潔凈室檢測技術

1、潔淨室監(jiān)測與檢測技術鴻圖醫(yī)療器械製造(東莞)有限公司 生物實驗室 黃少芳2011年11月目錄n一、潔凈室的定義和級別1.潔凈室的定義2.潔凈室的級別劃分3.相關標準4.潔淨室技術n二、醫(yī)療器械行業(yè)潔凈室的特點n三、潔凈室的檢測1.概述2.溫濕度目錄3.風速及換氣次數(shù)4.靜壓差5.塵埃數(shù)6.沉降菌數(shù)7.浮游菌數(shù)8.其它技術指標一、潔凈室的定義和級別1.潔凈室的定義潔凈室(區(qū)) clean room (area) 需要對塵粒及微生物含量進行控制的房間（區(qū)域）。其建築結構、裝備及其作用均具有減少對該房間（區(qū)域）內污染源的介入、產生和滯留的功能。室內其它參數(shù)如溫度、濕度、氣壓等，按需要受控。2.潔凈室

2、的級別劃分 一般地說，潔凈室有100級、10000級、100000級、300000級四個級別。 各級別的數(shù)字實際上是代表該級別塵粒最大允許數(shù)量。 舉例如下:100級即每立方英尺(28.3L)空氣中0.5m的塵粒數(shù)不超過100個。轉化成國際單位則為，空氣中0.5m的塵粒數(shù)不超過3500個/m3。 所以，數(shù)字越小則潔凈度級別越高，塵粒最大允許數(shù)量與該數(shù)字成正比。 GB 50591-2010 規(guī)定的級別是5級(100級)、6級(1000級)、7級(10000級)、8級(100000級)等。該規(guī)定是按0.1m的塵粒數(shù)的對數(shù)為級別。部分國際標準對級別表示為N5級等。一、潔凈室的定義和級別2.潔凈室的級別

3、劃分潔凈度級別塵埃數(shù)最大允許數(shù)，個/m3微生物最大允許數(shù)0.5m5m沉降菌數(shù)個/皿浮游菌數(shù)個/ m3100級350001510000級35000020003100100000級350000020000 10500300000級10500000 60000 15-一、潔凈室的定義和級別3.相關標準nYY 0033-2000 無菌醫(yī)療器具生產管理規(guī)范nGB/T 16292-2010 醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測試方法nGB/T 16293-2010 醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法nGB/T 16294-2010 醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法nGB 50457-2008 醫(yī)藥工業(yè)潔

4、凈廠房設計規(guī)范nGB 50591-2010 潔凈室施工及驗收規(guī)范nGB 50333-2002醫(yī)院潔凈手術部建筑技術規(guī)范4.潔淨室技術潔凈室技術潔凈室設計與結構n潔凈室的設計n平面布置n建築材料n動力設施(水,氣)n潔凈室的構造潔凈室測試與監(jiān)測n測試新潔凈室達到設計要求n監(jiān)測潔凈室的狀況潔凈室的運作n人員，設備，材料入場n防止產品污染n潔凈服，包括手套，口罩等n潔凈的清潔和清潔設備。二、醫(yī)療器械行業(yè)潔凈室的特點潔凈室主要功能是控制微粒及微生物的污染。潔凈室按用途可分為兩大類： A.工業(yè)潔凈室:以無生命微粒為控制對象。主要控制空氣塵埃微粒對工作對象的污染，內部一般保持正壓狀態(tài)。它適用于精密機械工業(yè)

5、、電子工業(yè)（半導體、集成電路等）、宇航工業(yè)、高純度化學工業(yè)、原子能工業(yè)、光磁產品工業(yè)（光盤、膠片、磁帶生產）LCD（液晶玻璃）、電腦硬盤、電腦磁頭生產等多行業(yè)。 二、醫(yī)療器械行業(yè)潔凈室的特點B.生物潔凈室：以有生命微粒（細菌）與無生命微粒（塵埃）為控制對象。 醫(yī)院、醫(yī)療器械生產企業(yè)、制藥、食品生產等使用的潔凈室。 醫(yī)院一般更重視有生命微粒（細菌）的控制，醫(yī)療器械生產企業(yè)則必須控制有生命微粒與無生命微粒。 醫(yī)療器械生產企業(yè)潔凈室與工藝布局、設備安裝、人流、物流等關系密切，必須有專業(yè)的技術人員進行管理。三、潔凈室的檢測1.概述A. 潔凈室的檢測包括企業(yè)內部日常檢測和由第三方檢驗機構進行周期檢驗。企

6、業(yè)內部必須每月或每季度進行監(jiān)測，每年應由第三方檢驗機構進行周期檢驗。B. 檢驗可分為動態(tài)測試和靜態(tài)測試，企業(yè)內部日常監(jiān)測一般可以在動態(tài)或靜態(tài)下進行，第三方檢驗機構進行周期檢驗一般應為靜態(tài)測試。C. 測試范圍一般應包括二更、緩沖間、潔凈走廊等。（省局2010年5號文）D. 測試應在淨化空氣調節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于10min后 進行。三、潔凈室的檢測2.溫濕度A. 可以使用各種計量合格的溫濕度計進行測試。檢測儀表的小刻度溫度不宜高于0.4，濕度不宜高于2%。B. 測點可在送/回風口處或在恒溫恒濕工作區(qū)具有代表性的地點布置。C.人體呼出氣體含有大量水蒸氣，測試人員靠近測試儀器會使?jié)穸茸x數(shù)偏大。D.

7、 如果濕度偏高，應利用空調系統(tǒng)除濕，空調系統(tǒng)冷卻水溫度降低則除濕能力明顯增強。E.如果濕度偏小，則應使用加濕機增加濕度。F.在絕對含水量不變的情況下，溫度上升則相對濕度下降。反之亦然。G. GB 50591-2010規(guī)定，必須在系統(tǒng)運行至少8h（無恒溫恒濕）、 12h（恒溫恒濕）才能檢測。三、潔凈室的檢測3.風速和換氣次數(shù)A. 對于層流潔凈室，采用截面平均風速和截面積乘積的方法確定送風量；對于垂直層流潔凈室，測定截面取距離地面0.8m的水平截面；對于水平層流潔凈室，測定截面取距離送風面0.5m的垂直截面。截面上測點間距不應大于2m，測點數(shù)應不少于10個，均勻分布，結果取平均值。B.對于亂流潔凈

8、室，采用風口法確定送風量。采用風口截面平均風速和截面積乘積的方法確定送風量。C.換氣次數(shù)=（平均風速送風面積）3600車間體積； 平均風速 m/s，送風面積m2，車間體積m3 ，換氣次數(shù)次/h。D.可以采用風量罩測定送風量。GB 50591-2010規(guī)定風量罩測試方法。三、潔凈室的檢測4.靜壓差A. 為防止外部空氣污染潔淨區(qū)，整個凈化系統(tǒng)需對外界保持一定正壓。不同等級的潔凈室以及潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間的壓差，應不小于 5Pa ，潔凈區(qū)與室外的壓差，應不小于 10Pa 。對兩個不同級別的凈化系統(tǒng)設計了壓力梯度，并在適當位置設置了微壓差計，用于監(jiān)測及控制房間的相對壓差。 B. 相鄰潔凈室之間都要保證

9、有一定的靜壓差，一方面是在門窗緊閉的情況下防止?jié)崈舫潭鹊偷臐崈羰覂鹊目諝庥煽p隙滲入到潔凈程度高的潔凈室內；另一方面在門開啟時，保證有足夠的氣流按正方向流動，以盡量減少由于開門動作和人的進入的瞬時帶來的逆向氣流量，降低污染。一般地說，越往里面壓力應越大，即二更應對一更保持正壓，而一更對外界保持正壓。 C. 靜壓差的測定應在所有的門關閉時進行。D. 對凈化間進行清潔后，應注意各回風口擋板位置保持不變，以保證回風量不改變。三、潔凈室的檢測5.塵埃數(shù)A. 使用儀器一般為粒子計數(shù)器，有光散射型和激光粒子型，流量一般有2.83L/min、 28.3L/min等。 必須按照儀器的檢定周期，定期對儀器作檢定，

10、以保證測試數(shù)據(jù)的可靠性。 儀器開機預熱至穩(wěn)定后，方可按說明書的規(guī)定對儀器進行校正。 采樣管口在采樣點采樣時，測試人員應避免不必要的動作，以免產生測量誤差。在確認計數(shù)穩(wěn)定后方可開始連續(xù)讀數(shù)。 采樣管必須干凈，嚴禁滲漏。在使用一段時間后應對儀器進行自凈。 計數(shù)器采樣口和儀器工作位置應處在同一氣壓和溫度下，以免產生測量誤差。 三、潔凈室的檢測5.塵埃數(shù)B. 空態(tài)，靜態(tài)和動態(tài)三種狀態(tài)均可進行測試。 空態(tài)或靜態(tài)測試時，室內測試人員不得多于2人。測試報告中應標明測試時所采用的狀態(tài)。 對單向流，測試應在凈化空氣調節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于10min后開始。 對非單向流，測試應在凈化空氣調節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少

11、于30min所開始。三、潔凈室的檢測5.塵埃數(shù)C.最少采樣點數(shù)目 塵埃粒子測試最少采樣點數(shù)目設置有兩種選擇方法： 1) NL=A NL-最少採樣點，A-潔淨室的面積，m2 2)最少采樣點數(shù)目可從下表中查到 注：表中的面積，對于單向流潔凈室，指的是送風面積； 對非單向流潔凈室，指的是房間面積。三、潔凈室的檢測最少采樣點數(shù)目三、潔凈室的檢測三、潔凈室的檢測5.塵埃數(shù)D.采樣點的位置 采樣點一般在離地面0.8m高度的水平面上均勻布置。 采樣點多于5點時，也可以在離地面0.8m1.5m高度的區(qū)域內分層布置，但每層不少于5點。 采樣點的布置應根據(jù)產品的生產及工藝關鍵操作區(qū)設置。E.采樣次數(shù)的限定 對任何

12、小潔淨室或局部空氣淨化區(qū)域，采樣點的數(shù)目不得少于2個，總采樣次數(shù)不得少于5次。每個采樣點的采樣次數(shù)可以多於1次，且不同采樣點的采樣次數(shù)可以不同。三、潔凈室的檢測5.塵埃數(shù)F.不同潔淨度級別每次最少的采樣量見下表： 最小采樣量 5m 為8.5L/次，如果使用粒子計數(shù)器流量為2.83L/min，則每次采樣需要3min，最好使用流量為28.3L/min的儀器。 GB 50591-2010 規(guī)定6級（萬級）或優(yōu)于6級的潔凈室應采用不小于28.3L/min的計數(shù)器。三、潔凈室的檢測5.塵埃數(shù)G.采樣注意事項在確認潔凈室溫濕度，送風量和壓差達到要求后，方可進行采樣。對于單向流，計數(shù)器采樣管口朝向應正對氣流

13、方向，對于非單向流，采樣管口宜向上。布置采樣點時，應避開回風口。采樣時，測試人員應在采樣口的下風測。應採取一切措施防止采樣過程的污染。三、潔凈室的檢測5.塵埃數(shù)H. 結果計算懸浮粒子濃度的采樣數(shù)據(jù)應按下述步驟作統(tǒng)計計算：采樣點的平均粒子濃度A=(C1+C2+CN)N式中：A-某一采樣點的平均粒子濃度粒/m3C i-某一采樣點的粒子濃度（i1，2，.，N），粒/m3；N-某一采樣點上的采樣次數(shù)，次。平均值的均值M（A1+A2+.+AL）/L式中：M-平均值的均值，即潔凈室的平均粒子濃度，粒/m3；A i-某一采樣點的平均粒子濃度（i1，2，L），粒/m3；L-某一潔凈室內的總采樣點數(shù)，個。三、潔

14、凈室的檢測5.塵埃數(shù)標準誤差式中：SE-平均值均值的標準誤差，粒/m3；95%置信上限UCLM(tSE)式中：UCL平均值均值的95%置信上限，粒/ m3；t95%置信上限的t分布系數(shù)，見下表:L234567899t6.312.922.352.132.021.941.901.86-三、潔凈室的檢測5.塵埃數(shù)I. 判斷懸浮粒子的潔凈度級別應依據(jù)下述二個條件： 1)每個采樣點的平均粒子濃度必須不大于規(guī)定的級別界限，即Ai級別界限； 2)全部采樣點的粒子濃度平均值均值的95%置信上限必須不大于規(guī)定的級別界限，即UCL級別界限。三、潔凈室的檢測5.塵埃數(shù)J. 不合格原因分析 如果5m 的塵埃數(shù)不合格，

15、但0.5m 的塵埃數(shù)合格，不合格原因可能是環(huán)境清潔問題。檢查地板是否有明顯灰塵。 如果5m 的塵埃數(shù)合格，但0.5m 的塵埃數(shù)不合格，不合格原因可能是泄漏。過濾器破損或安裝不當。三、潔凈室的檢測6.沉降菌數(shù)A.方法概述 本測試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內的活做生物數(shù)，并以此來評定潔凈室的潔凈度。三、潔凈室的檢測6.沉降菌數(shù)B.儀器包括：培養(yǎng)皿，培養(yǎng)基，恒溫培養(yǎng)箱，高壓蒸汽滅菌鍋等。 培養(yǎng)皿，一般采用90mm15mm的棚硅酸玻璃培養(yǎng)皿。也可以采用一次性培養(yǎng)皿。培

16、養(yǎng)基，營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基或其他藥典認可的培養(yǎng)基。 采樣開始前，所有的培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基必須嚴格消毒。三、潔凈室的檢測6.沉降菌數(shù)C.采樣方法 將已制備好的培養(yǎng)皿按要求放置，打開培養(yǎng)皿蓋使培養(yǎng)基表面暴露30min，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。D.培養(yǎng) 采樣結束后，將培養(yǎng)皿倒置于3035培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于48h。（不同標準有差異） 每批培養(yǎng)基應作對照試驗，檢驗培養(yǎng)基本身是否污染。 可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。不得有菌生長。三、潔凈室的檢測6.沉降菌數(shù)E.菌落計數(shù) 用肉眼直接計數(shù)，標記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用510倍放大鏡檢查，有否遺漏。 若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上的菌落重疊

17、，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數(shù)。三、潔凈室的檢測6.沉降菌數(shù)F.注意事項 測試用具要作滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。 采取一切措施防止人為對樣本的污染。 對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。 由于細菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)血背面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。 采樣前應仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質量，如發(fā)現(xiàn)變質、破損或污染的應剔除。三、潔凈室的檢測6.沉降菌數(shù)G.采樣點數(shù)目及其布置沉降菌的最少采樣點數(shù)可參照懸浮粒子布置。 但100級最少要14點。100級凈化工作臺需要14個培養(yǎng)皿。H.采

18、樣點的位置可以同懸浮粒子測試點。 工作區(qū)采樣點的位置離地0.81.5m左右。 可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加采樣點。 每個點一般采樣一次，采樣時應儘量避免塵粒較集中的回風口。 應采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對樣本的污染。三、潔凈室的檢測6.沉降菌數(shù)I. 測試報告中應記錄房間溫度、相對濕度、壓差及測試狀態(tài)。J. 用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。用平均菌落數(shù)判斷潔凈室空氣中的微生物。潔凈室內的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評定標準。若某潔凈室內的平均菌落數(shù)超過評定標準，則必須對此區(qū)域先進行消毒，然后重新采樣兩次，兩次測試結果合格才能判定為符合。三、潔凈室的檢測7.浮游菌數(shù)A.方法概

19、述 本方法采用計數(shù)濃度法，即通過收集懸游在空氣中的生物性粒子于專門的培養(yǎng)基，經若干時間，在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境內單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。三、潔凈室的檢測7.浮游菌數(shù)B.所用的儀器、設備和培養(yǎng)基： 浮游菌采樣器 培養(yǎng)皿 培養(yǎng)基 恒溫培養(yǎng)箱三、潔凈室的檢測7.浮游菌數(shù)C.浮游菌采樣器 浮游菌采樣器宜采用撞擊法機理的采樣器，一般采用狹縫式采樣器或離心式采樣器。 采用的浮游菌采樣器必須要有流量計和定時器。 空氣采樣量根據(jù)需要選定。已知采樣器的流量（L/min），設定采樣時間（min），兩者相乘即采樣量（L）。三、潔凈室的檢測

20、7.浮游菌數(shù)C.浮游菌采樣器 狹縫式采樣器由附加的真空抽氣泵抽氣，通過采樣器的縫隙式平板，將采集的空氣噴射并撞擊到緩慢旋轉的平板培養(yǎng)基表面上，附著的活微生物粒子經培養(yǎng)后形成菌落，予以計數(shù)。三、潔凈室的檢測7.浮游菌數(shù)D.注意事項 采樣器、培養(yǎng)皿固定裝置等每次更換采樣前都應消毒。 采樣管嚴禁滲漏，內壁應光滑。 采樣管的長度應根據(jù)測點的高度定，盡量減少彎曲。三、潔凈室的檢測7.浮游菌數(shù)E.狹縫式采樣器一般采用150mm15mm、90mm15mm、65mm15mm三種規(guī)格的硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。可根據(jù)所選用采樣器選擇合適的培養(yǎng)皿。 離心式采樣器采用專用的固形培養(yǎng)條。 培養(yǎng)基可采用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，大豆酪蛋

21、白瓊脂培養(yǎng)基或其他藥典認可的培養(yǎng)基。三、潔凈室的檢測7.浮游菌數(shù)F. 測試前儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴格消毒。 采樣器進入被測房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用于100級潔凈室的采樣器宜一直放在被測房 間內。 采樣前，先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉盤以及罩子的內外面，采樣結束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內壁和轉盤。 采樣儀器經消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開啟儀器使儀器上的殘餘消毒劑蒸發(fā)，時間不少于5min。 關閉儀器，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子，置采樣品于采樣點后開啟儀器進行采樣。三、潔凈室的檢測7.浮游菌數(shù)G.培養(yǎng) 全部采樣結束后，將培養(yǎng)皿倒置于3035恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于48h。 每批培養(yǎng)基應有對照

22、試驗，檢驗培養(yǎng)基本身是否污染。可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。三、潔凈室的檢測7.浮游菌數(shù)H.菌落計數(shù) 用肉眼直接計數(shù)、標記或在菌落計數(shù)器上點計，然后用510倍放大鏡檢查，有否遺漏。 若平板上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數(shù)。三、潔凈室的檢測7.浮游菌數(shù)I. 采樣點的位置和數(shù)目 采樣點的位置和數(shù)目可參照懸浮粒子測試點。 工作區(qū)測點位置離地0.81.5m左右（略高于工作面）。 送風口測點位置離開送風面30cm左右。 可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點。三、潔凈室的檢測7.浮游菌數(shù)J.最小采樣量 浮游菌每次最小采樣量如下表： 每個采樣點一般采樣一次。潔淨室級別采樣量 L/次100級100010000級500 100000級100 300000級100三、潔凈室的檢測7.浮游菌數(shù)K.菌落計數(shù) 用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。 每個測點的浮游菌平均濃度的計算： 平均濃度（個/m3）=菌落數(shù)/采樣量 用浮游菌平均濃度判斷潔凈室（區(qū)）空氣中的微生物。 若某測點的浮游菌平均濃度超過評定