理化因素和藥物對家兔離體腸肌的作用

1、真誠為您提供優(yōu)質參考資料，若有不當之處，請指正。 理化因素和藥物對家兔離體腸肌的作用 浙江中醫(yī)藥大學 14級臨床醫(yī)學本部三班 張伊娜【摘要】目的：研究乙酰膽堿、腎上腺素、NaOH、HCl、低溫臺氏液、缺氧對離體家兔腸肌的作用及機制。方法：向浸有離體家兔腸肌的38臺氏液中依次滴加乙酰膽堿、腎上腺素、NaOH、HCl各2滴，將38臺氏液迅速換成25的臺氏液，停止供氧及恢復供氧，用生物信號采集處理系統(tǒng)記錄腸肌的收縮情況。結果：滴加乙酰膽堿、NaOH后，腸肌收縮張力和頻率都增大；滴加腎上腺素、HCl和將 38的臺氏液迅速換成25臺氏液后，腸肌收縮張力與頻率都降低；停止供氧后，腸肌收縮早期張力及頻率增強

2、，晚期減弱。通氣后頻率先降低又逐漸恢復正常。結論：一定濃度乙酰膽堿、NaOH可促進腸肌的運動；一定濃度的腎上腺素、HCl以及低溫會抑制腸肌的運動；短時間的缺氧能使腸肌收縮一開始增強，隨后減弱。 【關鍵詞】理化因素；小腸平滑肌；家兔；電活動1實驗材料和方法 1.1實驗材料1.1.1實驗動物 家兔（雌雄不限）。1.1.2實驗材料和器械 微機化生物信號采集處理系統(tǒng)（RM6240系統(tǒng)），麥氏浴槽，張力換能器，鐵支架，雙凹夾，恒溫水浴箱，氣泵，溫度計，燒杯，螺旋夾，棉線，L型固定鉤，剪刀，眼科鑷，注射器，持針器，手術圓針，手術盤，搪瓷碗等；臺氏液，乙酰膽堿（10-4mol/L），腎上腺素（10-4mol

3、/L），氫氧化鈉，鹽酸，阿托品等。1.2實驗方法1.2.1實驗裝置準備和儀器參數設置 安裝麥氏浴槽，在麥氏浴槽中加固定量（10-15mL）的臺氏液，調節(jié)超級恒溫器的溫度，使麥氏浴槽內溫度溫度在38。通氣管接95%O2+5%CO2混合氣體管道。用螺絲夾調節(jié)氣體管道的氣體流量，調節(jié)至浴槽中氣體一個個逸出為止。換能器輸出線連接微機生物信號采集處理系統(tǒng)，儀器參數設置：RM6240，點擊“實驗”菜單中的“腸肌記錄”，通道時間常數為直流，濾波頻率10Hz，靈敏度3g，采樣頻率200Hz，掃描速度1s/div。 1.2.2離體家兔腸肌制備 取家兔一只，用木槌猛擊兔頭枕部使其昏迷，迅速剖開腹腔找到胃，以胃幽門

4、與十二指腸交界處為起點，先將腸系膜沿腸緣剪去，再剪取20-30cm腸管，用4臺氏液沖洗，除去腸管內容物。沖洗干凈后將腸管剪成數小段（約11.5cm），換以新鮮臺氏液備用（注意操作時勿牽拉腸段以免影響收縮功能）。取小段腸管置于盛有臺氏液的培養(yǎng)皿中（此過程一直通有空氣），在其兩端對角壁處，分別用縫針穿線，并打結。注意保持腸管暢通，勿使其封閉。1.2.3標本固定 腸管一端連線系于浴槽固定鉤上，然后放入38麥氏浴槽中，再將腸管另一端系結在張力換能器的懸梁壁上。1.2.4實驗觀察1.2.4.1待離體腸肌穩(wěn)定后，記錄一段正常張力曲線。然后用滴管加ACh（10-4mol/L）2滴于浴槽內，觀察并記錄其張力曲

5、線，然后立即從排水管放出浴槽內含ACh的臺氏液，然后從側管加入38的新鮮臺氏液，重復2次（每次用針管抽取20mL），以洗去殘余藥物，使之降到無效濃度，再加入與一開始等量的臺氏液。待張力恢復到用藥前的水平后進行下一項實驗。1.2.4.2用滴管加腎上腺素（10-4mol/L）2滴于浴槽內，觀察并記錄其張力曲線，然后按相同步驟處理含腎上腺素的臺氏液。待張力恢復到正常水平后進行下一項實驗。1.2.4.3用滴管加2滴NaOH于浴槽內，觀察并記錄其張力曲線，然后按相同步驟處理含NaOH的臺氏液。待張力恢復到用藥前的水平后進行下一項實驗。1.2.4.4用滴管加2滴HCl于浴槽內（實際操作中因效應不明顯，我們

6、小組最后是加了4滴），觀察并記錄其張力曲線，然后按相同步驟處理含HCl的臺氏液。待張力恢復到正常水平后進行下一項實驗。1.2.4.5將38的臺氏液迅速換成25的臺氏液，觀察并記錄其張力曲線，等待溫度回升張力恢復到正常水平后進行下一項實驗。1.2.4.6用滴管加阿托品2滴于浴槽內，等3min后用滴管加ACh（10-4mol/L）2滴于浴槽內，觀察并記錄其張力曲線，然后按相同步驟處理臺氏液。待張力恢復到正常水平后進行下一項實驗。1.2.4.7關閉電源停止供氧，5min后恢復供氧，觀察并記錄其張力曲線1。2實驗結果 實驗名稱：理化因素和藥物對家兔離體腸肌的作用實驗日期：2016.4.7實驗人員：張伊

7、娜 謝來娣 陳揚揚 龔麗芬 龔青青圖一 各種因素對家兔離體腸肌的作用 圖二 乙酰膽堿對家兔離體腸肌的作用 圖三 腎上腺素對家兔離體腸肌的作用圖像描述：加入2滴乙酰膽堿后，曲線迅速上升， 圖像描述：加入2滴腎上腺素后，曲線逐漸下降 頻率加快，收縮幅度、強度增加，表明小腸平滑 及基線下移。收縮幅度、強度減小，頻率減慢， 肌張力增加，自律性增加。 表明小腸平滑肌張力減小，自律性降低。 圖四 氫氧化鈉對家兔離體腸肌的作用 圖五 鹽酸對家兔離體腸肌的作用圖像描述：加入2滴氫氧化鈉后，曲線呈上升態(tài) 圖像描述：加入4滴鹽酸后，曲線逐漸下降，收縮但略顯不規(guī)則，頻率加快，收縮幅度有所減小、 幅度、強度減小，頻率

8、減慢，表明小腸平滑肌張力強度增加，表明小腸平滑肌緊張性增加，張力增 減小，自律性降低。加，但收縮性降低。 圖六 25臺氏液對家兔離體腸肌的作用圖像描述：替換25臺氏液后，曲線呈下降狀態(tài)，頻率降低，振幅、強度下降，表明小腸平滑肌張力減小，自律性降低。 圖七 阿托品+ACh對家兔離體腸肌的作用圖像描述：加入阿托品后，曲線先稍有下降后又迅速恢復正常，3min后加入ACh，曲線無明顯變化，表明小腸平滑肌張力及自律性沒什么改變。 圖八 缺氧對家兔離體腸肌的作用圖像描述：停止氧供后，曲線瞬間上升，頻率和幅度增強，后來頻率和幅度略微有所減小，表明缺氧早期小腸平滑肌張力及自律性增強，晚期減弱。通氣后頻率先降低

9、又逐漸恢復正常。3實驗討論3.1乙酰膽堿對家兔離體腸肌的作用 在浴槽中加入2滴乙酰膽堿后，可見離體腸管活動增強，曲線上升，收縮頻率變快，幅度和強度增加。出現上述現象的機理，認為與消化道平滑肌細胞產生動作電位的離子基礎是Ca2+的內流有關。乙酰膽堿可與肌膜上的M受體結合，使得兩類通道開放：一類為電位敏感性Ca2+專用通道，另一類為特異性受體活化Ca2+專用通道。前一類通道對ACh敏感，小劑量ACh即引起開放；后一類通道對ACh相對不敏感，只有大劑量ACh才會引起開放。這兩類通道開放都使得肌漿中Ca2+增高，進而激活肌纖蛋白肌凝蛋白ATP系統(tǒng)，使平滑肌收縮，肌張力增加。3.2腎上腺素對家兔離體腸肌

10、的作用 在浴槽中加入2滴腎上腺素后，可見離體腸管活動減弱，曲線下降，收縮頻率變慢，幅度和強度減小。出現上述現象的機理，目前認為與腸肌細胞膜上存在和兩種受體有關，而受體又可分為1和2受體兩種亞型。受體又分為1、2和3受體三種亞型2。腎上腺素作用于2受體，引起腸肌膜上一種特異性受體活化，使K+外流增多，細胞膜發(fā)生超極化，腸肌興奮性降低，肌張力下降。同時，腎上腺素還作用于受體，一方面它的激活引起腸肌細胞膜中的cAMP合成增多，cAMP激活腸肌膜及肌漿網上Ca泵活動，使肌漿上Ca2+濃度降低，亦使肌張力降低；另一方面受體激活后還促使K+及Ca2+外流增加，加速膜的超極化，促進了腸肌肌張力的降低。3.3

11、氫氧化鈉對家兔離體腸肌的作用 小腸的 PH約為 7.08.0,過高或過低的PH都會影響腸肌的收縮。在浴槽中加入2滴NaOH后，使臺氏液的 PH值剛好處于 7.08.0之間，處于腸肌收縮的最適PH，因此可觀察到腸肌運動加強，曲線呈上升態(tài)但略顯不規(guī)則，頻率加快，強度增加。但亦有實驗結果發(fā)現加入NaOH后腸肌收縮減弱，或先抑制后興奮等。這可能與以下兩種說法有關：1.如果NaOH對小腸肌理化環(huán)境影響的結果與小腸正常所處的堿性環(huán)境一致，會使細胞內酶的活性增高從而使肌張力增強；過堿則使肌張力減弱，因為不是小腸的適宜生活環(huán)境。2.NaOH在增強堿性環(huán)境的同時，可改變肌膜對離子的通透性，增加了胞外Na+的濃度

12、從而使Na+的內流增強，從而促進了細胞內貯存的Ca+大量釋放3。3.4鹽酸對家兔離體腸肌的作用 在浴槽中加入4滴HCl后（我們小組加入2滴HCl發(fā)現現象不明顯，因此改加4滴），臺氏液的 PH低于腸肌的最適PH范圍，可見腸肌收縮減弱。出現上述現象的機理，細胞外 H+升高時，Ca2+通道的活性受到抑制，使得Ca2+內流減少；同時可干擾肌肉的代謝和肌絲滑行的生化過程，H+能與Ca2+競爭鈣調蛋白的結合位點而使肌球蛋白ATP酶活性降低，使肌原纖維對Ca2+的敏感性和Ca2+從肌質網的釋放量減少。3.5低溫對家兔離體腸肌的作用 38的臺氏液替換25后，可見腸肌收縮減弱，曲線呈下降狀態(tài)，頻率降低，振幅、強

13、度下降。腸肌運動最適宜的溫度在37.5+0.5范圍，高于或低于該溫度都會影響結果。當溫度降到25時，酶活性降低，各離子通道開放數量減少，從而使腸管興奮性下降。3.6阿托品+ACh對家兔離體腸肌的作用 當加入阿托品時，離體腸管所對應的曲線先稍有下降后趨于正常，下降是因為阿托品作為平滑肌肌膜上M受體拮抗劑與M受體結合了，影響了遞質作用于M受體，從而影響了沖動的傳導，導致了收縮降低。后來在滴加阿托品3min后再滴加乙酰膽堿，乙酰膽堿不能與小腸平滑肌肌膜上的M受體結合，就不能引起小腸平滑肌的興奮性效應，所以曲線仍然正常。3.7缺氧對家兔離體腸肌的作用 停止氧供后，曲線瞬間上升，頻率和幅度有略微增強，后

14、來頻率和幅度略微有所減小，通氣后又逐漸恢復正常。出現上述現象的機理可能是由于缺氧，腸肌運動得不到能量供給，故腸肌運動在缺氧開始一段時間代償性升高；由于ATP有限，故隨后運動張力和收縮幅度減弱?；謴脱豕┖螅c肌得到能量供給，代償運動消失，故造成腸肌收縮活動短暫降低，由于ATP供應恢復正常，故隨后逐漸恢復正常。4實驗結論 一定濃度乙酰膽堿、NaOH可促進腸肌的運動，原因是乙酰膽堿可與肌膜上的M受體結合，使得相應離子通道開放，肌漿中Ca2+增高，而一定濃度的堿性環(huán)境使得腸肌收縮處于最適PH；一定濃度的腎上腺素、HCl以及低溫會抑制腸肌的運動，原因是腎上腺素主要作用于2受體，使K+外流增多，細胞膜發(fā)生超極化，腸肌興奮性降低。同時H+增多使腸肌收縮偏離其最適PH。低溫會抑制