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文檔簡介
1、一、填空題1、植物組織培養(yǎng)成功與否,一方面取決于 培養(yǎng)材料本身 的性質(zhì);另一方面取決于培養(yǎng)基的 種類 和 成分 。2. 一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)?分生狀態(tài),并形成 _細(xì)胞團(tuán)的現(xiàn)象稱為 脫分化。3 植物組織培養(yǎng)技術(shù)的三大難題分別為 褐變 、 污染 和 玻璃化 。4 具有防止褐變作用的維生素是 維生素 C。5 病毒在植物體內(nèi)的運(yùn)轉(zhuǎn)方式有 短距離運(yùn)轉(zhuǎn) 和 長距離運(yùn)轉(zhuǎn) 兩種,前者經(jīng)過 胞間連絲 向鄰近細(xì)胞中擴(kuò)散,速度很慢。后者通過寄主植物 韌皮部的疏導(dǎo)組織 隨著營養(yǎng)輸送進(jìn)行轉(zhuǎn)移,速度很 快。6、6-BA / NAA的高低決定了外植體的發(fā)育方向, 比值低時(shí)促進(jìn) 根的生長,這時(shí)_分化占主導(dǎo)地位;比值
2、高促進(jìn) _苗_的生長,這時(shí) _分裂 _占主導(dǎo)地位; 懸浮培養(yǎng)的材料必須達(dá)到 懸浮培養(yǎng) 物質(zhì)分散性多 、細(xì)胞核較小均一性好 和 生長迅速 等三個(gè)要求。7、連續(xù)培養(yǎng)是指在培養(yǎng)過程中,以不斷抽取用過的培養(yǎng)基 并注入 新鮮的培養(yǎng)基 ,使培養(yǎng)不斷得到養(yǎng)分補(bǔ)充,保持其 穩(wěn)定狀態(tài) 的培養(yǎng)。8培養(yǎng)基的母液一般是配成 大量元素,微量元素,維生素 和氨基酸 類存放備用。培養(yǎng)基 中組成大量元素的鹽類分別是 硝酸鉀和 硝酸銨。9一般情況下,細(xì)胞分裂 / 生長素的比值高,有利于愈傷組織長 芽,比值低有利于長 根 。10在植物的材料滅菌中,酒精的濃度用 70%75%,處理時(shí)間一般在幾秒至幾十秒范圍,是靠 _使蛋白質(zhì) 凝固
3、 _殺菌的;升汞的濃度一般用 1%2%,處理的時(shí)間在 510min范圍,升汞是靠 _Hg2+_殺菌的; 殺菌劑中的 次氯酸鈉是靠 _ClO-_殺菌的。11培養(yǎng)植物適宜的溫度大多在 252,光照強(qiáng)度在 1000lx ,光照時(shí)間在 16h。12、進(jìn)行熱處理植物脫毒的溫度在 _85 _左右。13、配制螯合態(tài)鐵鹽需要的成分是 _FeSO47H2O_和_Na2-EDTA_。14、培養(yǎng)基中有機(jī)態(tài) N素營養(yǎng)主要是 硝態(tài)氮 和 銨態(tài)氮 。15、原生質(zhì)體的融合可實(shí)現(xiàn) _體細(xì)胞_的雜交,其融合的方式分為 _自發(fā)融合 _和_誘導(dǎo)融合_兩類。16、從再生植株倍性來看,小孢子培養(yǎng)通常產(chǎn)生單倍體 植株,胚培養(yǎng)通常產(chǎn)生 二
4、倍體 植株, 胚乳培養(yǎng) 通常產(chǎn)生三倍體植株。17. 進(jìn)行植物組織培養(yǎng)最基本的前提條件是 配置培養(yǎng)基 。葉緣 或 葉脈 處容易發(fā)生愈傷組織18. 離體葉片在誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基上培養(yǎng),一般從19. 某些生長調(diào)節(jié)物質(zhì)及抗生素、酶類物質(zhì)遇熱不穩(wěn)定,對其滅菌時(shí)不能進(jìn)行 高壓蒸汽滅菌,而要進(jìn)行 過濾方法除菌。20配制培養(yǎng)基時(shí),一般先配制母液,其目的在于 _使用方便_和_用量準(zhǔn)確 _。21 分生區(qū)域內(nèi)無維管束,病毒只能通過 _胞間連絲 _傳遞。22 在無毒苗的組織培養(yǎng)中,外植體的大小與其成活率成 _正比_,而與脫毒效果成 _反比_。二、單項(xiàng)選擇題1、( C ) 可作為植物外植體的表面消毒劑是 。A. 漂白
5、粉和水 B. 次氯酸鈉溶液和聚乙二醇 C. 氯化汞和新潔爾滅 D. 酒精和氯化鈉2、( B )大多數(shù)植物組織培養(yǎng)最適溫度一般為。A. 37 1 B.26 2 C.162D.423、( A ) 在適宜的培養(yǎng)條件下,還可使愈傷組織長期傳代生存下去,這種培養(yǎng)稱為 。A . 繼代培養(yǎng) B. 再分化培養(yǎng) C. 胚狀體培養(yǎng) D. 馴化4、( B ) 大多數(shù)植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基最適 pH為。A. 5.0-7.0 B. 5.0-6.0 C. 3.0-4.0 D. 7.0-8.05、( A )外植體褐變的原因是 。A. 外植體中的多酚氧化酶被激活,使細(xì)胞的代謝發(fā)生變化。B. 外植體中的琥珀酸脫氫酶被激活,使細(xì)胞的
6、代謝發(fā)生變化。C. 外植體中的磷酸化酶被激活,使細(xì)胞的代謝發(fā)生變化。D. 外植體中的三磷酸腺苷酶被激活,使細(xì)胞的代謝發(fā)生變化。6植物組培初代接種易污染的可能原因 BC。A 材料過嫩 B 材料過老 C 接種材料過大 D 每瓶接種數(shù)量太少7. 影響培養(yǎng)基凝固程度因素有 _AD。A瓊脂的質(zhì)量好壞 ;B 高壓滅菌的時(shí)間; C 高壓滅菌的溫度; D 培養(yǎng)基的 PH 8愈傷組織不分化、生長過旺、疏松,其原因有 CA 糖的濃度過高 B 培養(yǎng)基的滲透壓過低 C生長素和分裂素過高 D 生長素和分裂素過低9有一種植物經(jīng)初代培養(yǎng)得到株無菌苗,以后按每天繼代增殖一次,每次增殖倍數(shù)為倍,一 年后繁殖苗有 CA 3 41
7、0株 B 4 312株 C 310株 D 412株NAA(萘乙酸) 、 IBA(吲哚丁酸) 、IAA (吲哚乙酸 )、苯乙酸( PAA)、2, 4D ( 合成植物生長素 )都屬于生長素類,10. 下列不屬于生長素類的植物激素是 _AC。A BA; B NAA; C ZT; D 2.4 D611. 植物組織培養(yǎng)可用于: ABCD。_A 快速繁殖; B 脫除病毒; C 提高品質(zhì); D 育種; E 減少品種變異12、誘導(dǎo)試管苗分化叢芽,培養(yǎng)基的調(diào)整應(yīng) B。A 加大生長素的濃度 B加大分裂素的濃度 C 加活性炭 D 降低鹽的濃度。13. 下列不屬于 MS中微量元素的鹽是 ABD。_A NH4NO3;B
8、 KNO3;C ZnSO4.7H2O; D MgSO4.7H2O14. 對生根培養(yǎng)不起作用的激素是: _A_。A GA; B IAA ; C NAA; D IBA15、( D ) 在下列選項(xiàng)中,不需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是 d 。 A、利用基因工程培育抗棉鈴蟲的棉花植株B、利用細(xì)胞工程技術(shù)培養(yǎng)“番茄一馬鈴薯”雜種植株C、利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株D、利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗,得到染色體數(shù)目加倍的植株16、( C )植物組織培養(yǎng)形成的愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng), 又可以分化形成根、芽等器官,這一過程稱 為。A 、脫分化 B、去分化 C、再分化 D 、脫分化或去分化17、( B )下列哪種不是
9、原生質(zhì)體分離所用的酶 _B。A 、纖維素酶 B、淀粉酶 C、果膠酶 D、半纖維素酶18、( A ) 在花藥培養(yǎng)中下列哪種不是花粉的發(fā)育過程 _A。A 、營養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育途徑 B、生殖細(xì)胞發(fā)育途徑C 、胚狀體發(fā)育途徑 D、花粉均等分裂途徑19、( D ) 下列哪種在 MS培養(yǎng)基中不起促進(jìn)生長作用 _D。A 、氨基酸 B、肌醇 C、維生素 D、瓊脂20、( B )下列技術(shù)培育出的新個(gè)體中,遺傳物質(zhì)只來源于一個(gè)親本的是 。 細(xì)胞組織培養(yǎng) 細(xì)胞融合 扦插 誘導(dǎo)產(chǎn)生多倍體 雜交育種 轉(zhuǎn)基因工程A 、B、C、D、21、( a ) 下列那種不是無性繁殖的器官 。A、種子 B 、枝條 C 、塊莖 D 、塊根22、
10、( b ) 植物離體保存的主要步驟是 。離體培養(yǎng)物的保存 離體培養(yǎng)與祛除病原物 種質(zhì)離體收集 遺傳穩(wěn)定性鑒定A、B、C、D、23、( c )原生質(zhì)體純化步驟大致有如下幾步 。將收集到的濾液離心,轉(zhuǎn)速以將原生質(zhì)體沉淀而碎片等仍懸浮在上清液中為準(zhǔn),一般以 500r min 離 心 15min。用吸管謹(jǐn)慎地吸去上清液。 將離心下來的原生質(zhì)體重新懸浮在洗液中 (除不含酶外,其他成分和酶液相同 ) ,再次離心,去上清液, 如此重復(fù)三次。 將原生質(zhì)體混合液經(jīng)篩孔大小為 40 100um的濾網(wǎng)過濾,以除去未消化的細(xì)胞團(tuán)塊和篩管、導(dǎo)管等雜 質(zhì),收集濾液。 用培養(yǎng)基清洗一次, 最后用培養(yǎng)基將原生質(zhì)調(diào)到一定密度進(jìn)
11、行培養(yǎng)。 一般原生質(zhì)體的培養(yǎng)密度為 104 106ml。A、 B 、 C 、 D 、24、( c ) 下列有關(guān)細(xì)胞全能性的含義,正確的是 。 A、每個(gè)生物體內(nèi)的所有細(xì)胞都具有相同的功能B、生物體內(nèi)的任何一個(gè)細(xì)胞可以完成該個(gè)體的全部功能C、生物體的每一個(gè)活細(xì)胞都具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能D、生物體的每個(gè)細(xì)胞都經(jīng)過產(chǎn)生、分裂、分化、生長、衰老、死亡的全過程25、(d ) 下列不屬于活性炭在組織培養(yǎng)中的作用是 。A、吸附有毒物質(zhì)B、減少褐變,防止玻璃化C、創(chuàng)造黑暗環(huán)境,增加培養(yǎng)基的通透性,利于根的生長D、增加培 養(yǎng)基 中的養(yǎng)分三、判斷題1、( )胚狀體的維管組織與母體結(jié)構(gòu)和外植體的維管組織一般沒有聯(lián)系
12、。2、( )培養(yǎng)基當(dāng)中生長素與細(xì)胞分裂素的比例高時(shí),僅形成愈傷組織。3、( )對植物器官或愈傷組織上分離出的單細(xì)胞(或小細(xì)胞團(tuán))進(jìn)行培養(yǎng),形成單細(xì)胞無性系或再 生植株的技術(shù)稱為植物組織培養(yǎng)技術(shù)。4、( )植物組織與細(xì)胞培養(yǎng)方法生產(chǎn)出藥品,農(nóng)藥,香料,色素及食品添加劑。5、( )超低溫保存是指在 -100 溫下使細(xì)胞代謝和生長處于基本停止的狀態(tài),在適宜的條件下可迅 速繁殖,生出新的植株,并保持原來的遺傳特性。6、( )FAD法可顯示細(xì)胞內(nèi)脫氫酶的活性,脫氫酶使 FAD還原生成一種紅色的物質(zhì),作為檢驗(yàn)活細(xì)胞的方法 。7、( )蔗糖可作為滲透性冰凍保護(hù)劑。8、( )一方親本的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)分另一方親
13、本的少量核物質(zhì)和全部細(xì)胞質(zhì)融合9、( )有些植物對病毒極為敏感,一旦感染病毒就會(huì)在其葉片乃至全株上表現(xiàn)特有的病斑,把這種 植物稱為病毒敏感植物或指示植物。10( )花藥和花粉培養(yǎng)可獲得單倍體植株。叫細(xì)胞質(zhì)雜交 。四、名詞解釋1、脫分化 有高度分化能力 的植物 組織或器官,產(chǎn)生愈傷組織 的過程。2、愈傷組織 植物各器官的 外植體 在離體的條件下,經(jīng)細(xì)胞 脫分化 (等一系列過程 改變了它們原有的 特性)而形成的一種能 迅速增殖 的不特定結(jié)構(gòu)和功能 的細(xì)胞團(tuán),稱為愈傷組織。3、人工種子 是指將植物離體培養(yǎng) 產(chǎn)生的體細(xì)胞胚包埋 在含有 營養(yǎng)成分和保護(hù)功能的物質(zhì)中 ,在適宜 的條件下 發(fā)芽出苗的顆粒體
14、。4、胚狀體 在離體或活體 條件下,通過體細(xì)胞經(jīng)原胚期、球形胚期、心形胚期、魚雷胚期和子葉期等階 段形成的胚叫體細(xì)胞胚狀體。5、植物快速繁殖 利用離體培養(yǎng)技術(shù) ,將來自 優(yōu)良植株的器官、組織和細(xì)胞 進(jìn)行離體培養(yǎng) ,在短期內(nèi) 獲得大量遺傳性一致 的個(gè)體的方法6、看護(hù)培養(yǎng) 把單個(gè)細(xì)胞 置于一塊 活躍生長的愈傷組織 (也稱看護(hù)愈傷組織, nursecalli )上培養(yǎng), 在愈傷組織和培養(yǎng)的細(xì)胞之間用 一片濾紙相隔 。這培養(yǎng)的單細(xì)胞長出微小的 細(xì)胞團(tuán)之后,再移至 瓊脂培養(yǎng)基 上。7、植物種質(zhì)保存 利用天然或人工創(chuàng)造的適宜環(huán)境, 使個(gè)體中所含有 的遺傳物質(zhì)保持遺傳完整性 ,有 高 的活力 ,能通過繁殖將
15、其遺傳特性傳遞下去。8、連續(xù)培養(yǎng) 是利用特別的培養(yǎng)容器 進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng) 的一種方式。連續(xù)培養(yǎng)過程中,不斷 注入新鮮 培養(yǎng)基,排掉 等體積的用過的培養(yǎng)基 ,培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)得到不斷補(bǔ)充。9、馴化或煉苗 : 在移植之前必須對試管苗進(jìn)行提高其適應(yīng)能力的鍛煉,使植株生長粗壯,增強(qiáng)小苗體質(zhì) 以提高移苗成活率。同時(shí)進(jìn)一步將瓶內(nèi)植物打開進(jìn)行煉苗。使試管苗慢慢適應(yīng)外界環(huán)境。這個(gè)過程叫做馴化 或煉苗。有瓶煉和盤煉,移栽方式有容器移栽和大田移栽。簡答題(一)、某培養(yǎng)基的配方是 MSBA 1.5 mg/L NAA2.5 mg/LIBA 1.0 mg/L+ 2.5% 蔗糖 0.7 瓊脂粉。 MS母液的濃度分別是
16、:大量元素 50倍,微量元素 100倍,鐵鹽 20倍,有機(jī)物 100倍;BA母液濃度 1.0 mg/ml , NAA母液濃度 0.5mg/ml ,IBA 母液濃度 0.2mg/ml 。要配制 800ml該培養(yǎng)基,需要吸取各種母液各多少 ml?分 別稱取蔗糖、瓊脂粉各多少克?(要求寫出計(jì)算步驟)大量元素 :800/50=16ml 微量元素 :800/100=8ml 鐵鹽 :800/20=40ml 有機(jī)物 :800/100=8mlBA=0.8*1.5/1=1.2ml NAA=0.8*2.5/0.5=4ml IBA=0.8*1/0.2=4ml 蔗糖=800*2.5%=20g 瓊脂粉 =800*0.7
17、%=5.6g Ms綠色書 23 頁表(二)、如何減輕試管苗玻璃化現(xiàn)象?如何防止外植體的真菌污染?1. (第四章 21 頁)(1)利用固體培養(yǎng)方法,增加瓊脂濃度,降低培養(yǎng)基中的滲透勢,造成細(xì)胞吸水阻 遏?;蛱岣吲囵B(yǎng)基中蔗糖含量或加入滲透劑,減少培養(yǎng)基中植物材料可獲得的水分,這也可以抑制玻璃化的 發(fā)生。( 2)適當(dāng)降低培養(yǎng)基中的細(xì)胞分裂素和赤霉素的濃度。或者,適當(dāng)增加培養(yǎng)基中Ca、Mg、Mn、K、P、Fe、Cu、Zn元素含量,降低 N和 CL元素比例,特別是降低胺態(tài)氮的濃度,提高硝態(tài)氮量。( 3)增加自然光照。 因?yàn)樽匀还庵械淖贤饩€能促進(jìn)試管苗成熟。 (4)改善培養(yǎng)器皿的氣體交換狀態(tài)封口膜 (5)
18、在培養(yǎng)基中添加其他物質(zhì)。如添加馬鈴薯汁可降低油菜的玻璃苗的產(chǎn)生頻率。2. (第三章 11頁) 在接種前要求無菌室內(nèi)做到用空氣循環(huán)過濾裝置使空氣過濾滅菌或通過紫外線照射滅菌外, 再利用超凈 工作臺(tái)接種前,應(yīng)開機(jī) 15min 以達(dá)到空氣的充分過濾滅菌。而且接種時(shí)嚴(yán)格操作,如在接種前去掉橡皮筋, 打開棉塞時(shí)動(dòng)作要輕及去掉瓶塞后瓶子應(yīng)拿成斜角,最好瓶口放在酒精火焰的前方等等。(三)、簡答出一般莖段是怎樣選材消毒和接種的?選材:較幼嫩的材料,器官的生理狀態(tài)和發(fā)肓年齡,外植體的大小為0.5 1.0cm(第三章 3頁)消毒:自來水較長時(shí)間沖洗 +70%酒精浸泡植物種 +無菌水沖洗 23次+2%10%NaC(lO0.1%HgCl2) 12min+無菌水沖洗 3次。(第三章 5頁)接種:左手拿三角瓶或果醬瓶,用右手輕輕取下封口膜或蓋子 將三角瓶或果醬瓶的口靠近酒精燈火焰,瓶口稍微傾斜,這樣瓶口外部在火焰上旋轉(zhuǎn)灼燒數(shù)
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