熒光控制軟件說明書

1、熒光儀控制軟件使用說明儀器準備檢查實驗用儀器配件是否齊全，至少應(yīng)包括熒光儀、熒光儀內(nèi)部引出的實驗專用控制線、信號轉(zhuǎn)接板、B型USB連接線、電源適配器。硬件驅(qū)動1. 將附帶的“FT232 Driver.rar”解壓到本地目錄下。2. 將USB連接線到信號轉(zhuǎn)接板上，并插入電腦。3. 電腦提示安裝新硬件。在“設(shè)備管理器”中可查看到有一個未安裝驅(qū)動的硬件。4. 右鍵點擊該硬件，選擇“更新驅(qū)動程序”，進入“硬件更新向?qū)А?。點擊“從列表或指定位置安裝”5. 勾選“在搜索中包括這個位置”，并通過“瀏覽”按鈕，將路徑選定到解壓好的FT232驅(qū)動目錄下，點擊“確定”6. 點擊下一步，直至完成即可。7. 完成后將

2、再次彈出未安裝硬件提示，重復(fù)以上步驟即可。8. 從設(shè)備管理器中查看該硬件的串口號，如圖所示為com4設(shè)置流程1. 將適配器接入熒光儀并開機，開機后運動模塊會將試劑卡槽送入儀器內(nèi)部。控制線接入信號轉(zhuǎn)換板。2. 打開配套軟件：華科瑞公司熒光儀調(diào)試程序。3. 在“通信端口”中，選擇對應(yīng)端口號，點擊“打開”。4. 點擊“控制測試”中的“出卡”按鈕，然后將熒光強度較強的熒光試劑卡插入儀器。5. 點擊“測試”按鈕，儀器對試劑卡進行一次掃描，并將熒光亮度曲線畫在軟件窗口中，例如下圖，圖中，X軸為位置信息，Y軸為對應(yīng)位置上的熒光亮度。左側(cè)小波峰為熒光濃度較低的T線，右側(cè)波峰為熒光濃度較高的C線。6. 如出現(xiàn)下

3、圖的情況，說明“測量起始位”尚未調(diào)試，需按如下步驟調(diào)整參數(shù)設(shè)置。如圖為同一張試劑卡，在掃描位置未做調(diào)試時有可能出現(xiàn)的偏移情況。Test_1(紅線)為正常波峰，左邊T峰、右邊C鋒對稱分布，較合理。Test_2(綠線)為曲線偏左情況，曲線顯示了C峰，左側(cè)T峰未進入窗口。Test_3(加粗黃線)為曲線偏右，曲線顯示了T峰，右側(cè)C峰未進入窗口。調(diào)試方法： 進入“設(shè)置”選項卡，在“測量起始位置設(shè)置”中，點擊“獲取”以獲取當(dāng)前起始位置數(shù)據(jù)，根據(jù)該數(shù)值及波峰所在位置適當(dāng)進行調(diào)整（設(shè)定值波峰所在位置），點擊“設(shè)置”后生效，設(shè)定值將保存到儀器控制芯片中。 再次進入“曲線”選項卡進行測試，觀察是否左移或右移到合適

4、位置。 重復(fù)以上兩步直到C、T線對稱為止。注：“測量起始位置”中的參數(shù)只需設(shè)置一次即可，之后的正常實驗過程中不需要重新設(shè)定，除非因試劑條劃線位置修改或其它原因造成C、T線位置不準確時，才需要再次修改。軟件打開時，“測量起始位置”中顯示的數(shù)值并非保存在儀器控制芯片中的設(shè)定值，所以在修改設(shè)定值之前，必須先點擊“獲取”，然后再根據(jù)獲取到的設(shè)定值進行修改。7. 設(shè)置找峰范圍：先用試劑卡進行一次測試，假設(shè)曲線如圖：1調(diào)試軟件規(guī)定，兩個波峰都顯示在曲線窗口中時，T線必須是左側(cè)波峰，C線必須為右側(cè)波峰。如互換將容易導(dǎo)致計算或?qū)懭腠椖繕?biāo)準曲線時的人為錯誤。如果觀察到C線在左側(cè)，可在“設(shè)置”選項卡中勾選“首尾數(shù)

5、據(jù)反向”，再次測試時，C、T峰將以X軸中點為中心軸做反轉(zhuǎn)，將C峰轉(zhuǎn)到右側(cè)，T峰轉(zhuǎn)到左側(cè)。注：C、T峰可根據(jù)試劑條上已知的熒光強度區(qū)分，熒光強度越大，峰值越高。2觀察T、C峰所在的大概X軸位置，如圖T峰大約在80位置，C峰大約在210位置，則可大致確定為第1峰位置20140，第2峰位置150250。波峰寬度根據(jù)上圖可大致設(shè)為50（具體設(shè)定值需通過后期實驗確定）。根據(jù)以上設(shè)定值，在“設(shè)置”選項卡，把50填入波峰寬度，波峰數(shù)量填入2，第1峰位置填入20140，第2峰位置150250；找峰范圍設(shè)置完畢，現(xiàn)在可點擊“退出”按鈕，退出程序的同時系統(tǒng)自動保存“設(shè)置”頁面中的所有參數(shù)，下次打開自動恢復(fù)該參數(shù)。

6、實驗流程1. 打開串口：插上信號轉(zhuǎn)換板，儀器開機，在“設(shè)備管理器”中查看對應(yīng)串口號，將該串口號輸入“曲線”頁面中的“端口”欄，點擊打開，狀態(tài)欄將顯示串口打開成功。2. 點擊“出卡”，讓儀器開機時自動進入儀器內(nèi)部的卡槽出倉。如點擊無效，請檢查串口是否打開，儀器控制線是否接上控制板。3. 預(yù)測試：插入試劑卡，點擊“測試”，儀器將掃描一次，并將結(jié)果曲線顯示到軟件上。查看曲線T、C波峰位置，查看“設(shè)置”頁面中的找峰范圍是否正確，“首尾數(shù)據(jù)反向”是否正確?！安ǚ鍖挾取笔欠裾_。4. 進入“計算”頁面，查看“波峰1位置”是否正確，“波峰2位置”是否正確。如位置正確，軟件即可正確計算面積比。5. 正常實驗測

7、試插入試劑卡，點擊“測試”按鈕，在軟件右下方，將顯示該試劑卡面積比。用不同濃度的試劑卡不斷測試，通過曲線窗口可直觀觀察出濃度的變化過程。測試完成后，點擊“保存”按鈕，將提示保存兩次文件，分別為原始數(shù)據(jù)及面積比數(shù)據(jù)，文件名自動以日期時間命名，用戶可根據(jù)實際需要修改名稱。保存后的txt文件為面積比數(shù)據(jù)，用戶可將該數(shù)據(jù)代入到標(biāo)準曲線計算器中進行擬合計算。保存后的bat文件為原始數(shù)據(jù)，每一豎列為一次測量數(shù)據(jù)，將原始數(shù)據(jù)復(fù)制到Excel中，可通過插入折線圖還原曲線。也可通過Excel復(fù)制其中的一列數(shù)據(jù)，粘貼到軟件的“讀入波形數(shù)據(jù)”中，點擊“計算波形數(shù)據(jù)”，在軟件中還原曲線并可重新計算或選擇其它計算方式。

8、如不需要保存數(shù)據(jù)、曲線雜亂或錯誤，可點擊“清除”按鈕清除所有曲線。注意，清除后曲線數(shù)據(jù)、計算結(jié)果都將丟失。6. 擬合標(biāo)準曲線將測到的面積比及已知的濃度代入到ELISACalc計算器中，可選擇曲線模型，并計算出對應(yīng)的擬合參數(shù)。詳細過程請參考“ELISA Calc回歸擬合計算程序使用教程”。7. 將ELISA Calc計算器算出的參數(shù)，復(fù)制到“計算”頁面中的計算參數(shù)中，即可根據(jù)面積比，直接反算出濃度值。注：點擊“退出”按鈕，可將該計算參數(shù)保存到軟件中，下次打開軟件自動調(diào)入該參數(shù)。其它功能曲線頁面 “圖形顯示窗口”：Y軸顯示為所測到熒光強度，X軸為位置信息。Y軸會根據(jù)顯示的曲線自動更改坐標(biāo)軸的最大值

9、、最小值及刻度，所以查看熒光強度時需注意Y軸變化。 在圖形窗口上，按住鼠標(biāo)左鍵，向右下角方向畫出一個方框，松開左鍵，可放大選中方框中的圖形。 按住鼠標(biāo)左鍵，向左上角方向隨意畫方框，松開左鍵，可恢復(fù)原始縮放比例。 按住右鍵，即可拖動坐標(biāo)軸，便于觀察曲線?！帮@示選擇”：可選取連續(xù)多次測試中的某一次測試曲線，進行波形處理，包括濾波，基線調(diào)整等。常用于高亮顯示某一條測試曲線，選取曲線后勾選“顯示數(shù)據(jù)點”即可?！巴ㄐ哦丝凇保捍谔栠x擇。根據(jù)設(shè)備管理器中顯示的串口號填入，點擊“打開”即可激活該串口。每次打開軟件后，都需要先打開串口再進行其它操作?！翱刂茰y試”“測試”：最常用功能，點擊即開始一次掃描測試過程

10、。“開燈”：點擊后激發(fā)光將點亮，用于檢驗激發(fā)光是否正常，該功能不常用?！瓣P(guān)燈”：熄滅激發(fā)光。“測當(dāng)前點”：讀取當(dāng)前傳感器接收到的光強度AD值，顯示到“當(dāng)前點值”的方框中。該功能可用于觀察某一固定點熒光變化的過程。點擊“開燈”后，將卡槽推入一定的距離，點擊“測當(dāng)前點”。如當(dāng)前點為試劑卡NC膜上劃線位置，則可讀取到該點值。如保持測量位置不變，每隔精確的1秒或若干秒點擊一次，可觀察到熒光強度隨時間變化的規(guī)律（讀取到的熒光值保存在“數(shù)據(jù)”頁面）。“進卡”：將卡槽送入儀器內(nèi)部。“出卡”：將卡槽送出?！皵?shù)據(jù)處理”“清除”：用于清除顯示在圖形窗口中的曲線，包括原始數(shù)據(jù)和計算結(jié)果等，該操作不可逆。“濾波”：對

11、“顯示選擇”中選定的某條曲線做濾波處理，讓曲線更加平滑?！氨４妗保簩⑶€原始數(shù)據(jù)、面積計算結(jié)果保存到電腦上。保存時會提示保存兩次，保存為兩個文件，其中后綴為bat的文件為原始數(shù)據(jù)，txt文件為面積及面積比。用戶可將txt文件中的面積比數(shù)據(jù)，代入到標(biāo)準曲線計算器中進行擬合計算。bat原始數(shù)據(jù)，每一豎列為一次測量數(shù)據(jù)，將原始數(shù)據(jù)復(fù)制到Excel中，可通過插入折線圖還原曲線。也可通過Excel復(fù)制其中的一列數(shù)據(jù)，粘貼到軟件的“讀入波形數(shù)據(jù)”中，點擊“計算波形數(shù)據(jù)”，在軟件中還原曲線并重新計算或選擇其它計算方式。“復(fù)制”：將所有測試的原始數(shù)據(jù)復(fù)制到系統(tǒng)剪切板中，可粘貼到Excel中保存。“波形處理”“

12、基線上移”：將“顯示選擇”中選取的某條曲線，整體上移下方文本框中填入的數(shù)值?！盎€下移”：將“顯示選擇”中選取的某條曲線，整體下移下方文本框中填入的數(shù)值?！盎€到0”：將“顯示選擇”中選取的某條曲線，整體下移至基線為0的程度?！帮@示數(shù)據(jù)點”：將“顯示選擇”中選取的某條曲線的每一個數(shù)據(jù)點顯示出來，可將數(shù)據(jù)點進行小范圍移動從而改變曲線。一般只作為高亮顯示某條曲線功能?！巴顺觥保簩④浖P(guān)閉，并將軟件的設(shè)定值，如端口號、“設(shè)置”頁中的設(shè)定值等進行保存，以便下次打開軟件時不需要重新設(shè)定。右側(cè)文本框：控制軟件最大化后將顯示，用于顯示面積比，省去每次測試后需要在“計算”頁才能看到面積比的麻煩。 數(shù)據(jù)頁面 顯

13、示原始數(shù)據(jù)及“測當(dāng)前點”中的測試數(shù)據(jù)。計算頁面 “面積比” “T/C”：面積比計算方式，T線面積除以C線面積。 “C/T”：面積比計算方式，C線面積除以T線面積。 “計算公式”提供多種數(shù)學(xué)模型，選定后使用該模型進行擬合反算。擬合參數(shù)則需要根據(jù)“ELISA計算器”中的計算結(jié)果填寫。“計算參數(shù)”擬合回歸的具體參數(shù)，根據(jù)“ELISA計算器”計算結(jié)果填寫?！坝嬎闫鳌碧峁┯嬎愎δ埽鶕?jù)選定的數(shù)學(xué)模型及參數(shù)，填入T/C，算出結(jié)果值?！坝嬎銣y量結(jié)果”“峰面積處理”：有三種計算峰面積方式，現(xiàn)假定波峰寬度設(shè)定為50，則每種算法圖例如下。圖一為原始曲線，圖二為“基線上面積”，圖三為“整個波面積”，圖四為“峰左右分

14、別計算面積”一般選取“基線上的面積”?！坝嬎銉?nèi)容”“只計算T/C”：每次測試結(jié)束后的計算過程中，只計算面積比，不根據(jù)公式計算濃度值?！鞍垂接嬎憬Y(jié)果”：計算完面積比后，再根據(jù)計算方程及參數(shù)，計算出濃度值。如計算參數(shù)不符合公式要求，如A,B,C,D都為1時，四參數(shù)方程沒有意義，則會彈出計算錯誤窗口，計算結(jié)果無效?！坝嬎憬Y(jié)果”：除了每次測量結(jié)束后會自動計算一次結(jié)果外，還可以手動點擊計算按鈕，進行手動計算，在點擊“計算”之前，可對找峰范圍、波峰寬度、計算參數(shù)、峰面積處理、計算內(nèi)容等參數(shù)進行修改。點擊“計算”即可再次對最后一條曲線進行重計算?？芍庇^看到修改的參數(shù)對計算結(jié)果產(chǎn)生的影響。設(shè)置頁面“測量波形

15、設(shè)置” “首尾數(shù)據(jù)反向”：勾選后，下次檢測后，C、T峰將以X軸中點為對稱軸做反轉(zhuǎn)。如圖，紅色線為沒有勾選時的曲線，綠色線為勾選后的曲線。 “波峰寬度”、“第1峰位置”、“第2峰位置”等參數(shù)定義，請參考本文“設(shè)置流程”中的第7點?！跋挛粰C設(shè)置”“卡槽總長度”：運動導(dǎo)軌的總長，一般設(shè)定為1400。點擊“獲取”可讀取到儀器內(nèi)部控制芯片中已經(jīng)存儲的設(shè)定值。修改完成后，點擊“設(shè)置”可將修改好的設(shè)定值傳輸并保存到儀器內(nèi)部控制芯片中。該值出廠后，一般不需要進行修改。如誤修改，恢復(fù)1400設(shè)定值即可?！皽y量起始位”：該參數(shù)控制傳感器在試劑卡上掃描的起點位置，設(shè)定不同值，可觀察到圖形窗口中的曲線在向左或向右移動

16、，移動至T、C峰對稱分布時，為最佳狀態(tài)。“測量窗長度”：控制傳感器在試劑卡上掃描的范圍，該值越大，掃描的試劑卡長度越大，圖形界面中的X軸越大。但太大的掃描范圍，將有可能掃描到吸水紙或玻璃纖維等不需要掃描的范圍，一般設(shè)定為300既能滿足絕大多數(shù)試劑需求。該值最大可設(shè)為600，超出600個點，將導(dǎo)致儀器控制器內(nèi)存溢出?！盎€減扣”：對基線進行處理，假定該值設(shè)定為100，點擊設(shè)置后，下次測量時，儀器控制器將對曲線上的每一個點減去100。從曲線來看，可觀察到跟“基線下移”功能一樣的處理效果。區(qū)別在于“基線下移”僅對一組數(shù)據(jù)有效，而“基線減扣”將影響儀器所有的測量結(jié)果。如該值設(shè)定太大，減扣值太多，將有可能導(dǎo)致曲線計算結(jié)果錯誤。“樣本條碼”：選配功能，當(dāng)選配了外置