分子發(fā)光試卷

1、應(yīng)化1201杜云飛2012310200117分子發(fā)光分析中國武漢二O一五 年 六 月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)本科課程考試試卷考試課程與試卷類型：分子發(fā)光分析姓名：學(xué)年學(xué)期：2014-2015-2學(xué)號：考試時間：班級： 一、選擇題（選出一個正確答案，將序號填寫在【 】里。每小題1分，共12分。）1下列哪一項不是n* 躍遷的最低激發(fā)單重態(tài)的性質(zhì) 【 】A是自旋禁阻的躍遷 B摩爾吸光系數(shù)小C激發(fā)態(tài)壽命長 D S1 到T1系間竄越的幾率小2下列哪一種分子的去激發(fā)過程是磷光過程? 【 】A分子從第一激發(fā)三重態(tài)的最低振動能級返回到基態(tài)B. 分子從第二激發(fā)單重態(tài)的某個低振動能級過渡到第一激發(fā)單重態(tài)C. 分子從第一激發(fā)單

2、重態(tài)非輻射躍遷至三重態(tài)D. 分子從第一激發(fā)單重態(tài)的最低振動能級返回到基態(tài)3 熒光屬于下列哪一種放光形式 【 】A化學(xué)發(fā)光B光致發(fā)光C生物發(fā)光 D場致發(fā)光4 下列關(guān)于強(qiáng)熒光物質(zhì)應(yīng)具有的特征錯誤的是 【 】A具有大的共軛鍵結(jié)構(gòu)B具有剛性的平面結(jié)構(gòu)C取代基團(tuán)為吸電子基團(tuán) D具有最低的單線電子激發(fā)態(tài)S1為，1*型5喹啉在下列哪種介質(zhì)中熒光強(qiáng)度最高 【 】A乙醇B甲醇C 水 D 苯6下列化合物磷光最強(qiáng)的是 【 】A B C D7下列關(guān)于室溫磷光法的說法錯誤的是 【 】A固體基質(zhì)室溫磷光法所用的載體可以將分析物束縛在表面或基質(zhì)中而增加其剛性B膠束增穩(wěn)的溶液室溫磷光法利用了膠束對磷光團(tuán)的約束力而減少了內(nèi)轉(zhuǎn)化

3、和碰撞能量損失C室溫磷光法中分析物的磷光量子產(chǎn)率通常比低溫磷光法中的高 D敏化溶液室溫磷光法的分析物質(zhì)本身并不發(fā)射磷光，而是引發(fā)受體發(fā)磷光8分子熒光分析法比紫外-可見分光光度法的靈敏度高24個數(shù)量級的原因 【 】A熒光物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù)大；提高激發(fā)光的強(qiáng)度可以提高熒光的強(qiáng)度B熒光信號是在暗背景下測量的；提高激發(fā)光的強(qiáng)度可以提高熒光的強(qiáng)度C熒光發(fā)射的量子產(chǎn)率高；熒光物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù)大 D熒光發(fā)射的量子產(chǎn)率高； 9在分子熒光分析法中，下面說法正確的是 【 】 A熒光發(fā)射光譜不隨激發(fā)波長的變化而改變 B熒光發(fā)射光譜要隨激發(fā)波長的變化而改變 C熒光激發(fā)光譜與它的紫外可見吸收光譜互為鏡像對稱關(guān)系 D熒

4、光發(fā)射光譜與它的紫外可見吸收光譜形狀相似且波長位置也一樣 10在分子熒光測量中，要使熒光強(qiáng)度正比于熒光物質(zhì)的濃度，必要的條件是什么？ 【 】 A用高靈敏度的檢測器 B在稀溶液中測量C在最大摩爾吸光系數(shù)下測量D 在最大量子產(chǎn)率下測量11. Which factor has no effect on the fluorescence quantum yield molecule? 【 】 Amolecular structureBthe presence of heavy atomsCthe concentration of the solutionDthe temperature of solu

5、tion12Which of the following group can enhance fluorescence intensity ？ 【 】ANH2BCOOH CNO2DNO二、判斷正誤題（正確打“”，錯誤打“”，將答案填寫在【 】內(nèi)。每題2分，共10分。）1【 】Stokes位移是指分子的熒光發(fā)射波長總比其相應(yīng)的磷光發(fā)射波長要長2【 】提高共軛度有利于增加化合物的熒光量子產(chǎn)率并產(chǎn)生紅移3【 】有激發(fā)光照射時，苯酚在pH=1時無熒光發(fā)射，在pH=13時有熒光發(fā)射4【 】發(fā)生電子轉(zhuǎn)移反應(yīng)的熄滅劑不限于金屬離子。5【 】對于靜態(tài)猝滅，猝滅劑的存在并沒有改變熒光分子激發(fā)態(tài)的壽命三、名詞解釋

6、（每小題5分，共20分。）1：熒光探針2 熒光量子產(chǎn)率3 激發(fā)光譜：4 延時熒光四、簡答題（簡要回答下列各題，要求依據(jù)明確、條理清楚。共4小題，共30分。）1為什么熒光發(fā)射光譜和它的吸收光譜呈鏡像對稱關(guān)系?（6分）, 2. 熒光分光光度計和紫外-可見分光光度計的主要區(qū)別是什么?(答出兩點即可)（6分）3. 熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)濃度的關(guān)系為F=Kc。滿足F=Kc公式的條件有哪些？（8分）4.從熒光衍生法、熒光猝滅法、熒光增強(qiáng)法、敏化熒光法和熒光偏振免疫分析法中選擇兩個分別簡要說明其原理。（10分）五、英文翻譯（本大題共1小題，共10分。）Fluorescence spectral data are

7、 generally presented as emission spectra. A fluorescence emission spectrum is a plot of the fluorescence intensity versus wavelength (nanometers) or wavenumber (cm-1). Two typical fluorescence emission spectra are shown in Figure 1.3. Emission spectra vary widely and are dependent upon the chemical

8、structure of the fluorophore and the solvent in which it is dissolved. The spectra of some compounds, such as perylene, show significant structure due to the individual vibrational energy levels of the ground and excited states. Other compounds, such as quinine, show spectra devoid of vibrational st

9、ructure.六、計算題（寫出主要計算步驟及結(jié)果。本大題共1小題，共10分。）1. 用熒光分析法測定食品中維生素B2的含量：稱取2.00g食品，用10.0mL氯仿萃取（萃取率100%），取上清液2.00mL，再用氯仿稀釋為10.0mL。維生素B2氯仿標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為0.100gmL-1。測得空白溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液的熒光強(qiáng)度分別為：Fo=2.0，F(xiàn)s=62.0，F(xiàn)x=59.0，求該食品中維生素B2的含量（gg1）。七：改錯題（8分）下面是熒光分析法定量檢測維生素B2的試驗步驟，其中有3處錯誤，請指出來并解釋原因。 1、系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備取維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液(10.0g/mL) 0.50mL

10、、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL分別置于25mL的容量瓶中，各加入去離子水稀釋至刻度，搖勻。得濃度依次為0.20g/mL、0.40g/mL、0.60g/mL、0.80g/mL、1.00g/mL的一系列維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液。待測。2、激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜的繪制設(shè)置em540nm為發(fā)射波長，在5001000nm范圍內(nèi)掃描，記錄熒光發(fā)射強(qiáng)度和激發(fā)波長的關(guān)系曲線，便得到激發(fā)光譜。從激發(fā)光譜圖上可找出其最大激發(fā)波長ex。 從得到的激發(fā)光譜中找出最大激發(fā)波長，在此激發(fā)波長下，在250-500nm范圍內(nèi)掃描，記錄發(fā)射強(qiáng)度與發(fā)射波長間的函數(shù)關(guān)系，便得到熒光發(fā)射光譜。從熒光發(fā)射光譜上找出

11、其最大熒光發(fā)射波長em。3、標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品的熒光測定 固定任意一個激發(fā)波長和熒光發(fā)射波長。測量上述系列標(biāo)準(zhǔn)維生素B2溶液的熒光發(fā)射強(qiáng)度。數(shù)據(jù)記錄于表中。以溶液的熒光發(fā)射強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。 在同樣條件下測定未知溶液的熒光強(qiáng)度，并由標(biāo)準(zhǔn)曲線確定未知試樣中維生素B2的濃度，計算待測樣品溶液中的維生素B2的含量。華中農(nóng)業(yè)大學(xué)本科課程考試試卷參考答案與評分標(biāo)準(zhǔn)考試課程與試卷類型：分子發(fā)光分析姓名：學(xué)年學(xué)期：2014-2015-2學(xué)號：考試時間：班級： 一、 選擇題（每小題1分，共12分。）1-5：DABCC 6-10：BCDAB 11-12：CA二、判斷正誤題（每題2分，

12、共10分。）1-5：三、名詞解釋（每小題XX分，共XX分。） 1：熒光探針與蛋白質(zhì)或其他大分子結(jié)構(gòu)非共價相互作用而使一種或幾種熒光性質(zhì)發(fā)生改變的小分子物質(zhì)。可用于研究大分子物質(zhì)的性質(zhì)和行為。 2 熒光量子產(chǎn)率定義為熒光發(fā)射量子數(shù)與被物質(zhì)吸收的光子數(shù)之比，也可表示為熒光發(fā)射強(qiáng)度與被吸收的光強(qiáng)之比，或表示為熒光發(fā)射速率與吸收光速率常數(shù)之比，或者用公式表示：f熒光量子產(chǎn)率 = 熒光發(fā)射量子數(shù)/吸收的光子數(shù) = kfS1/吸光速率 = If/Ia， ，只要給出一種定義即可。3 激發(fā)光譜：在一定條件下，固定發(fā)射波長（em），掃描激發(fā)波長（ex），記錄熒光強(qiáng)度（F），以熒光強(qiáng)度F對激發(fā)波長ex作圖得到的曲

13、線為激發(fā)光譜。激發(fā)光譜說明不同激發(fā)波長的輻射引起物質(zhì)發(fā)射某一波長熒光的相對效率。激發(fā)光譜形狀與吸收光譜相似。4 延時熒光分子受到激發(fā)后，處于激發(fā)單重態(tài)，通過內(nèi)轉(zhuǎn)換、振動弛豫和體系間跨越，躍遷到第一激發(fā)三重態(tài)的最低振動能級，如果分子再次受激發(fā)，又回到激發(fā)單重態(tài)，然后以輻射形式回到基態(tài)的各個振動能級發(fā)射的光。四、簡答題（簡要回答下列各題，要求依據(jù)明確、條理清楚。共4小題，共30分。）1 基態(tài)（S0態(tài)）到S1態(tài)為激發(fā)譜,S1態(tài)到S0態(tài)為熒光譜.一般而言,S0和S1的振動能級相對比較接近能級間距比較近,所以光譜的形狀比較相似；另外,從S0態(tài)到S1的振動態(tài)的吸收光譜與S1的振動基態(tài)到S0的各個振動能級的

14、能量要高,所以,熒光光譜線對于激發(fā)譜要有所紅移,于是形成了鏡像。意思正確即可。2. （1）熒光分光光度計有兩個單色器,而紫外只有一個單色器（2）熒光分光光度計的光源和檢測器是成直角分布的,而紫外是成一條直線的.（3）熒光分光光度計是以氘燈做為光源,而紫外是以氫燈或氘燈作為紫外區(qū)光源,鎢燈或鹵鎢燈作為可見光區(qū)的光源（4）熒光分光光度計的比色皿是四壁均為光學(xué)面,而紫外僅為兩面為光學(xué)面.3. （1）入射光為單色光；（2） Ecl0.05；（3）入射光的強(qiáng)度I0一定；（4）樣品池厚度一定。（答出一個1分，兩個3分，三個4分，四個5分。）4.（下面任意答出一種得5分）熒光衍生法：是運用某種手段將自身不發(fā)

15、熒光的分析物，轉(zhuǎn)變成一種發(fā)熒光的化合物，再通過測定該化合物的熒光強(qiáng)度，以間接測定分析物。熒光猝滅法：有些分析物本身不發(fā)熒光，但卻能使某種熒光試劑的熒光發(fā)生猝滅，且熒光猝滅的程度與分析物的濃度有著定量的關(guān)系，通過測定該熒光試劑熒光強(qiáng)度的下降程度，便可間接地測定該分析物。熒光增強(qiáng)法：有些分析物本身不發(fā)熒光，但卻能使某種熒光試劑的熒光發(fā)生增強(qiáng)，且熒光增強(qiáng)的程度與分析物的濃度有著定量的關(guān)系，通過測定該熒光試劑熒光強(qiáng)度的增強(qiáng)程度，便可間接地測定該分析物。敏化熒光法：若分析物不發(fā)熒光，可通過選擇合適的熒光試劑作為能量受體，在分析物受激發(fā)后，通過能量轉(zhuǎn)移的過程，將激發(fā)能傳遞給能量受體，使能量受體分子被激發(fā)，

16、再通過測定能量受體所發(fā)射的熒光強(qiáng)度，可以對分析物進(jìn)行間接測定。熒光偏振免疫分析法(fluorescence polarization immunoassay，F(xiàn)PIA)：是一種定量免疫分析技術(shù)，其基本原理是熒光物質(zhì)經(jīng)單一平面的藍(lán)偏振光(485nm)照射后，吸收光能躍入激發(fā)態(tài)，隨后回復(fù)至基態(tài)，并發(fā)出單一平面的偏振熒光(525nm)。偏振熒光的強(qiáng)弱程度與熒光分子的大小呈正相關(guān)，與其受激發(fā)時轉(zhuǎn)動的速度呈反相關(guān)。五、英文翻譯（本大題共1小題，共10分。）熒光光譜數(shù)據(jù)通常用發(fā)射光譜表示。一個熒光發(fā)射光譜是用熒光強(qiáng)度對波長（nm）或波數(shù)（cm-1）的曲線圖表示。圖1.3表示的是兩個典型的熒光發(fā)射光譜。發(fā)射光譜變化很大，其取決于熒光團(tuán)的化學(xué)結(jié)構(gòu)和溶解熒光物質(zhì)所用的溶劑。某些化合物，如苝的光譜，其重要的結(jié)構(gòu)決定其在基態(tài)和激發(fā)態(tài)的各個振動能級的不同。其它化合物，如奎寧，顯示的光譜表明其結(jié)構(gòu)的振動能級較少。六、計算題（寫出主要計算步驟及結(jié)果。本大題共1小題，共10分。）1. 解： Fs- Fo=KCs （3分），F(xiàn)x- Fo=K