一步一步教你讀流式圖：凋亡和壞死的區(qū)別

1、-作者xxxx-日期xxxx一步一步教你讀流式圖：凋亡和壞死的區(qū)別【精品文檔】一步一步教你讀流式圖：凋亡和壞死的區(qū)別2008-08-05 00:00 來源：丁香園 點(diǎn)擊次數(shù)： 841 關(guān)鍵詞： 流式圖 調(diào)亡 壞死 區(qū)別 分享到： 收藏夾 騰訊微博 新浪微博 開心網(wǎng)下圖為壞死圖。壞死的位于G0/G1峰前的峰形為從左至右的反拋物線形。如下： 而APOptosis則是一個(gè)較為對稱的峰。如下：.而有時(shí)凋亡和壞死同時(shí)存在。如下圖：藍(lán)色的為apo峰（第一個(gè)三角），而白色的為壞死峰。第二個(gè)三角為G0/G1峰。第三個(gè)為異倍體G0/G1峰。 實(shí)際上，很多時(shí)候我們誘導(dǎo)的凋亡峰不像上圖那樣明顯，如下：原因要從實(shí)驗(yàn)的

2、原理開始，到細(xì)胞狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)步驟，試劑效能等，一一分析。例如，某因素誘導(dǎo)的凋亡需要較長時(shí)間，而我們培養(yǎng)時(shí)間還沒到，就有可能不出凋亡峰；或是在早期凋亡是用PI染色做SUB-G1，凋亡率會(huì)不高，而用API法則更好地測出其凋亡率。編輯： famsking 一步一步教你讀流式圖：凋亡誘導(dǎo)2008-08-05 00:00 來源：丁香園 點(diǎn)擊次數(shù)： 978 關(guān)鍵詞： 流式圖 教程 調(diào)亡誘導(dǎo) 分享到： 收藏夾 騰訊微博 新浪微博 開心網(wǎng)先發(fā)一張關(guān)于PI染色的uv誘導(dǎo)凋亡的圖片，這是con：這是誘導(dǎo)凋亡的流式圖，我們稱之為sampl：那么怎么看這兩張圖呢？首先，我們要知道各個(gè)參數(shù)的意義。這在流式原理中有介紹。然

3、后，我們要知道各個(gè)圖之間的聯(lián)系。大家看一下下面的圖。R1主要代表粘連細(xì)胞R2主要代表G2/M期細(xì)胞R3主要代表G0/G1期細(xì)胞R4主要代表s期細(xì)胞R5主要代表凋亡細(xì)胞“主要”是因?yàn)榇蠹铱梢钥吹皆O(shè)的gate后各個(gè)gate中的細(xì)胞有位置重疊。FL2-W/FL2-A和FL2-A/COUNT之間的關(guān)系。這兩張圖的最大區(qū)別在于G0/G1期前面的亞G1峰。這個(gè)峰就是FL2-W/FL2-A圖上的左下方的“小尾巴”，小尾巴越大，SUB-G1峰就越高。也就是說凋亡的越多。當(dāng)然這需要跟整張圖比較，就是選取mark后測量其gate%。編輯： famsking 一步一步教你讀流式圖：表型CD4CD82008-08-0

4、5 00:00 來源：丁香園 點(diǎn)擊次數(shù)： 927 關(guān)鍵詞： 表型CD4CD8 流式圖 教程 分享到： 收藏夾 騰訊微博 新浪微博 開心網(wǎng)大鼠外周血T細(xì)胞CD亞群CD4/CD8比值所做的流式分析圖右上角的圖片是CD4和CD8的雙熒光檢測。右下象限是CD8單陽性，左上是CD4單陽，右上為二者雙陽，左下為雙陰。比例如圖。剩下的二圖為CD4、CD8直方圖。實(shí)際上用剛才的雙標(biāo)也可以看出比例來。R1為淋巴細(xì)胞群體，是您的目的細(xì)胞群體，針對這一群細(xì)胞進(jìn)行分析！ 一步一步教你讀流式圖：sub-G1凋亡圖2008-08-05 00:00 來源：丁香園 點(diǎn)擊次數(shù)： 1851 關(guān)鍵詞： 流式圖 sub-G1凋亡圖

5、教程 分享到： 收藏夾 騰訊微博 新浪微博 開心網(wǎng)凋亡都比較多，但遺憾的是與G1峰分得不是很開，因此，Modfit分析的時(shí)候，會(huì)根據(jù)結(jié)果用統(tǒng)計(jì)學(xué)原理將它們分為Apo和G1，但這樣可能掩蓋真正的結(jié)果！建議做PI染色的時(shí)候，在PBS洗兩次后，加入PC buffer，這是一種輕破膜劑，可以使斷裂成小片斷的DNA出細(xì)胞而降低其在FL2-Ad上的值，這樣就容易區(qū)分G1和APO了。凋亡誘導(dǎo)，左邊為對照，右邊為凋亡組對照很好，cv值不錯(cuò)，凋亡率控制得也不錯(cuò)！凋亡非常明顯，而且峰也很漂亮。唯一的美中不足就是凋亡峰的位移稍低，如能用PC buffer 輕破膜，效果將更漂亮！請查閱cnki中關(guān)于Sub-G1法測凋

6、亡的關(guān)于PC buffer的使用方法（作者：龔建平 關(guān)鍵字：Sub-G1查），將對實(shí)驗(yàn)有很大幫助！細(xì)胞周期分析,modifit ,不知凋亡細(xì)胞為什么沒和G1期分開?右圖為對照，左圖實(shí)驗(yàn)組作者用的是muticycle，所以不太能確定。但是不管是哪家的軟件，都是按一定的數(shù)學(xué)模型（公式）結(jié)合數(shù)據(jù)進(jìn)行模擬，所以在數(shù)據(jù)分布不夠典型的時(shí)候是會(huì)產(chǎn)生很大誤差的。就像你的結(jié)果，我根據(jù)經(jīng)驗(yàn)判斷是modfit強(qiáng)行進(jìn)行subG1計(jì)算，其實(shí)算進(jìn)去的基本上都不是凋亡細(xì)胞，但是它沒有模糊概念，生硬地套用了subG1的模擬方程，所以才有“subG1”的出現(xiàn)。如果你對sample只進(jìn)行one cycle模擬，結(jié)果會(huì)不一樣的。建議，除非su