彎曲菌屬和幽門(mén)螺桿菌及檢驗(yàn)

1、第二一章彎曲菌屬和幽門(mén)螺桿菌及檢驗(yàn)本章考點(diǎn)：1. 概述：概念2. 彎曲菌屬，幽門(mén)螺桿菌分類(lèi)，生物學(xué)性狀，臨床意義，微生物學(xué)檢查一、彎曲菌屬（一）概述：彎曲菌屬細(xì)菌是 一類(lèi)微需氧，不分解糖類(lèi)，氧化酶陽(yáng)性，菌體彎曲呈逗點(diǎn)狀、S形或螺旋狀，有動(dòng)力的革蘭陰性菌。包括5個(gè)種和5個(gè)亞種。對(duì)人類(lèi)致病的主要是 空腸彎曲菌和胎兒彎曲菌胎兒亞種 。前者是人 類(lèi)腹瀉最常見(jiàn)的病原菌之一，后者在免疫功能低下時(shí)可引起敗血癥、腦膜炎等。（二）生物學(xué)性狀1. 形態(tài)染色：革蘭陰性、細(xì)長(zhǎng)、螺旋形或海鷗展翅狀、S形的彎曲桿菌。一端或兩端具有單鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑，有時(shí)呈螺旋狀運(yùn)動(dòng)。一端單鞭毛多見(jiàn)于胎兒亞種，兩端單鞭毛多見(jiàn)于空腸彎曲菌，無(wú)

2、芽胞，無(wú)莢膜。2. 培養(yǎng)特性：微需氧菌，初次分離時(shí)需在含 5%Q 85%N、10%CO氣體環(huán)境中生長(zhǎng)，傳代培養(yǎng)時(shí)能在10%CO 環(huán)境中生長(zhǎng)。本屬菌最適生長(zhǎng)溫度隨菌種而異（生長(zhǎng)溫度差異可作為菌種鑒別要點(diǎn)）。菌種25 C37 C42 C大腸彎曲菌-+空腸彎曲菌-+簡(jiǎn)明彎曲菌-+-胎兒彎曲菌+-營(yíng)養(yǎng)要求高，在普通培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)。需加入血液、血清才能生長(zhǎng)。常用的選擇培養(yǎng)基有 Skirrow瓊脂和Campy-BAP培養(yǎng)基。這些培養(yǎng)基以血瓊脂為基礎(chǔ)，加人多種抗生素，能抑制腸道正常菌群，而有利于 本菌的分離?？漳c彎曲菌初次分離時(shí)，經(jīng)48h培養(yǎng)可形成兩種菌落；一種為扁平、濕潤(rùn)、灰白色、半透明、邊緣不整齊、常沿

3、接種線擴(kuò)散生長(zhǎng)的菌落；另一種為圓形、凸起、半透明、 針尖狀、有光澤、單個(gè)細(xì)小菌落。兩種菌落均不溶血。在布氏肉湯內(nèi)呈均勻混濁生長(zhǎng)。3. 生化反應(yīng)：本屬細(xì)菌 生化反應(yīng)不活潑。不分解糖類(lèi)、不液化明膠、不分解尿素，V-P和甲基紅試驗(yàn)均陰性。氧化酶均為陽(yáng)性，大多數(shù)彎曲菌能還原硝酸鹽、觸酶試驗(yàn)為陽(yáng)性，空腸彎曲菌馬尿酸水解試驗(yàn)陽(yáng)性。4. 抗原結(jié)構(gòu)：有菌體（0）抗原、熱不穩(wěn)定抗原和鞭毛（H）抗原。根據(jù) 0抗原可將空腸彎曲菌分為42個(gè)血清型。5. 抵抗力：抵抗力較弱，56C5分鐘即被殺死。干燥環(huán)境中僅能存活3小時(shí)。（二）微生物學(xué)檢驗(yàn)1. 標(biāo)本采集：立即送檢，及時(shí)接種。2. 檢驗(yàn)方法及鑒定（1）直接涂片1）懸滴標(biāo)

4、本檢查：顯微鏡下觀察有無(wú)投鏢式或螺旋狀運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌。2） 革蘭染色檢查：為革蘭陰性逗點(diǎn)狀、S形或螺旋狀小桿菌。（2） 分離培養(yǎng)：糞便和肛拭子標(biāo)本直接接種于改良彎曲菌瓊脂平板如改良的Skir-row 血瓊脂平板和Campy-BAP平板；血液或腦脊液標(biāo)本接種布氏肉湯增菌后，轉(zhuǎn)種彎曲菌分離培養(yǎng)基，置42C、37C，在微需氧環(huán)境下培養(yǎng) 2472h，觀察菌落特征。（3）鑒定革蘭陰性細(xì)小彎曲桿菌，單鞭毛具有投鏢樣或螺旋樣動(dòng)力，需氧環(huán)境不生長(zhǎng)，微需氧條件下，在彎曲 菌選擇培養(yǎng)基上形成兩種類(lèi)型菌落。不分解葡萄糖。 彎曲菌屬的鑒定要點(diǎn)為氧化酶陽(yáng)性，革蘭陰性，菌體彎曲或呈S形。最常用的鑒定試驗(yàn)有生長(zhǎng)溫度（25C、3

5、7C、42C）試驗(yàn)、過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)、馬尿酸鹽水 解試驗(yàn)、硝酸鹽和亞硝酸鹽還原試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)等。（三）臨床意義致病因素主要與腸毒素、細(xì)胞毒素、內(nèi)毒素和黏附、定植能力有關(guān)。主要引起人類(lèi)腸道感染和各種腸道外感染。其中空腸彎曲菌是引起散發(fā)性細(xì)菌性腸炎最常見(jiàn)的菌種之一。胎兒彎曲菌主要引起腸道外感染，其中胎兒亞種為主要的人類(lèi)致病菌，致菌血癥、膽囊炎、腹膜炎、肺部感染等。（四）治療原則空腸彎曲菌常對(duì) 紅霉素、克林霉素和四環(huán)素 敏感，多數(shù)空腸彎曲菌對(duì)氨基糖苷類(lèi)、氯霉素及氟喹諾酮 類(lèi)敏感，由于可產(chǎn)生 3-內(nèi)酰胺酶，一般對(duì) 3-內(nèi)酰胺類(lèi)耐藥。關(guān)于彎曲菌的描述，正確的是A. 微需氧菌B. 革蘭陰性，呈細(xì)長(zhǎng)、螺旋形

6、、海鷗展翅狀或S形C. 營(yíng)養(yǎng)要求高，培養(yǎng)基中需加入血液、血清才能生長(zhǎng)D. 生化反應(yīng)活潑E. 對(duì)人致病的主要是空腸彎曲菌和胎兒彎曲菌O答疑編號(hào) 500735210101正確答案 ABCE二、幽門(mén)螺桿菌（一）簡(jiǎn)述幽門(mén)螺桿菌是 一類(lèi)氧化酶和過(guò)氧化氫酶均陽(yáng)性、微需氧、在37C能夠生長(zhǎng)，在25C不能生長(zhǎng)42C少數(shù)生長(zhǎng)的革蘭陰性彎曲的細(xì)菌，有動(dòng)力。能引起人類(lèi)疾病的有 3個(gè)種，即幽門(mén)螺桿菌（H.pylori ）、H.fennelliae和H.cinaedi 。幽門(mén)螺桿菌多見(jiàn)。（二）生物學(xué)性狀革蘭陰性，菌體細(xì)長(zhǎng)彎曲呈螺旋形、S形或海鷗狀。菌體一端或兩端可有多根帶鞘鞭毛。運(yùn)動(dòng)活潑。微需氧，在 5%O、85%N、

7、10%C0的環(huán)境中生長(zhǎng)良好。對(duì)濕度要求較高，相對(duì)濕度最好在98%以上。對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高，一般需含血或血清才生長(zhǎng)。為抑制雜菌培養(yǎng)基中添加多粘菌素B萬(wàn)古霉素、兩性霉素、TMP等。HP與其他細(xì)菌相比有一定的耐酸性，但對(duì)酸仍比較敏感，pH降至3.5以下活力明顯減弱。生化反應(yīng)不活潑。氧化酶、觸酶、DNA酶均陽(yáng)性。快速脲酶試驗(yàn)強(qiáng)陽(yáng)性（該菌能產(chǎn)生豐富的尿素酶是其顯著的特征）。（三）臨床意義全球一半以上人口被 HP感染。傳播途徑推測(cè)經(jīng)口感染，HP感染與消化性潰瘍，十二指腸潰瘍有密切關(guān)系。HP存在于胃黏膜上皮表面和粘液底層，胃竇為定植的最佳部位，HP數(shù)量較多，胃體和胃底較少。（四）微生物檢查1. 標(biāo)本采集：從多部

8、位采 集胃黏膜活檢 標(biāo)本，放入20%葡萄糖運(yùn)送液或無(wú)菌生理鹽水中立即送檢，4C 冰箱保存，不超過(guò) 5小時(shí)。2. 檢驗(yàn)方法（1） 快速診斷：有直接染色鏡檢，快速脲酶分解試驗(yàn)、碳標(biāo)記（13c或14c標(biāo)記尿素）呼氣試驗(yàn)（如果 CO超標(biāo)，提示HP存在）、有商品試劑盒檢測(cè)糞便 HP抗原、血清學(xué)檢測(cè)抗 Hp菌體抗體或脲酶抗體、基因芯 片法檢測(cè)脲酶、細(xì)胞毒素和空泡毒素抗體。分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)毒素基因。（2） 分離培養(yǎng)鑒定：用選擇性培養(yǎng)基（如血巧克力培養(yǎng)基中添加多粘菌素、萬(wàn)古霉素、兩性霉素、TMP等）和非選擇性培養(yǎng)基放在微需氧和濕潤(rùn)的環(huán)境中，35C孵育 34天，挑選出細(xì)小、針尖大小、半透明的、不溶血的可疑菌落

9、，做生化鑒定。（3）藥敏試驗(yàn)：測(cè)試 MIC（4）治療：選用一種 質(zhì)子泵抑制劑（PPI ）或一種膠體鉍劑加上克拉霉素、阿莫西林（或四環(huán)素）甲 硝唑（或替硝唑）,3種抗菌藥物中的2種，組成三聯(lián)療法。也可用 PPI、膠體鉍劑聯(lián)合兩種抗生素的四聯(lián) 療法。關(guān)于幽門(mén)螺桿菌的生物學(xué)性狀，敘述正確的是A. 菌落細(xì)小、半透明、不溶血B. 兼性厭氧生長(zhǎng)C. 氧化酶陽(yáng)性D. 革蘭陰性螺旋形E. 快速脲酶試驗(yàn)強(qiáng)陽(yáng)性O(shè)答疑編號(hào) 500735210102正確答案 ACDE第二十二章厭氧性細(xì)菌及檢驗(yàn)本早考點(diǎn)：1. 概述概念，分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)及分類(lèi)2. 厭氧菌的分布與臨床意義自然界和正常人體中的分布，臨床意義3. 厭氧菌標(biāo)本的采集與

10、送檢標(biāo)本的采集方法，標(biāo)本的運(yùn)送和處理4. 分離與鑒定檢驗(yàn)程序，檢驗(yàn)方法概述一、概述（一）概念厭氧性細(xì)菌是一大群專(zhuān)性厭氧，必須在無(wú)氧環(huán)境中才能生長(zhǎng)的細(xì)菌。（二）厭氧菌的分類(lèi)梭菌屬（革蘭陽(yáng)性）根據(jù)能否形成芽胞（革蘭陽(yáng)性無(wú)芽胞桿菌革蘭陰性無(wú)芽胞桿菌I無(wú)芽胞厭氧菌 革蘭陽(yáng)準(zhǔn)厭氧球菌革蘭陰性厭氧球菌主要厭氧菌的分類(lèi)見(jiàn)表5-22-1。種和亞種類(lèi)主要常見(jiàn)菌種革蘭陽(yáng)性有芽胞桿菌83破傷風(fēng)梭菌、肉毒梭菌、溶組織梭菌、梭菌屬產(chǎn)氣莢膜梭菌等革蘭陽(yáng)性尢牙胞桿菌丙酸桿菌屬8痤瘡丙酸桿菌、顆粒丙酸桿菌、貪夢(mèng)丙酸桿菌優(yōu)桿菌屬34不解乳優(yōu)桿菌、遲緩優(yōu)桿菌、粘性?xún)?yōu)桿菌、短優(yōu)桿菌等乳酸桿菌屬51本菌屬與致病關(guān)系不大放線菌屬12衣

11、氏放線菌、溶齒放線菌、化膿放線菌 等蛛網(wǎng)菌屬1丙酸蛛網(wǎng)菌雙歧桿菌屬24兩歧雙歧桿菌、青春雙歧桿菌、嬰兒雙歧 桿菌、短雙歧桿菌、長(zhǎng)雙歧桿菌等革蘭陰性尢牙胞桿菌 類(lèi)桿菌屬18脆弱類(lèi)桿菌、多形類(lèi)桿菌、多形桿菌、 普通類(lèi)桿菌普雷沃菌屬20產(chǎn)黑色素普雷沃菌、中間普雷沃菌等紫單胞菌屬12不解糖紫單胞菌、牙髓紫單胞菌梭桿菌屬16具核梭桿菌、壞死梭桿菌、死亡梭桿菌等纖毛菌屬1口腔纖毛菌沃廉菌屬2產(chǎn)琥珀酸沃廉菌（來(lái)自牛瘤胃）和直線沃廉菌（來(lái)自人牙齦溝）月形單胞菌屬生痰月形單胞菌（來(lái)自人牙齦溝）和反芻月形單胞菌（來(lái)自反芻動(dòng)物瘤胃）革蘭陽(yáng)性厭氧球菌 消化球菌屬1黑色消化球菌消化鏈球菌屬9厭氧消化鍵球菌、不解糖化鏈球

12、菌、吲 哚消化鏈球菌、大消化鏈球菌、微小消化鏈球菌、產(chǎn)生消化鏈球菌、普氏消化鏈球厭氧性鏈球菌成微需氧鏈球菌4菌、四聯(lián)消化鏈球菌麻疹鏈球菌、漢孫鏈球菌、多形鏈球菌瘤胃球菌屬8、短小鏈球菌、另外還有已屬于口腔鏈 球菌的中間型鏈球菌和星群鏈球菌糞球菌屬3八疊球菌屬2革蘭陰性氧球菌 韋榮菌屬7小韋榮菌、產(chǎn)堿韋榮菌氨基酸球菌屬1發(fā)酵氨基酸球菌巨球菌屬1埃氏巨球菌二、厭氧菌感染（一）厭氧菌在正常人體的分布厭氧菌在人體的分布非常廣泛，正常人的腸道、口腔、陰道等處均有大量的厭氧菌寄居。厭氧菌與需 氧菌和兼性厭氧菌共同組成人體的正常菌群，其中絕大多數(shù)為無(wú)芽胞厭氧菌。其中腸道中的厭氧菌數(shù)量是大腸埃希菌的10001

13、0000倍。在人體腸道正常菌群中占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)的有A. 雙歧桿菌B. 傷寒沙門(mén)菌C. 大腸桿菌D. 變形桿菌E. 無(wú)芽胞厭氧菌O答疑編號(hào) 500735220101正確答案E（二）臨床意義1. 外源性感染：梭狀芽胞桿菌屬引起的感染，其細(xì)菌及芽胞來(lái)源于土壤、糞便和其他外界環(huán)境。少數(shù) 致病菌能產(chǎn)生強(qiáng)烈外毒素和侵襲性酶，引起人和動(dòng)物疾病。2. 內(nèi)源性感染：無(wú)芽胞厭氧菌 大多數(shù)是人體正常菌群，屬于條件致病菌，在一定條件下可引起感染， 一般不在人群中傳播。由厭氧菌引起的人類(lèi)感染在所有的感染性疾病中占有相當(dāng)大的比例，有些部位的感染如腦膿腫、牙周 膿腫和盆腔膿腫等 80%以上是由厭氧菌引起的。其中部分系厭氧菌單獨(dú)

14、感染，大部分系與需氧菌混合感染。3. 厭氧菌感染的危險(xiǎn)因素1）組織缺氧或氧化還原電勢(shì)降低 ，如組織供血障礙、大面積外傷、刺傷。2）機(jī)體免疫功能下降，如接受免疫抑制劑治療、抗代謝藥物治療、放射治療、化學(xué)藥物治療的病人以 及糖尿病患者、慢性肝炎患者、老年人、早產(chǎn)兒等均易并發(fā)厭氧菌感染。3）機(jī)體局部屏障作用破壞：某些手術(shù)及創(chuàng)傷，如開(kāi)放性骨折、胃腸道手術(shù)、生殖道手術(shù)以及深部刺傷 等易發(fā)生厭氧菌感染。4）長(zhǎng)期應(yīng)用某些抗菌藥物，如氨基糖苷類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)等，可誘發(fā)厭氧菌感染。5）深部需氧菌感染，需氧菌生長(zhǎng)可消耗環(huán)境中的氧氣，為厭氧菌生長(zhǎng)提供條件，從而導(dǎo)致厭氧菌合并 感染。4. 厭氧菌感染的臨床及細(xì)

15、胞學(xué)指征1） 感染組織局部產(chǎn)生大量氣體 ，造成組織腫脹和壞死，皮下有捻發(fā)感，是產(chǎn)氣莢膜梭菌 所引起感染的 特征。2）發(fā)生在口腔、腸道、鼻咽腔、陰道等處的感染，易發(fā)生厭氧感染。3）深部外傷如槍傷后，以及動(dòng)物咬傷后的繼發(fā)感染，均可能是厭氧菌感染。4） 分泌物有惡臭或呈暗血紅色，并在紫外光下發(fā)出紅色熒光，均可能是厭氧菌感染。產(chǎn)生紅色熒光的 分泌物，可能是產(chǎn)黑素普雷沃菌或不解糖紫單胞菌；分泌物或膿腫有硫磺顆粒，為放線菌感染。5）分泌物涂片經(jīng)革蘭染色，鏡檢發(fā)現(xiàn)有細(xì)菌，而培養(yǎng)陰性者，或在液體及半固體培養(yǎng)基深部生長(zhǎng)的細(xì) 菌，均可能為厭氧菌感染。6）長(zhǎng)期應(yīng)用氨基糖苷類(lèi)抗生素?zé)o效的病例，可能是厭氧菌感染。7）胃

16、腸道手術(shù)后發(fā)生的感染。三、厭氧菌標(biāo)本的采集與送檢標(biāo)本采集與送檢必須注意兩點(diǎn)：標(biāo)本絕對(duì)不能被正常菌群所污染；應(yīng)盡量避免接觸空氣。1. 采集：采集標(biāo)本須注意：不被正常菌群污染，并盡量避免接觸空氣。采集深部組織標(biāo)本時(shí)，需用碘 酒消毒皮膚用注射器抽取，穿刺針頭應(yīng)準(zhǔn)確插入病變部位深部，抽取數(shù)毫升即可，抽出后可排出一滴標(biāo)本 于酒精棉球上。若病灶處標(biāo)本量較少，則可先用注射器吸取1ml還原性溶液或還原性肉湯，然后再抽取標(biāo)本。在緊急情況下，可用棉拭取材，并用適合的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)送。厭氧培養(yǎng)最理想的檢查材料是組織標(biāo)本，因厭氧菌在組織中比在滲出物中更易生長(zhǎng)。用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本不同于一般的細(xì)菌培養(yǎng)，多采用特殊的采集方法，

17、如針筒抽取等，應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌 操作，嚴(yán)禁接觸空氣。不同部位標(biāo)本采集方法也各有不同特點(diǎn)，具體方法見(jiàn)表5-22-3。表5-22-3不同部位標(biāo)本采集方法標(biāo)本來(lái)源收集方法封閉性膿腫婦女生殖道下呼吸道分泌物胸腔竇道、子宮腔、深部創(chuàng)傷組織尿道針管抽取后穹隆穿刺抽取肺穿刺術(shù)胸腔穿刺術(shù)用靜脈注射的塑料導(dǎo)管穿人感染部位抽吸 無(wú)菌外科切開(kāi)膀胱穿刺術(shù)哪些標(biāo)本不符合厭氧菌檢驗(yàn)要求A. 血B. 咽拭子C. 深部膿腫穿刺液D. 牙周膿腫穿刺液E. 膀胱穿刺液0答疑編號(hào) 500735220102正確答案B2. 送檢方法與處理標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后， 應(yīng)在2030min內(nèi)處理完畢，最遲不超過(guò) 2h,以防止標(biāo)本中兼性厭氧菌過(guò)度繁殖 而抑

18、制厭氧菌的生長(zhǎng)。如不能及時(shí)接種，可將標(biāo)本置室溫保存（一般認(rèn)為，冷藏對(duì)某些厭氧菌有害，而且在低溫時(shí)氧的溶解度較高）。1）針筒運(yùn)送：一般用無(wú)菌針筒抽取標(biāo)本后，排盡空氣，針頭插入無(wú)菌橡皮塞，以隔絕空氣，立即送檢。 這種方法多用于液體標(biāo)本的運(yùn)送，如血液、膿液、胸腹水、關(guān)節(jié)液等。2）無(wú)菌小瓶運(yùn)送：一般采用無(wú)菌的青霉素小瓶，瓶?jī)?nèi)加一定量的培養(yǎng)基和少量氧化還原指示劑，用橡皮蓋加鋁蓋固定密封，排除瓶?jī)?nèi)空氣，充以C0 2氣體。同時(shí)先觀察瓶?jī)?nèi)氧化還原指示劑的顏色，以判斷瓶?jī)?nèi)是否為無(wú)氧環(huán)境，如合格將用無(wú)菌注射器將液體標(biāo)本注入瓶中即可。3）棉拭子運(yùn)送一般不采用棉拭子運(yùn)送，如果使用該方法，一定使用特制運(yùn)送培養(yǎng)基，確保無(wú)

19、氧環(huán)境， 確保不被污染，確?？焖偎蜋z。4）厭氧罐或厭氧袋運(yùn)送將厭氧罐或厭氧袋內(nèi)裝入可有效消耗氧氣的物質(zhì)，確保無(wú)氧環(huán)境。該方法一般 用于運(yùn)送較大的組織塊或床邊接種的培養(yǎng)皿等。四、厭氧菌的分離與鑒定 檢驗(yàn)程序：臨床標(biāo)本 肉眼觀察及有無(wú)氣味 直接涂片染色鏡檢厭氧分離培養(yǎng)可疑菌落分類(lèi)鑒定藥物敏感試驗(yàn)形態(tài)與染色、菌落、生化反應(yīng)*氣複相色喈等（一）直接鏡檢根據(jù)形態(tài)和染色性，結(jié)合標(biāo)本性狀與氣味，初步對(duì)標(biāo)本中可能有的細(xì)菌作出估計(jì)。 表5-22-4厭氧菌直接鏡檢初步鑒別菌名革蘭染色形態(tài)及其他特征脆弱類(lèi)桿菌G-b兩端鈍圓，著深色，中間色淺且不均勻，且有氣泡， 長(zhǎng)短不一產(chǎn)黑素普雷沃菌G-b多形性，長(zhǎng)短不一，有濃染和

20、空泡，無(wú)鞭毛和芽胞。 標(biāo)本有惡臭，琥珀味，紫外線照射發(fā)紅色熒光具核梭桿菌G-b菌體細(xì)長(zhǎng)，兩頭尖，紫色顆粒菌體長(zhǎng)軸成雙排列， 標(biāo)本有丁酸味壞死梭桿菌G-b咼度多形性，長(zhǎng)短不一，菌體中部膨脹呈圓球形韋榮球菌G-c極小的革蘭陰性球菌消化鏈球菌G+c革蘭陽(yáng)性呈鏈狀的小球菌乳桿菌G+b細(xì)長(zhǎng)，有時(shí)多形性，呈單、雙、短鏈或柵狀排列痤瘡丙酸桿菌G+b排列特殊呈X、Y、V或柵狀，標(biāo)本有丙酸氣味雙歧桿菌G+b多形性，有分支呈 丫、V形或棒狀，標(biāo)本有醋酸氣味放線菌G+b分支呈棒狀、X、丫 V、或柵狀，膿汁中有黃色顆粒有琥珀酸氣味破傷風(fēng)梭菌G+b細(xì)長(zhǎng)、梭形或鼓槌狀，有芽胞，有周鞭毛產(chǎn)氣莢膜梭菌G+b粗大桿菌,呈單或雙

21、排列，有芽胞，有夾膜艱難梭菌G+b粗長(zhǎng)桿菌，有芽胞，有鞭毛，近來(lái)發(fā)現(xiàn)有莢膜c： coccus，球菌； b： bacillus ，桿菌。（二）分離培養(yǎng)主要分初代培養(yǎng)和次代培養(yǎng)兩個(gè)階段，其中初代培養(yǎng)相對(duì)比較困難，關(guān)鍵的問(wèn)題就是厭氧環(huán)境和培養(yǎng)基的選擇。初代培養(yǎng)的一般原則是：（1）先將標(biāo)本涂片染色直接鏡檢，指導(dǎo)培養(yǎng)基的選擇。（2）盡量選用在厭氧菌中覆蓋面寬的非選擇性培養(yǎng)基。（3）最好多選12種覆蓋面不同的選擇性培養(yǎng)基。（4）盡量保證培養(yǎng)基新鮮。（5）要考慮到微需氧菌存在的可能 。1. 選用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基接種：應(yīng)接種固體和液體兩種培養(yǎng)基；（1）培養(yǎng)基的使用，應(yīng)注意下列各點(diǎn)：1） 盡量使用新鮮培養(yǎng)基，24h內(nèi)用完；2） 應(yīng)使用預(yù)還原培養(yǎng)基，預(yù)還原2448h更好；3） 可采用預(yù)還原滅菌法制作的培養(yǎng)基（用前于培養(yǎng)基中加入還原劑，如L-半胱氨酸、硫乙醇酸鈉、維 生素C及葡萄糖等，盡可能使預(yù)還原劑處于還原狀態(tài)）；4）液體培養(yǎng)基應(yīng)煮沸 10min，以驅(qū)除溶解氧，并迅速冷卻，立即接種；5） 培養(yǎng)厭氧菌的培養(yǎng)基均應(yīng)營(yíng)養(yǎng)豐富，并加有還原劑與生長(zhǎng)刺激因子（血清、維生素K氯化血紅素、 聚山梨