農(nóng)殘快速檢測(cè)培訓(xùn)資料

1、農(nóng)殘快速檢測(cè)培訓(xùn)資料一、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)抽樣技術(shù)采樣是選取有代表性的果蔬樣品。應(yīng)根據(jù)樣本種類(lèi)實(shí)際情況確定 采樣方法，通常有隨機(jī)法、對(duì)角線(xiàn)法、五點(diǎn)法、“ Z”形法、“ S”形 法、棋盤(pán)式法、交叉法等。應(yīng)避免采有病、過(guò)小或未成熟的樣本。取 樣本時(shí)，需在植株各部位（上、下、內(nèi)、外、向陽(yáng)和背陰面）采取。 擦去表面泥土或洗凈后待檢測(cè)。1.1采樣的總體原則“一三五”原則：“一”即一個(gè)樣品一個(gè)袋子，獨(dú)立包裝；“三”即茄果瓜類(lèi)等大果型蔬菜至少采不同地方的三個(gè)；“五”即葉菜類(lèi)蔬菜至少采不同地方五棵。1.2檢測(cè)時(shí)要從每棵蔬菜上取樣具體的取樣方法 葉菜類(lèi)：青菜、小青菜、菜心、菜莧、米莧、生菜、菠菜、 蕹菜、大白菜

2、、杭白菜、黃芽菜、空心菜、娃娃菜、雞毛菜、油麥菜、 塔菜、芥蘭、草頭、紫角葉、薺菜、蓬蒿、黃心菜、甘藍(lán)、卷心菜、 牛心菜、菊花菜、芹菜、美芹、水芹、黃心芹、香菜、豆苗、金絲芥、 芥菜、馬蘭、韭菜、韭黃、大蔥、小蔥、大蒜、蒜苗、洋蔥等；葉菜類(lèi)取1克樣品時(shí)，不易太碎，以葉為主。蔥蒜等特殊菜注意 假陽(yáng)性，樣品比對(duì)是用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照庫(kù)。 花菜類(lèi)：花菜、白花菜、青花菜等；花菜類(lèi)選取3棵樣品，取葉1克（1厘米長(zhǎng)寬，不要剪的太碎）。 果菜類(lèi)：茄子、番茄、青茄、紅茄、辣椒、尖椒、甜椒、杭 椒、青椒、黃瓜、西葫蘆、冬瓜、瓠瓜、苦瓜、絲瓜、南瓜、節(jié)瓜、金瓜、佛手瓜、豇豆、刀豆、蕓豆、扁豆、白扁豆、毛豆、蠶豆、豌 豆、荷

3、蘭豆等；果菜類(lèi)可以采取順皮削取1克的方法。具體用帶刮皮器的水果刀 順皮削下一片，然后切成1厘米左右見(jiàn)方碎片。 食用菌：蘑菇、香菇、平菇、袖珍菇、金針菇、茶樹(shù)菇等；食用菌類(lèi)可以采取整株浸泡的方法。二、農(nóng)殘快速檢測(cè)過(guò)程的關(guān)鍵控制點(diǎn)2.1標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施的必要性我國(guó)是農(nóng)藥使用的第一大國(guó)（年使用量100萬(wàn)噸以上），由農(nóng)藥殘 留引起的食物中毒事故屢有發(fā)生，這主要分為在蔬菜、瓜果上使用高 毒農(nóng)藥后，短時(shí)間內(nèi)采摘和食用所引起的急性中毒事故和農(nóng)藥殘留量 超過(guò)最高允許限量（MRL值），長(zhǎng)期食用引起的慢性中毒兩種。由于 農(nóng)藥品種結(jié)構(gòu)不合理，加上一些人為不合理的使用，以及農(nóng)藥殘留監(jiān) 管力度不夠，致使我國(guó)農(nóng)藥殘留問(wèn)題比較突出

4、。農(nóng)殘超標(biāo)的主要原因：一是生產(chǎn)者不嚴(yán)格按農(nóng)藥安全使用準(zhǔn)則的 要求進(jìn)行生產(chǎn)，使用違禁農(nóng)藥或使用量和安全期掌握不好。二是施藥 器具噴灑的均勻性欠佳，易導(dǎo)致局部給藥超量所致。由于咼毒、咼殘留的有機(jī)磷農(nóng)藥如：對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、樂(lè)果、 氧樂(lè)果、敵敵畏及甲胺磷等占據(jù)了殺蟲(chóng)劑產(chǎn)量的70%以上，并且其中 70%以上的中毒事故都是由有機(jī)磷農(nóng)藥引起的。2.2標(biāo)準(zhǔn)操作的可行性酶抑制法是研究最多且相對(duì)成熟的一種對(duì)部分農(nóng)藥進(jìn)行殘留快 速檢測(cè)技術(shù)。酶抑制法是利用有機(jī)磷與氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥可特異性地 抑制昆蟲(chóng)中樞和周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酯酶 （AChE）的活性，破壞神 經(jīng)的正常傳導(dǎo)，使昆蟲(chóng)中毒致死這一毒理學(xué)原理，將AChE

5、與樣品反 應(yīng)，根據(jù)AChE活性受到抑制的情況，可判斷出樣品中是否含有有機(jī) 磷與氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥。為了提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確度，將提取液 用比色法進(jìn)行分析，從而研制出各種農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀。 殘留農(nóng)藥 對(duì)乙酰膽堿酯酶活性有抑制，濃度越高，抑制率越高。儀器通過(guò)測(cè)定 酶與底物、顯色劑顯色反應(yīng)變色速率，并與空白對(duì)照比較求得酶抑制 率，從而判定農(nóng)藥殘留量是否超標(biāo)。2.4檢測(cè)過(guò)程的關(guān)鍵控制點(diǎn) 檢測(cè)過(guò)程中溫度與提取時(shí)間對(duì)結(jié)果的影響以生菜為樣品，通過(guò)檢測(cè)不同溫度、不同提取時(shí)間，所得到的抑 制率來(lái)判斷最佳環(huán)境條件，樣品的提取溫度在 10- 30C范圍抑制率變 化較小，高于30C時(shí)抑制率有所降低，而靜置制備樣品提

6、取時(shí)間達(dá)6分鐘后，抑制率不再增加。 關(guān)鍵點(diǎn)假陽(yáng)性的控制假陽(yáng)性的產(chǎn)生：一方面，由于各蔬菜品種間（如：蔥蒜類(lèi)、香菜、 韭菜等容易出現(xiàn)假陽(yáng)性的蔬菜） 對(duì)檢測(cè)抑制率有不同干擾和影響， 使 一般的快速檢測(cè)方法難以區(qū)分與農(nóng)殘抑制作用的比例關(guān)系容易造成 誤判（假陽(yáng)性）；另一方面，因色素的干擾可能影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確 性。當(dāng)待測(cè)樣品的色素（如：葉綠素、胡蘿卜素等）含量較高時(shí)，會(huì) 使測(cè)得的透過(guò)率非常低，從而造成對(duì)吸光度隨時(shí)間變化值計(jì)算的錯(cuò) 誤，影響檢測(cè)結(jié)果的可靠性。果蔬農(nóng)藥殘留比對(duì)數(shù)據(jù)庫(kù)：2004年，上海博納新技術(shù)研究所 與農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督和檢測(cè)中心 （北京）及中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)藥殘 留與環(huán)境毒理教研室共同合作，

7、依據(jù) GB/T5009.199-2003的標(biāo)準(zhǔn)，在 CL-B皿農(nóng)殘快速測(cè)定儀的基礎(chǔ)上成功研發(fā)了 果蔬農(nóng)藥殘留比對(duì)數(shù)據(jù) 庫(kù)，初步解決了應(yīng)用“酶抑制率法+分光光度法”檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留時(shí)存在的部分“檢測(cè)盲區(qū)”， 在一定程度上避免了 檢測(cè)結(jié)果的假陽(yáng)性，并實(shí)現(xiàn)了檢測(cè)過(guò)程中對(duì)吸收光譜的自動(dòng)校準(zhǔn)。利用這一科研成果，可使非專(zhuān)業(yè)人員能較快掌握相應(yīng)的操作技能，從而達(dá)到復(fù)雜原理與簡(jiǎn)易操作的有機(jī)統(tǒng)一。如何處理和避免假陽(yáng)性？A. 由于果蔬細(xì)胞液中存在有抑制膽堿酯酶的物質(zhì)，在檢測(cè)取樣 時(shí)，最好不要將果蔬樣品切的太碎，以免果蔬細(xì)胞液流入檢測(cè)液中， 影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。B. 大多果蔬由于剪得太碎，或浸提時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，使

8、得提取的樣品 溶液中，含有較多葉綠素，干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。C. 韭菜、生姜、蔥、辣椒、胡蘿卜等蔬菜中，含有破壞酶活性 的物質(zhì)，處理這類(lèi)樣品時(shí)，必要時(shí)可采取整株蔬菜浸提。D. 用CL-B皿殘留農(nóng)藥測(cè)定儀的軟件中，“保存對(duì)照”和“裝入對(duì)照”的功能，我們能分別建立相應(yīng)果蔬品種的空白對(duì)照庫(kù)。 并能用 相應(yīng)果蔬品種的空白對(duì)照同該果蔬品種的樣品進(jìn)行測(cè)定。 這樣就有可 能對(duì)如：韭菜、生姜、蔥、辣椒、胡蘿卜等蔬菜進(jìn)行更好地檢測(cè)。三、使用農(nóng)殘儀的注意事項(xiàng)與故障排除3.1 儀器的維護(hù)、保養(yǎng) 存放儀器的地方必須保持干燥、防塵、防振動(dòng)。 儀器內(nèi)部通道應(yīng)保持干凈，無(wú)灰塵，若有污物，可用棉質(zhì)物 拭凈。 儀器操作時(shí)，必須

9、注意比色皿通光面不能受到手指或油跡等 污染，如有污物或液體可用過(guò)濾紙檫凈。 儀器所配套的各個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目所需的輔助設(shè)備、檢測(cè)試劑和檢 測(cè)用品器具。每次檢測(cè)完畢后，應(yīng)注意進(jìn)行維護(hù)和保管 禁止在儀器DC輸入孔插入非本公司配套的其他電源。 儀器使用前必須先仔細(xì)閱讀儀器使用說(shuō)明書(shū)，根據(jù)說(shuō)明書(shū)上的操作步驟進(jìn)行操作。如儀器出現(xiàn)不正?，F(xiàn)象時(shí)，應(yīng)通知銷(xiāo)售商或送 到特約維修點(diǎn)維修。用戶(hù)不得自行拆卸修理，否則將影響銷(xiāo)售商按照 儀器維修條款提供優(yōu)質(zhì)服務(wù)。3.2常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法1儀器開(kāi)機(jī)，為什么液晶屏不亮？解決方法：檢查電壓如果高于220V,則儀器及其穩(wěn)壓電源可能被 燒壞，請(qǐng)更換穩(wěn)壓電源；若更換穩(wěn)壓電源后，仍然無(wú)法開(kāi)機(jī)

10、，請(qǐng)將儀 器寄送回我公司修理。2. 聯(lián)機(jī)操作調(diào)0/100時(shí)，無(wú)紅線(xiàn)，軟件為何顯示“沒(méi)有檢查到指 定的設(shè)備，請(qǐng)檢查儀器連接”？解決方法：首先檢查儀器與電腦間的數(shù)據(jù)線(xiàn)是否連接好。若連接正常，請(qǐng)檢查儀器是否調(diào)整為“受控工作模式”，然后在食品質(zhì)量安全檢測(cè)軟件中的設(shè)備設(shè)置中，選擇相應(yīng)的儀器型號(hào)。如果還是不行， 則換一臺(tái)電腦試試，有可能是電腦的串口出故障。3. 在調(diào)0和100后為何會(huì)出現(xiàn)“您調(diào)0/100有誤”，出現(xiàn)800或是 更高的紅線(xiàn)？解決方法：確認(rèn)是否在調(diào)0時(shí)放入黑塊，黑塊拿出時(shí)調(diào)100;另外 不要在0到100或是100到0的變化過(guò)程中，按下0/100鍵。4. 調(diào)0/100時(shí)，按下0鍵，或100鍵后，

11、紅線(xiàn)為什么不馬上變?yōu)? 或 100?解決方法：這種現(xiàn)象是正常的，要在調(diào) 0/100按“結(jié)束分析”鍵 后，重新點(diǎn)擊“開(kāi)始對(duì)照分析”鍵，才會(huì)看到0線(xiàn)和100線(xiàn)的數(shù)值變?yōu)?0或 100。5. 調(diào)0/100時(shí)，數(shù)據(jù)曲線(xiàn)總是為0或其數(shù)值總是在上下飄動(dòng)，無(wú) 法穩(wěn)定，是怎么回事？解決方法：儀器與電腦的數(shù)據(jù)采集線(xiàn)是否連接好； 正常聯(lián)接排除 后有可能是比色池中的燈泡老化，需要更換燈泡。6. 在使用移液槍時(shí)要注意哪些問(wèn)題？A. 在加入不同的試劑時(shí)，一定要用不同的槍頭。B. 在取出試劑后，要檢查槍頭內(nèi)的試劑有無(wú)氣泡。C. 在向試管內(nèi)加入試劑時(shí)，要保證槍頭與液面垂直，并將試劑全 部加入溶液中，而沒(méi)有在留在試管壁上。7

12、. 為什么在第一檢測(cè)儀中做完對(duì)照后，在第二檢測(cè)儀中做不出 樣品測(cè)試，總是讓重做對(duì)照測(cè)試？解決方法：檢查其它通道中是否裝入對(duì)照樣例， 點(diǎn)擊“裝入對(duì)照 樣例”，選擇相應(yīng)通道，點(diǎn)擊“讀取”。8為什么做空白對(duì)照時(shí)紅線(xiàn)的起始值很低？解決方法：在做標(biāo)準(zhǔn)溶液配置時(shí)，加完底物后晃動(dòng)試管并將溶液 倒入比色皿后快速放入比色池，不要過(guò)很長(zhǎng)時(shí)間后再放。檢查比色皿 是否由于清潔而影響其透光率，更換新的比色皿或者把不干凈的比色 皿放到酒精中浸泡4-5小時(shí)，然后用棉球?qū)⑵洳潦酶蓛簟?. 怎樣的對(duì)照才是正常的對(duì)照？解決方法：一般看對(duì)照的差值，檢測(cè)的時(shí)間為 3分鐘，則差值應(yīng) 該大于8,如果差值偏小達(dá)不到要求，貝卩表明試劑中有一

13、樣或幾樣過(guò) 期，無(wú)法使用。10. 如果試劑過(guò)期，如何判斷是什么試劑過(guò)期？此問(wèn)題分幾種情況A. 當(dāng)對(duì)照結(jié)束后，對(duì)照溶液的顏色沒(méi)有什么變化，則表明有可能是酶試劑過(guò)期。B. 當(dāng)加入底物后，對(duì)照溶液一下子變?yōu)樯铧S色，則表明有可能 是底物過(guò)期。C. 如果換過(guò)一瓶新酶，依然出現(xiàn) A中的現(xiàn)象，則有可能是顯色 劑過(guò)期。11. 為什么要使用標(biāo)樣庫(kù)及如何正確使用。每種蔬菜都有自己特殊的一種化合物，該化合物對(duì)酶的作用和農(nóng) 藥對(duì)酶的作用是類(lèi)似的，即：會(huì)抑制酶的活性。有些蔬菜本身對(duì)酶的 活性的抑制作用比較強(qiáng)，而有些則較弱。在所有的蔬菜中有刺激性氣 味的蔬菜對(duì)酶活性的抑制作用是比較強(qiáng)的， 為更好的消除這種來(lái)自蔬 菜本身的

14、影響，上海博納新技術(shù)研究所和中國(guó)農(nóng)大合作開(kāi)發(fā)來(lái)該標(biāo)準(zhǔn) 對(duì)照庫(kù)，也是全國(guó)唯一一家有此對(duì)照庫(kù)的廠家。A. 做一標(biāo)準(zhǔn)的空白對(duì)照，并且進(jìn)行保存。B. 按“裝入對(duì)照樣例”鍵，打開(kāi)對(duì)照數(shù)據(jù)庫(kù)，在選擇“標(biāo)準(zhǔn)對(duì) 照庫(kù)”。C. 在對(duì)照上半部分選擇當(dāng)天做的空白對(duì)照。D. 在對(duì)照庫(kù)下半部分選擇所做蔬菜的修正對(duì)照。E. 在對(duì)照庫(kù)的右上角出選擇所要用的通道，并在通道號(hào)前打V 。F. 在對(duì)照庫(kù)的右下角處按“讀取”鍵完成轉(zhuǎn)入工作。12. 為什么做樣品分析時(shí)會(huì)出現(xiàn)“采樣點(diǎn)透過(guò)率太小”？解決方法：檢查是否在做樣品分析的時(shí)，加入底物后時(shí)間過(guò)的較 長(zhǎng)才進(jìn)行樣品分析。是否樣品本身的沉淀物和雜質(zhì)含量較多， 樣品本 身的色素干擾作用，是

15、否品種為假陽(yáng)性一一用濾紙或其他方式進(jìn)行過(guò) 濾，在“系統(tǒng)設(shè)置”菜單中選種“自動(dòng)修正色素干擾的檢測(cè)結(jié)果”，選擇樣品比對(duì)庫(kù)13. 樣品檢測(cè)值為何總是偏大？此問(wèn)題有數(shù)種可能，請(qǐng)分別檢查下面的步驟是否正確：A. 沒(méi)有做空白對(duì)照，或用來(lái)以前的空白對(duì)照。B. 在做樣品溶液時(shí)，菜葉剪得太碎，以至于檢測(cè)液顏色較深。 建議菜葉大小為1厘米平方。C. 檢測(cè)液中有懸浮物或渾濁物，使光線(xiàn)無(wú)法正常通過(guò)比色皿， 建議過(guò)濾后再檢測(cè)。D. 試劑加入的順序錯(cuò)誤，或漏加某個(gè)試劑。試劑加入的順序一 定是：酶，顯色劑，底物。E. 比色皿污濁或放入方位錯(cuò)誤，使光線(xiàn)無(wú)法通過(guò)比色皿。F. 比色皿外表有水滴使樣品曲線(xiàn)不正常。14. 樣品檢測(cè)值

16、為何總是偏小。此問(wèn)題有數(shù)個(gè)可能，請(qǐng)分別檢查下面的步驟是否正確：A. 沒(méi)有調(diào)0和100。B. 制作樣品檢測(cè)液時(shí)，靜止等待的時(shí)間不夠 15分鐘。C. 加入酶和顯色劑后等待的時(shí)間不夠15分鐘。15. 為什么在做完樣品測(cè)試后，電腦沒(méi)有直接跳出檢測(cè)結(jié)果？ 解決方法：“系統(tǒng)設(shè)置”菜單中不要選種的“檢測(cè)完成后自動(dòng)保存檢測(cè)結(jié)果”，如選種，檢測(cè)結(jié)果就需要在“統(tǒng)計(jì)匯總”菜單下的 “自動(dòng)保存檢測(cè)數(shù)據(jù)”一欄查看。16. 為什么在數(shù)據(jù)保存時(shí)會(huì)出現(xiàn)“無(wú)法修復(fù)與壓縮數(shù)據(jù)”？解決方法：由于數(shù)據(jù)庫(kù)文件出現(xiàn)損壞，需要重新安裝軟件。平時(shí) 在做數(shù)據(jù)的過(guò)程中盡量多進(jìn)行備份，以免數(shù)據(jù)丟失。17. 為什么會(huì)出現(xiàn)“本機(jī)時(shí)間快于服務(wù)器時(shí)間”，

17、從而導(dǎo)致數(shù)據(jù)無(wú)法上傳?解決方法：把電腦的時(shí)間調(diào)整到服務(wù)器時(shí)間之后，重新進(jìn)行上傳 附表1.不同種類(lèi)農(nóng)藥的濃度（mg/kg）與抑制率（）的關(guān)系序號(hào)農(nóng)藥名稱(chēng)農(nóng)藥濃度和抑制率1敵百蟲(chóng)濃度（mg/kg） 0.050.10.21.02.04.0抑制率（）13.3295373.283.792.32敵敵畏濃度（mg/kg） 0.10.51.02.5516抑制率（%）39.5 48.977.783.287.293.53伏殺磷濃度（mg/kg） 0.53.125 5.07.5101625抑制率（%）7.637.3 43.161.073.281.292.44久效磷濃度（mg/kg） 1.02.03.01015253

18、0抑制率（%）9.723.4 44.856.969.189.993.55蝰硫磷濃度（mg/kg） 1.25 2.55.010152030抑制率（%）16.8 41.6 50.165.379.38196.46馬拉硫磷濃度（mg/kg） 0.51.02.05.0101520抑制率（%）10.3 22.9 37.8 43.160.964.685.37西維因濃度（mg/kg） 0.05 0.10 0.501.02.04.0抑制率（%）2.640.5 50.6 58.176.094.08二硫磷濃度（mg/kg） 0.51.02.53.03.2抑制率（）13.854.370.389.093.79乙硫磷濃度

19、（mg/kg） 1.02.03.0102040抑制率（%）5.518.9 45.858.378.488.410氧化樂(lè)果濃度（mg/kg） 0.51.02.04.01020抑制率（%）23.739.6 48.065.885.393.411內(nèi)吸磷濃度（mg/kg） 0.10.20.40.50.81.02.5 4.0抑制率（%）18.1 28.3 32.5 40.9 48.0 61.6 81.6 87.312呋喃丹濃度（mg/kg） 0.0020.0040.010.040.10.2抑制率（）18.425.951.885.197.199.913抗蚜威濃度（mg/kg） 0.10.20.51.051020抑制率（%）16.320.631.0 41.259.4 69.3 87.314對(duì)硫磷濃度（mg/kg） 0.10.20.51.02.05.C10抑制率（%）10.320.139.246.357.6 68.9 85.415甲拌磷濃度（mg/kg） 0.051.02.05.01020抑制率（%）13.330.444.358.375.387.616殺撲磷濃度（mg/kg） 0.10.51.02.05.010抑制率（%）6.313.927.260.274.986.617