乳腺病變患者血清CerbB2蛋白測(cè)定的臨床意義

1、乳腺病變患者血清C-erbB-2蛋白測(cè)定的臨床意義【摘要】 目的 探討乳腺病變患者C-erbB-2的基因產(chǎn)物P185蛋白血清水平測(cè)定在臨床中的應(yīng)用價(jià)值。方法 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)42例乳腺癌、29例乳腺良性病變及40例體檢者血清中P185蛋白的含量。結(jié)果 乳腺癌和乳腺良性病變患者血清P185蛋白的平均水平分別是（22.67±12.61）、（8.34±5.70） mg/L，兩者之間具有顯著性差異（P<0.05）；與正常體檢者（5.79±4.47） mg/L相比，乳腺癌患者血清P185蛋白水平明顯增高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.

2、05）。以cut-off值為15.8 mg/L判斷，乳腺癌組血清P185蛋白的陽(yáng)性率為45.2%。結(jié)論 用ELISA法檢測(cè)血清中C-erbB-2基因產(chǎn)物P185蛋白水平，有助于術(shù)前對(duì)乳腺病變的輔助診斷。 【關(guān)鍵詞】 乳腺癌 C-erbB-2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) Abstract: Objective To study the extracellular level of P185, a soluble oncoprotein fragment of C-erbB-2, in breast cancer patients. Methods Serum samples from 42 patient

3、s with primary breast cancer, 29 with benign breast diseases and 40 healthy controls, were assayed in an ELISA for P185. Results The serum level of P185 was higher in the cancer patients than in the patients with benign breast diseases and healthy controls （22.67±12.61） mg/L vs. （8.34±5.70

4、） mg/L and (5.79±4.47） mg/L respectively, P<0.05. Let 15.8 mg/L be the cut-off value, the positive rate of P185 for breast cancer patients will be 45.2%. Conclusion Monitoring of serum C-erbB-2 level helps to appreciate the status of breast cancer before it is treated. Key words: breast

5、cancer； C-ebrB-2； ELISA C-erbB-2又稱為EGFR2、neu、HER2、NGL，是一種細(xì)胞來(lái)源癌基因，編碼185×103的表皮生長(zhǎng)因子受體樣跨膜糖蛋白（P185），此糖蛋白有一個(gè)酪氨酸激酶活性的細(xì)胞外跨膜功能區(qū)和細(xì)胞內(nèi)功能區(qū)，在血清中有其可溶性蛋白碎片存在1-2。在多種腫瘤組織中，C-erbB-2癌基因及其蛋白產(chǎn)物P185均有過(guò)表達(dá)和擴(kuò)增3-4。運(yùn)用定量病理學(xué)、免疫組織化學(xué)和分子生物學(xué)等方法研究發(fā)現(xiàn)，20%30%乳腺癌患者的病變組織中有C-erbB-2癌基因擴(kuò)增或過(guò)度表達(dá)。目前普遍認(rèn)為，C-erbB-2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)可作為判斷乳腺癌預(yù)后的獨(dú)立指標(biāo)5-6，并

6、且與較多的腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及較差的內(nèi)分泌治療和化學(xué)治療效果相關(guān)7。本研究運(yùn)用ELISA法定量分析乳腺癌患者血清中C-erbB-2蛋白碎片P185的水平。 1 材料和方法 1.1 一般資料 42例乳腺癌及29例乳腺良性病變患者為2005年6月2006年9月來(lái)我院就診的門診患者，均為女性。乳腺癌組：患者年齡3171歲，平均44.6歲，未經(jīng)任何化療和放療。乳腺良性病變組：包括乳腺增生13例，乳腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤5例，乳腺纖維腺瘤11例，患者年齡2763歲，平均40.2歲。對(duì)照組40例來(lái)源于本院的體檢者，均為女性，年齡3253歲，平均42.2歲，經(jīng)體格檢查，未見乳腺有結(jié)節(jié)、硬塊等情況。 1.2 試劑 C-

7、erbB-2/c-Neu Rapid Format ELISA kit (QIA10)購(gòu)于德國(guó)Merck公司。 1.3 方法 用BD公司的真空采血管（不含抗凝劑和促凝劑）采集患者或體檢人群靜脈全血3 ml，分離血清，-80保存。ELISA法參照試劑使用說(shuō)明書，用酶標(biāo)儀讀取光密度值并換算成質(zhì)量濃度。 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 PASS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量數(shù)據(jù)以±s表示，采用單因素方差分析，P<0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異有顯著性。 2 結(jié) 果 乳腺癌、乳腺良性病變患者及正常體檢者血清P185蛋白水平見表1。各組血清中P185蛋白的檢測(cè)水平分別為：乳腺癌11.4288.34 mg/

8、L、乳腺良性病變2.4430.92 mg/L，正常體檢者0.8824.53 mg/L 。如果以cut-off值為15.8 mg/L判斷，正常體檢組中只有1例P185蛋白陽(yáng)性（1/40，2.5%），乳腺良性病變組中有2例陽(yáng)性（2/29，6.9%），乳腺癌組有19例陽(yáng)性（19/42，45.2%）。表1 乳腺癌、乳腺良性病變及體檢者血清P185蛋白含量 與乳腺癌組比較：*P<0.05 3 討 論 近年來(lái)乳腺癌的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，已成為威脅婦女生命的主要腫瘤之一。隨著科研技術(shù)的飛速發(fā)展，對(duì)于乳腺癌癌基因的研究也不斷深入，特別是對(duì)乳腺腫瘤相關(guān)抗原或特異性抗原的研究。1981年，Shinc等

9、首次通過(guò)NIH/3T3細(xì)胞轉(zhuǎn)染試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了neu基因。Schechter 等進(jìn)一步證實(shí)neu瘤基因的表達(dá)產(chǎn)物為P185蛋白，并且該基因與編碼表皮生長(zhǎng)因子受體的癌基因一樣與病毒癌基因 v-erbB具有同源序列，因此將neu癌基因命名為C-erbB-2。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)在多種腺癌細(xì)胞中C-erbB-2基因均有高水平表達(dá)，并可以用其蛋白產(chǎn)物P185的高表達(dá)間接反映。對(duì)P185的病理研究首先見于乳腺癌。Kalogeraki等8報(bào)道乳腺導(dǎo)管癌C-erbB-2基因表達(dá)率60%，P185的過(guò)量表達(dá)率為10%30%。我們也發(fā)現(xiàn)C-erbB-2蛋白在乳腺導(dǎo)管內(nèi)癌的細(xì)針抽吸物的陽(yáng)性表達(dá)率為57.1%，浸潤(rùn)性導(dǎo)管

10、癌為59.1%9。 由于C-erbB-2蛋白定位于細(xì)胞膜上，它的細(xì)胞外區(qū)域(extracellular domain)會(huì)被切割而釋出，在血清或血漿中，或者是某些細(xì)胞株的培養(yǎng)上清液中，可以找到這種形式的蛋白。通常腫瘤組織中C-erbB-2癌基因有過(guò)度表達(dá)，其血清中C-erbB-2蛋白的濃度會(huì)升高，因此考慮將其用來(lái)作為癌癥的指標(biāo)。在本研究中，正常體檢者中只有1例（1/40）P185蛋白水平增高明顯（cut-off值=15.8 mg/L），乳腺良性病變有2例（6.9%）,而乳腺癌患者中有19例顯著增高（45.2%），與報(bào)道1012一致。 C-erbB-2癌基因編碼的185×103跨膜磷酸糖

11、蛋白2，已確認(rèn)在細(xì)胞外的磷酸糖蛋白作為一個(gè)受體而代表一個(gè)未確定的配體，在細(xì)胞內(nèi)的部分有促進(jìn)酪氨酸激酶活性的作用。Jukkola等12報(bào)道C-erbB-2陽(yáng)性乳腺癌患者預(yù)后差，陽(yáng)性晚期患者對(duì)激素治療及含或不含蒽環(huán)類抗生素聯(lián)合化療的療效均差，復(fù)發(fā)的概率也較大。近年來(lái)，用Herceptin藥物治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌是成功的一個(gè)例子，其實(shí)這種藥物就是一種對(duì)抗C-erbB-2蛋白細(xì)胞外區(qū)域的單克隆抗體，對(duì)過(guò)度表達(dá)C-erbB-2蛋白的患者特別有效。 本研究結(jié)果提示，乳腺癌患者血清中C-erbB-2基因產(chǎn)物P185可視為癌癥的早期標(biāo)記物，有助于術(shù)前對(duì)乳腺病變的輔助診斷；另一方面，推測(cè)可以幫助醫(yī)生選擇適合做Her

12、ceptin治療的患者，并可能用以追蹤治療的療效，有待于進(jìn)一步研究。 【參考文獻(xiàn)】 1 Eccles SA. The role of c-erbB-2/HER2/neu in breast cancer progression and metastasis J. J Mammary Gland Biol Neoplasia,2001,6(4):393-406. 2 Stern DF, Heffernan PA, Weinberg RA. P185, a product of the neu protooncogene is a receptor like pretein associated

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