實(shí)驗(yàn)三 細(xì)菌芽孢和鞭毛染色法

1、細(xì)菌的芽孢染色及鞭毛染色細(xì)菌的芽孢染色及鞭毛染色l學(xué)習(xí)并掌握芽孢染色法、鞭毛染色法。學(xué)習(xí)并掌握芽孢染色法、鞭毛染色法。l初步了解芽孢桿菌、細(xì)菌鞭毛的形態(tài)特初步了解芽孢桿菌、細(xì)菌鞭毛的形態(tài)特征。征。l鞏固無菌操作技術(shù)鞏固無菌操作技術(shù)芽孢染色法：芽孢染色法： 芽孢是細(xì)菌的休眠體。細(xì)菌能否形成芽孢以及芽孢的形狀、芽芽孢是細(xì)菌的休眠體。細(xì)菌能否形成芽孢以及芽孢的形狀、芽孢在芽孢囊內(nèi)的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鑒定細(xì)菌的依孢在芽孢囊內(nèi)的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鑒定細(xì)菌的依據(jù)之一。據(jù)之一。 芽孢壁厚、透性低、不易著色，用著色力強(qiáng)的染色劑孔雀綠或芽孢壁厚、透性低、不易著色，用著色力強(qiáng)的染色劑孔雀綠或石

2、炭酸復(fù)紅，在加熱條件下染色，使染料不僅進(jìn)入菌體也可進(jìn)石炭酸復(fù)紅，在加熱條件下染色，使染料不僅進(jìn)入菌體也可進(jìn)入芽孢內(nèi)，進(jìn)入菌體的染料經(jīng)水洗后被脫色，而芽孢一經(jīng)著色入芽孢內(nèi)，進(jìn)入菌體的染料經(jīng)水洗后被脫色，而芽孢一經(jīng)著色難以被水洗脫，當(dāng)用對比度大的復(fù)染劑染色后，芽孢仍保留初難以被水洗脫，當(dāng)用對比度大的復(fù)染劑染色后，芽孢仍保留初染劑的顏色，而菌體和芽孢囊被染成復(fù)染劑的顏色，使芽孢和染劑的顏色，而菌體和芽孢囊被染成復(fù)染劑的顏色，使芽孢和菌體更易于區(qū)分。菌體更易于區(qū)分。2. 鞭毛染色法：鞭毛染色法： 鞭毛是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)鞭毛是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)“器官器官”，細(xì)菌是否具有鞭毛，以及鞭毛著，細(xì)菌是否具有鞭毛，以及鞭毛著生

3、的位置和數(shù)目是細(xì)菌的一項(xiàng)重要形態(tài)特征。細(xì)菌的鞭毛很纖生的位置和數(shù)目是細(xì)菌的一項(xiàng)重要形態(tài)特征。細(xì)菌的鞭毛很纖細(xì)，其直徑通常為細(xì)，其直徑通常為0.010.02m，一般細(xì)菌的鞭毛均不能用光學(xué)，一般細(xì)菌的鞭毛均不能用光學(xué)顯微鏡直接觀察到顯微鏡直接觀察到 。在染色前先用媒染劑處理，使它沉積在鞭在染色前先用媒染劑處理，使它沉積在鞭毛上，使鞭毛直徑加粗，然后再進(jìn)行染色。毛上，使鞭毛直徑加粗，然后再進(jìn)行染色。l菌種枯草芽孢桿菌，變形桿菌菌種枯草芽孢桿菌，變形桿菌l染色劑染色劑5孔雀綠水溶液，孔雀綠水溶液，0.5番紅水溶番紅水溶液，硝酸銀鞭毛染色液（液，硝酸銀鞭毛染色液（ A液，液，B液）液）l其他顯微鏡，酒精

4、燈，雙層瓶，載玻片，其他顯微鏡，酒精燈，雙層瓶，載玻片，木夾子，生理鹽水，等。木夾子，生理鹽水，等。1、鞭毛染色、鞭毛染色載玻片載玻片一端加一滴水一端加一滴水挑菌挑菌在水滴中在水滴中輕沾幾下輕沾幾下將玻片稍傾斜將玻片稍傾斜自然自然干燥干燥A液覆蓋（液覆蓋（5-6min）充分充分水洗水洗B液沖去殘液沖去殘水水 ，B液覆蓋液覆蓋(可稍加熱可稍加熱)涂面出現(xiàn)涂面出現(xiàn)明顯褐色明顯褐色時(shí)時(shí)水洗水洗自然干燥自然干燥鏡檢鏡檢2、芽孢染色、芽孢染色 涂片涂片干燥干燥固定固定染色染色（孔雀綠，加（孔雀綠，加熱，微冒蒸汽且熱，微冒蒸汽且不干不干，10min）水洗（玻片水洗（玻片冷卻后）冷卻后）復(fù)染（番紅，復(fù)染（番紅，5min）水洗水洗干燥干燥鏡檢鏡檢細(xì)菌鞭毛顯微鏡照片細(xì)菌鞭毛顯微鏡照片繪圖（油鏡下）：繪圖（油鏡下）： 芽孢、芽孢囊、營養(yǎng)細(xì)胞芽孢、芽孢囊、營養(yǎng)細(xì)胞 鞭毛鞭毛l1. 用簡單染色法能否觀察到細(xì)菌的芽孢？用簡