豚鼠肺炎鏈球菌病感染和發(fā)病觀察

1、鈺1)韋永芳2)張(1) 廣東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物監(jiān)測(cè)所, 廣州 510260; 2) 廣州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)摘 要 報(bào)導(dǎo)肺炎鏈球菌在 1 個(gè)豚鼠封閉群中的感染, 并從臨床、 病理剖檢、 病原及發(fā)病特征等進(jìn)行了較詳細(xì)的觀察。 發(fā)病豚鼠群在觀察期內(nèi)死亡 8616% , 死亡豚鼠中雌性豚鼠占4811% , 且死亡豚鼠表現(xiàn)明顯的頜下淋巴結(jié)腫大化膿, 占 3018% 。從病豚鼠的頜下淋巴結(jié)及 肺病灶中均檢出肺炎鏈球菌, 用該菌對(duì)小鼠和豚鼠進(jìn)行致病力試驗(yàn), 實(shí)現(xiàn)了急性感染, 受感 染動(dòng)物出現(xiàn)了與自然病例相似的臨床及病理特征, 從受感染動(dòng)物和自然發(fā)病豚鼠的肺組織 中分離的致病菌都符合肺炎鏈球菌的病原學(xué)特征。 還討

2、論了肺炎鏈球菌對(duì)豚鼠不顯性感染 的臨床表現(xiàn), 以及對(duì)豚鼠的肺炎鏈球菌感染的監(jiān)控問題。關(guān)鍵詞 肺炎鏈球菌, 豚鼠, 感染分類號(hào) r 378112肺炎鏈球菌 (s t rep tococcu s p n eum on ia e) 是一類革蘭氏陽(yáng)性球菌, 它為人畜共患致病, 是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和人的肺類及生殖道細(xì)菌感染的致病菌之一。健康人的帶菌率高, 通常菌1呈不顯性感染2 , 豚鼠、大鼠的敏感性高3 。本文報(bào)道了某單位一群感染肺類雙球菌的豚鼠(c a v ia p orce l lu s) ,其臨床癥狀表現(xiàn)為頜下淋巴結(jié)腫大、 妊娠母鼠流產(chǎn)、 出現(xiàn)死胎或畸胎, 并從病理剖檢及病原分離鑒定、 致病力試驗(yàn)方面進(jìn)

3、行了詳細(xì)觀察。流行情況某單位從 1994 年 10 月引進(jìn) 60 只種豚鼠, 其中 50 只母鼠, 10 只公鼠, 至 1995 年 8月淘汰和死亡的豚鼠共有 52 只, 占引進(jìn)豚鼠的 8616% 。 詳細(xì)情況見表 1。1表 1豚鼠發(fā)病和死亡情況每月母鼠死亡數(shù)頜下淋巴結(jié)明顯腫大妊娠和產(chǎn)后母鼠死亡總數(shù)項(xiàng)目2 月份4 月份7 月份豚鼠數(shù)量比例16252810165225522528521052從 上表可以看出豚鼠出現(xiàn)淋巴結(jié)腫大, 占死亡豚鼠的3 0 18 % , 母鼠死亡率較高, 占收稿日期: 1996211201病理剖檢對(duì) 4 只頜下淋巴結(jié)明顯腫大的病豚鼠和 6 只死亡母豚鼠進(jìn)行病理剖檢, 其中

4、 4 只病 豚鼠可見單側(cè)或兩側(cè)頜下淋巴結(jié)腫大, 以單側(cè)多見, 腫體直徑 10 40mm , 并形成結(jié)締組 織包膜, 與周圍組織分離, 切開包膜, 流出乳白色膿汁, 其他部位淋巴結(jié)未見異常, 病 豚鼠肺部灰白色, 質(zhì)地柔軟, 表面有出血斑; 而 6 只死亡的妊娠母豚鼠和產(chǎn)后母豚鼠中 有 3 只母豚鼠出現(xiàn)頜下淋巴結(jié)明顯腫大, 死亡母豚鼠肺部被膜緊張, 表面有出血點(diǎn), 并 附有纖維素性滲出物, 切面流出大量泡沫狀滲出液, 肺部出現(xiàn)肝樣病變, 還有 1 只妊娠 母豚鼠肝臟出現(xiàn)脂肪變性, 其他臟器未見明顯的病變。3切片鏡檢取 1 只病豚鼠的肺、 肝、 脾及腎進(jìn)行病理切片和鏡檢, 肺表現(xiàn)淤血水腫、 出血,

5、 出 現(xiàn)間質(zhì)性肺類, 脾輕度充血, 肝腎輕度水腫。5 細(xì)菌學(xué)診斷對(duì) 4 只病豚鼠的病灶組織進(jìn)行細(xì)菌學(xué)鑒定。(1) 涂片鏡檢: 病變組織 (頜下淋巴結(jié)、 肺組織) 直接涂片, 進(jìn)行革蘭氏染色和鏡 檢, 可見革蘭氏陽(yáng)性雙球菌, 成雙排列, 鈍頭相對(duì), 尖頭相背, 呈矛頭狀, 姬姆薩染色, 可見有莢膜的雙球菌。(2) 培養(yǎng)性狀: 將無(wú)菌采取的病變組織 (頜下淋巴結(jié)、 肺組織) 接種綿羊鮮血培養(yǎng) 基, 37培養(yǎng) 24 h , 可見細(xì)小、扁平、透明及有光澤的菌落, 菌落大小為 1 mm 左右, 中 心與邊緣隆起, 呈現(xiàn)二層環(huán)狀, 菌落周圍可見綠色溶血環(huán), 將細(xì)菌接種普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂, 未 見細(xì)菌生長(zhǎng), 接種

6、葡萄糖肉湯培養(yǎng)基, 培養(yǎng) 18 h , 肉湯變渾濁, 管底有少量沉淀, 培養(yǎng)36 h , 肉湯變清亮, 將所分離的培養(yǎng)物進(jìn)行革蘭氏染色和鏡檢, 仍可見成雙排列的革蘭氏 陽(yáng)性細(xì)菌。4(3) 生化反應(yīng):見表 2。表 2致病細(xì)菌的生化反應(yīng)項(xiàng)目觸酶葡萄糖蔗糖乳糖麥芽糖蕈糖木糖衛(wèi)矛醇 10% 去氧膽酸鈉o p to ch in反應(yīng)溶解敏感大于 5 mm-+-用上述鑒定過的肺類鏈球菌 24 h 葡萄糖肉湯培養(yǎng)液分別對(duì)普通級(jí) km 小鼠和豚鼠進(jìn)行致病力試驗(yàn)。第 1 組 km小鼠 4 只,18 20 g ,雌雄各半, 每只腹腔接種培養(yǎng)液 015ml , 對(duì)照 km 小鼠 2 只, 雌雄各半, 用生理鹽水代替培

7、養(yǎng)液; 第 2 組豚鼠 4 只, 250 g 左右, 雌雄各半, 每只接種培養(yǎng)液 110 ml , 對(duì)照豚鼠 2 只, 雌雄各半, 用生理鹽水代替培 養(yǎng)液。試驗(yàn)組 km 小鼠在接種 24 h 后出現(xiàn)死亡, 剖檢可見肺出血, 腹膜出血, 腹腔液增多,對(duì)照組表現(xiàn)正常, 將試驗(yàn)組 km 小鼠的腹腔液接種綿羊鮮血瓊脂培養(yǎng)基, 均能檢出與原 來(lái)相同的細(xì)菌。試驗(yàn)組豚鼠在接種 24 h 后全部死亡。死前豚鼠呼吸急促,剖檢時(shí), 可見肺出血, 腹腔出血, 腹腔液和胸腔液增多, 從心血及腹腔液中分離到與原來(lái)相同 的細(xì)菌, 對(duì)照組豚鼠表現(xiàn)正常。通過上述動(dòng)物致病力試驗(yàn), 斷定所分離的肺類鏈球菌對(duì)小鼠敏感,性死亡。 試

8、驗(yàn)組豚鼠的病變與自然發(fā)病豚鼠的病癥相似。引起小鼠 24 h 急結(jié)果與討論通過對(duì)病豚鼠病變組織的細(xì)菌學(xué)診斷以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn), 初步斷定該豚鼠群感染了嚴(yán)重 的肺類鏈球菌病, 并且該菌是導(dǎo)致豚鼠群致病死亡的原因。 在其它一些豚鼠肺炎鏈球菌 病中未見頜下淋巴結(jié)腫大的報(bào)道3, 4 , 本文報(bào)道的致病豚鼠群頜下淋巴結(jié)腫大占病死豚鼠 的 30% 以上, 這說明頜下淋巴腫大也是該病的臨床癥狀之一。至于在動(dòng)物試驗(yàn)中沒有觀 察到感染豚鼠出現(xiàn)淋巴結(jié)腫大, 這可能與我們的試驗(yàn)中接種部位、感染途徑、感染劑量、 感染致病時(shí)間太短 (急性感染) 有關(guān)。豚鼠對(duì)肺炎鏈球菌病的敏感性高, 肺炎鏈球菌能引起豚鼠出現(xiàn)肺炎、 心外膜炎、

9、胸 膜炎和敗血癥等病變, 一般呈不顯性感染, 但在氣溫突然變化、 墊料潮濕、 妊娠、 運(yùn)輸 和營(yíng)養(yǎng)障礙等因素的影響下, 將可能導(dǎo)致肺炎鏈球菌病的發(fā)生。 該實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心的這批豚鼠來(lái)源于外省區(qū), 原準(zhǔn)備引進(jìn)作為繁殖種群, 但在引種 2 個(gè)月后就開始出現(xiàn)頜下淋巴 結(jié)腫大和妊娠豚鼠流產(chǎn)或死亡等現(xiàn)象, 這可能是這批豚鼠在引進(jìn)之前就已感染肺炎鏈球 菌, 在運(yùn)輸過程中受到一些應(yīng)激, 并且又是在氣溫較高的季節(jié)配種, 這樣就造成豚鼠, 特 別是成年的懷孕母豚鼠發(fā)病率和死亡率增高, 也有可能是引進(jìn)后管理問題造成感染所致。 因此, 在引進(jìn)種鼠時(shí), 應(yīng)嚴(yán)格進(jìn)行檢疫, 減少外界的應(yīng)激, 避免在氣溫高的季節(jié)配種繁 殖,

10、同時(shí), 也要嚴(yán)格管理和加強(qiáng)監(jiān)測(cè), 防止大的感染?；疾‰嗍箢M下淋巴結(jié)有時(shí)出現(xiàn)自行化膿和潰爛, 排于外界環(huán)境中, 并感染其他健康 豚鼠, 造成整群感染, 因此, 如果發(fā)現(xiàn)豚鼠頜下淋巴結(jié)出現(xiàn)紅腫等癥狀, 應(yīng)及時(shí)淘汰, 必 要時(shí)可采用藥物治療或疫苗進(jìn)行免疫。71977. 174 17612b ux to n a , f ra se r g. d ip lococcu s p neum on iae, a n im a l m ic ro b io lo gy,l und e , h en r ich sen j. l abo ra to ry d iagno sis se ro lo gy and e

11、p idem io lo gy o f s t rep tococcu s p neum o2n iae. in: m e tho d s in m ic ro b io lo gy, 1978. 241 262sa ito m , m u to t , h a ruzo no s. a n ep izoo t ic o f p neum o co cca l infee t io n o ccu r red in inb red gu inea31983, 32: 29 37-p ig co lo b ie s. e xp a n im ,j g 福克斯 (蕭佩衡等譯). 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物醫(yī)學(xué), 豚鼠的生物學(xué)和疾病. 北京: 農(nóng)業(yè)出版社, 1991.200 218王永坤主編. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物監(jiān)測(cè), 肺炎雙球菌. 北京: 農(nóng)業(yè)出版社, 1992. 40 44r e 布坎南, n e 吉本斯, 等. 伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè) (第八版) , 肺炎鏈球菌. 北京: 科學(xué)出版社,1984. 688 689456in fec t io n an d d i