食品中霉菌和酵母分布檢測和鑒定

1、食品中霉菌和酵母分布、檢測和鑒定福建省疾病預(yù)防控制中心 馬群飛1. 霉菌和酵母的基本特性霉菌和酵母這種稱謂僅是為了方便起見，將小型真菌有真正菌絲的稱為霉菌，沒有 菌絲的稱酵母， 并沒有分類學(xué)上的依據(jù)。 相對(duì)于低等的細(xì)菌來說， 霉菌和酵母生長緩慢， 競爭能力較弱，故霉菌和酵母常在不利于細(xì)菌生長繁殖的環(huán)境中形成優(yōu)勢菌群。 由于霉 菌和酵母的細(xì)胞較大，新陳代謝能力強(qiáng)，故 10 10個(gè)酵母即可引起一克食物的變質(zhì)， 而細(xì)菌則需要 100 倍于此數(shù)的細(xì)胞。通常霉菌和酵母適合在高碳低氮有機(jī)物如植物性物質(zhì)上生存。適合的pH 38，有些霉菌可以在 pH2，酵母在 pH 1.5 時(shí)生活。水活度要求 0.99 0.

2、61 ，霉菌 0.85 時(shí)最適 宜，某些嗜滲酵母和霉菌常引起糖果類食品的變質(zhì)。 一般的霉菌的生長溫度為 2030， 部分霉菌可以在不低于 7的溫度下生長。酵母一般在 045時(shí)生長。耐熱能力較差， 酵母細(xì)胞 55 56幾分鐘就被殺死。少數(shù)霉菌的孢子（如絲衣霉）則可在90中耐受幾分鐘。霉菌和酵母很多可以耐受防腐劑。如乳酸、醋酸、 CO和 SO等。有些酵母酯酶 活性高并能合成 B 族維生素。2. 食品中酵母的常見類群 在食品中能分離出各種酵母菌，但它們很可能沒有什么意義，因?yàn)槠渲卸鄶?shù)來源于 外界的偶然污染。 僅有非常有限的幾個(gè)酵母屬可使經(jīng)過加工并正常生產(chǎn)工藝包裝的食品 腐敗。比如抗 SO熏蒸的酵母，

3、就是飲料、葡萄酒變質(zhì)的常見因素。耐受保鮮劑的畢赤 酵母，高度嗜氧，可以形成泡菜和醬油的表面膜。當(dāng)然，如果不按照標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)程序進(jìn)行食品生產(chǎn)，那么許多外界污染的酵母都將在 食品中大量繁殖， 這種情況下，就談不上優(yōu)勢菌群問題了， 也不必進(jìn)行酵母的分類鑒定。 處理方法只有一個(gè)，恢復(fù)正常的生產(chǎn)程序。2.1 乳制品：鮮奶易因細(xì)菌污染而腐敗，酵母菌不是重要問題。當(dāng)鮮奶被加工成奶油、 乳酪、酸奶等制品后，由于細(xì)菌被抑制，酵母可相應(yīng)地成為優(yōu)勢菌。它們使奶油、乳酪 產(chǎn)生怪味和氣體，使黃油產(chǎn)生有味物質(zhì)，并可使酸奶和酸乳酪腐敗。在實(shí)驗(yàn)室中，漢遜 德巴利酵母、布提利假絲酵母、多孢絲孢酵母和紅酵母均能導(dǎo)致固體和液體乳酪的

4、腐敗。2.2 肉類與肉制品： 通常情況下，這類制品適于細(xì)菌的生長， 酵母不是引起變質(zhì)的主要原 因。某些德巴利酵母可使冷凍的豬、牛肉香腸和午餐肉表面出現(xiàn)令人不愉快的粘滑感覺。2.3 水果和蔬菜：兩者的差別主要是 pH值。水果通常為酸性， pH值在 1.8 2.2 左右（味 濃的水果，檸檬等）到 pH 4.5 5.0 （西紅柿等）之間，對(duì)細(xì)菌有抵抗力。而蔬菜的 pH 值接近中性，對(duì)細(xì)菌侵入敏感。通常引起水果腐敗的原因是霉菌而非酵母，只有檸檬型 克拉克酵母可侵入破損的草莓。2.4 果醬、蜜餞、果汁和干果：這類食物的特點(diǎn)是水活度低。一些接合酵母能使加熱不 完全的果醬敗壞。 魯接合酵母和拜爾接合酵母可引

5、起包裝好的巧克力變質(zhì)。 即使僅沾上 幾個(gè)細(xì)胞，最終也將生長而產(chǎn)生大量氣體至將外包裝脹破。拜爾接合酵母同樣能使果汁 變質(zhì)，它能在水活度很低并含防腐劑的食品中生長。 無花果由于種子腔開口易被酵母菌 污染，有時(shí)嗜干酵母可導(dǎo)致無花果干的腐敗。2.5 葡萄酒：酒中 922的乙醇、 33.6 的 pH值和防腐劑（一般是 SO和山梨酸）能 抑制多種微生物生長。 二孢接合酵母和釀酒酵母卻能生長于 18的乙醇中， 而路德酵母 能抵抗 SO和山梨酸，它們使葡萄酒渾濁，生成沉淀和怪味物質(zhì)。2.6 啤酒：啤酒花（ Hops）和 2 6的乙醇、 CO及低 pH 值加上厭氧環(huán)境，營養(yǎng)成分 有限，能在其中生長的微生物量受到

6、限制。酵母屬可使之渾濁并產(chǎn)生丁二醇、酚類等異 味物質(zhì)。2.7 浸漬制品： 蔬菜和水果在浸漬時(shí)由于未能隔絕空氣造成膜生酵母及一些丁酸細(xì)菌生 長而引起變質(zhì)。正常情況下，這類食品中，酵母菌是優(yōu)勢菌群之一。2.8 無酒精飲料：常因酵母屬、畢赤酵母屬和球擬酵母屬等生長而腐敗。充碳酸氣的飲 料少見霉菌性變質(zhì)，有時(shí)可見酵母引起沉淀物產(chǎn)生。美國食品和管理局（FDA）要求此類食品每毫升酵母數(shù)少于 50 個(gè)，霉菌少于 100 個(gè)。2.9 糧食：在干燥情況下，酵母并非優(yōu)勢菌。國內(nèi)有報(bào)導(dǎo)紅酵母屬引起濕糯米粉制成的 元宵變色，失去固有粘性，但毒理學(xué)檢查未見異常。3食品中霉菌的類群 霉菌分布廣泛，但它與細(xì)菌主要的不同之一

7、便是通過空氣中的分生孢子傳播。蔬菜 是霉菌生長的良好基質(zhì)，霉菌還是水果、漿果、谷物、面包等變質(zhì)的主要原因。它還能 在不適于微生物生長的皮革、衣物上生長。比如枝孢霉常存在于土壤和植物中，對(duì)植物 無害，它也是空氣中常見真菌，容易導(dǎo)致衣物出現(xiàn)小小的黑斑。霉菌多為需氧菌， 主要生長于和空氣接觸的物體表面。 嗜冷霉菌可在 70生長， 如鐮刀菌、 青霉、枝孢霉。耐熱的絲衣霉常導(dǎo)致加工過的水果變質(zhì)。 許多霉菌特異性高， 僅在特殊的環(huán)境下存活。例如鐮刀菌在低溫能生長，常導(dǎo)致冷庫貯存的大蒜、大麥芽變 質(zhì)。青霉常在柑桔中常檢出，它能夠抵抗防腐劑，對(duì)于生產(chǎn)影響較大。3.1 谷類：霉菌很容易成為優(yōu)勢菌。田野霉對(duì)收獲后

8、的谷物霉變沒有多大意義。霉菌和 酵母數(shù)量是食品加工衛(wèi)生史的一種指標(biāo)。霉菌數(shù)高的糧食保存期相當(dāng)短。3.2 水果和蔬菜：水果臨近成熟時(shí) pH 值升高，表皮變軟，防御屏障薄弱，易為霉菌侵 染。青霉是柑桔類水果變質(zhì)的最常見原因，有時(shí)是白地霉或柑桔鏈孢霉。擴(kuò)展青霉甚至 可使冷藏的蘋果和梨腐爛。變質(zhì)時(shí)水果先變軟，表面有淡褐色斑點(diǎn)并迅速擴(kuò)展至全果。 即使將變質(zhì)的部分削去也不能除去擴(kuò)散的展青霉素。所以， 被擴(kuò)展青霉侵染過的薔薇科 水果制成的果醬和果汁中， 這種致癌致畸的毒素陽性檢出率非常之高。 在我國北方省份 生產(chǎn)的蘋果、山楂等水果的果醬和果汁中多次檢出展青霉素。 叢梗孢霉和黑根霉能使桃、 杏等核果腐爛。蔬菜

9、腐爛主要是由葡萄孢霉 （豌豆、洋蔥、西紅柿等）、曲霉（洋蔥等）、 鐮刀菌（洋蔥、大蒜、馬鈴薯等）和交鏈孢霉（番茄、瓜葉類蔬菜）造成的。根霉可引 起幾乎所有的水果和蔬菜的霉?fàn)€。 市售蔬菜的主要病害可由曲霉、 青霉、枝孢霉等造成。3.3 干燥食品：曬干的谷物常見有散囊菌。黃曲霉和寄生曲霉的檢出有重大意義。大量 青霉出現(xiàn)表明在干燥過程中可能有生長。水活度高的食品如面包、蛋糕，可因青霉及其 他常見霉菌生長引起發(fā)霉。3.4 果醬、蜜餞、果汁和干果：發(fā)霉果醬中常見散囊菌，時(shí)有嗜干青霉。金銹孢霉引起 蜜餞變質(zhì)，嗜旱二孢霉引起甘草腐敗。經(jīng)巴氏消毒后的果汁中雖有絲衣霉存在，但它們 不能生長。杏、桃、梨和香蕉制干

10、前二氧化硫的熏蒸抑制了多數(shù)微生物。未經(jīng)處理的干 果易因嗜干霉菌如散囊菌、嗜旱二孢霉等變質(zhì)。果仁中霉菌毒素問題較多。4霉菌和酵母總數(shù)測定4.1 基本要求：霉菌培養(yǎng)應(yīng)用專用培養(yǎng)箱，培養(yǎng)溫度在 25 30之間對(duì)結(jié)果影響不大。 為盡快得到結(jié)果，我們以 27為培養(yǎng)溫度。菌落計(jì)數(shù)應(yīng)于培養(yǎng)后的 72 小時(shí)進(jìn)行第一次 觀察。這時(shí)主要是觀察那些密集生長的平皿，以免到第五天之后，菌落生長成片而難以 計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)時(shí)手腳要快，動(dòng)作宜輕，培養(yǎng)過程中觀察平板時(shí)，動(dòng)作稍重，生長快速的霉菌 孢子就會(huì)在培養(yǎng)基內(nèi)擴(kuò)散，導(dǎo)致二次污染，結(jié)果讀數(shù)異常。特別是翻轉(zhuǎn)平板進(jìn)行培養(yǎng)， 觀察時(shí)再轉(zhuǎn)過來，特別容易導(dǎo)致孢子飛散。一般以第五天的讀數(shù)為最

11、終計(jì)數(shù)。但觀察應(yīng) 持續(xù)七天。由于霉菌和酵母菌落較大， 光線正常時(shí)可以方便地計(jì)數(shù)。 選擇那些霉菌數(shù)為 10 100 個(gè)之間的平皿計(jì)數(shù)，而不是象細(xì)菌的 30 300 個(gè)。有時(shí) 1050 個(gè)菌落的平皿也是受肯 定的。霉菌和酵母培養(yǎng)時(shí)間較長，用于傾注的培養(yǎng)基量應(yīng)稍多于細(xì)菌計(jì)數(shù)，約為1520 mL，以保證培養(yǎng)時(shí)不至于造成培養(yǎng)基過分干燥。培養(yǎng)箱內(nèi)溫濕度調(diào)節(jié)不當(dāng)，會(huì)造成霉菌 蔓延生長或培養(yǎng)基失水。尤其是當(dāng)濕度過高時(shí)，常導(dǎo)致嗜濕的根霉、木霉、毛霉、鏈孢 霉等的強(qiáng)烈污染。當(dāng)然，每批實(shí)驗(yàn)時(shí)空白對(duì)照都是要做的。4.2 霉菌和酵母計(jì)數(shù)培養(yǎng)基 傳統(tǒng)霉菌和酵母計(jì)數(shù)時(shí)用酸性培養(yǎng)基來抑制細(xì)菌。酸化的馬鈴薯葡萄糖瓊脂（ PDA

12、） 是一致公認(rèn)最好的酸化培養(yǎng)基。用酸，如酒石酸調(diào) pH 至 3.5 后用于計(jì)數(shù)，效果尚令人 滿意。酸化培養(yǎng)基也有無法避免的缺點(diǎn)，如霉菌菌落的擴(kuò)展，耐酸細(xì)菌的生長，蛋白質(zhì) 出現(xiàn)沉淀，以及抑制了不耐酸霉菌和酵母的生長等。最后還有一點(diǎn)，生長在酸化培養(yǎng)基 上的霉菌和酵母形態(tài)異常，不利于分類鑒定。目前普遍使用抗生素培養(yǎng)基， 上述缺點(diǎn)明顯改善。 此方法經(jīng)濟(jì)有效， 培養(yǎng)基易制備， 不會(huì)破壞正常的菌落形態(tài)。常用的抗生素類藥物有氯霉素（ 50 100 mgkg）、土霉素 （100 mgkg）、硫酸慶大霉素（ 50 mgkg）、鏈霉素（ 3 g kg）、鹽酸金霉素（ 20 mg kg）等。兩種抗生素合并使用效果更

13、好。硫酸慶大霉素和氯霉素耐高壓，可以預(yù)先添 加在培養(yǎng)基中一起滅菌， 而其他的抗生素一般在培養(yǎng)基溫度降至 50以下后添加。注意， 抗生素效用在堿性條件下（ pH8.0 ）降低。孟加拉紅（ Rose of Bengal）常被用于制備霉菌和酵母的計(jì)數(shù)瓊脂。主要作用是限 制霉菌菌落的蔓延生長，而不是象某些書本所描述的那樣，用于抑制細(xì)菌。孟加拉紅也 被稱為虎紅，化學(xué)名是四碘四氯熒光素鈉鹽或鉀鹽。 添加孟加拉紅的培養(yǎng)基上生長的霉 菌菌落較為致密，而且生長的菌落背面顯出較濃的紅色，有助于計(jì)數(shù)。唯一的缺點(diǎn)是孟 加拉紅溶液對(duì)光敏感， 易分解成一種黃色的有細(xì)胞毒作用的物質(zhì)。 平時(shí)應(yīng)將孟加拉紅溶 液用不透光的容器或

14、袋子包好，貯存在冰箱中。已變黃的溶液和瓊脂應(yīng)棄去。著名的應(yīng) 用孟加拉紅的培養(yǎng)基是馬丁瓊脂（ Matins Media，亦稱虎紅瓊脂、孟加拉紅瓊脂） 。孟 加拉紅可添加在 PDA中。鄰氯對(duì)硝基苯胺（ 2 mg kg）有類似孟加拉紅的作用。國外學(xué) 者也常用孟加拉紅瓊脂，其中添加孟加拉紅 25 mg kg，另外附加鄰氯對(duì)硝基苯胺 2 mg kg，氯霉素 50 mgkg，金霉素 50 mg kg。美國 FDA尚未認(rèn)可孟加拉紅瓊脂，它的 標(biāo)準(zhǔn)仍以 PDA的酸化法和抗生素法為基本。國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定， 霉菌和酵母數(shù)檢驗(yàn)時(shí)使用的培養(yǎng)基為孟加拉紅瓊脂和馬鈴薯葡萄糖 瓊脂（ PDA）。原標(biāo)準(zhǔn)只要求做糧食霉菌總數(shù)時(shí)，使

15、用高鹽察氏瓊脂。高鹽察氏瓊脂使用 時(shí)也有抑制力過強(qiáng)的缺點(diǎn)，而毛霉和根霉等卻仍然生長旺盛。一般使用CAO時(shí)，應(yīng)同時(shí)使用孟加拉紅瓊脂，以反映食品真菌的菌相全貌?，F(xiàn)在高鹽察氏瓊脂已廢止。不過，標(biāo) 準(zhǔn)中忘記刪除流程圖中的 CAO。察氏瓊脂（ Czapek）和 PDA通常只用于分類鑒定。當(dāng)酵母為優(yōu)勢菌群時(shí)，使用 MEGA計(jì)數(shù)。配方：麥芽浸膏 20克，蛋白胨 1克，葡萄糖 20克，瓊脂20克，蒸餾水 1升，調(diào)pH 5.4，12115 min，添加50 mg/kg氯霉素和金霉 素以抑制細(xì)菌。如買不到麥芽浸膏，可以向啤酒廠購買麥芽汁（未添加啤酒花， without hops）代替。上述培養(yǎng)基均有干粉出售。使用

16、時(shí)十分方便，但各品牌的質(zhì)量不一。4.3 霉菌和酵母計(jì)數(shù)方法稀釋平板法最常用于食品樣品的檢驗(yàn)。 國家標(biāo)準(zhǔn)種樣品處理等方法與細(xì)菌的菌落總 數(shù)計(jì)數(shù)方法大致相同。事實(shí)上，可以在進(jìn)行菌落總數(shù)計(jì)數(shù)的同時(shí)，進(jìn)行霉菌和酵母總數(shù) 的檢驗(yàn)。兩者之間的差異為培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度的不同。有人認(rèn)為，霉菌和酵母計(jì)數(shù)用表面涂布平板法能提高檢出率， 因?yàn)槊咕袣馍z， 好氧性強(qiáng)，酵母耐熱性差，不耐融化瓊脂的熱力。而且可用不透明的培養(yǎng)基。檢驗(yàn)方法 同細(xì)菌檢驗(yàn)常規(guī)，不再贅述。但因使用樣品量較少，對(duì)含菌量少的樣品，此法可能不夠 準(zhǔn)確。對(duì)于國家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的霉菌直接計(jì)數(shù)方法，引用了著名的霍華德（ Howard）霉菌計(jì) 數(shù)法，適用于檢驗(yàn)番

17、茄及其加工制品，但是需要專門的技術(shù)培訓(xùn)和相應(yīng)設(shè)備。5. 霉菌和酵母分類鑒定 霉菌中的多數(shù)種類不會(huì)產(chǎn)生有害的霉菌毒素，危害較小，而少數(shù)菌株即使污染數(shù)量 不多，產(chǎn)生的霉菌毒素卻有極大的危害， 因此單純的霉菌和酵母計(jì)數(shù)并不能反映食品的 安全性，只有知道了食品的污染菌菌相， 才能更準(zhǔn)確地判斷。 分類鑒定的意義就在于此。 但是，霉菌和酵母的分類鑒定十分繁瑣。5.1 分離和純化：常用方法有直接點(diǎn)種法、劃線法、稀釋平板法。稀釋平板法同常規(guī)檢 驗(yàn)，除了培養(yǎng)基用具選擇性的外，還要求每皿中長出的霉菌菌落在十個(gè)左右，太多則影 響分離效果。另外，如采用傾注法，長在瓊脂深處的霉菌發(fā)育不良，無法觀察其菌落特 征?？筛挠帽?/p>

18、面涂布法。此方法手續(xù)繁瑣，但所得種類較多。直接點(diǎn)種法將食物小顆粒 直接種于分離培養(yǎng)基上， 25培養(yǎng) 23 天后，用接種針挑取孢子或菌絲，轉(zhuǎn)接于適當(dāng) 的瓊脂斜面上待鑒定。此方法分純效果略遜。劃線法是用無菌水洗滌樣品，用接種環(huán)沾 取液體在分離培養(yǎng)基上劃線分離。此法最簡便，但可能遺落部分菌株。5.2 真菌分類系統(tǒng)：全世界已知真菌有上千屬，十萬種。四十年多來，真菌的研究飛速 發(fā)展，盡管在真菌超微結(jié)構(gòu)、生理生化、醫(yī)學(xué)真菌學(xué)、藥用真菌學(xué)、真菌毒素、食用真 菌人工培養(yǎng)開發(fā)等方面已經(jīng)獲得了很多進(jìn)展， 但是，真菌學(xué)仍然是微生物學(xué)的薄弱環(huán)節(jié)， 還有待進(jìn)一步深入研究。目前，在系統(tǒng)學(xué)方面，受到公認(rèn)的分類體系不多。5.

19、3 酵母分類鑒定：酵母在真菌分類系統(tǒng)中分別隸屬于子囊菌綱、 擔(dān)子菌綱和半知菌類。 為方便起見，國際上仍沿用酵母（Yeast）這個(gè)非分類學(xué)名詞。 酵母分類以荷蘭 Lodder J. 主編 The Yeast A Taxonomic Study （ 羅德，酵母分類研究 ）1970 年再版本為比 較完整的系統(tǒng)。鑒定一株酵母，要花費(fèi)極大的人力物力。因其形態(tài)和生理方面的試驗(yàn)項(xiàng)目繁多，一 般微生物實(shí)驗(yàn)室難以開展。分離酵母時(shí)，現(xiàn)在一般不用低 pH 培養(yǎng)，而以抗生素抑制細(xì) 菌。嗜干酵母常規(guī)方法很難檢出，因其要求低水活度，可以用濃縮果汁為培養(yǎng)基，或添 加 30葡萄糖，稀釋樣品時(shí)也用 30葡萄糖溶液。濃縮果汁中此

20、類菌數(shù)量不得超過 1/50 mL。在檢查分離抗防腐劑的酵母時(shí)，培養(yǎng)基添加 0.5 醋酸能促進(jìn)抗保鮮劑酵母的生長 并抑制其他酵母。鑒定時(shí)，先根據(jù)細(xì)胞形態(tài)特征進(jìn)行屬以上的判斷，如是否有性繁殖，子囊孢子、擲 孢子、冬孢子和擔(dān)孢子數(shù)量、形態(tài)，無性生殖是出芽還是裂殖，有無假菌絲等等。種的 確定主要以生理特性，尤其是糖類發(fā)酵或同化為依據(jù)，還要包括無維生素生長、酯酶活 性、色素形成、同化硝酸鹽、酯類產(chǎn)生情況、對(duì)放線菌酮抗性、低水活度生長等等生理 特點(diǎn)，常常需要數(shù)周后才有鑒定結(jié)果。使用 API 20C或 Biolog 全自動(dòng)細(xì)菌分類系統(tǒng)等可以大大加快檢索鑒定速度。目前， 上述設(shè)備及類似設(shè)備研制較多，但普及有一

21、定難度，主要原因是其價(jià)格居高不下。這種 全自動(dòng)或半自動(dòng)檢索代表了今后微生物分類研究的發(fā)展方向。 目前鑒定一株酵母需花費(fèi) 約 5 美元。5.4 霉菌分類鑒定5.4.1 霉菌分類培養(yǎng)基：絲狀真菌沒有完整的分類系統(tǒng)，常用 Smith 系統(tǒng)。霉菌培養(yǎng)時(shí) 常因不同的培養(yǎng)基而在生理和形態(tài)方面表現(xiàn)出極大的差異， 故描述菌種時(shí)應(yīng)注明鑒定培 養(yǎng)基。最為常用的是察氏瓊脂和馬鈴薯葡萄糖瓊脂，通常對(duì)青霉、曲霉菌種用察氏瓊脂 培養(yǎng)，其他霉菌則應(yīng)選用 PDA。對(duì)于鐮刀菌屬的菌種，必要時(shí)要選用六種以上的不同培 養(yǎng)基來分別顯示它的不同培養(yǎng)特征。對(duì)有特殊要求的霉菌，培養(yǎng)時(shí)也應(yīng)滿足其條件，低 水活度食品如果醬、糧食中的嗜干霉菌，

22、應(yīng)使用大量添加蔗糖或食鹽的高滲培養(yǎng)基。5.4.2 培養(yǎng)時(shí)間：直接采用霉菌和酵母計(jì)數(shù)后的平板進(jìn)行霉菌分類鑒定是可行的。但在 培養(yǎng) 57 天時(shí)，菌種的形態(tài)特征不明顯，不容易觀察。通常于培養(yǎng) 714 天時(shí)鑒定。5.4.3 染色液：制片時(shí)染色液是必需的。常用兩種：乳酸品紅液（百萬分之一酸性品紅 乳酸溶液），染色速度快，尤其是幼齡組織上色快。 胞壁組織清晰， 適于顯微攝影。 1896 年 Amann 氏發(fā)明的乳酸苯酚棉藍(lán)染色液（ 10 克石炭酸溶于 10 mL 熱蒸餾水，再加入甘 油 20 mL、乳酸 10 mL、棉藍(lán) cotton blue 0.22 克即成），折光率好，背景微藍(lán)，細(xì)胞 不變形，殺菌防腐防腐，且不易干燥，保持時(shí)間較長。5.4.4 霉菌鑒定程序：霉菌分類的困難關(guān)鍵在于培養(yǎng)特征的觀察和描述。使用檢索表時(shí) 一定要對(duì)每一分類特征判斷清楚， 以免因一次錯(cuò)誤而誤入歧途。 經(jīng)常進(jìn)行霉菌分類鑒定 的單位或部門需要專人負(fù)責(zé)這項(xiàng)工作，臨時(shí)人員是無法勝任的。鑒定時(shí)先肉眼觀察平板上生長的單個(gè)菌落，注意菌落顏色、質(zhì)地等。然后用顯微鏡 由低倍鏡、高倍鏡至油鏡觀察，注意菌絲形態(tài)、孢子梗、分生孢子和有性器官顏色、形 態(tài)等。這是鑒定時(shí)一定要仔細(xì)觀察的指標(biāo)。以曲霉鑒定為例。先進(jìn)行察氏瓊脂觀察。曲霉在察氏瓊脂上顏色和形態(tài)分化較好。 根據(jù)菌落有無綠色調(diào)產(chǎn)生分成