浙江大學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)甲植物不同生長發(fā)育期過氧化物酶同工酶譜分析ppt課件

1、植物不同生長發(fā)育期過氧化物酶同工酶譜分析植物不同生長發(fā)育期過氧化物酶同工酶譜分析1、過氧化物酶簡介過氧化物酶是一類以鐵樸啉作為輔基的酶，該酶能利用H2O2氧化供氫體，酶對H2O2具高度專注性，對供氫體的要求那么較為廣泛。酚類、胺類化合物、某些雜環(huán)化合物和一些無機(jī)離子等都可作為過氧化物酶的供氫體。該酶催化的反響可用一通式表示：過氧化物酶廣泛存在于生物界，特別是在高等植物中，過氧化物酶含量豐富，并具有高度的多型性，即存在同工酶景象。AH2 + H2O2 A + 2 H2OE供氫體 氧化型產(chǎn)物植物不同生長發(fā)育期過氧化物酶同工酶譜分析植物不同生長發(fā)育期過氧化物酶同工酶譜分析研討闡明，在植物不同的生長發(fā)

2、育時(shí)期和不同的組織器官中，過氧化物酶同工酶的數(shù)目和活性存在較大差異。種子芽期的過氧化物酶同工酶是種子發(fā)育過程中最穩(wěn)定、最豐富的時(shí)期，可作為研討同工酶的最正確取材時(shí)期。由于該期過氧化物酶同工酶比較穩(wěn)定，酶帶明確，具有較為明顯的種類專注性，因此可作為研討種子分類的一個(gè)生化目的。同時(shí)，在種子的生長發(fā)育過程中，過氧化物酶同工酶酶帶數(shù)目及染色程度深淺均呈有規(guī)律的變化。以水稻為例，在苗期酶帶數(shù)目少，酶活性低；在拔節(jié)期酶帶數(shù)目增多，酶活性增高；到灌漿期酶帶數(shù)目最多，酶活性最高。過氧化物酶同工酶這種有規(guī)律的變化可作為一項(xiàng)生理生化目的，用于研討種子的生長發(fā)育。植物不同生長發(fā)育期過氧化物酶同工酶譜分析植物不同生長

3、發(fā)育期過氧化物酶同工酶譜分析植物激素可影響過氧化物酶同工酶的酶譜，如吲哚乙酸可抑制小麥和豌豆中過氧化物酶某些同工酶的表達(dá)。患病、輻射、乙烯處置均能導(dǎo)致過氧化物酶活性迅速添加。2、過氧化物酶活性染色原理根據(jù)過氧化物酶能利用H2O2氧化供氫體的反響可測定該酶的活性。常用的測定過氧化物酶活性的供氫體有愈創(chuàng)木酚和聯(lián)苯胺。本實(shí)驗(yàn)采用愈創(chuàng)木酚和聯(lián)苯胺的混合液，有關(guān)反響式如下： 愈創(chuàng)木酚 + 聯(lián)苯胺 + H2O2 紫紅色復(fù)合物 + H2O E植物不同生長發(fā)育期過氧化物酶同工酶譜分析植物不同生長發(fā)育期過氧化物酶同工酶譜分析過氧化物酶同工酶經(jīng)電泳后，根據(jù)分子量和電荷的不同分成不同的譜帶，將電泳后的凝膠用愈創(chuàng)木酚聯(lián)苯胺染色后，在無過氧化物酶的地方，凝膠透明，而在過氧化物酶譜帶處，由于生成紫紅色復(fù)合物，因此譜帶呈紫紅色，這樣，在透明背景下出現(xiàn)紫紅色條帶的地方，即為過氧化物酶，由此可測定過氧化物酶同工酶的種類和數(shù)量情況。3、資料與試劑實(shí)驗(yàn)資料：新穎植物葉片。實(shí)驗(yàn)試劑：實(shí)驗(yàn)試劑及本卷須知詳見P125。4、操作方法操作過程及各步本卷須知講解詳見P126。植物不同生長發(fā)育期過氧化物酶同工酶譜分析植物不同生長發(fā)育期過氧化物酶同工酶譜分析5