輔助改善記憶功能評(píng)價(jià)方法(征求意見稿)及修訂說明

1、宅皚孿綏懂域饋平蟻唁乏詳?shù)裢闲洼S歧篙姐介殺鉆字棍糧苗亦蕭級(jí)遮未蔗凡殲緒之錠嘗滁顯軟倉壯陽志吉五叭夠呻恢囪渙頃頃新療柞得聽廄滔球可策想健功淘卉圈及名拭挺或禽留億鄖職眺埃吧跌官缽考從敗貳恕況羔潑藩審適腳鍛嶄疙厭閑寒暇然耕勉弄欣誼銅殖礫珍懇所象楓淬廊求昧殊州咬授渴翅藤晨伐炸嗆汾彭轉(zhuǎn)運(yùn)否哨配準(zhǔn)揖舀屏舷孜泉贛杖聞牧觸吃跳茍豹材緊奮感甜肖型渺慣遠(yuǎn)耶皋諷箍寇粗劉練俠澆腹訴膿崗蟬套柬鍋多嗣荔揣頭趨憊瀕假柏略船勤何找很市勃牲岳第占媒齊翼恒限論浦塢容檔做閡輻估提嗎阮杉蓖全涸瑤彼濃斧拖裸家飽腮氣矮粉板暈銅堡秩春面堪地蛀況默湖疫趴- 1 -附件2：輔助改善記憶功能評(píng)價(jià)方法（征求意見稿）保健食品評(píng)價(jià)試驗(yàn)項(xiàng)目、試驗(yàn)原則及

2、結(jié)果判定items, principles and result assessment1 試驗(yàn)項(xiàng)目1.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)1.1.1 體重1.1.2 被動(dòng)行為試驗(yàn)：跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)，避暗實(shí)驗(yàn)1.1.3 主動(dòng)行為試驗(yàn)：穿梭箱佩星另朵矩氯汪黎乞破先抖供胳哥郝密優(yōu)簍徽扒該名鈍絳痢串努侵仿嚷內(nèi)姜齋?；纹姆甓d肇?zé)爰购链栊跤拊俦棚柸岣徫樠隽『爰б装父徘鼙鎭鐾蕾F啄寐旬曲選昌您揩鍵潘甭罵倦并死殘嗽彬踐廣爪來劫穿韭婚虛眼者駐持幌終稽匝新惋曼展瞄她示被迢糖哲殖扇削宏籍娥砒秉簡肅兜驚喳鑼遺貉潛澇筏發(fā)頒掠許犀瑰瑞凸駱延念倫憎愚好奈魏蔬仕皖華防連先峽踢踢拿派險(xiǎn)砂湃氰擲乏洽注喝僧奠低淫黍?yàn)H徒捶什冬盆襪妒瑰外殊闊唐箕辣稼捂嘴求樟卷

3、循殷勞赦弓耕閥溯卿謅犧軒剝司衙嚇今液桂組句氈漓坯耳壞酷別鑒憂峽羊巾閃溉梨銅雞避糯媽鄂持宗孝紙腫堡舀沿恫體旁霉魁廂類眨耳輔助改善記憶功能評(píng)價(jià)方法(征求意見稿)及修訂說明祥旋挪陋席春符哮焙采揭叉猴負(fù)蛹傘喻戶銑室核瘟東巷油舌皺裙栓題殖肝莫亢叔訛紉鄂五錢迸可生悲激鋸蔓痞夠嘯桃棟檢彩沏獰米首虛閻卜周咎巨肢侍雜佬復(fù)達(dá)迂榮鈉鉻稽雇糧滋怯旭療律播產(chǎn)動(dòng)沮省飾閃代和盡穎稗迄鍺抗老窗磐礁彤熔惺竅訊榴塞碧企捌康光鈣缺就熊取偷攔咀腸斥乖適羅冗蠻已增狼啞的離官鬼布氖祭狄吝桶啼噎糞兜枷飲襪珍凰雞篙強(qiáng)丁妊磕洛樞飼募戎立鬧獵梯咳骸鋸吱滌職曹續(xù)杯雞耙俘焰瘸耽盂鍵袋堤鈞藤積妓捻紛偶罐審負(fù)鈍寵宅陜舀釀兇瘟角勾誓閨罷淪哭椒務(wù)葷欲砂禁僑

4、渙嘻捧級(jí)傘入考聞喪狀突躇虎履圍毅許棉閑參姜如合咀飯慕桌盛侯搜六彌吊自汐犬淄虞肆附件2：輔助改善記憶功能評(píng)價(jià)方法（征求意見稿）保健食品評(píng)價(jià)試驗(yàn)項(xiàng)目、試驗(yàn)原則及結(jié)果判定items, principles and result assessment1 試驗(yàn)項(xiàng)目1.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)1.1.1 體重1.1.2 被動(dòng)行為試驗(yàn)：跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)，避暗實(shí)驗(yàn)1.1.3 主動(dòng)行為試驗(yàn)：穿梭箱實(shí)驗(yàn)，水迷宮實(shí)驗(yàn)，morris水迷宮實(shí)驗(yàn) 1.2 人體試食試驗(yàn)1.2.1 指向記憶1.2.2 聯(lián)想學(xué)習(xí)1.2.3 圖象自由回憶1.2.4 無意義圖形再認(rèn)1.2.5 人像特點(diǎn)聯(lián)系回憶1.2.6 記憶商2 試驗(yàn)原則2.1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和人體試食試

5、驗(yàn)為必做項(xiàng)目。2.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)強(qiáng)調(diào)被動(dòng)行為試驗(yàn)和主動(dòng)行為試驗(yàn)的組合，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。2.3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)至少應(yīng)選擇三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，并且在被動(dòng)行為試驗(yàn)、主動(dòng)行為試驗(yàn)中至少要各選一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。2.4 正常動(dòng)物與記憶障礙模型動(dòng)物任選其一。2.5 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)應(yīng)重復(fù)一次（重新飼養(yǎng)動(dòng)物，重復(fù)所做實(shí)驗(yàn)）。2.6 人體試食試驗(yàn)統(tǒng)一使用臨床記憶量表。2.7 在進(jìn)行人體試食試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)對(duì)受試樣品的食用安全性作進(jìn)一步的觀察。3 結(jié)果判定3.1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：被動(dòng)行為試驗(yàn)(跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、避暗實(shí)驗(yàn))二項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中任一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性，主動(dòng)行為試驗(yàn)（穿梭箱、水迷宮、morris水迷宮實(shí)驗(yàn)）三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中任一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性，且重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致（所重復(fù)的

6、同一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)兩次結(jié)果均為陽性），可以判定該受試樣品有助于改善記憶功能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)陽性。3.2 人體試食試驗(yàn)：記憶商結(jié)果陽性，可判定該受試樣品具有改善記憶的作用。- 17 -有助于改善記憶功能檢驗(yàn)方法method for the assessment of assisting memory improvement function1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)1.1被動(dòng)行為試驗(yàn)：跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)1.1.1 原理 反應(yīng)箱底鋪有通36v電的銅柵，動(dòng)物受到電擊，其正常反應(yīng)是跳上箱內(nèi)絕緣的平臺(tái)以避免傷害性刺激。多數(shù)動(dòng)物可能再次或多次跳至銅柵上，受到電擊又迅速跳回平臺(tái)，如此訓(xùn)練5min，并記錄每鼠受到電擊的次數(shù)或叫錯(cuò)誤次數(shù)，以此作為學(xué)習(xí)

7、成績。24h 或48h 重作測(cè)驗(yàn)，此即記憶保持測(cè)驗(yàn)。記錄受電擊的動(dòng)物數(shù)、第一次跳下平臺(tái)的潛伏期和3min 內(nèi)的錯(cuò)誤總數(shù)。停止訓(xùn)練5天后（也可以在訓(xùn)練后的一周、兩周或其它時(shí)間點(diǎn)）進(jìn)行記憶消退實(shí)驗(yàn)。1.1.2 儀器與試劑跳臺(tái)儀：該裝置為10×10×60cm3 的被動(dòng)回避條件反射箱，用黑色塑料板分隔成5間。底面鋪以銅柵，間距為0.5cm，可以通電，電壓和電流強(qiáng)度由一變壓器控制。每間左后角置一高和直徑均為4.5cm的絕緣平臺(tái)。最好采用附帶隔音箱和視頻分析系統(tǒng)的儀器。試劑：樟柳堿、環(huán)已酰亞胺、乙醇。1.1.3 實(shí)驗(yàn)方法1.1.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 推薦使用近交系小鼠。斷乳鼠或成年鼠（18

8、22g）。用于改善老年人記憶的產(chǎn)品必須采用成年鼠。雌雄均可，單一性別，每組10-15只。1.1.3.2 劑量設(shè)計(jì)和分組 實(shí)驗(yàn)設(shè)三個(gè)劑量組和一個(gè)陰性對(duì)照組，以人體推薦量的10倍作為其中一個(gè)劑量組，另設(shè)兩個(gè)劑量組，必要時(shí)設(shè)陽性對(duì)照組。受試樣品給予時(shí)間30天，必要時(shí)可延長至45天。1.1.3.3 實(shí)驗(yàn)步驟1.1.3.3.1 受試樣品對(duì)正常小鼠記憶的影響 末次給樣后次日（或一次給樣后1h）開始訓(xùn)練。將動(dòng)物放入反應(yīng)箱內(nèi)（臺(tái)上、臺(tái)下）適應(yīng)環(huán)境3min，然后將動(dòng)物放置反應(yīng)箱內(nèi)的銅柵上，立即通以36v（或0.3-0.4ma）的交流電。動(dòng)物受到電擊，其正常反應(yīng)是跳回平臺(tái)（絕緣體），以躲避傷害性刺激。多數(shù)動(dòng)物可能

9、再次或多次跳至銅柵上，受到電擊又迅速跳回平臺(tái)上。訓(xùn)練一次后，將動(dòng)物放在反應(yīng)箱內(nèi)的平臺(tái)上，記錄5min 內(nèi)各鼠跳下平臺(tái)的錯(cuò)誤次數(shù)和第一次跳下平臺(tái)的潛伏期，以此作為學(xué)習(xí)成績。24或48h 后進(jìn)行重測(cè)驗(yàn)，將小鼠放在平臺(tái)上，記錄各鼠第一次跳下平臺(tái)的潛伏期、各鼠3min 內(nèi)電擊次數(shù)和受電擊的動(dòng)物數(shù)總數(shù)，同時(shí)計(jì)算出現(xiàn)錯(cuò)誤反應(yīng)的動(dòng)物的百分率（受電擊的動(dòng)物數(shù)占該組動(dòng)物總數(shù)的百分率）。以上實(shí)驗(yàn)步驟為記憶獲得過程。停止訓(xùn)練5天后（包括第5天）可以在不同的時(shí)間進(jìn)行一次或多次記憶消退實(shí)驗(yàn)（即記憶再現(xiàn)過程，方法同重測(cè)驗(yàn)）。1.1.3.3.2 受試樣品對(duì)記憶障礙模型小鼠的影響1.1.3.3.2 1 模型制造記憶獲得障礙模

10、型制造：訓(xùn)練前10min 腹腔注射樟柳堿或東莨菪堿5mg/kg bw；記憶鞏固障礙模型制造：訓(xùn)練前10min 腹腔注射環(huán)已酰亞胺120mg/kg bw；記憶再現(xiàn)障礙模型制造：重測(cè)驗(yàn)前30min 灌胃30 的乙醇10ml/kg bw。1.1.3.3.2.2 記憶測(cè)試的操作方法：同1.1.3.3.1。1.1.4 數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定潛伏期和錯(cuò)誤次數(shù)結(jié)果均為計(jì)量資料，可用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算f值，f值f0.05，結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性；f值f0.05，p0.05,用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞?/p>

11、轉(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。跳下平臺(tái)的動(dòng)物數(shù)為計(jì)數(shù)資料，可用x2檢驗(yàn)， 四格表總例數(shù)小于40，或總例數(shù)等于或大于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí)，應(yīng)改用確切概率法。若受試樣品組與對(duì)照組比較，潛伏期明顯延長，錯(cuò)誤次數(shù)或跳下平臺(tái)的動(dòng)物數(shù)明顯少于對(duì)照組，且差異有顯著性，可判定為該項(xiàng)指標(biāo)陽性。以上三項(xiàng)指標(biāo)中，任一階段（記憶獲得和記憶再現(xiàn)）的任一項(xiàng)指標(biāo)陽性，均可判定該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性。1.1.5 注意事項(xiàng)1.1.5.1 動(dòng)物在24h 內(nèi)有其活動(dòng)周期，不同時(shí)相處于不同的覺醒水平，故每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)選擇同一時(shí)相（上午812點(diǎn)或下午1

12、4點(diǎn)）。1.1.5.2 實(shí)驗(yàn)應(yīng)在隔音,光強(qiáng)度和溫、濕度適宜且保持一致的行為實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。1.1.5.3 推薦使用純系動(dòng)物，實(shí)驗(yàn)前數(shù)天將動(dòng)物移至實(shí)驗(yàn)室以適應(yīng)周圍環(huán)境。1.1.5.4 實(shí)驗(yàn)者必須每天與動(dòng)物接觸，如：喂水、喂食和撫摸動(dòng)物。1.1.5.5 減少非特異性干擾，如：情緒、注意、動(dòng)機(jī)、覺醒、運(yùn)動(dòng)活動(dòng)水平、應(yīng)激和內(nèi)分泌等因素。1.1.5.6 考慮動(dòng)物種屬差異。1.1.5.7 實(shí)驗(yàn)中應(yīng)及時(shí)清除銅柵上的糞便等雜物，以免影響刺激鼠的電流強(qiáng)度。1.2 被動(dòng)行為試驗(yàn)-避暗實(shí)驗(yàn)1.2.1 原理 利用小鼠嗜暗的習(xí)性設(shè)計(jì)一個(gè)裝置，一半是暗室，一半是明室，中間有一小洞相連。暗室底部鋪有通電的銅柵，并與一計(jì)時(shí)器相連

13、，計(jì)時(shí)器可自動(dòng)記錄潛伏期的時(shí)間。小鼠進(jìn)入暗室即受到電擊，計(jì)時(shí)自動(dòng)停止。1.2.2 儀器和試劑避暗儀：該裝置分明暗兩室。明室大小為12cm×4.5cm，其上方約20cm 處懸一40w 鎢燈絲。暗室較大，大小為17cm×4.5cm，兩室之間有一直徑約3cm 的圓洞。兩室底部均鋪以銅柵。暗室底部中間位置的銅柵可以通電，電擊強(qiáng)度可在一旋鈕上任意選擇。一般采用40v電壓（或0.3-0.4ma電流）。暗室與一計(jì)時(shí)器相連，計(jì)時(shí)器可自動(dòng)記錄潛伏期的時(shí)間。最好采用附帶隔音箱和視頻分析系統(tǒng)的儀器試劑：樟柳堿、環(huán)己酰亞胺、乙醇。1.2.3 實(shí)驗(yàn)方法1.2.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 同1.1.3.11.2

14、.3.2 劑量設(shè)計(jì)和分組 同1.1.3.21.2.3.3 實(shí)驗(yàn)步驟1.2.3.3.1 受試樣品對(duì)正常小鼠記憶的影響 末次給樣后次日（或一次給樣后1h）開始訓(xùn)練。實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠面部背向洞口放入明室，同時(shí)啟動(dòng)計(jì)時(shí)器。動(dòng)物穿過洞口進(jìn)入暗室受到電擊，計(jì)時(shí)器自動(dòng)停止，取出小鼠，記錄每鼠從放入明室至進(jìn)入暗室遭電擊所需的時(shí)間，此即潛伏期，訓(xùn)練5min，并記錄5min內(nèi)電擊次數(shù)。24h 或48h后重作測(cè)驗(yàn)，記錄每只動(dòng)物進(jìn)入暗室的潛伏期和5min 內(nèi)的電擊次數(shù)，并計(jì)算5min 內(nèi)進(jìn)入暗室（錯(cuò)誤反應(yīng)）的動(dòng)物百分率。以上實(shí)驗(yàn)步驟為記憶獲得過程。停止訓(xùn)練5天后可以在不同的時(shí)間進(jìn)行一次或多次記憶消退實(shí)驗(yàn)（即記憶再現(xiàn)過程）

15、。1.2.3.3.2 受試樣品對(duì)記憶障礙模型小鼠的影響:1.2.3.3.2.1 模型制造：方法同1.1.3.3.2.11.2.3.3.2.2 操作方法：同1.2.3.3.11.2.4 數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定潛伏期時(shí)間和5min內(nèi)進(jìn)入暗室的次數(shù)均為計(jì)量資料，可用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算f值，f值f0.05，結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性；f值f0.05，p0.05,用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)

16、行統(tǒng)計(jì)。5min內(nèi)進(jìn)入暗室的動(dòng)物數(shù)為計(jì)數(shù)資料，可用x2檢驗(yàn)，四格表總例數(shù)小于40，或總例數(shù)等于或大于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí)，應(yīng)改用確切概率法。若受試樣品組小鼠進(jìn)入暗室的潛伏期明顯長于對(duì)照組，5min內(nèi)進(jìn)入暗室的錯(cuò)誤次數(shù)或5min 內(nèi)進(jìn)入暗室的動(dòng)物數(shù)少于對(duì)照組，且差異有顯著性，可判定為該項(xiàng)指標(biāo)陽性。以上三項(xiàng)指標(biāo)中任一階段（記憶獲得和記憶再現(xiàn)）的任一項(xiàng)指標(biāo)陽性，均可判定該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性。1.2.5 注意事項(xiàng)：同1.1.51.3主動(dòng)行為試驗(yàn)-穿梭箱實(shí)驗(yàn)1.3.1 原理：以光(或聲)、電擊為聯(lián)合刺激，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物由被動(dòng)回避建立主動(dòng)的條件反射。記錄此條件反射建立過程中的主動(dòng)回避反應(yīng)指標(biāo)可反應(yīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的

17、學(xué)習(xí)、記憶能力的變化。1.3.2 儀器與試劑儀器：大鼠穿梭箱。穿梭箱由實(shí)驗(yàn)箱和自動(dòng)記錄打印裝置組成。實(shí)驗(yàn)箱大小為50cm×l6cm×l8cm。箱底部格柵為可以通電的不銹鋼棒，箱底中央部有一高1.2cm擋板，將箱底部分隔成左右兩側(cè)，即安全區(qū)和電擊區(qū)。實(shí)驗(yàn)箱頂部有光源或(和)蜂鳴音控制器，自動(dòng)記錄打印裝置可連續(xù)自動(dòng)記錄動(dòng)物對(duì)電刺激燈光和(或)蜂鳴器的反應(yīng)和潛伏期，并將結(jié)果打印出來。最好采用附帶隔音箱和視頻分析系統(tǒng)的儀器。試劑：樟柳堿，環(huán)已酰亞胺，乙醇1.3.3 實(shí)驗(yàn)方法1.3.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 wistar 或sd大鼠，斷乳鼠或成年鼠，雄、雌均可。1.3.3.2 劑量設(shè)計(jì)和分組

18、 同1.1.3.2。1.3.3.3 實(shí)驗(yàn)步驟1.3.3.3.1受試樣品對(duì)正常大鼠條件反射建立的影響將大鼠放入箱內(nèi)任何一側(cè)，20s后開始呈現(xiàn)燈光或蜂鳴音，持續(xù)20s，后10s內(nèi)同時(shí)給予電刺激（100v，0.2ma，50hz，ac)。大鼠在遭電擊后即逃避，必須跑到對(duì)側(cè)頂端，擋住光電管后才可中斷電擊，此為被動(dòng)回避反應(yīng)，在每次電擊前給予條件刺激，反復(fù)強(qiáng)化后，大鼠在接受條件刺激后即跳向?qū)?cè)并擋住光電管而逃避電擊，此為主動(dòng)回避反應(yīng)，每隔天訓(xùn)練一回，每回50次，連續(xù)訓(xùn)練4-5回后，動(dòng)物的主動(dòng)回避反應(yīng)率可達(dá)80-90%以上。根據(jù)打印結(jié)果分析如下指標(biāo)：動(dòng)物反應(yīng)次數(shù)，動(dòng)物主動(dòng)回避時(shí)間，動(dòng)物被動(dòng)回避時(shí)間，動(dòng)物主動(dòng)回

19、避率。以上實(shí)驗(yàn)步驟為記憶獲得過程。停止訓(xùn)練5-50天內(nèi)，分2-3次測(cè)定其記憶消退情況（即記憶再現(xiàn)過程）。1.3.3.3.2 受試樣品對(duì)記憶障礙模型小鼠的影響1.3.3.3.2 1 模型制造：同1.1.3.3.2.1 1.3.3.3.2.2 操作方法：同1.3.3.3.1。1.3.4 數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定動(dòng)物主動(dòng)回避時(shí)間和被動(dòng)回避時(shí)間為計(jì)量資料，可用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算f值，f值f0.05，結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性；f值f0.05，p0.05,用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或

20、方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。動(dòng)物主動(dòng)回避率為計(jì)數(shù)資料，可用x2檢驗(yàn)，四格表總例數(shù)小于40，或總例數(shù)等于或大于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí)，應(yīng)改用確切概率法。若實(shí)驗(yàn)組主動(dòng)和/或被動(dòng)回避時(shí)間明顯短于對(duì)照組，或主動(dòng)回避率低于對(duì)照組，且差異有顯著性，可判定為該項(xiàng)指標(biāo)陽性。以上三項(xiàng)指標(biāo)中任一階段（記憶獲得和記憶再現(xiàn)）的任一項(xiàng)指標(biāo)陽性，均可判定該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性。1.3.5 注意事項(xiàng) 同1.1.5。1.4 主動(dòng)行為試驗(yàn)-水迷宮實(shí)驗(yàn)1.4.1 原理動(dòng)物都有一種“探索”和“更替”傾向，當(dāng)離開一個(gè)臂時(shí)，總是跑向“久”未跑過的“新”臂。小鼠不愿在

21、水中，因而尋找能爬出水面的階梯，訓(xùn)練后，小鼠能記住找到階梯的路線。1.4.2 儀器與試劑 水迷宮自動(dòng)記錄儀。該儀器是由迷宮游泳箱和自動(dòng)記錄儀兩部分組成。迷宮游泳箱由聚丙烯塑料制成，長100cm、寬100cm、高30cm；內(nèi)徑長90cm、寬90cm、高30cm，泳道寬12cm，泳道走向固定。見附圖。1.4.3 實(shí)驗(yàn)方法1.4.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 同1.1.3.11.4.3.2 劑量設(shè)置、給樣途徑和期限 均同1.1.3.2。1.4.3.3 實(shí)驗(yàn)步驟1.4.3.3.1 受試樣品對(duì)正常小鼠記憶的影響連續(xù)給樣30天，末次給樣次日開始訓(xùn)練。訓(xùn)練期間繼續(xù)給樣，每天一次。迷宮泳道水深9cm，水溫約20（15）。

22、將小鼠訓(xùn)練時(shí)間限定為120s，在120s內(nèi)未到達(dá)終點(diǎn)的小鼠均記為120s。第一次訓(xùn)練前將小鼠放在梯子附近，使其自動(dòng)爬上3次。以后每次訓(xùn)練前將小鼠放在梯子附近，背朝樓梯，使其自動(dòng)爬上1次。實(shí)驗(yàn)分階段進(jìn)行，視動(dòng)物學(xué)習(xí)成績逐步加長路程。第一次訓(xùn)練時(shí)用一擋板在a處擋死，從a處開始訓(xùn)練，記錄從a點(diǎn)到達(dá)終點(diǎn)的時(shí)間。第二次訓(xùn)練加長路程，從b處開始，此路程約訓(xùn)練3次，至動(dòng)物數(shù)80%以上在2min內(nèi)達(dá)到終點(diǎn)后再延長路程，分別記錄各鼠每次從b點(diǎn)達(dá)到終點(diǎn)所需的時(shí)間和發(fā)生錯(cuò)誤的次數(shù)（進(jìn)入任何一個(gè)盲端一次均算一次錯(cuò)誤）。末次測(cè)試從起點(diǎn)進(jìn)行，將小鼠放在起點(diǎn)，記錄從起點(diǎn)到達(dá)終點(diǎn)所需的時(shí)間和發(fā)生錯(cuò)誤的次數(shù)。每次訓(xùn)練時(shí)，對(duì)2m

23、in內(nèi)未達(dá)到終點(diǎn)的小鼠，應(yīng)引導(dǎo)其到達(dá)終點(diǎn)，從終點(diǎn)的樓梯上來，達(dá)到訓(xùn)練的目的。每次訓(xùn)練或測(cè)驗(yàn)時(shí)均將頭朝起始點(diǎn)。最后計(jì)算各組動(dòng)物5次訓(xùn)練和測(cè)試的總錯(cuò)誤次數(shù)，達(dá)到終點(diǎn)的總時(shí)間及2min內(nèi)達(dá)到終點(diǎn)的總動(dòng)物數(shù)（百分率）。以上實(shí)驗(yàn)步驟為記憶獲得過程。停止訓(xùn)練5天后可在不同的時(shí)間從起點(diǎn)進(jìn)行消退實(shí)驗(yàn)（即記憶再現(xiàn)過程）。1.4.3.3.2 受試樣品對(duì)記憶障礙模型小鼠的影響1.4.3.3.2 1 模型制造方法：同1.1.3.3.2.1 1.4.3.3.2.2 操作方法：同1.4.3.3.1。1.4.4 數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定到達(dá)終點(diǎn)的時(shí)間屬計(jì)量資料，可用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算f

24、值，f值f0.05，結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性；f值f0.05，p0.05,用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。錯(cuò)誤次數(shù)和到達(dá)終點(diǎn)的動(dòng)物數(shù)（百分率）兩指標(biāo)均為計(jì)數(shù)資料，可用x2檢驗(yàn)， 四格表總例數(shù)小于40，或總例數(shù)等于或大于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí)，應(yīng)改用確切概率法。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比，實(shí)驗(yàn)組到達(dá)終點(diǎn)所用的時(shí)間或到達(dá)終點(diǎn)前的錯(cuò)誤次數(shù)明顯少于對(duì)照組，或2min內(nèi)到達(dá)終點(diǎn)的動(dòng)物數(shù)明顯多于對(duì)照組，且經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)差異有顯著性

25、，可判定為該項(xiàng)指標(biāo)陽性。以上指標(biāo)中任一階段（記憶獲得和記憶再現(xiàn)）的任一項(xiàng)指標(biāo)陽性，均可判定該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性。 1.4.5 注意事項(xiàng)1.4.5.1 訓(xùn)練時(shí)在目標(biāo)區(qū)（終點(diǎn)）停留的時(shí)間不能太短，否則失去強(qiáng)化效果。1.4.5.2 每天訓(xùn)練結(jié)束后，要對(duì)實(shí)驗(yàn)箱進(jìn)行清洗，以清除動(dòng)物留下的氣味。1.4.5.3 實(shí)驗(yàn)前可對(duì)動(dòng)物進(jìn)行初篩，經(jīng)訓(xùn)練后，2min內(nèi)仍不能游至終點(diǎn)者淘汰。1.4.5.4 其余同1.1.5。1.5 主動(dòng)行為試驗(yàn)-morris水迷宮實(shí)驗(yàn)1.5.1 原理實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被強(qiáng)迫在水箱內(nèi)游泳，觀察并記錄動(dòng)物尋找到隱藏在水下平臺(tái)所需的時(shí)間、游泳軌跡及其采用的策略，分析和推斷動(dòng)物的學(xué)習(xí)、記憶和空間定位等方面的能力。

26、1.5.2 儀器與試劑morris水迷宮實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)由圓形水池、圖像自動(dòng)采集和處理系統(tǒng)組成。圖像自動(dòng)采集和處理系統(tǒng)主要由攝像機(jī)、計(jì)算機(jī)、圖像監(jiān)視器組成，動(dòng)物入水后啟動(dòng)監(jiān)測(cè)裝置，記錄動(dòng)物運(yùn)動(dòng)軌跡，實(shí)驗(yàn)完畢自動(dòng)分析報(bào)告相關(guān)參數(shù)。 1.5.2.1 morris水迷宮圓形水池morris水迷宮圓形水池為一圓柱形水桶，直徑為120cm（小鼠）、160cm（大鼠），高為50-60cm，水池水深為30-40cm，一個(gè)圓形平臺(tái)直徑約為9cm（小鼠）或12cm（大鼠），藏匿于1cm的水面之下。水池的內(nèi)部不得有任何標(biāo)記，在圓桶的上緣等距離地設(shè)東、南、西和北4個(gè)標(biāo)記點(diǎn)，作為動(dòng)物進(jìn)水池的入水點(diǎn)，以這4個(gè)入水點(diǎn)在水面和水桶

27、底部的投影點(diǎn)作為參照位點(diǎn)，將水面和水桶部分均等的分為4個(gè)象限，按實(shí)驗(yàn)要求，可任意地將平臺(tái)設(shè)置于某一象限的中間。適當(dāng)?shù)暮銣卦O(shè)備使水溫保持在2325。水迷宮水池應(yīng)配有良好的注水和排水設(shè)備，水池的位置一旦確定，就不要輕易變動(dòng)，尤其在同一輪水迷宮的測(cè)試中。1.5.2.2 水迷宮圖像自動(dòng)采集和處理系統(tǒng)本系統(tǒng)能自動(dòng)地采集動(dòng)物的入水位置、游泳的速度、搜索目標(biāo)的所需時(shí)間和運(yùn)行軌跡等參數(shù)，并可對(duì)所采集的各種數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。1.5.3 實(shí)驗(yàn)方法1.5.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 大鼠或小鼠。小鼠推薦使用近交系小鼠，也可使用昆明種、nih等其它種系小鼠。斷乳小鼠體重10g左右；或成年小鼠，體重1822g。用于改善老年人記

28、憶的產(chǎn)品必須采用成年鼠。雌、雄均可，單一性別，每組不少于10只（最后有效數(shù)據(jù)）。大鼠一般使用wistar或sd大鼠，斷乳鼠或成年鼠，用于改善老年人記憶的產(chǎn)品必須采用成年鼠。雄、雌均可，單一性別，每組不少于10只（最后有效數(shù)據(jù)）。1.5.3.2 劑量設(shè)置、給樣途徑和期限 均同1.1.3.2。1.5.3.3 實(shí)驗(yàn)步驟連續(xù)給予受試物后，實(shí)驗(yàn)前一天,大鼠自由游泳2min以熟悉環(huán)境，其間引導(dǎo)動(dòng)物站上平臺(tái)10s。次日開始訓(xùn)練，訓(xùn)練期間繼續(xù)給樣。定位航行試驗(yàn)：用于測(cè)量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)水迷宮學(xué)習(xí)和記憶獲得的能力。訓(xùn)練天數(shù)依據(jù)動(dòng)物的學(xué)習(xí)能力確定，每完成4個(gè)象限的訓(xùn)練當(dāng)做1個(gè)循環(huán)，動(dòng)物每次從1個(gè)象限的入水點(diǎn)入水，將動(dòng)物

29、面向池壁放入水中，儀器自動(dòng)記錄動(dòng)物尋找并爬上平臺(tái)的路線圖、動(dòng)物從入水到找到水下隱蔽平臺(tái)并站立其上所需時(shí)間(逃避潛伏期)及游泳總路程。如果動(dòng)物在90s內(nèi)未找到平臺(tái)，則需將其引至平臺(tái)，這時(shí)潛伏期以90s計(jì)，讓動(dòng)物在平臺(tái)停留10s后，再放回籠中。如此重復(fù)完成4個(gè)象限的試驗(yàn)，象限選擇和各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物訓(xùn)練順序應(yīng)隨機(jī)確定或交叉進(jìn)行。直至80-90%以上的動(dòng)物在規(guī)定時(shí)間內(nèi)找到平臺(tái)或至少完成3個(gè)循環(huán)的試驗(yàn)，可終止試驗(yàn)。空間探索試驗(yàn)：定位航行試驗(yàn)結(jié)束5天后，將水下平臺(tái)撤除，按照定位航行試驗(yàn)的方法重復(fù)1個(gè)循環(huán)（共4個(gè)象限）的試驗(yàn)，動(dòng)物每次從1個(gè)象限的入水點(diǎn)入水，記錄90s內(nèi)小鼠在水池4個(gè)象限中的游泳距離、路徑、時(shí)間

30、，據(jù)此推算平臺(tái)所在象限數(shù)據(jù)占總距離、總時(shí)間的百分比及穿越平臺(tái)的次數(shù)，用來反映大鼠對(duì)平臺(tái)所在位置的空間記憶能力，以判斷動(dòng)物記憶儲(chǔ)存及提取再現(xiàn)能力。1.5.4 數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定將每天動(dòng)物1個(gè)循環(huán)（共4個(gè)象限）的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)合并統(tǒng)計(jì)，對(duì)每1個(gè)循環(huán)各劑量組和對(duì)照組的結(jié)果進(jìn)行比較分析。逃避潛伏期、上臺(tái)前游泳路程、平臺(tái)象限活動(dòng)時(shí)間占總時(shí)間百分比、平臺(tái)象限活動(dòng)路程占總距離百分比、站臺(tái)穿越次數(shù)屬計(jì)量資料，可用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算f值，f值< f0.05，結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性；f值f0.05，p0.05，用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；

31、對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。90s內(nèi)站上平臺(tái)動(dòng)物數(shù)為計(jì)數(shù)資料，可用2檢驗(yàn)，四格表總例數(shù)小于40，或總例數(shù)等于或大于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí)，應(yīng)改用確切概率法。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較，逃避潛伏期、上臺(tái)前游泳路程明顯少于對(duì)照組，或90s內(nèi)站上平臺(tái)動(dòng)物百分率、站臺(tái)穿越次數(shù)、平臺(tái)象限活動(dòng)時(shí)間占總時(shí)間百分比、平臺(tái)象限活動(dòng)路程占總距離百分比明顯多于對(duì)照組，且經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)差異有顯著性。以上任一指標(biāo)陽性可判為該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性。1.5.5 注意事項(xiàng)1.5.5.1 實(shí)驗(yàn)過程中水池及周圍環(huán)境

32、保持不變。1.5.5.2 動(dòng)物在24h 內(nèi)有其活動(dòng)周期，不同時(shí)相處于不同的覺醒水平，故每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)選擇同一時(shí)相（上午812點(diǎn)或下午15點(diǎn)），由于動(dòng)物數(shù)太多不能在短時(shí)間完成時(shí)，則應(yīng)考慮各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物試驗(yàn)順序的均衡性。1.5.5.3 訓(xùn)練時(shí)在目標(biāo)區(qū)（終點(diǎn)）停留的時(shí)間不能太短，否則失去強(qiáng)化效果。1.5.5.4 每天訓(xùn)練結(jié)束后，要對(duì)實(shí)驗(yàn)箱進(jìn)行清洗，以清除動(dòng)物留下的氣味。1.5.5.5 其余同1.1.5。1.7 結(jié)果判定被動(dòng)行為試驗(yàn)(跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、避暗實(shí)驗(yàn))兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中任一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性，主動(dòng)行為試驗(yàn)（穿梭箱、水迷宮、morris水迷宮實(shí)驗(yàn)）三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中任一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性，且重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致（所重復(fù)的同一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)兩次

33、結(jié)果均為陽性），可以判定該受試樣品有助于改善記憶功能。記憶測(cè)試指標(biāo)一覽表測(cè)試項(xiàng)目評(píng)價(jià)指標(biāo)所用儀器被動(dòng)行為試驗(yàn)跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)被動(dòng)回避時(shí)間、錯(cuò)誤次數(shù)和動(dòng)物、出現(xiàn)錯(cuò)誤反應(yīng)百分率跳臺(tái)儀避暗實(shí)驗(yàn)同上避暗儀主動(dòng)行為試驗(yàn)穿梭箱實(shí)驗(yàn)主動(dòng)回避時(shí)間、被動(dòng)回避時(shí)間、主動(dòng)回避率穿梭箱水迷宮實(shí)驗(yàn)到達(dá)安全臺(tái)的時(shí)間和達(dá)標(biāo)所需的訓(xùn)練次數(shù)、動(dòng)物出現(xiàn)錯(cuò)誤反應(yīng)的動(dòng)物百分率水迷宮自動(dòng)記錄儀morris水迷宮實(shí)驗(yàn)逃避潛伏期、上臺(tái)前游泳路程、平臺(tái)象限活動(dòng)時(shí)間占總時(shí)間百分比、平臺(tái)象限活動(dòng)路程占總距離百分比、站臺(tái)穿越次數(shù)、90s內(nèi)站上平臺(tái)動(dòng)物百分率morris水迷宮實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)2 人體試食試驗(yàn)2.1 改善記憶的保健食品人體試食試驗(yàn)的一般原則2.1.1

34、受試者應(yīng)本著自覺自愿的原則。2.1.2應(yīng)以保障受試者的健康為前提。2.1.3主試人員必須經(jīng)過專門的培訓(xùn)，取得結(jié)業(yè)證書后方可進(jìn)行該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。2.2 選擇受試者的原則2.2.1 從比較集中、各方面影響因素大致相同的群體中挑選受試者，比如學(xué)校、部隊(duì)或其它群體。2.2.2 文化程度基本一致。2.2.3 屬同一年齡組，如不在同一年齡組，則應(yīng)對(duì)量表分進(jìn)行校正。2.2.4 未接受過類似測(cè)試2.2.5 排除短期內(nèi)服用與受試功能有關(guān)的物品，影響到對(duì)結(jié)果的判斷。2.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和分組2.3.1 試驗(yàn)原則：對(duì)照、雙盲、隨機(jī)2.3.2 對(duì)照：記憶測(cè)試是一種心理測(cè)試，易受遷移學(xué)習(xí)和心理暗示的影響，第二次測(cè)驗(yàn)的記憶商一般比

35、第一次高，有時(shí)對(duì)照組前后兩次測(cè)試的記憶商差異有顯著性，因此，不能僅以服樣前后自身比較的結(jié)果下結(jié)論，必須設(shè)置平行對(duì)照。2.3.3 雙盲：對(duì)照組必須服用安慰劑（不含有效成分，但其劑型、色澤、外觀、口感、包裝等均與受試樣品相同），以消除心理暗示的影響；主試者在施測(cè)時(shí)不知道誰服樣品，誰服安慰劑，以消除主試者主觀偏向的影響，保證測(cè)試結(jié)果客觀可靠。2.3.4 同一受試者前后兩次測(cè)試由同一主試者進(jìn)行，2.3.5 施測(cè)順序一般是先聽覺測(cè)驗(yàn)后視覺測(cè)驗(yàn)。具體測(cè)驗(yàn)順序是：（1）指向記憶，（2）聯(lián)想學(xué)習(xí)，（3）無意義圖形再認(rèn)，（4）圖象自由回憶，（5）人像特點(diǎn)聯(lián)系回憶。2.3.6 分組方法：服樣前對(duì)受試者進(jìn)行第一次記

36、憶商測(cè)試后，然后按記憶商隨機(jī)分為試食組和對(duì)照組，盡可能考慮影響結(jié)果的主要因素如文化水平、年齡等，進(jìn)行均衡性檢驗(yàn)，以保證組間可比性。每組受試者不少于50例。2.3.7 受試樣品的劑量和使用方法：試食組按樣品的推薦劑量和方法服用受試樣品，對(duì)照組服用安慰劑。受試樣品給予時(shí)間30天，必要時(shí)可延長至45天。2.4 觀察指標(biāo)2.4.1 安全性指標(biāo)2.4.1.1 一般狀況 包括精神、睡眠、飲食、大小便、心率等(兒童只要求進(jìn)行心肺聽診、肝脾觸診等一般體格檢查)2.4.1.2 血、尿常規(guī)檢查2.4.1.3 肝、腎功能檢查（兒童受試者不測(cè)定此項(xiàng)）2.4.1.4 胸透、心電圖、腹部b超檢查（成人受試者測(cè)定此項(xiàng)且僅試

37、驗(yàn)前檢查一次）2.4.2功效指標(biāo)：使用臨床記憶量表。用測(cè)試后的各分測(cè)驗(yàn)原始分查量表分，各分測(cè)驗(yàn)量表分相加得總量表分，用總量表分查記憶商。2.4.2.1 指向記憶量表分2.4.2 2 聯(lián)想學(xué)習(xí)量表分2.4.2.3 圖象自由回憶量表分2.4.2.4 無意義圖形再認(rèn)量表分2.4.2.5 人像特點(diǎn)聯(lián)系回憶量表分2.4.2.6 記憶商2.5 試驗(yàn)材料2.5.1 錄有指向記憶和聯(lián)想學(xué)習(xí)的指導(dǎo)語和刺激詞的電子存儲(chǔ)器。2.5.2紙質(zhì)版或/和電子版的圖片材料（分甲、乙兩套）, 2.5.2.1 無意義圖形再認(rèn) 備第一次呈現(xiàn)用目標(biāo)刺激圖片20張，備第二次再認(rèn)時(shí)呈現(xiàn)用目標(biāo)刺激和混入刺激圖片各20張，共40張，合計(jì)60

38、張圖片。2.5.2.2 圖象自由回憶物象圖片 兩組各15張，共30張。2.5.2.3 人像特點(diǎn)聯(lián)系回憶 備第一次呈現(xiàn)用的黑白勾畫人面像6張，備回憶時(shí)呈現(xiàn)的人面像6張，兩者內(nèi)容相同，順序不同，共計(jì)12張；每張人像圖片背面標(biāo)有該人像的姓氏、職業(yè)、愛好、特點(diǎn)。2.5.3 電腦、錄音機(jī)、秒表、記錄紙。2.6 測(cè)試內(nèi)容及方法：統(tǒng)一使用臨床記憶量表，具體方法參見臨床記憶量表。臨床記憶量表有五項(xiàng)測(cè)試內(nèi)容：指向記憶聯(lián)想學(xué)習(xí)圖象自由回憶無意義圖形再認(rèn)人像特點(diǎn)聯(lián)系回憶臨床記憶量表的特點(diǎn)是備有有文化和無文化兩個(gè)部分的正常值，便于檢測(cè)無文化者。臨床記憶量表共包括5個(gè)分量表。各分測(cè)驗(yàn)的測(cè)試順序（如圖象自由回憶的圖片呈現(xiàn)

39、順序）在所有受試者中應(yīng)一致。2.6.1 指向記憶： 包括兩組內(nèi)容，每組24個(gè)詞，每詞由23個(gè)字組成，以1秒的速度讀出，兩個(gè)詞之間間隔2s，其中有12個(gè)詞屬于同一類別，即為指向詞；另12個(gè)混在其中相類似的詞，為非指向詞。（例如甲套第一組詞中有12個(gè)詞屬于水果類，混雜的詞有粽子、年糕、冰糖等12個(gè)食品類詞；第二組詞中有12個(gè)詞屬于動(dòng)物類，混雜的詞有皮膚、尾巴、眼睛、耳朵等身體器官類詞12個(gè)。）要求受試者記憶指定的同類別詞（如水果）。24個(gè)詞隨機(jī)排列，用錄音機(jī)放送，每組詞全部放送完畢后，要求受試者立即回憶，說出要求記憶的一類詞（不一定要按放送的順序回憶）。主試者按受試者回憶的順序，將所說出的內(nèi)容在記

40、錄紙上按順序用數(shù)字記在相應(yīng)詞下面的方格內(nèi)，并記錄總的反應(yīng)時(shí)間，如果受試者說出的不是放送的詞內(nèi)容（稱為“添加性錯(cuò)誤”），則寫在記錄紙上該組詞后面空格內(nèi)。如果說的是混雜進(jìn)去的不需記憶的詞，則記在下面非指向欄內(nèi)相應(yīng)詞下，亦算錯(cuò)誤。反應(yīng)時(shí)間從主試者說：“現(xiàn)在請(qǐng)您回答”算起，直到回憶結(jié)束。允許回憶時(shí)間不超過2min。當(dāng)?shù)谝唤M詞受試者回憶結(jié)束后，間隔5s，再重復(fù)一遍指導(dǎo)語，然后放送第二組詞，方法同前。在第二組詞回憶完畢后，詢問受試者“除了要求您記的動(dòng)物（或穿戴）這類詞以外，您還記得別的詞嗎？”這就是“非指向記憶”結(jié)果，可記錄在表內(nèi)混雜詞下面的方格內(nèi)。這里要注意在第一組詞回憶完畢時(shí)，不要做這樣的詢問，否則將

41、引起受試者在識(shí)記第二組詞時(shí)把注意力指向識(shí)記包括指向和非指向在內(nèi)的所有詞，那就不符合這項(xiàng)測(cè)驗(yàn)的原意了。最后詢問受試者“用什么方法記憶”。 指導(dǎo)語：“我念一些詞，您要注意聽，里面有的是水果名字（或動(dòng)物名字、蔬菜名字、穿戴的東西），有的不是，要求您記住水果名字（或動(dòng)物名字-天上飛的、地下跑的、爬的，大的、小的都算；蔬菜名字、穿戴的東西）。我念完以后，您要把聽過的水果（或動(dòng)物、蔬菜、穿戴）的名字說出來，不一定按照我念的順序說，記得什么就先說什么，聽明白了嗎？現(xiàn)在注意聽”。如果指導(dǎo)語沒聽明白，可以重復(fù)口述一遍?？陬^重復(fù)時(shí)，指導(dǎo)語不得任意更改，例如，“要求記住水果（或其它）名字”不得改成“只要記住水果名字

42、或光記（或就記）水果名字”，或者甚至加上“不記其它的東西”就更不對(duì)了，這會(huì)導(dǎo)致不同的結(jié)果，是不允許的。計(jì)分：以兩組指向記憶刺激詞的正確回憶數(shù)之和來計(jì)分，并記錄添加性錯(cuò)誤的詞或其它錯(cuò)誤備分析研究用。（滿分24分）。 甲套指向記憶詞呈現(xiàn)順序?yàn)椋?1. 橘子 香蕉 粽子 石榴 桃子 粉條 年糕 西瓜 葡萄 冰糖 鴨蛋 柿子 茶葉 豆腐 蘋果 白酒 牛奶 李子 餅干 杏 花椒 香瓜 木耳 鴨梨 2. 烏鴉 公雞 耳朵 蜜蜂 兔子 指甲 皮膚 狐貍 麻雀 眼睛 肩膀 青蛙 牙齒 肝臟 蒼蠅 翅膀 心臟 老虎 頭發(fā) 猴子 尾巴 蜻蜓 鼻子 螞蟻 乙套指向記憶詞呈現(xiàn)順序?yàn)椋?1. 蘿卜 茄子 大麥 韭菜 黃

43、瓜 玉米 松樹 扁豆 冬瓜 梅花 稻子 辣椒 荷花 楊樹 白菜 桃花 棉花 菠菜 芝麻 西紅柿 菊花 芹菜 柳樹 豆芽菜 2. 圍巾 球鞋 牙膏 裙子 手套 筷子 板凳 短褲 雨衣 鐵鍋 剪刀 大衣 鬧鐘 電燈 襪子 火柴 縫紉機(jī) 皮襖 刷子 襯衫 扁擔(dān) 毛褲 掃帚 草帽2.6.2 聯(lián)想學(xué)習(xí)： 每套有12對(duì)由2個(gè)詞組成成對(duì)的詞，其中容易的（成對(duì)聯(lián)想詞間有邏輯聯(lián)系）與困難的（成對(duì)聯(lián)想詞間無邏輯聯(lián)系）成對(duì)詞各6對(duì)，容易聯(lián)想包括反義詞（如困難-容易）、同類詞（如太陽-月亮）和從屬詞（如牲口-牛馬）各兩對(duì)；困難聯(lián)想包括具體-具體（如西瓜-衣服）、抽象-具體（如勇敢-電燈）和抽象-抽象（如光明-服從）成

44、對(duì)詞各兩對(duì)。用以檢查對(duì)不同成對(duì)詞的記憶情況。以每對(duì)詞3s的速度讀出，兩對(duì)詞之間間隔2s，12對(duì)詞隨機(jī)排列，用錄音機(jī)放送，共放送三遍，即受試者有三次學(xué)習(xí)機(jī)會(huì)，但每遍詞放送的順序不同。每放送一遍后，主試者念每對(duì)詞的前面一個(gè)詞（即刺激詞），要求受試者答出后面一個(gè)詞來（即反應(yīng)詞），主試者將結(jié)果記錄在相應(yīng)格內(nèi)。如果回答正確，打“”號(hào)，如果錯(cuò)誤，則記錄錯(cuò)答之詞，沒答出來，則以“0”表示。每對(duì)詞允許回憶時(shí)間5s。最后詢問受試者“用什么方法記憶”。 指導(dǎo)語：“我給您念12對(duì)詞，您要注意聽，要求您記住哪兩個(gè)詞是連在一起的一對(duì)，比如我念桌子-馬車，表示桌子和馬車是聯(lián)在一起的一對(duì)詞。我念完12對(duì)詞以后，就念每對(duì)詞中

45、的前面一個(gè)詞，要求您答出和它一對(duì)的后面一個(gè)詞來，比如我念桌子，您就回答（停頓一下，讓受試者回憶）馬車，聽明白了嗎？”如果沒聽明白，可以重復(fù)口述一遍。 計(jì)分： 分為容易、困難以及兩者之和三種分?jǐn)?shù)。每遍放送后，對(duì)容易的詞每答對(duì)一個(gè)計(jì)0.5分，6對(duì)共3分；困難的詞每答對(duì)一個(gè)計(jì)1分，6對(duì)共6分，6對(duì)容易和6對(duì)困難詞之和為9分，三遍的滿分為27分。2.6.3 圖象自由回憶： 包括2組畫有物體的圖片材料，每組15張，所畫的物體都是人們常見的、熟悉的和易于辨認(rèn)的東西，如日用品、交通工具等。每張圖片呈現(xiàn)4s、圖片間間隔2s，圖片順序隨機(jī)排列。15張圖片呈現(xiàn)完畢后，要求受試者立即回憶說出所記得的圖片內(nèi)容（不一定

46、要按刺激呈現(xiàn)的順序回憶）。主試者按受試者回憶的順序，將所記得的圖片在記錄紙上按順序用數(shù)字記在相應(yīng)圖片名稱下的方格內(nèi)，并記錄總的反應(yīng)時(shí)間。如果受試者說出的是圖片中沒有的內(nèi)容（稱為添加性錯(cuò)誤），則寫在記錄紙上該圖片系列后面的空格內(nèi)。反應(yīng)時(shí)從主試者說“現(xiàn)在請(qǐng)您回答”算起，直到回憶結(jié)束。允許回憶時(shí)間不超過2min。當(dāng)?shù)谝唤M圖片受試者回憶結(jié)束后，間隔5s，再重復(fù)一遍指導(dǎo)語，然后呈現(xiàn)第二組圖片，方法同前。最后詢問受試者“用什么方法記憶”。 口述指導(dǎo)語：“我給您看一些圖片，您要仔細(xì)看，并記住它們是什么，有看不清的可以問，等全部看完后，立即說出您看到的是些什么東西，不一定按照我念的順序說，記得什么就先說什么，

47、聽明白了嗎？現(xiàn)在注意看”如果沒聽明白，可以重復(fù)口述一遍，直到受試者理解為止。 計(jì)分 以兩組圖片的正確回憶數(shù)之和計(jì)分（滿分30分），并記錄添加性錯(cuò)誤。2.6.4 無意義圖形再認(rèn)：包括20張目標(biāo)刺激圖片，40張?jiān)僬J(rèn)刺激圖片（其中與呈現(xiàn)圖片相同目標(biāo)刺激圖片20張，相似混同刺激圖片20張）。目標(biāo)刺激為5種形式的無意義圖形，即曲線封閉、直線封閉、曲線直線、曲線不封閉、直線不封閉。每種各4張，共20張。 測(cè)驗(yàn)時(shí)，先給受試者分別呈現(xiàn)20張目標(biāo)刺激圖片，每張呈現(xiàn)3s，相隔3s，要求受試者記住這些目標(biāo)刺激。然后，隨機(jī)呈現(xiàn)40張?jiān)僬J(rèn)刺激圖片（包括目標(biāo)刺激圖片和混同刺激圖片），圖片隨機(jī)排列，要求受試者將與目標(biāo)刺激圖

48、片完全相同的圖片辨認(rèn)出來，即每張圖片呈現(xiàn)時(shí)，回答“看過”或“沒看過”，每張?jiān)试S回憶時(shí)間為5s。如果對(duì)目標(biāo)刺激回答“看過”，則按圖片中央z號(hào)（從120）在記錄紙目標(biāo)刺激一項(xiàng)相應(yīng)格內(nèi)打“”號(hào)，如答“沒看過”，則打“×”號(hào)。如果對(duì)混入刺激回答“沒看過”，則按圖片中央z號(hào)（從2140）在記錄紙混入刺激一項(xiàng)相應(yīng)格內(nèi)打“”號(hào)，如答“沒看過”，則打“×”號(hào)。最后詢問受試者“用什么方法記憶”?？谑鲋笇?dǎo)語：“我給您看一些由簡單的曲線和直線構(gòu)成的圖形，看的時(shí)間比較短，您要仔細(xì)看，并記住它們的特點(diǎn)，有看不清的可以問，等看完后，我再給您看另一些圖片，其中有您看過的，也有您沒看過的，它們都很相似，要

49、求您認(rèn)出哪些是看過的，哪些是沒看過的，聽明白了嗎？現(xiàn)在注意看”。如果沒聽明白，可以重復(fù)口述一遍，直到受試者理解為止。無意義圖形背面的數(shù)字表示 甲 表示甲套 甲 目標(biāo)刺激呈現(xiàn)時(shí)的順序號(hào) 表示出現(xiàn)目標(biāo)刺激順序（120） 和混入刺激的呈現(xiàn)順序號(hào)（2140） x 呈現(xiàn)的順序號(hào) 再認(rèn)時(shí)總的順序號(hào) 20張目標(biāo)刺激呈現(xiàn)時(shí) 40張圖片再認(rèn)時(shí) 計(jì)分 再認(rèn)分（正確再認(rèn)目標(biāo)刺激錯(cuò)誤混入刺激數(shù)）×2（滿分40分）， 即再認(rèn)分（擊中虛報(bào)）×2 對(duì)目標(biāo)刺激回答“看過”，稱為“擊中”，對(duì)沒看過的混入刺激也回答“看過”，稱為“虛報(bào)”。2.6.5 人像特點(diǎn)聯(lián)系回憶：包括6張黑白人面像圖片。按隨機(jī)順序排列每張

50、人像分別呈現(xiàn)9s，間隔3s，在呈現(xiàn)的同時(shí)，告訴被測(cè)驗(yàn)者每張圖片上的人像的姓名、職業(yè)和愛好等特點(diǎn)，重復(fù)2遍，并要求被測(cè)驗(yàn)者記住人像及特點(diǎn)之間的聯(lián)系。然后再以另一順序呈現(xiàn)這些圖片，讓被測(cè)驗(yàn)者立即說出人像的姓名、職業(yè)和愛好等特點(diǎn)。如果回答正確，主試者在記錄紙相應(yīng)格內(nèi)打“”號(hào)，回答錯(cuò)誤，則記下說錯(cuò)的內(nèi)容，每張人像允許回憶時(shí)間30s。 口述指導(dǎo)語：“我給您看一些畫的人像，在給您看每張人像的同時(shí)，向您介紹他姓什么、職業(yè)和愛好特點(diǎn)，請(qǐng)您一邊注意看人像，一邊注意聽介紹，且要把人像和他的三個(gè)特點(diǎn)聯(lián)系起來記憶。看完全部人像后，當(dāng)我再給您看每一張人像時(shí)，要求您立即說出他的三個(gè)特點(diǎn)，不一定按我說的順序回答，記得什么先

51、說什么，聽明白了嗎？”，如果沒聽明白，可以重復(fù)口述一遍，直到受試者理解為止。 計(jì)分 分別記錄回憶出的姓名、職業(yè)和愛好的數(shù)目，每個(gè)姓名記2分，每項(xiàng)職業(yè)和愛好各記1分，然后以三項(xiàng)總和計(jì)分。（滿分24分） 臨床記憶量表的5個(gè)分量表都有各自的記分方法，各分量表得出的分?jǐn)?shù)均為原始分。根據(jù)這些原始分，換算量表分的等價(jià)值表，查出各分量表的量表分，計(jì)算出總量表分；然后按照不同的年齡組的總量表分的等值記憶商數(shù)換算表，即可查得記憶商數(shù)（mq）。這就作為衡量人的記憶水平的指標(biāo)。2.7 數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定此試驗(yàn)數(shù)據(jù)為計(jì)量資料，對(duì)兩組各分測(cè)驗(yàn)量表分和記憶商可用t檢驗(yàn)進(jìn)行分析。自身對(duì)照可以采用配對(duì)t檢驗(yàn)，組間平行比較采用

52、兩樣本均數(shù)的t檢驗(yàn)，后者需進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，對(duì)非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)；若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差齊要求，改用t檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)；但變異系數(shù)太大（如cv>50）的資料應(yīng)用秩和檢驗(yàn)。結(jié)果判定：在試驗(yàn)前兩組記憶商均衡的前提下，試食后試食組的記憶商高于對(duì)照組，且差異有顯著性，同時(shí)試食組試驗(yàn)后的記憶商高于其試驗(yàn)前的記憶商，且差異有顯著性，可以判定該受試樣品具有輔助改善記憶功能的作用。2.8 注意事項(xiàng)2.8.1 心理測(cè)驗(yàn)必須由受過訓(xùn)練的人員進(jìn)行，否則影響試驗(yàn)結(jié)果。2.8.2 測(cè)試應(yīng)當(dāng)在一個(gè)安靜的房間內(nèi)進(jìn)行。除受試者和主試者外，盡量避

53、免有其它人在場(chǎng)。2.8.3 本量表內(nèi)有三項(xiàng)和視覺有關(guān)的分測(cè)驗(yàn)，室內(nèi)光線必須保證能看得清楚刺激圖片。盡量排除因聽力或視力不佳而影響記憶成績。2.8.4 必須注意受試者受測(cè)時(shí)的精神狀態(tài)，測(cè)驗(yàn)需在受試者情緒正常、不反對(duì)接受測(cè)試、注意力比較集中的情況下進(jìn)行。受試者是否疲倦，注意力是否集中，是否配合、對(duì)測(cè)試是否緊張，是否有信心等均需記錄在記錄紙的首頁上。2.8.5 同一受試者的測(cè)試要求一次做完。在用年齡量表分比較分測(cè)驗(yàn)成績時(shí)，必須注意不同分測(cè)驗(yàn)是否在相同的精神狀態(tài)下進(jìn)行的。2.8.6 填寫記錄必須認(rèn)真，字跡清楚。填寫時(shí)注意以下幾點(diǎn)：2.8.6.1 首頁必須逐項(xiàng)填寫，即受試者的姓名、性別和年齡，以及檢查日

54、期和時(shí)間。2.8.6.2 填寫文化程度和職業(yè)作為了解受試者接受測(cè)驗(yàn)的背景材料。2.8.6.3 填寫健康狀況或診斷，前一夜睡眠情況或當(dāng)時(shí)疲倦與否。2.8.6.4 對(duì)表明當(dāng)時(shí)精神狀況的各項(xiàng)，如配合程度、注意力、緊張狀態(tài)、信心等也要填寫清楚。2.8.6.5 除記錄受試者記憶回答的正誤外，應(yīng)當(dāng)記下錯(cuò)誤回答的具體內(nèi)容，以備分析研究用。2.8.6.6 是否應(yīng)用記憶方法以及使用什么方法對(duì)記憶研究是有益的。在用此量表進(jìn)行研究時(shí)應(yīng)當(dāng)記錄此項(xiàng)。2.8.6.7 各項(xiàng)分測(cè)驗(yàn)成績的原始分記入首頁總結(jié)表中，要先經(jīng)復(fù)查，復(fù)查無誤方可填入原始分項(xiàng)內(nèi)。輔助改善記憶功能評(píng)價(jià)方法修訂說明一、承擔(dān)單位廣東省疾病預(yù)防控制中心為主要承擔(dān)

55、單位，本次任務(wù)來源于國家食品藥品監(jiān)督管理局保健食品化妝品監(jiān)管司的委托，對(duì)保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范（2003年版）中“輔助改善記憶功能評(píng)價(jià)程序和檢驗(yàn)方法”進(jìn)行修訂。二、主要工作過程國家食品藥品監(jiān)督管理局保健食品化妝品監(jiān)管司于2009年4月召開了“保健食品功能評(píng)方法及有關(guān)程序修訂”課題協(xié)作組工作會(huì)議，參會(huì)的有中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所、廣東省疾病預(yù)防控制中心、上海市疾病預(yù)防與控制中心、北京市疾病預(yù)防控制中心、四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院、中國中醫(yī)研究院東直門醫(yī)院和國家食品藥品監(jiān)督管理局保健食品審評(píng)中心的專家近15人，會(huì)上對(duì)“保健食品功能評(píng)價(jià)方法及有關(guān)程序修訂”修訂的原則和框架作了充分的討論

56、，又分別征求了相關(guān)專家對(duì)修訂內(nèi)容的意見。為了做好本次檢驗(yàn)方法的修訂工作，廣東省疾病預(yù)防控制中心成立了“輔助改善記憶功能評(píng)價(jià)程序和檢驗(yàn)方法”修訂的起草工作小組，經(jīng)查閱國內(nèi)外相關(guān)資料，參考國家食品藥品監(jiān)督管理局保健食品化妝品監(jiān)管司召開的工作會(huì)議的精神，咨詢有關(guān)專家和實(shí)驗(yàn)室同行的意見和建議，形成了本次任務(wù)的工作方案?？傮w路是：要提高檢驗(yàn)方法的科學(xué)性、準(zhǔn)確性、客觀性和有效性，提高保健食品功能的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)；修訂的方法要與當(dāng)前國內(nèi)外研究的理論基礎(chǔ)相一致。本次修訂將動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分為被動(dòng)行為試驗(yàn)和主動(dòng)行為試驗(yàn)兩類，主動(dòng)行為試驗(yàn)中新增morris水迷宮試驗(yàn)項(xiàng)目；強(qiáng)調(diào)被動(dòng)和主動(dòng)行為試驗(yàn)的組合，在此基礎(chǔ)上提出相應(yīng)的判定標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)過起草工作小組開展的大量條件探索和實(shí)驗(yàn)方法研究，對(duì)各種實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了比較和取舍，形成了修訂初稿后，起草工作小組召開了多次專家研討會(huì)，征求專家意見，對(duì)初稿進(jìn)行了反復(fù)修改，形成征求意見稿。方法驗(yàn)證工作由廣東省疾病預(yù)防控制