 201100單位：s分析：加入1徐化鈣溶液2滴后，離體腸管活動(dòng)節(jié)律增強(qiáng)，理論上，加入氯化鈣后，Ca2+濃度升高，而

9、Ca2+對(duì)小腸平滑肌的收縮和緊張都有促進(jìn)作用。但實(shí)驗(yàn)結(jié)果并非如此，原因 可能是加的Ca2+的量過少使Ca2+濃度變化很微弱，得不到實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(7) 腎上腺素對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響12.5s后接近于一條水平線，在大約75s后收縮曲線開始緩慢恢復(fù)到原水平。圖七腎上腺素對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響(12.5s/Div)單位：s從圖七可看出，正常情況下，離體腸段收縮節(jié)律為16次/min,平滑肌收縮最小張力為 33.5g,最大張力為46.8g,加入1:5000腎上腺素后，基線明顯下降，小腸節(jié)律性收縮曲線在9分析：加入1:5000腎上腺素2滴后，可見離體腸管活動(dòng)減弱，收縮頻率變慢，幅度減小以 及基線下移。因?yàn)槟I上腺

10、素主要終止于壁內(nèi)神經(jīng)叢中的膽堿能神經(jīng)元抑制其釋放乙酰膽 堿，引起消化道 運(yùn)動(dòng)減弱，腺體分泌抑制和血流量減少(8) Ach對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響從圖八可看出，離體腸段在適宜的溫度37 C下，正常節(jié)律為17次/min，離體小腸收縮張力最小值為28g,最大值為32.8g。加入2滴1:10000Ach后，基線上移，收縮的節(jié)律仍為分析:加入1:10000乙酰膽堿2滴(約0.2ml )后，離體腸管活動(dòng)增強(qiáng)，曲線幅度增加。出 現(xiàn)上述現(xiàn)象，其原因是腸道內(nèi)神經(jīng)元副交感節(jié)后纖維主要乙酰膽堿能纖維，興奮時(shí)末梢釋放乙酰膽堿，能夠增加消化道運(yùn)動(dòng)和腺體分泌，使平滑肌收縮，肌張力增加。但實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示加入乙酰膽堿后，其收縮頻率

11、沒有改變，其原因可能與加入乙酰膽堿的量及濃度有關(guān)。(9) 阿托品對(duì)離體小腸活動(dòng)的影響可從圖九看出，在乙酰膽堿之后滴加入阿托品，離體腸段收縮曲線的基線明顯下降，且收縮頻率減小由17次/min變?yōu)?6次/min，收縮強(qiáng)度明顯減小， 說明阿托品對(duì)離體小腸活動(dòng) 有抑制作用。分析：阿托品可阻斷乙酰膽堿對(duì)消化器官的興奮作用。阿托品(Atro)是M受體阻斷藥，為競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑，聯(lián)合用藥可阻斷M受體，對(duì)抗乙酰膽堿的M樣作用-抑制小腸平滑肌運(yùn)動(dòng)，使腸管收縮幅度降低。（10 ）實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)匯總表項(xiàng)目節(jié)律變化振幅變化基線變化停氧1min降低降低先上移后下降回原來狀態(tài)22 C臺(tái)氏液明顯降低略有升高先上移后下降45 C臺(tái)氏液明顯升高先升冋冉降低先上移后下降回原水平1M NaOH無明顯變化明顯增大先上移后恢復(fù)回原水 平1M HCl略有下降降低略有下降1%CaCI略有上升降低無明顯變化1:5000腎上腺素明顯降低明顯降低明顯下降1:10000乙酰膽堿無明顯變化明顯增大明顯上移Ach+阿托品降低明顯降低明顯下降1. 注意事項(xiàng)：1）每做一個(gè)離子或試劑對(duì)腸道的影響實(shí)驗(yàn)時(shí)，都要更換臺(tái)氏液，并清洗干凈保持腸道活性正常。2）所加的試劑的量不要過大，防止腸道受到不可恢復(fù)的破壞。3）做各種因數(shù)對(duì)腸道的影響時(shí)，都要做對(duì)照組。2. 為什么加入