第六章 微生物的生長(zhǎng)和環(huán)境條件

1、 通過(guò)本章的學(xué)習(xí)，要求掌握：通過(guò)本章的學(xué)習(xí)，要求掌握： 1、微生物生長(zhǎng)量的測(cè)定方式。、微生物生長(zhǎng)量的測(cè)定方式。 2、細(xì)菌純培養(yǎng)生長(zhǎng)曲線各個(gè)時(shí)期的主要特點(diǎn)。、細(xì)菌純培養(yǎng)生長(zhǎng)曲線各個(gè)時(shí)期的主要特點(diǎn)。 3、物理、化學(xué)手段用于控制微生物生長(zhǎng)的方法及原理。、物理、化學(xué)手段用于控制微生物生長(zhǎng)的方法及原理。 重點(diǎn)：重點(diǎn)： 細(xì)菌純培養(yǎng)生長(zhǎng)曲線。細(xì)菌純培養(yǎng)生長(zhǎng)曲線。 難點(diǎn)：難點(diǎn)： 如何利用細(xì)菌純培養(yǎng)生長(zhǎng)曲線的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期來(lái)計(jì)算細(xì)菌的如何利用細(xì)菌純培養(yǎng)生長(zhǎng)曲線的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期來(lái)計(jì)算細(xì)菌的 代時(shí)和代數(shù)。代時(shí)和代數(shù)。 生長(zhǎng)生長(zhǎng)(Growth) 是指細(xì)胞從環(huán)境吸取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，經(jīng)代謝作用合成新的細(xì)胞成是指細(xì)胞從環(huán)境吸取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，

2、經(jīng)代謝作用合成新的細(xì)胞成 分，細(xì)胞各組分有規(guī)律的增長(zhǎng)，導(dǎo)致細(xì)胞體積增大和重分，細(xì)胞各組分有規(guī)律的增長(zhǎng)，導(dǎo)致細(xì)胞體積增大和重 量增加。量增加。 繁殖繁殖(Reproduction) 微生物生長(zhǎng)到一定階段由于細(xì)胞內(nèi)各種細(xì)胞結(jié)構(gòu)的復(fù)雜和重微生物生長(zhǎng)到一定階段由于細(xì)胞內(nèi)各種細(xì)胞結(jié)構(gòu)的復(fù)雜和重 建導(dǎo)致產(chǎn)生新的生命個(gè)體，即引起生命個(gè)體數(shù)量增加的建導(dǎo)致產(chǎn)生新的生命個(gè)體，即引起生命個(gè)體數(shù)量增加的 整個(gè)生物學(xué)過(guò)程。整個(gè)生物學(xué)過(guò)程。 個(gè)體生長(zhǎng)個(gè)體生長(zhǎng) 個(gè)體繁殖個(gè)體繁殖 群體生長(zhǎng)群體生長(zhǎng) 個(gè)體生長(zhǎng)個(gè)體生長(zhǎng) 個(gè)體繁殖個(gè)體繁殖 群體生長(zhǎng)群體生長(zhǎng) + + 個(gè)體與群落間關(guān)系個(gè)體與群落間關(guān)系 獲得純培養(yǎng)的方法獲得純培養(yǎng)的方法

3、 稀釋倒平板法稀釋倒平板法pour plate method 涂布平板法涂布平板法spread plate method 平板劃線分離法平板劃線分離法streak plate method 利用選擇培養(yǎng)基分離利用選擇培養(yǎng)基分離 單細(xì)胞（單孢子）分離法單細(xì)胞（單孢子）分離法 純培養(yǎng)純培養(yǎng)(pure culture)(pure culture)只有一種微生物生長(zhǎng)只有一種微生物生長(zhǎng) 的培養(yǎng)物，或者嚴(yán)格的說(shuō)是從一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)繁殖而得的培養(yǎng)物，或者嚴(yán)格的說(shuō)是從一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)繁殖而得 到的后代到的后代. . 1 1、稀釋倒平板法、稀釋倒平板法 操作較麻煩，對(duì)操作較麻煩，對(duì) 好氧菌、熱敏感好氧菌、熱敏感

4、 菌效果不好！菌效果不好！ 2 2、涂布平板法、涂布平板法 使用較多的常規(guī)使用較多的常規(guī) 方法，但有時(shí)涂方法，但有時(shí)涂 布不均勻！布不均勻！ 稀釋的菌液稀釋的菌液 融化的固體融化的固體 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 3 3、平板劃線分離法、平板劃線分離法 特點(diǎn)：快速、方便。特點(diǎn)：快速、方便。 分區(qū)劃線（適用于濃度較大的樣品）分區(qū)劃線（適用于濃度較大的樣品） 連續(xù)劃線（適用于濃度較小的樣品）連續(xù)劃線（適用于濃度較小的樣品） 4 4、選擇培養(yǎng)基分離法、選擇培養(yǎng)基分離法 E.coli 含氨芐青霉素含氨芐青霉素 的的LB平板培養(yǎng)基平板培養(yǎng)基 沒(méi)有一種培養(yǎng)基或一種培養(yǎng)條件能夠滿足自然界中一切生物沒(méi)有一種培養(yǎng)基或一種培養(yǎng)

5、條件能夠滿足自然界中一切生物 生長(zhǎng)的要求，在一定程度上所有的培養(yǎng)基都是選擇性的。生長(zhǎng)的要求，在一定程度上所有的培養(yǎng)基都是選擇性的。 含氨芐青霉素降含氨芐青霉素降 解酶基因的質(zhì)粒解酶基因的質(zhì)粒 利用選擇培養(yǎng)基分離利用選擇培養(yǎng)基分離 根據(jù)所要分離的菌種的特性選用培養(yǎng)基：根據(jù)所要分離的菌種的特性選用培養(yǎng)基： 分離真菌用馬丁氏培養(yǎng)基，分離真菌用馬丁氏培養(yǎng)基，pH偏酸；分離放線偏酸；分離放線 菌用高氏菌用高氏1號(hào)，號(hào)，pH中性偏堿。中性偏堿。 根據(jù)不同菌對(duì)根據(jù)不同菌對(duì)化學(xué)試劑的敏感性：化學(xué)試劑的敏感性：分離放線菌，分離放線菌， 培養(yǎng)基中加培養(yǎng)基中加10%酚，抑制細(xì)菌、真菌；從土壤酚，抑制細(xì)菌、真菌；從土

6、壤 中分離真菌，加鏈霉素，抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。中分離真菌，加鏈霉素，抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。 根據(jù)分離對(duì)象的根據(jù)分離對(duì)象的營(yíng)養(yǎng)特征營(yíng)養(yǎng)特征：分離能發(fā)酵纖維素：分離能發(fā)酵纖維素 的菌株，培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源。分離固的菌株，培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源。分離固 氮菌，用無(wú)氮培養(yǎng)基。分離厭氧菌，可以消除氮菌，用無(wú)氮培養(yǎng)基。分離厭氧菌，可以消除 培養(yǎng)基中的氧氣培養(yǎng)基中的氧氣 5 5、單細(xì)胞挑取法、單細(xì)胞挑取法 毛細(xì)管法：毛細(xì)管法：用毛細(xì)管提取微生物個(gè)體，適于較大微生物用毛細(xì)管提取微生物個(gè)體，適于較大微生物 顯微操作儀：顯微操作儀：用顯微針、鉤、環(huán)等挑取單個(gè)細(xì)胞或孢子用顯微針、鉤、環(huán)等挑取單個(gè)細(xì)胞或孢子 小液滴法：小液

7、滴法：將經(jīng)過(guò)適當(dāng)稀釋后的樣品制成小液滴，在顯將經(jīng)過(guò)適當(dāng)稀釋后的樣品制成小液滴，在顯 微鏡下選取只含一個(gè)細(xì)胞的液滴來(lái)進(jìn)行純培養(yǎng)物的分離。微鏡下選取只含一個(gè)細(xì)胞的液滴來(lái)進(jìn)行純培養(yǎng)物的分離。 采用顯微分離法采用顯微分離法在顯微鏡下在顯微鏡下從從 混雜群體中直接分離單個(gè)細(xì)胞混雜群體中直接分離單個(gè)細(xì)胞 或單個(gè)個(gè)體進(jìn)行培養(yǎng)以獲得純或單個(gè)個(gè)體進(jìn)行培養(yǎng)以獲得純 培養(yǎng)。培養(yǎng)。 v 細(xì)胞總數(shù)測(cè)量（直接計(jì)數(shù)法）細(xì)胞總數(shù)測(cè)量（直接計(jì)數(shù)法） v 活菌數(shù)測(cè)量（間接計(jì)數(shù)法）活菌數(shù)測(cè)量（間接計(jì)數(shù)法） v 細(xì)胞生物量測(cè)量細(xì)胞生物量測(cè)量 目鏡測(cè)微尺目鏡測(cè)微尺 每個(gè)大格又可分為每個(gè)大格又可分為1010個(gè)個(gè) 小格，每小格的實(shí)際長(zhǎng)小格

8、，每小格的實(shí)際長(zhǎng) 度為度為0.01mm0.01mm 總長(zhǎng)總長(zhǎng)0.1mm0.1mm 總長(zhǎng)總長(zhǎng)1mm1mm 共分為共分為1010格格 細(xì)胞大小的測(cè)定細(xì)胞大小的測(cè)定 兩重合線間鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)兩重合線間鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù) X 10 兩重合線間目鏡測(cè)微尺的格數(shù)兩重合線間目鏡測(cè)微尺的格數(shù) 細(xì)胞總數(shù)測(cè)量細(xì)胞總數(shù)測(cè)量 1 1、顯微鏡計(jì)數(shù)器直接計(jì)數(shù)、顯微鏡計(jì)數(shù)器直接計(jì)數(shù) 血球計(jì)數(shù)板和血球計(jì)數(shù)板和PetrofPetrof HausserHausser細(xì)菌細(xì)菌 計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)板 2 2、比濁法、比濁法 原理：原理：在一定在一定 范圍內(nèi)，菌懸液范圍內(nèi)，菌懸液 中的細(xì)胞濃度與中的細(xì)胞濃度與 混濁度成正比，混濁度成正比， 即

9、與光密度即與光密度 （OD值）成正值）成正 比，菌數(shù)越多，比，菌數(shù)越多， 光密度越大，但光密度越大，但 與透光度成反比。與透光度成反比。 活菌數(shù)測(cè)量活菌數(shù)測(cè)量 1 1、稀釋平板計(jì)數(shù)法、稀釋平板計(jì)數(shù)法 以菌落形成單位以菌落形成單位CFU(colony forming units)表示。表示。 2 2、最大概率數(shù)法、最大概率數(shù)法(most probable number, MPN) 稀釋度稀釋度 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7 10-8 重復(fù)數(shù)重復(fù)數(shù) 5 5 5 5 5 5 出現(xiàn)生長(zhǎng)的管數(shù)出現(xiàn)生長(zhǎng)的管數(shù) 5 5 5 4 1 0 X 5X 5X 5X 5 測(cè)定不占優(yōu)勢(shì)，但具有某種特

10、測(cè)定不占優(yōu)勢(shì)，但具有某種特 殊生理功能的類群。殊生理功能的類群。 3 3、濃縮法（濾膜法）、濃縮法（濾膜法） 測(cè)定空氣、水等含菌量測(cè)定空氣、水等含菌量 低的樣品當(dāng)中的活菌數(shù)低的樣品當(dāng)中的活菌數(shù) 硝酸纖維素膜硝酸纖維素膜 細(xì)胞生物量測(cè)量細(xì)胞生物量測(cè)量 1 1、細(xì)胞干重法、細(xì)胞干重法 2 2、DNADNA含量測(cè)定法含量測(cè)定法 每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞約含每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞約含DNA 8.4X10-5 ng 3 3、ATPATP含量測(cè)定法含量測(cè)定法 4 4、代謝活性法、代謝活性法 物質(zhì)的消耗物質(zhì)的消耗 產(chǎn)生量產(chǎn)生量 對(duì)氧的吸收對(duì)氧的吸收 發(fā)酵糖產(chǎn)酸量發(fā)酵糖產(chǎn)酸量 二氧化碳的釋放量等二氧化碳的釋放量等 適用于含菌量高，

11、不含或少含顆粒性雜質(zhì)的樣品適用于含菌量高，不含或少含顆粒性雜質(zhì)的樣品 微生物細(xì)胞中的微生物細(xì)胞中的ATP含量恒定含量恒定 概念：概念： 將某種單細(xì)胞微生物少量接種到恒定容積將某種單細(xì)胞微生物少量接種到恒定容積 的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，定時(shí)取樣分析。的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，定時(shí)取樣分析。 以菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，生長(zhǎng)時(shí)間為橫以菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，生長(zhǎng)時(shí)間為橫 坐標(biāo)作圖而得到的生長(zhǎng)曲線。坐標(biāo)作圖而得到的生長(zhǎng)曲線。 生長(zhǎng)曲線的制作生長(zhǎng)曲線的制作 活菌計(jì)數(shù)活菌計(jì)數(shù) ？ 一條典型的生長(zhǎng)曲線至少可以分為一條典型的生長(zhǎng)曲線至少可以分為 延滯期，對(duì)數(shù)期，穩(wěn)定期和衰亡期延滯期，對(duì)數(shù)期，穩(wěn)定期和衰亡期等四個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期等四個(gè)生

12、長(zhǎng)時(shí)期 v細(xì)菌數(shù)量不增加或增加細(xì)菌數(shù)量不增加或增加 很少，代謝活躍；很少，代謝活躍； v細(xì)胞內(nèi)的代謝活力強(qiáng)，細(xì)胞內(nèi)的代謝活力強(qiáng)， 特別是合成一些必需的特別是合成一些必需的 酶類；酶類； v細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)RNA，尤其是，尤其是 rRNA的含量很高，細(xì)的含量很高，細(xì) 胞的嗜堿性強(qiáng)；胞的嗜堿性強(qiáng)； v細(xì)胞體積增大，拉長(zhǎng)；細(xì)胞體積增大，拉長(zhǎng)； v抗性有所降低，對(duì)不良抗性有所降低，對(duì)不良 環(huán)境因素表現(xiàn)很敏感。環(huán)境因素表現(xiàn)很敏感。 A （一）延緩期（一）延緩期 （lag phase） 少量微生物接種到新培養(yǎng)液后細(xì)胞數(shù)目不增加的時(shí)期少量微生物接種到新培養(yǎng)液后細(xì)胞數(shù)目不增加的時(shí)期 影響延滯期長(zhǎng)短的因素：影響延滯

13、期長(zhǎng)短的因素： 菌種：繁殖速度較快的菌種的延滯期一般較短菌種：繁殖速度較快的菌種的延滯期一般較短 接種物菌齡：接種物菌齡：“種子種子”所處的生長(zhǎng)曲線上的階段所處的生長(zhǎng)曲線上的階段 接種量：接種量：接種量增大可縮短甚至消除延滯期接種量增大可縮短甚至消除延滯期 培養(yǎng)基成分：營(yíng)養(yǎng)成分及其變化影響延滯期培養(yǎng)基成分：營(yíng)養(yǎng)成分及其變化影響延滯期 （二）對(duì)數(shù)期（二）對(duì)數(shù)期 （ log phase ） 細(xì)胞以幾何級(jí)數(shù)速度分裂的一段時(shí)期細(xì)胞以幾何級(jí)數(shù)速度分裂的一段時(shí)期 v代時(shí)最短，生長(zhǎng)速代時(shí)最短，生長(zhǎng)速 度最快；度最快； v細(xì)胞穩(wěn)定（平衡）細(xì)胞穩(wěn)定（平衡） 生長(zhǎng)：細(xì)胞內(nèi)各種生長(zhǎng)：細(xì)胞內(nèi)各種 物質(zhì)按比例生長(zhǎng)，物質(zhì)

14、按比例生長(zhǎng)， 菌體成分均勻；菌體成分均勻； v酶活性高，代謝穩(wěn)酶活性高，代謝穩(wěn) 定，菌體大小基本定，菌體大小基本 一致。一致。 B 繁殖代數(shù)（繁殖代數(shù)（n） 12=21 24=22 48=23 816=24 16=1* *24 x2=x1* *2n lgx2 = lgx1 + nlg2 n=（lgx2 - lgx1）/lg2 n = 3.3 lg (x2 /x1 ) 代時(shí)（代時(shí)（ G ）：即每增加一代所需要的時(shí)間即每增加一代所需要的時(shí)間 G=（t2 - t1）/n G =（t2 - t1 ）/3.3 lg (x2 /x1) 例如：在一細(xì)菌培養(yǎng)液中第一次測(cè)得的細(xì)菌數(shù)為例如：在一細(xì)菌培養(yǎng)液中第一次

15、測(cè)得的細(xì)菌數(shù)為 104 /ml，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng) 4 h后，又測(cè)得菌液中的細(xì)菌后，又測(cè)得菌液中的細(xì)菌 數(shù)為數(shù)為 108 /ml，求此菌的世代時(shí)間和在此時(shí)間內(nèi)繁，求此菌的世代時(shí)間和在此時(shí)間內(nèi)繁 殖的代數(shù)。殖的代數(shù)。 根據(jù)公式：根據(jù)公式：G = （t2 - t1 ）/3.3 lg (x2 /x1) t2 - t1 = （4 - 0） 60 min = 240 min x2 = 108 x1 = 104 lg(x2 /x1 ) = lg108 - lg104 = 8 - 4 = 4 代入上式代入上式 G = 240/3.3 4 = 240/13.2 = 18 min 即在上述培養(yǎng)液中，世代時(shí)間為即

16、在上述培養(yǎng)液中，世代時(shí)間為 18 min。 細(xì)菌繁殖代數(shù)細(xì)菌繁殖代數(shù) n = (t2 - t1)/G = 240/18 = 13.3 繁繁 代。代。 影響對(duì)數(shù)期微生物代時(shí)的因素影響對(duì)數(shù)期微生物代時(shí)的因素： 菌種：不同菌種的代時(shí)差別極大菌種：不同菌種的代時(shí)差別極大 營(yíng)養(yǎng)成分：同一種細(xì)菌在營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)成分：同一種細(xì)菌在營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)， 代時(shí)較短代時(shí)較短 營(yíng)養(yǎng)物濃度：影響微生物營(yíng)養(yǎng)物濃度：影響微生物 的生長(zhǎng)速率和總生長(zhǎng)量的生長(zhǎng)速率和總生長(zhǎng)量 培養(yǎng)溫度培養(yǎng)溫度 （三）穩(wěn)定期（三）穩(wěn)定期 （ stationary phase ） 新繁殖的細(xì)胞數(shù)與衰亡的細(xì)胞數(shù)相等新繁殖的細(xì)胞數(shù)與衰

17、亡的細(xì)胞數(shù)相等 v生長(zhǎng)速度為零，新生生長(zhǎng)速度為零，新生= =死亡，死亡， 達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡；達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡； v活菌數(shù)總量達(dá)到最大值；活菌數(shù)總量達(dá)到最大值； v胞內(nèi)儲(chǔ)藏物開(kāi)始形成（肝胞內(nèi)儲(chǔ)藏物開(kāi)始形成（肝 糖粒、脂肪粒等）；糖粒、脂肪粒等）； v某些芽孢菌芽孢開(kāi)始形成；某些芽孢菌芽孢開(kāi)始形成； v某些細(xì)菌過(guò)量積累次級(jí)代某些細(xì)菌過(guò)量積累次級(jí)代 謝產(chǎn)物，如抗生素、維生謝產(chǎn)物，如抗生素、維生 素等。素等。 C 穩(wěn)定期到來(lái)的主要原因：穩(wěn)定期到來(lái)的主要原因： 營(yíng)養(yǎng)物尤其是生長(zhǎng)限制因子的消耗營(yíng)養(yǎng)物尤其是生長(zhǎng)限制因子的消耗 營(yíng)養(yǎng)物的比例失調(diào)，例如營(yíng)養(yǎng)物的比例失調(diào)，例如C/N的比值不合的比值不合 適適 酸、醇、毒素

18、或酸、醇、毒素或H2O2等有害代謝產(chǎn)物的積等有害代謝產(chǎn)物的積 累累 pHpH、氧化還原勢(shì)等物化條件越來(lái)越不適宜、氧化還原勢(shì)等物化條件越來(lái)越不適宜 （四）衰亡期（四）衰亡期 （ decline phase ） 個(gè)體死亡速度超過(guò)新生速度，因此整個(gè)群體出現(xiàn)負(fù)生長(zhǎng)個(gè)體死亡速度超過(guò)新生速度，因此整個(gè)群體出現(xiàn)負(fù)生長(zhǎng) v生長(zhǎng)速率負(fù)增長(zhǎng)；生長(zhǎng)速率負(fù)增長(zhǎng)； v細(xì)胞形態(tài)多樣，出現(xiàn)畸形，細(xì)胞形態(tài)多樣，出現(xiàn)畸形， 形成衰退型；形成衰退型； 蛋白水解蛋白水解 酶活躍，出現(xiàn)細(xì)胞自溶現(xiàn)酶活躍，出現(xiàn)細(xì)胞自溶現(xiàn) 象；象； v芽孢細(xì)菌芽孢大量釋放。芽孢細(xì)菌芽孢大量釋放。 D 同步培養(yǎng)法同步培養(yǎng)法synchronous cultu

19、re ：設(shè)法使培養(yǎng)的設(shè)法使培養(yǎng)的 微生物處于比較一致的生長(zhǎng)發(fā)育階段上的培養(yǎng)方法。微生物處于比較一致的生長(zhǎng)發(fā)育階段上的培養(yǎng)方法。 同步生長(zhǎng)（同步生長(zhǎng)（synchronous growth）的概念）的概念：一個(gè)細(xì)：一個(gè)細(xì) 胞群體中各個(gè)細(xì)胞都在同一時(shí)間進(jìn)行分裂的狀態(tài)，稱胞群體中各個(gè)細(xì)胞都在同一時(shí)間進(jìn)行分裂的狀態(tài)，稱 為同步生長(zhǎng)，進(jìn)行同步分裂的細(xì)胞稱為同步細(xì)胞。為同步生長(zhǎng)，進(jìn)行同步分裂的細(xì)胞稱為同步細(xì)胞。 同步細(xì)胞群體在任何一時(shí)刻都處在細(xì)胞周期的同一相，同步細(xì)胞群體在任何一時(shí)刻都處在細(xì)胞周期的同一相， 彼此間形態(tài)、生化特征都很一致，因而是細(xì)胞學(xué)、生彼此間形態(tài)、生化特征都很一致，因而是細(xì)胞學(xué)、生 理學(xué)和

20、生物化學(xué)等研究的良好材料。理學(xué)和生物化學(xué)等研究的良好材料。 同步培養(yǎng)方法同步培養(yǎng)方法 選擇法選擇法 誘導(dǎo)法誘導(dǎo)法 離心方法離心方法 過(guò)濾分離法過(guò)濾分離法 硝酸纖維素濾膜法硝酸纖維素濾膜法 溫度溫度 培養(yǎng)基成份控制培養(yǎng)基成份控制 光照和黑暗交替培養(yǎng)光照和黑暗交替培養(yǎng) 獲得同步生長(zhǎng)的方法主要有兩類：獲得同步生長(zhǎng)的方法主要有兩類： 環(huán)境條件誘導(dǎo)法：變換溫度、光線、培養(yǎng)基等，造成與正常環(huán)境條件誘導(dǎo)法：變換溫度、光線、培養(yǎng)基等，造成與正常 細(xì)胞周期不同的周期變化。細(xì)胞周期不同的周期變化。 選擇法：選擇性過(guò)濾、梯度離心。物理方法，隨機(jī)選擇，不選擇法：選擇性過(guò)濾、梯度離心。物理方法，隨機(jī)選擇，不 影響細(xì)胞代

21、謝。影響細(xì)胞代謝。 Helmstetter-Cummings 法法 原理：原理：一些細(xì)菌細(xì)胞會(huì)緊緊吸附于硝酸纖維微孔濾膜一些細(xì)菌細(xì)胞會(huì)緊緊吸附于硝酸纖維微孔濾膜 上。上。 步驟：步驟：菌懸液通過(guò)微孔濾膜，細(xì)胞吸附其上；反置濾菌懸液通過(guò)微孔濾膜，細(xì)胞吸附其上；反置濾 膜，以新鮮培養(yǎng)液通過(guò)濾膜，洗掉浮游細(xì)胞；除去起膜，以新鮮培養(yǎng)液通過(guò)濾膜，洗掉浮游細(xì)胞；除去起 始洗脫液后就可以得到剛剛分裂下來(lái)的新生細(xì)胞，即始洗脫液后就可以得到剛剛分裂下來(lái)的新生細(xì)胞，即 為同步培養(yǎng)。為同步培養(yǎng)。 細(xì)菌的同步生長(zhǎng)和非同步生長(zhǎng)細(xì)菌的同步生長(zhǎng)和非同步生長(zhǎng) 同步生長(zhǎng)的時(shí)間，因菌同步生長(zhǎng)的時(shí)間，因菌 種和條件而變化，由于種和

22、條件而變化，由于 同步群體的個(gè)體差異，同步群體的個(gè)體差異， 同步生長(zhǎng)不能無(wú)限地維同步生長(zhǎng)不能無(wú)限地維 持，往往會(huì)逐漸破壞，持，往往會(huì)逐漸破壞， 最多能維持最多能維持2323個(gè)世代個(gè)世代 ，又逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)殡S機(jī)生，又逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)殡S機(jī)生 長(zhǎng)，即非同步化長(zhǎng)，即非同步化 原核細(xì)胞的生長(zhǎng)周期一原核細(xì)胞的生長(zhǎng)周期一 般較短，可分為般較短，可分為DNADNA復(fù)復(fù) 制的準(zhǔn)備前期（制的準(zhǔn)備前期（I I），）， DNADNA復(fù)制期（復(fù)制期（R R），細(xì)胞），細(xì)胞 分裂期（分裂期（D D）。）。 真核細(xì)胞的生長(zhǎng)周期真核細(xì)胞的生長(zhǎng)周期 一一 些些 基基 本本 術(shù)術(shù) 語(yǔ)語(yǔ) 化療化療(Chemotherapy) 滅菌滅菌(St

23、erilization) 防腐防腐(Antisepsis) 消毒消毒(Dis-infection) 化療化療(chemotherapy) v是指利用具有選擇性的化學(xué)物質(zhì)如磺胺、抗生素等是指利用具有選擇性的化學(xué)物質(zhì)如磺胺、抗生素等 對(duì)生物體內(nèi)部被微生物感染的組織或病變細(xì)胞進(jìn)行對(duì)生物體內(nèi)部被微生物感染的組織或病變細(xì)胞進(jìn)行 治療，以殺死組織內(nèi)的病原微生物或病變細(xì)胞，但治療，以殺死組織內(nèi)的病原微生物或病變細(xì)胞，但 對(duì)機(jī)體本身無(wú)毒害作用的治療措施對(duì)機(jī)體本身無(wú)毒害作用的治療措施。 滅菌滅菌（sterilization) v是指用物理或化學(xué)因子，是指用物理或化學(xué)因子， 殺滅物體中的所有活微生殺滅物體中的所有

24、活微生 物，包括最耐熱的細(xì)菌芽物，包括最耐熱的細(xì)菌芽 孢。孢。 紫外線紫外線 滅菌器滅菌器 高壓滅菌鍋高壓滅菌鍋 手提式高壓滅菌鍋手提式高壓滅菌鍋 防腐防腐( (antisepsis) ) v在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下，能在某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子作用下，能 防止或抑制微生物生長(zhǎng)的一種措施，它防止或抑制微生物生長(zhǎng)的一種措施，它 能防止食品腐敗或防止其它物質(zhì)霉變。能防止食品腐敗或防止其它物質(zhì)霉變。 消毒消毒(disinfection) v消毒是指殺死或消除所有的病原微生消毒是指殺死或消除所有的病原微生 物，可以起到防止感染或傳播的作用。物，可以起到防止感染或傳播的作用。 但不能殺死所有的芽孢。

25、但不能殺死所有的芽孢。 消毒劑消毒劑 指微生物能進(jìn)行繁殖的最低溫度界限。指微生物能進(jìn)行繁殖的最低溫度界限。 指使微生物達(dá)到最大生長(zhǎng)速度的溫度。指使微生物達(dá)到最大生長(zhǎng)速度的溫度。 指微生物能生長(zhǎng)繁殖的最高溫度界限。指微生物能生長(zhǎng)繁殖的最高溫度界限。 指能在指能在1010分鐘內(nèi)殺死微生物的高溫界限。分鐘內(nèi)殺死微生物的高溫界限。 在一定溫度下殺死微生物所需要的最短時(shí)間。在一定溫度下殺死微生物所需要的最短時(shí)間。 極端嗜熱菌極端嗜熱菌 嗜熱菌嗜熱菌 中溫菌中溫菌 適冷菌適冷菌 嗜冷菌嗜冷菌 微生物生長(zhǎng)的溫度類型微生物生長(zhǎng)的溫度類型 -125 -5 10202530 10 2540 30 70 低溫保藏菌

26、種就是利用這個(gè)原理。低溫保藏菌種就是利用這個(gè)原理。 1 1）一些細(xì)菌、酵母菌和霉菌的瓊脂斜面菌種通?？梢蚤L(zhǎng)時(shí)間）一些細(xì)菌、酵母菌和霉菌的瓊脂斜面菌種通?？梢蚤L(zhǎng)時(shí)間 地保藏在地保藏在44的冰箱中；的冰箱中； 2 2）-20-20、-70-70和液氮保藏（和液氮保藏（-196-196）。）。 當(dāng)環(huán)境溫度低于微生物的最適生長(zhǎng)溫度時(shí)，微生當(dāng)環(huán)境溫度低于微生物的最適生長(zhǎng)溫度時(shí)，微生 物的生長(zhǎng)繁殖停止，但微生物的原生質(zhì)結(jié)構(gòu)并未破壞時(shí)，物的生長(zhǎng)繁殖停止，但微生物的原生質(zhì)結(jié)構(gòu)并未破壞時(shí)， 不會(huì)很快造成死亡并能在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持活力，當(dāng)溫度不會(huì)很快造成死亡并能在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持活力，當(dāng)溫度 提高時(shí)，可以恢復(fù)正常的生

27、命活動(dòng)。提高時(shí)，可以恢復(fù)正常的生命活動(dòng)。 1 1、低溫對(duì)微生物的影響、低溫對(duì)微生物的影響 低溫保藏菌種低溫保藏菌種 利用高溫滅菌的方法利用高溫滅菌的方法 干熱滅菌干熱滅菌 通過(guò)高溫干燥的空氣達(dá)通過(guò)高溫干燥的空氣達(dá) 到滅菌效果到滅菌效果 ：高溫可引起蛋白質(zhì)、核酸和脂類等重要生高溫可引起蛋白質(zhì)、核酸和脂類等重要生 物高分子發(fā)生降解或改變其空間結(jié)構(gòu)等，從而變物高分子發(fā)生降解或改變其空間結(jié)構(gòu)等，從而變 性或破壞。性或破壞。 濕熱滅菌濕熱滅菌 更有效，因濕熱蒸汽不但更有效，因濕熱蒸汽不但 透射力強(qiáng)，還能破壞維持透射力強(qiáng)，還能破壞維持 蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性 的氫鍵。的氫鍵。 2 2

28、、高溫對(duì)微生物的影響、高溫對(duì)微生物的影響 高溫下蛋白質(zhì)不可逆變性，酶變性失活，代謝停滯而高溫下蛋白質(zhì)不可逆變性，酶變性失活，代謝停滯而 死亡。死亡。 蛋白質(zhì)含水蛋白質(zhì)含水（%）蛋白質(zhì)凝固溫蛋白質(zhì)凝固溫（oC） 滅菌時(shí)間滅菌時(shí)間(min) 505630 25748030 18809030 614530 016017030 蛋白質(zhì)含水量與凝固溫度關(guān)系蛋白質(zhì)含水量與凝固溫度關(guān)系 干熱滅菌干熱滅菌 干熱滅菌干熱滅菌 160-170160-170處理處理1 1-2h,2h, 適用于玻璃器皿、適用于玻璃器皿、 金屬用具等耐熱金屬用具等耐熱 物品的滅菌。物品的滅菌。 優(yōu)點(diǎn)：可保持物品優(yōu)點(diǎn)：可保持物品 的干燥

29、。的干燥。 灼熱滅菌法灼熱滅菌法 常用于金屬性接種工常用于金屬性接種工 具、污染物品及實(shí)具、污染物品及實(shí) 驗(yàn)材料等廢棄物的驗(yàn)材料等廢棄物的 處理。處理。 v巴斯德消毒法：巴斯德消毒法：用較低的溫度（如用較低的溫度（如62-63,30 min62-63,30 min） 處理牛奶、酒類等飲料，以殺死其中的病原菌如結(jié)處理牛奶、酒類等飲料，以殺死其中的病原菌如結(jié) 核桿菌、傷寒桿菌等，同時(shí)又不損害營(yíng)養(yǎng)與風(fēng)味的核桿菌、傷寒桿菌等，同時(shí)又不損害營(yíng)養(yǎng)與風(fēng)味的 方法。方法。 v煮沸消毒法：煮沸消毒法：100100，15min15min以上。以上。 v間隙滅菌法：間隙滅菌法：用流通蒸汽反復(fù)多次處理的滅菌法。用流通

30、蒸汽反復(fù)多次處理的滅菌法。 v高壓蒸汽滅菌法：高壓蒸汽滅菌法：1.05kg/cm1.05kg/cm2 2（15b/in15b/in）的蒸汽壓，）的蒸汽壓， 121121處理處理15-30min15-30min。 濕熱滅菌濕熱滅菌 各種細(xì)菌的芽孢在濕熱中的各種細(xì)菌的芽孢在濕熱中的 致死溫度和致死時(shí)間致死溫度和致死時(shí)間 菌菌 種種100100o oC C105105o oC C110110o oC C115115o oC C121121o oC C 炭疽芽孢桿菌炭疽芽孢桿菌510_ 枯草芽孢桿菌枯草芽孢桿菌617_ 嗜熱脂肪芽孢桿菌嗜熱脂肪芽孢桿菌_12 肉毒梭狀芽孢桿菌肉毒梭狀芽孢桿菌33010

31、032104 破傷風(fēng)梭菌破傷風(fēng)梭菌515510_ pHpH對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響 氫離子影響細(xì)胞質(zhì)膜電荷和養(yǎng)料吸收氫離子影響細(xì)胞質(zhì)膜電荷和養(yǎng)料吸收; ; 影響酶的活性影響酶的活性; ; 改變環(huán)境中養(yǎng)料的可給態(tài)和有害物質(zhì)的改變環(huán)境中養(yǎng)料的可給態(tài)和有害物質(zhì)的 毒性毒性; ; 影響代謝產(chǎn)物的積累影響代謝產(chǎn)物的積累; ; 抑制雜菌生長(zhǎng)。抑制雜菌生長(zhǎng)。 微生物生長(zhǎng)的微生物生長(zhǎng)的pH值三基點(diǎn)：值三基點(diǎn)：各種微生物都有其生長(zhǎng)的最各種微生物都有其生長(zhǎng)的最 低、最適和最高低、最適和最高pH值。值。 低于低于最低、或最低、或超過(guò)超過(guò)最高生長(zhǎng)最高生長(zhǎng)pHpH值時(shí)，值時(shí)， 微生物生長(zhǎng)受抑制或?qū)е滤劳?。?/p>

32、生物生長(zhǎng)受抑制或?qū)е滤劳觥?微生物在基質(zhì)中生長(zhǎng)，由于代謝產(chǎn)物的積累，也會(huì)改微生物在基質(zhì)中生長(zhǎng)，由于代謝產(chǎn)物的積累，也會(huì)改 變變pHpH值。值。 微生物微生物最低最低pHpH值值最適最適pHpH值值最高最高pHpH值值 圓褐固氮菌圓褐固氮菌 4.57.47.69.0 大豆根瘤菌大豆根瘤菌 4.26.87.011.0 亞硝酸細(xì)菌亞硝酸細(xì)菌 7.07.88.69.4 氧化硫桿菌氧化硫桿菌 1.02.02.84.06.0 嗜酸乳桿菌嗜酸乳桿菌 4.04.65.86.06.8 放線菌放線菌 5.07.08.010.0 酵母菌酵母菌 3.05.06.08.0 黑曲霉黑曲霉 1.55.06.09.0 水的活

33、度水的活度是指在一定的溫度和壓力下，溶液的蒸汽壓力和純是指在一定的溫度和壓力下，溶液的蒸汽壓力和純 水的蒸汽壓力之比，即：水的蒸汽壓力之比，即： w w = = （P P溶液 溶液）（ ）（P P純水 純水） ） 微生物生長(zhǎng)需要的水的活度在微生物生長(zhǎng)需要的水的活度在 0.630.630.990.99。當(dāng)環(huán)境中的。當(dāng)環(huán)境中的 w w值值 低于微生物生長(zhǎng)需要時(shí)，微生物的生長(zhǎng)受阻，甚至停止生長(zhǎng)。低于微生物生長(zhǎng)需要時(shí)，微生物的生長(zhǎng)受阻，甚至停止生長(zhǎng)。 幾類微生物生長(zhǎng)的最適幾類微生物生長(zhǎng)的最適 aw 微生物類群微生物類群a aw w 一般細(xì)菌一般細(xì)菌0.910.91 酵母菌酵母菌0.880.88 霉菌霉

34、菌0.800.80 嗜鹽細(xì)菌嗜鹽細(xì)菌0.760.76 嗜鹽真菌嗜鹽真菌0.650.65 嗜高滲酵母嗜高滲酵母0.600.60 一般來(lái)說(shuō)，細(xì)菌生長(zhǎng)需要的一般來(lái)說(shuō)，細(xì)菌生長(zhǎng)需要的 w w值值 霉菌霉菌 鹽細(xì)菌鹽細(xì)菌 耐旱真菌耐旱真菌 由于一般微生物不能耐受高滲透壓，所以日常生活中常用高由于一般微生物不能耐受高滲透壓，所以日常生活中常用高 濃度的鹽或糖保存食物，如腌漬蔬菜、肉類及蜜餞等。糖的濃度的鹽或糖保存食物，如腌漬蔬菜、肉類及蜜餞等。糖的 濃度通常為濃度通常為50-70%50-70%，鹽的濃度為，鹽的濃度為10-15%10-15%。 等滲溶液：等滲溶液：細(xì)胞內(nèi)溶質(zhì)濃度與胞外溶液的溶質(zhì)濃度相等時(shí)，

35、細(xì)胞內(nèi)溶質(zhì)濃度與胞外溶液的溶質(zhì)濃度相等時(shí)， 高滲溶液：高滲溶液：溶液的溶質(zhì)濃度高于胞內(nèi)溶質(zhì)濃度溶液的溶質(zhì)濃度高于胞內(nèi)溶質(zhì)濃度, , 低滲溶液低滲溶液：溶液的溶質(zhì)濃度低于胞內(nèi)溶質(zhì)濃度為：溶液的溶質(zhì)濃度低于胞內(nèi)溶質(zhì)濃度為. . 滲透壓對(duì)微生物的影響滲透壓對(duì)微生物的影響 利用高滲透壓保存食物利用高滲透壓保存食物 耐低水活度的機(jī)制耐低水活度的機(jī)制 提高細(xì)胞內(nèi)溶質(zhì)的濃度而從外界獲得水分：提高細(xì)胞內(nèi)溶質(zhì)的濃度而從外界獲得水分： 1 1、從外界泵入離子、從外界泵入離子 2 2、胞內(nèi)合成某些溶質(zhì)、胞內(nèi)合成某些溶質(zhì) 微生物對(duì)氧的需要和耐受力在不同的類群微生物對(duì)氧的需要和耐受力在不同的類群 中變化很大，根據(jù)微生物

36、與氧的關(guān)系中變化很大，根據(jù)微生物與氧的關(guān)系, ,可可 把它們分為幾種類群把它們分為幾種類群: : 專性好氧菌專性好氧菌 好氧菌好氧菌 微好氧菌微好氧菌 兼性厭氧菌兼性厭氧菌 耐氧厭氧菌耐氧厭氧菌 厭氧菌厭氧菌 專性厭氧菌專性厭氧菌 需氧微生物需氧微生物 必須在有分子氧的條件下才能生長(zhǎng)，有完整的呼吸鏈，必須在有分子氧的條件下才能生長(zhǎng)，有完整的呼吸鏈， 以分子氧作為最終氫受體以分子氧作為最終氫受體。培養(yǎng)時(shí)需加棉塞。培養(yǎng)時(shí)需加棉塞。 厭氧微生物厭氧微生物 分子氧對(duì)它有毒害，短期接觸空氣，也會(huì)抑制其生長(zhǎng)分子氧對(duì)它有毒害，短期接觸空氣，也會(huì)抑制其生長(zhǎng) 甚至致死；甚至致死； 產(chǎn)生超氧化物、過(guò)氧化氫產(chǎn)生超氧

37、化物、過(guò)氧化氫 O2 + e - O2- O2-+H2O2 O2 + OH - + OH SOD酶與酶與H2O2酶酶 2O2- + 2H + H2O2 + O2 2H2O2 2 H2O + O2 兼性需氧微生物兼性需氧微生物 有氧時(shí)進(jìn)行有氧呼吸，無(wú)氧時(shí)進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)能。有氧時(shí)進(jìn)行有氧呼吸，無(wú)氧時(shí)進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)能。 氧化還原電位勢(shì)氧化還原電位勢(shì)(Eh) 好氧微生物：好氧微生物： 0.1 V 0.1 V；最適；最適+0.3+0.4V+0.3+0.4V； 厭氧微生物：厭氧微生物： 0.1V; 0.1V; 兼性好氧微生物兼性好氧微生物EhEh值在值在 0.1 0.1 伏以上行好氣性伏以上行好氣性 呼吸，呼吸，

38、Eh Eh 值在值在 0.1 0.1 伏以下行厭氣性呼吸。伏以下行厭氣性呼吸。 產(chǎn)甲烷細(xì)菌：產(chǎn)甲烷細(xì)菌：-330 mV-330 mV； 影響影響EhEh的因素很多，分子態(tài)氧的影響尤為重要。其次的因素很多，分子態(tài)氧的影響尤為重要。其次 是培養(yǎng)基中氧化還原物質(zhì)及是培養(yǎng)基中氧化還原物質(zhì)及pHpH值的影響值的影響 指通過(guò)空氣或外層空間以波動(dòng)方式從一個(gè)地方傳播或傳遞到另一地方的能源。指通過(guò)空氣或外層空間以波動(dòng)方式從一個(gè)地方傳播或傳遞到另一地方的能源。 它們或是離子或是電磁波。它們或是離子或是電磁波。是能量通過(guò)空間傳遞的一種物理現(xiàn)象。是能量通過(guò)空間傳遞的一種物理現(xiàn)象。 電磁輻射電磁輻射 電離輻射電離輻射

39、1 1、可見(jiàn)光：、可見(jiàn)光：波長(zhǎng)在波長(zhǎng)在400760nm的電磁輻射。的電磁輻射。 大部分微生物不需要光，大部分微生物不需要光，只有光能營(yíng)養(yǎng)型的微生物才需要只有光能營(yíng)養(yǎng)型的微生物才需要光光 作為能源。作為能源。有的微生物對(duì)光有趨光性，如閃光須霉。擔(dān)子菌有的微生物對(duì)光有趨光性，如閃光須霉。擔(dān)子菌 形成子實(shí)體也需要散射光的照射。形成子實(shí)體也需要散射光的照射。 一般可見(jiàn)光對(duì)大多數(shù)化能微生物沒(méi)有影響，但是，太強(qiáng)或連一般可見(jiàn)光對(duì)大多數(shù)化能微生物沒(méi)有影響，但是，太強(qiáng)或連 續(xù)長(zhǎng)時(shí)間照射也會(huì)導(dǎo)致微生物死亡。因續(xù)長(zhǎng)時(shí)間照射也會(huì)導(dǎo)致微生物死亡。因微生物細(xì)胞經(jīng)照射后，微生物細(xì)胞經(jīng)照射后， 在有氧情況下，產(chǎn)生在有氧情況下

40、，產(chǎn)生光化學(xué)氧化反應(yīng)，生成光化學(xué)氧化反應(yīng)，生成H2O2，能發(fā)生強(qiáng)，能發(fā)生強(qiáng) 烈氧化作用，引起細(xì)胞死亡。烈氧化作用，引起細(xì)胞死亡。 2 2、紫外線（）波長(zhǎng)在紫外線（）波長(zhǎng)在100 400nm的電磁輻射。的電磁輻射。 紫外線殺菌或誘變?cè)恚鹤贤饩€殺菌或誘變?cè)恚?紫外線紫外線作用于作用于DNA ，使其產(chǎn)生，使其產(chǎn)生胸腺嘧啶二聚體（胸腺嘧啶二聚體（TT），），引起引起DNA結(jié)構(gòu)變結(jié)構(gòu)變 形，阻礙正常的堿基配對(duì)，從而造成形，阻礙正常的堿基配對(duì)，從而造成微生物微生物變異或死亡。變異或死亡。 紫外線會(huì)使空氣中的分子氧變成臭氧，臭氧釋放的原子氧有殺菌作用。紫外線會(huì)使空氣中的分子氧變成臭氧，臭氧釋放的原子氧有

41、殺菌作用。 波長(zhǎng)在波長(zhǎng)在265 266nm處的紫外線處的紫外線殺菌力最強(qiáng)，因?yàn)楹怂幔⒕ψ顝?qiáng)，因?yàn)楹怂幔―NA、RNA）的）的 吸收峰為吸收峰為260nm。 光復(fù)活現(xiàn)象：光復(fù)活現(xiàn)象：經(jīng)紫外線照射的微生物，立即放在可見(jiàn)光下，經(jīng)紫外線照射的微生物，立即放在可見(jiàn)光下， 光可以激活光可以激活DNA修復(fù)酶，該酶能修復(fù)修復(fù)酶，該酶能修復(fù)DNA上的損傷，使上的損傷，使 微生物的突變率或死亡率下降。微生物的突變率或死亡率下降。 3 3 電離輻射：電離輻射： 、 、射線射線 ，波長(zhǎng)短，能量高，有較強(qiáng)的殺傷，波長(zhǎng)短，能量高，有較強(qiáng)的殺傷 力。力。 作用原理作用原理 ：可引起水和其他物質(zhì)在吸收能量后的電離，可引起

42、水和其他物質(zhì)在吸收能量后的電離， 產(chǎn)生游離基，使核酸、蛋白質(zhì)或酶發(fā)生變化，造成細(xì)產(chǎn)生游離基，使核酸、蛋白質(zhì)或酶發(fā)生變化，造成細(xì) 胞損傷或死亡。胞損傷或死亡。 特點(diǎn)：特點(diǎn)：穿透力強(qiáng)，非專一性，作用于一切穿透力強(qiáng)，非專一性，作用于一切細(xì)胞細(xì)胞成分，成分， 對(duì)所有生物均有殺傷作用。對(duì)所有生物均有殺傷作用。 應(yīng)用應(yīng)用：用于殺菌或菌種誘變。：用于殺菌或菌種誘變。 抗微生物劑抗微生物劑 非選擇性非選擇性 （對(duì)所有細(xì)胞均有毒性）（對(duì)所有細(xì)胞均有毒性） 有選擇性有選擇性 （對(duì)病原微生物毒性更強(qiáng)）（對(duì)病原微生物毒性更強(qiáng)） 消毒劑消毒劑(Disinfectant) 防腐劑防腐劑(Antisepsis) 抗代謝藥物抗代謝藥物 抗生素抗生素 中草藥有效成分中草藥有效成分