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1、實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)一、目的要求1.了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細(xì)菌鑒定中的重要作用。2.掌握通過糖發(fā)酵鑒別不同微生物的方法。實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)二、基本原理 糖發(fā)酵試驗(yàn)是最常用的生化反應(yīng),在腸道細(xì)菌的鑒定上尤為重要。絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖類作為碳源和能源,但是它們在分解糖的能力上有很大的差異,有些細(xì)菌能分解某種糖并產(chǎn)酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫、甲烷、二氧化碳等);有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。例如大腸桿菌能分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣;傷寒桿菌能分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不能分解乳糖;普通變形桿菌分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不能分解乳糖。實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)二、基本原理 酸的
2、產(chǎn)生可利用指示劑來斷定。在配制培養(yǎng)基時(shí)預(yù)先加入溴甲酚紫Ph5.2(黃色)-6.8(紫色),當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí),可使培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色。 氣體的產(chǎn)生可由發(fā)酵管中倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明。 實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)三、實(shí)驗(yàn)材料1.大腸桿菌,普通變形桿菌( Proteus vulgaris)斜面各1支;2.盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管各3支(內(nèi)裝有倒置的德漢氏小管),試管架,接種環(huán)等。實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)圖1 糖類發(fā)酵試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)四、操作步驟四、操作步驟1、編號 用記號筆在各試管上分別標(biāo)明發(fā)酵培養(yǎng)基名稱和所接種的菌名。2、接種 取盛有葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基的試管3支,按編號1支
3、接種大腸桿菌,另1支接種普通變形桿菌,第3支不接種,作為對照。另取乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管3支,同樣1支接種大腸桿菌,1支接種普通變形桿菌,第3支不接種,作為對照。3將上述已接種的葡萄糖和乳糖發(fā)酵試管和對照管置37溫室中培養(yǎng)24小時(shí)。實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn) 注意事項(xiàng): 接種后應(yīng)輕輕搖動試管,使其均勻,防止倒置的小管進(jìn)入氣泡。否則會造成假象,得出錯(cuò)誤答案。實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果: 觀察結(jié)果時(shí),看各管顏色變化及杜氏小管有無氣泡。 產(chǎn)酸產(chǎn)氣用“”表示; 只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣用“+”表示; 不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣用“”表示。實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)四 糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn) 假如某種微生物可以有氧代謝葡萄糖,發(fā)酵試驗(yàn)應(yīng)該出現(xiàn)什么結(jié)果?思考題:思考題:此課件下載可自行編輯修改,供參考!此
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