冰凍切片注意事項(xiàng)

1、遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義冰凍切片的注意事項(xiàng)冰凍切片的注意事項(xiàng)20152015年年1111月月遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義 溫度：冷凍組織中水分起填充作用，使組溫度：冷凍組織中水分起填充作用，使組織迅速變硬，由于各種組織所含水分多少織迅速變硬，由于各種組織所含水分多少不同，因此所要求的適宜溫度不同。含水不同，因此所要求的適宜溫度不同。含水分較多的疏松組織易凍結(jié)，而含脂肪較多分較多的疏松組織易凍結(jié)，而含脂肪較多的組織難凍結(jié)。的組織難凍結(jié)。遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義 樣品頭溫度樣品頭溫度 冷凍箱溫度冷凍箱溫度 肝 -15 -20 脾 -10 -2

2、0 腸 -20 -20 卵巢 -15/-20 -20 腎臟 -15 -20 甲狀腺 -15 -20 乳腺 -20 -20 帶脂肪的皮膚 -40 -30 脂肪 -50 -30 腦 -10 -20遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義 如組織塊溫度太低，組織片容易卷曲和碎裂，此時(shí)可把大拇指置于組織塊上幾秒鐘，升高組織塊溫度。 如組織塊溫度太高，組織片易皺褶，可將速凍臺(tái)置于組織面上幾秒鐘以快速降溫。遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義 脂肪組織：因脂肪不會(huì)結(jié)冰，因此脂肪組織在制作冰凍切片時(shí)尤為困難。

3、 解決辦法：只有將溫度降低，讓脂肪變硬。如果是脂肪組織與非脂肪組織混合存在，溫度可降至-25；如果是純脂肪組織，則降至-50.遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義 切片上有條紋：垂直于刀片上的細(xì)條紋，考慮是刀片缺口所致，可能是由于鈣化組織、縫線引起；如出現(xiàn)寬條紋或組織缺損，則可能是由于刀片下粘附有組織殘?jiān)?波浪線樣的皺褶：可能是由于切片機(jī)內(nèi)某個(gè)零件松動(dòng)所致。檢查支撐刀片的刀架，冷凍頭等有無松動(dòng)。遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義切片卷縮：常見原因1:放卷板位置不正確/放卷板較臟/放卷板有缺口2:切片刀溫度不夠低3:切片刀鈍/粘附有

4、組織殘屑4:組織硬度不夠遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義解決對(duì)策：1:調(diào)整放卷板位置，使其切片可以順暢通過2:蓋上冷凍室蓋，讓刀片溫度降低3:及時(shí)清潔刀片，更換刀口4:降低組織塊溫度，使其硬度適當(dāng)5:用OCT/膠水包埋組織，有利于防止切片卷縮遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義切片脫落：常見原因1:組織內(nèi)壞死組織多2:固定液溫度低3:載玻片不干凈/溫度低4:切片太厚遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義解決對(duì)策：1:取材時(shí)：盡量避免壞死組織，如必需取材，則可用酒精燈/電吹風(fēng)將切片吹干防脫2:定期更換固定液，將固定液瓶蓋蓋好，防止固定液揮發(fā)而使其濃度降低3:保持載玻片干

5、凈，置于室溫4:切片不應(yīng)太厚（5um），脂肪可厚些遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義切片過程中的注意事項(xiàng)：防卷板及切片刀和持刀架上的板塊應(yīng)保持干凈，需經(jīng)常用毛筆挑除切片殘余和用柔軟的紙張擦。有時(shí)需要每切完一張切片后就用紙擦一次。因?yàn)檫@個(gè)地方是切片通過和附貼的地方，如果有殘余的包埋劑粘于刀或板上，將會(huì)破壞甚至撕裂切片，便切片不能完整切出。多例多塊組織同時(shí)需做冰凍切片時(shí)，可各自放于不同的支承器上，于冷凍臺(tái)上凍起來，然后依據(jù)不同的編號(hào)，依序切片，這樣做既不費(fèi)時(shí)也不會(huì)亂。遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義放置組織冰凍前，應(yīng)視組織的形狀及走勢(shì)來放置，所謂“砍柴看柴勢(shì)”，切片也是如此，

6、如果胡亂放置，就不能收到很好的效果。組織塊不須經(jīng)各種固定液固定，尤其是含水的固定液，在未達(dá)到固定前，更不能使用。臨床快速冰凍切片，不須要預(yù)先固定，一是為了爭(zhēng)取時(shí)間，二是固定了的組織，反而增加了切片的難度。遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義如果使用未完全固定的組織做冰凍切片，就會(huì)出現(xiàn)冰晶。這是因?yàn)楹墓潭ㄒ涸诮M織未經(jīng)固定前，其中的水份也可滲入到組織中去，當(dāng)冰凍發(fā)生時(shí)，這些水份就存留于組織中，形成了冰晶。當(dāng)切片時(shí)，如果發(fā)現(xiàn)冰凍過度時(shí)，可將冰凍的組織連同支承器取出來，在室溫停留片刻，再行切片，或者用口中哈氣，或者用大拇指按壓組織塊，以此來軟化組織，再行切片。另者，調(diào)高冰凍點(diǎn)。遵義市第一人民醫(yī)院遵從行醫(yī)之道 恪守濟(jì)世之義用于附貼切片的載玻片，不能存放于冷凍處，于室溫存放即可。因?yàn)楫?dāng)附貼切片時(shí)，從室溫中取出的載玻片與冷凍箱中的切片有一種溫度差，當(dāng)溫度較高的載玻片附貼上溫度較低的切片時(shí)，由于兩種物質(zhì)間溫度的差別，